专利名称：一种钙离子选择性螯合剂的合成方法
技术领域：
本发明涉及一种生物药剂的合成方法，特别是涉及一种钙离子选择性螯合剂的合成方法。
背景技术：
2-双(2-氨基苯氧基)乙烧-N, N, N’，N’ -四乙酸 2a (O, O’ -Bis (2-aminophenyl)ethyleneglycol-N, N, N’ , N’ -tetraacetic acid),简称 BAPTA,是一种无毒的I丐离子选择性螯合剂与指示剂。它基本的螯合单位和EDTA类似，只是两个脂肪氮被芳香氮所替代。因此，BAPTA在生理pH下不会被质子化。84 了八的？1(&3为5.47，？1(&4为6.36。这个特点显示了去质子化的步骤并不包含在Ca的螯合步骤中。由于不受质子的干扰，它的螯合率比EGTA要高很多。1980年Tsien等提出了对钙离子最佳选择性结构的基础上向EDTA中引入芳香发色团(即BAPTA)，苯环的引入保持了对钙离子的高选择性，在生理条件下完全离子化，因而与钙离子络合不受PH值变化的影响，结合钙离子的速度也大大提高了。(Tsien R Y.Biochemistry, 1980, 19(11) : 2396)然而，它的衍生物在细胞浆中可以很容易地水解，它可以与钙离子形成螯合物从而有效缓解血浆浓度的变化。这种螯合物与内皮细胞接触可以增加环前列腺素在动脉内皮细胞中的释放率。而且向芳环中引入卤素可以极大地增强环前列腺素与自由羧酸钙离子的作用，这种作用可以使增加的环前列腺素离解，进而与钙离子螯合。环前列腺素，它是一种抗血凝剂有助于血管扩张，以增加活性血小板的数量来防止血管破损处形成血栓。因为减少了动脉肌细胞中胆固醇的含量，从而降低动脉硬化的发生概率。(Heilporn S，Broeders F，Daloze D. Bull. Soc. Chim. Belg, 1994, 103(7):309)
2-双(2-氨基苯氧基)乙烷-N，N，N’，N’-四乙酸酯可以透过细胞膜已成为研究细胞Ca2+生理功能的有利工具，杨丽萍等提出2-双(2-氨基苯氧基)乙烷-N，N，N’，N’ -四乙酸甲酯Ia可在不损伤细胞膜的情况下而进入细胞，在细胞内水解出游离的BAPTA，在生理PH条件下与细胞内游离Ca2+结合，似有使红细胞骨骼蛋白构象起稳定作用而提高红细胞抗高温的能力(YANG Li-Ping, TU Hui-Ping, FU Hong-Yan. Journalof East China NormalUniversity(Narural Science), 1996, (I): 45)
下面的合成路线是已发表并公开的反应路线，其产品收率化合物2-双(2-氨基苯氧基)乙烷-N, N，N’，N’ -四乙酸甲酯Ia是71%，2-双(2-氨基苯氧基)乙烷-N, N，N’，N’ -四乙酸2a收率无报道。第一步反应
权利要求
1.一种钙离子选择性螯合剂的合成方法，即2-双、即2-胺基苯氧，乙烷-N，N，N’，N’-四乙酸甲酯、S卩la，BAPTA的甲酯，的合成方法，其特征在于，该方法包括首先将液态原料溴乙酸甲酯和二异丙基乙胺以及乙氰干燥脱去其中的水分，其次将整个反应装置去除水分；原料配比为1，2_双、即2-胺基苯氧乙烷，溴乙酸甲酯和二异丙基乙胺的摩尔比值为1:5. 2:5. 2，反应终点体系为中性；具体步骤为第一步溶剂乙氰与原料溴乙酸甲酯以及二异丙基乙胺经活化的分子筛浸泡24小时以上，分子筛在使用前在400°C下用茂福炉烘干4小时；实验装置干燥，通入高纯氮气除去其中空气与水分；将1，2_双、即2-胺基苯氧，乙烷与溴乙酸乙酯为I. 5当量、催化剂无水碘化钠和二异丙基乙胺混合为I. 2当量，混合，将他们溶解在乙氰中；混合物在氮气的保护下加热回流搅拌20h ;反应结束后，冷却，用甲苯稀释，过滤，用大量甲苯洗涤滤饼，最后将甲苯合并在一起；先将混合相用水洗，然后用硫酸镁干燥，减压蒸去甲苯，再用乙醇把得到的固体进行重结晶得白色晶体经红外、核磁氢谱鉴定为化合物la，重结晶两次的晶体，经HPLC验证纯度达到97. 45 % ;第二步将化合物Ia溶解在微热的乙醇中，加入4当量的KOH的浓溶液，皂化成化合物2a的钾盐；反应在微热条件下进行一小时后，蒸掉乙醇，然后向里面加入蒸馏水；用盐酸将PH值调至2，抽滤、用水洗涤、干燥可以得到白色固体化合物，经红外、氢谱鉴定为化合物2a，而产物反复纯化与洗涤后，经HPLC验证纯度达到99 %。
2.根据权利要求I所述的一种钙离子选择性螯合剂的合成方法，其特征在于，所述的方法为使用化学提纯法对粗产品进行分离、提纯处理的方法，该方法提纯先用15%的氢氧化钾溶液溶解，再用O. 33M的盐酸溶液使之沉淀,最后用超纯水洗涤。
全文摘要
一种钙离子选择性螯合剂的合成方法，涉及一种生物药剂的合成方法，以1，2-双(2-胺基苯氧)乙烷为原料经酯化和酸化两步反应，合成了2-双(2-氨基苯氧基)乙烷-N,N,N',N'-四乙酸(2a，BAPTA)，化合物2a的结构经IR、1HNMR表征。通过调整配比及催化剂用量为1，2-双(2-胺基苯氧)乙烷、溴乙酸甲酯和二异丙基乙胺的摩尔比值为1:5.2:5.2，2-双(2-氨基苯氧基)乙烷-N,N,N',N'-四乙酸甲酯(1a，BAPTA的甲酯)的收率为86%纯度97.45%。化学提纯方法，BAPTA纯度可达99%，该纯度下收率可达94%。该方法降低了生产成本，优化了工艺步骤并提高了品质与收率。
文档编号C07C227/40GK102617376SQ20121006503
公开日2012年8月1日 申请日期2012年3月13日 优先权日2012年3月13日
发明者张大伟, 曲晓晔, 滕雅娣, 管国生 申请人:沈阳化工大学