专利名称：固相标记卤代药物的方法及标记反应器的制作方法
技术领域：
本发明涉及放射性卤素同位素标记药物的方法及其标记反应器。
随着放射性同位素的迅速发展，用放射性卤素标记的放射性药物在临床诊断、治疗和显像等方面的应用已十分广泛。例如用碘代胆固醇在临床上作为肾上腺显影剂等。但是，用放射性卤素标记放射性药物的方法却仍然沿用均相标记法，即需要在反应溶剂中进行。这种标记方法存在标记时间长，放化操作程序复杂，放射性回收率不高等缺点。
本发明的目的是提供一种标记快速、简便、无载体的卤素标记放射性药物的方法，以及使用该方法标记药物的反应器。
用卤素标记药物，是把带负离子的卤素通过氧化剂氧化成带正电荷的氯化物，再利用带正电荷的卤素对被标记药物的亲电取代反应对药物进行标记。本发明人根据这一原理，选择含有N-C1功能团的氧化型树脂作氧化剂，并用聚乙烯硫醇为载体，将被标记的化合物预先固定在载体上，以卤素I或Br同位素进行固相标记。标记反应式为
式中
代表聚合物尼龙-6，
代表聚乙烯硫醇，X代表卤素I或Br，R代表能生成有机汞化合物的芳香烃衍生物、烯烃衍生物、羰基化合物和杂环化合物的某一种。
反应式中处于氧化态的X
选择性地进攻-Hg-R
，并断开碳汞键，生成碘或溴标记化合物，汞留在树脂上，因而得到无载体的产物。N-C1代尼龙-6与氧化树脂处于固相，不与有机汞化合物直接接触而不会反应，以保持稳定。
本发明选用
-N-C1氧化型树脂作氧化剂。这种带有N-C1功能团的氧化型树脂象N-氯代琥珀酰亚胺一样是一种氯胺型氧化剂，用次氯酸氯代长链聚酰胺尼龙-6，与离子交换法相类似
，此时的卤代过程是活性氯(Cl
)取代氢的共价键的转移过程。从而把带负离子的卤素氧化成-氯化物(ICl)、(BrCl)。
本发明采用聚乙烯硫醇为载体，用以预先固定被标记化合物是可行的。因为，聚乙烯硫醇与芳烃衍生物、烯烃衍生物、杂环化合物和羰基衍生物的有机汞化合物偶联，偶联产物都处于亚稳态，适合固相标记。
为了便于操作使用上述提出的标记方法，本发明人进一步将该方法制作成一种固相标记反应器，即用该反应器实现其标记方法。该反应器由玻璃柱和树脂组成，玻璃柱上端为加大型的开口，下端开一小孔，柱内装有两部份树脂床之间用玻璃纤维隔离。上部份树脂床是含有N-Cl功能团的氧化型树脂，下部份是载体树脂，用以预先固定所需要的被标记化合物。
附
图1为固相反应器的结构图。将负离子状态的卤素通过开口进入玻璃柱1时，用甲醇作淋洗剂，氧化型树脂2将把其氧化成带正电荷的卤素，再与载体3上预先固定的被标记化合物发生亲电反应实现标记。标记化合物从柱底部小孔4流出。柱底部和柱内两部份树脂之间用玻璃纤维5隔离和过滤。
图2，为6-125I胆固醇的TLC扫描图。
图3，为125I-RHO的TLC扫描图。
下面结合实施例进一步描述本发明所提出的固相标记方法及其反应器的操作方法和效果。
实施例一被标记化合物的固定化。
实现固相标记的首要任务就是要把被标记化合物固定到载体上，并且要求固定化产物既要有一定的稳定性，又要在特定条件下保证有相当的活性。通过有机金属中间体与功能高分子载体偶联可以满足这一要求。实验证明，有机汞化合物的中间体是最合适的，脂肪族、芳香族、乙烯和其它杂环化合物可以合成有机汞中间体化合物。这些有机汞化合物能以多种方式与树脂联结。先选择通过巯基联结实现被标记化合物的固定化，以被标记化合物诺丹明6G(RhO)为例通过下式反应
用亲核试剂KHS直接取代聚氯乙烯，取代产物聚乙烯硫醇，再与有机汞化合物RhOHgCl偶合转化成RhOHgoH。经测定，该产物中汞含量为0.081/g，与RhOHg一对树脂的增重而计算的的摩尔数0.0805meq/g一致，证明产物实现偶联，诺丹明已被固定在载体上。
实施例二用固相法及固相标记反应器标记6-125I胆固醇及鉴定。
称取2克未经分离的胆固醇的有机汞化合物的混合物(CL-6-HgCl0.35g)，溶于80mlCHCl3中，加入0.25mNaoH、乙醇50%10ml，加入4.0g
