一种多芳基取代咪唑荧光探针及其制备方法和在检测g-四链体结构中的应用的制作方法
【专利摘要】本发明提供一类多芳基取代咪唑荧光探针的制备方法及其在检测G-四链体核酸中的应用。该类探针制备简单、易得，并且结构稳定，可用于特异性检测G-四链体核酸二级结构，通过荧光分光光度计可以快速检测出溶液中的DNA样品的二级结构。该类探针对G-四链体核酸二级结构的检测方法具有操作简便，选择性好的优点，并且克服了其他检测方法价格昂贵，设备要求高，技术操作相对复杂等缺点。
【专利说明】一种多芳基取代咪唑荧光探针及其制备方法和在检测 G-四链体结构中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种荧光探针，更具体地，涉及一种多芳基取代咪唑荧光探针及其制 备方法和在检测G-四链体结构中的应用。
【背景技术】
[0002] G-四链体（G-quadruplex)是一种特殊的DNA二级结构。人类基因组中很多富鸟 嘌呤区域具有形成这一结构的能力，包括端粒末端鸟嘌呤重复序列，以及多种基因的启动 子区域，如 c_kit、c-myc、c-myb、bcl_2、roGF、kRAS、VEGF、Rb 和膜岛素基因等。G-四链体 结构具有多态性，链的数量和取向、loop的连接方式以及鸟嘌呤的糖苷扭转角以及与羰基 负电中心配位的金属离子等多方面决定了 G-四链体的类型和构象，这些差异性也为蛋白 和小分子化合物提供了多个识别位点。根据链的取向不同，G-四链体分为正平行，反平行 与混合型三种构象。
[0003] G-四链体结构的形成对于体内的一系列生理过程都存在调控作用。研究证明，某 些启动子区域的G-四链体结构会显著影响基因的转录和翻译水平，因此G-四链体结构被 认为是起到分子开关的功能，其形成和拆散可能涉及到信号传导、细胞凋亡和细胞增殖等 一系列体内重要的生理过程。所以，在体内或者体外试验中，能够特异性地检测出G-四链 体结构的存在或者形成，对于研究G-四链体结构的相关生物学功能以及开发以G-四链体 结构为靶点的抗癌药物等方面都具有非常重要的作用。
[0004] 目前，在体内和体外检测G-四链体结构的研究都取得了一些进展。由于体内大大 过量的双螺旋DNA的存在，以及复杂的细胞内环境，使得体内的检测相对于体外检测需要 解决更多的难题，目前已有一些荧光分子可以实现体内G-四链体结构的检测。 申请人:实验 室前期的工作中合成了一系列的三芳基取代咪唑类的化合物，其对G-四链体具有较好的 选择性和结合能力。 申请人:将多种荧光团结构融合到三芳基咪唑结构当中，得到了新型的 G-四链体探针，该探针选择性识别G-四链体，有些可以进一步识别正平行G-四链体。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的之一是提供一种荧光探针，所述的荧光探针的结构式为：
【权利要求】
1. 一种荧光探针，其特征在于，所述的荧光探针的结构式为：
η为 2,3,4 或 5 ; R1为〇或N; R2为O或N; R3为甲氧基，氨基，甲胺，二甲胺，二乙胺，吗啡啉，哌啶，N-甲基哌嗪，羧基，羟基，甲 酰胺，苯甲酸，1-甲基咪唑，双氯乙基甲胺，糖基或核酸碱基； R4为甲氧基，氨基，甲胺，二甲胺，二乙胺，吗啡啉，哌啶，N-甲基哌嗪，羧基，羟基，甲 酰胺，苯甲酸，1-甲基咪唑，双氯乙基甲胺，糖基或核酸碱基。
2. -种根据权利要求1所述的荧光探针，其特征在于，所述的RJPR3通过三氮唑连接， 所述的馬和R4通过三氮唑连接。
3. -种荧光探针，其特征在于，所述的荧光探针的结构式为
所述的RjPR6SF^O-CH
4. 一种根据权利要求1至3任一所述的荧光探针，其特征在于，所述的荧光团为7-二 乙胺基香豆素，1，8-萘酰亚胺，氟硼二吡咯，荧光素，罗丹明，咔唑或二苯乙烯。
5. -种权利要求1至3任一所述的荧光探针的制备方法，其特征在于，包括以下步骤： 步骤1.制备获得荧光团，并引入醛基； 步骤2.宅
上引入相关的官能团获得
步骤3.将步骤1所述制得的荧光团和步骤2所述的
反应，即得。
6. -种权利要求1至3任一所述的荧光探针在制备检测G-四链体结构的药物中的应 用。
【文档编号】C07D403/14GK104449669SQ201410545469
【公开日】2015年3月25日 申请日期:2014年10月15日 优先权日:2014年10月15日
【发明者】黄志纾, 谭嘉恒, 胡命豪, 陈硕斌 申请人:中山大学