专利名称：一种酶法制备浒苔叶绿素的工艺的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种叶绿素的制备工艺，具体涉及一种酶法制备浒苔叶绿素的工艺。
背景技术：
市场上的叶绿素包括天然色素和合成色素。合成色素主要来自于化工原料，发色物质多含有苯环、萘环等基团，摄入一定量会对人体产生危害，甚至会致毒、致癌和致畸；天然色素是从动物、植物或微生物的组织中提取得到的有色物质，色泽自然，更重要的是无毒副作用，因而倍受消费者的欢迎。 受工业废水以及生活污水排放的影响，海水的富营养化日趋加重，因此浒苔暴发也越来越频繁，越来越严重。而目前浒苔资源缺乏有效利用的方法，资源浪费严重，且打捞出来的浒苔一旦得不到及时的处理，会造成严重的环境污染，因此如何快速将浒苔处理掉，减轻污染，已成为环境保护的重大课题。而目前国内外并无从浒苔中提取叶绿素的报道，因此，如果能研究一种从浒苔中提取叶绿素的方法，不仅可以减轻环境污染，还可以降低目前叶绿素生产的成本。
发明内容
本发明的目的是针对目前浒苔资源缺乏有效利用的方法，资源浪费严重，且打捞出来的浒苔一旦得不到及时的处理，会造成严重的环境污染的现状，本发明提供一种酶法制备浒苔叶绿素的工艺。本发明通过以下技术方案来实现一种酶法制备浒苔叶绿素的工艺，包括以下步骤
(1)将浒苔浙干、加入10倍浒苔重量的质量浓度为0.04% 0. 06%的硫酸铜溶液浸泡稳定叶绿素，4 6小时后用清水洗去浒苔上的硫酸铜，然后烘干、绞碎细化；
(2)取浒苔细粉，加入I倍重量的蒸馏水混匀，加入1/20重量的纤维素酶和几丁质酶酶解；
(3)酶解结束后，100°C加热灭酶活，加入2倍体积、质量浓度为90%的乙醇容易反复浸泡提取两次，浸泡时间为24 36小时，把2次浸取提取液合并在一起；
(4)向提取液中加入硫酸铵，沉淀浒苔叶绿素，离心，取沉淀干燥后即成浒苔叶绿素成品。上述步骤⑵所述的酶解温度为50°C 70°C，酶解时间为4 6小时，纤维素酶和几丁质酶的质量比为2 1:1。上述步骤(4)所述硫酸铵为硫酸铵晶体，所述浒苔细粉与硫酸铵晶体的重量比为1:0.1 0. 4。上述步骤(4)所述的离心转速为8000rpm，离心时间为20分钟。本发明的有益效果是本发明的成本低，工艺流程简单，提取的叶绿素稳定性好，适宜大规模生产，可广泛应用于药品、保健品、食品领域的产品着色。
具体实施例方式以下结合具体实施例对本发明作进一步描述，但不作为对本发明的限定。实施例1
将浒苔浙干、加入10倍浒苔重量的质量浓度为0. 04%的硫酸铜溶液浸泡稳定叶绿素，6小时后用清水洗去浒苔上的硫酸铜，然后烘干、绞碎细化。取IKg浒苔细粉，加入I倍重量的蒸馏水混匀，加入1/20重量的纤维素酶和几丁质酶酶解，纤维素酶和几丁质酶的质量比为2 :1，酶解温度为50°C，酶解时间为6小时；酶解结束后，100°C加热灭酶活，加入2倍体积、质量浓度为90%的乙醇反复浸泡提取两次，浸泡时间为24 36小时，把2次浸取提取液合并在一起，向提取液中加入硫酸铵晶体，將苔细粉与硫酸铵晶体的重量比为1:0.1,将提取液离心，离心转速为SOOOrpm，离心时间为20分钟，取沉淀干燥后即成浒苔叶绿素成品。 实施例2