-SH，在60℃下回流搅拌2小时后，冷却至室温，加入100ml甲醇，即有白色沉淀析出，过滤，用甲醇洗净烘干称重，树脂增重0.21g，产率为63.6%。
将
-SHg-CL和
-NCl各1克用甲醇浸泡12小时后，于Φ4×100mm柱中湿法装柱，下端装
-SHg-CL20mm，上端装
-NCl30mm，中间用少量玻璃纤维隔开，分别用常量组份的NaI和放射性溶液的Na125I通过柱子，用甲醇洗柱，流速为2滴/S，得到产品6-125I胆固醇的放射化学纯度用薄层层析扫描鉴定，以硅胶为吸附剂，以7%甲醇的氯仿作展开剂，10%的磷钼酸乙醇作显色剂。喷板后在100℃烘烤5分钟，用常量组份的NaI通过柱子时得到的碘代产物显色后得唯一的Rf＝0.598的斑点。放射性Na125I标记组份的r扫描结果，所得放射峰的Rf与常量组份和文献报道的Rf值相符(图2)，放射性回收率为98%，放射化学纯度为95%。
实施例三用固相法及固相标记反应器标记诺丹明6G及鉴定。
称取
-SHgRho(50-150目)和
-NCl(5-150目)树脂各2克，分别用甲醇浸泡12小时后，将
-SHRho湿法装在φ4×90mm玻璃柱的下端20mm，放少量玻璃纤维，再装入高为30mm的
-NCl。待溶液将流尽时，加入放射性的Na125I，用甲醇淋洗，收集淋洗液，测总放射性。产品125I-Rho的放射化学纯度用薄层层析扫描进行鉴定，以硅胶为吸附剂，EtOAC/CH2Cl2(5∶95V/V)为展开剂，I-Rho本身为棕红色，用常量组份的NaI淋洗时测得Rf＝0.79，r扫描结果，所测得放射性峰值与常量组份的I-Rho相符(图3)。放射性回收率为96.8%，放射化学纯度为95.11%。
使用本发明标记放射性卤素药物有以下优点1.快速从加入放射性卤代药到得到标记产物，一般不超过5分钟，而且标记产物为放射化学纯度大于95%的无载体药物，减少了环境污染和操作人员所受的辐射剂量，有利于半衰期短的卤素放射性核素的使用。
2.操作简便使用固相标记反应器只需加入放射性卤素溶液和用甲醇淋洗即可得到标记药物，反应器可重复使用。
3.适用面广凡能生成有机汞化合物的芳香烃衍生物、烯烃衍生物、羰基衍生物和杂环化合物都能固定在反应器内的载体上，进行固相标记，放射性碘和溴的同位素都可用此法标记。
权利要求
1.固相标记卤代药物的方法，采用带负离子的卤素通过氧化剂氧化成带正电荷的氯化物，再利用带正电荷的卤素对被标记药物的亲电取代反应对药物进行标记，其特征在于选择含有N-C1功能团的氧化型树脂作氧化剂，用聚乙烯硫醇为载体，将被标记的化合物预先固定在载体上，以卤素I或Br同位素进行固相标记，标记反应式为
式中X代表卤素(I或Br)，
代表聚合物尼龙-6，
代表聚乙烯硫醇，R代表能生成有机汞化合物中的芳香烃衍生物、烯烃衍生物、羰基化合物和杂环化合物的某一种。
2.根据权利要求1所说的固相标记卤素药物的方法，其特征在于含有N-C1功能团的氧化型树脂属氯胺型氧化剂，在标记过程中，把带负离子的卤素氧化成相应的氯化物(ICl、Brcl)。
3.用固相法标记卤素药物的反应器，是由玻璃柱和树脂组成的，其特征在于玻璃柱1上端为加大型的开口，下端开一小孔4，柱内装有两部份树脂床，之间用玻璃纤维5隔离，上部份树脂床2为含有N-Cl功能团的氧化型树脂，下部份是载体树脂3，用以预先固定所需要的被标记化合物，将带有负离子的卤素通过柱子，用甲醇作淋洗剂，即可得到所需的标记化合物。
全文摘要
本发明是用固相标记方法及其使用该方法建立的固相标记反应器，用放射性卤素标记放射性药物，其标记反应式如下式中X代表卤素用该法标记药物快速，无载体，放射性回收率和所得到的标记化合物放射化学纯度均很高。
文档编号C07B59/00GK1049649SQ9010589
公开日1991年3月6日 申请日期1990年9月28日 优先权日1990年9月28日
发明者王科太 申请人:四川大学