将浒苔浙干、加入10倍浒苔重量的质量浓度为0. 05%的硫酸铜溶液浸泡稳定叶绿素，5小时后用清水洗去浒苔上的硫酸铜，然后烘干、绞碎细化。取IKg浒苔细粉，加入I倍重量的蒸馏水混匀，加入1/20重量的纤维素酶和几丁质酶酶解，纤维素酶和几丁质酶的质量比为1. 5 :1，酶解温度为60°C，酶解时间为5小时；酶解结束后，100°C加热灭酶活，加入2倍体积、质量浓度为90%的乙醇反复浸泡提取两次，浸泡时间为24 36小时，把2次浸取提取液合并在一起，向提取液中加入硫酸铵晶体，將苔细粉与硫酸铵晶体的重量比为1:0. 3,将提取液离心，离心转速为SOOOrpm，离心时间为20分钟，取沉淀干燥后即成浒苔叶绿素成品。实施例3
将浒苔浙干、加入10倍浒苔重量的质量浓度为0. 06%的硫酸铜溶液浸泡稳定叶绿素，4小时后用清水洗去浒苔上的硫酸铜，然后烘干、绞碎细化。取IKg浒苔细粉，加入I倍重量的蒸馏水混匀，加入1/20重量的纤维素酶和几丁质酶酶解，纤维素酶和几丁质酶的质量比为1:1，酶解温度为70°C，酶解时间为4小时；酶解结束后，100°C加热灭酶活，加入2倍体积、质量浓度为90%的乙醇反复浸泡提取两次，浸泡时间为24 36小时，把2次浸取提取液合并在一起，向提取液中加入硫酸铵晶体，將苔细粉与硫酸铵晶体的重量比为1:0.4,将提取液离心，离心转速为SOOOrpm，离心时间为20分钟，取沉淀干燥后即成浒苔叶绿素成品。
权利要求
1.一种酶法制备浒苔叶绿素的工艺，其特征在于，包含以下步骤(1)将浒苔浙干、加入10倍浒苔重量的质量浓度为O.04% O. 06%的硫酸铜溶液浸泡稳定叶绿素，4 6小时后用清水洗去浒苔上的硫酸铜，然后烘干、绞碎细化；(2)取浒苔细粉，加入I倍重量的蒸馏水混匀，加入1/20重量的纤维素酶和几丁质酶酶解；(3)酶解结束后，100°C加热灭酶活，加入2倍体积、质量浓度为90%的乙醇容溶液反复浸泡提取两次，浸泡时间为24 36小时，把2次浸取提取液合并在一起；(4)向提取液中加入硫酸铵，沉淀浒苔叶绿素，离心，取沉淀干燥后即成浒苔叶绿素成品O
2.按照权利要求1所述的酶法制备浒苔叶绿素的工艺，其特征在于步骤(2)所述的酶解温度为50°C 70°C，酶解时间为4 6小时，纤维素酶和几丁质酶的质量比为I 2 :1o
3.按照权利要求1所述的酶法制备浒苔叶绿素的工艺，其特征在于步骤(4)所述硫酸铵为硫酸铵晶体,所述將苔细粉与硫酸铵晶体的重量比为1:0.1 O. 4。
4.按照权利要求1所述的酶法制备浒苔叶绿素的工艺，其特征在于步骤(4)所述的离心转速为8000rpm，离心时间为20分钟。
全文摘要
本发明公开了一种叶绿素的制备工艺，以浒苔为浸取原料，该方法主要包括对浒苔的酶解步骤。具体地说，本发明的浒苔叶绿素的制备方法包括先用硫酸铜稳定叶绿素，再使用酶制剂对浒苔细胞进行酶解，破碎浒苔细胞壁，然后采用90％的乙醇反复浸泡提取，提取液用硫酸铵沉淀，离心，取沉淀干燥后即成浒苔叶绿素成品。本发明工艺流程简单，成本低廉，适宜大规模生产。
文档编号C07D487/22GK103012414SQ20121051100
公开日2013年4月3日 申请日期2012年12月4日 优先权日2012年12月4日
发明者荆晓丽 申请人:青岛艾华隆生物科技有限公司