丙烯酰基-咪唑衍生物的制作方法

专利名称：丙烯酰基-咪唑衍生物的制作方法
技术领域：
本发明涉及丙烯酰基-咪唑衍生物，它们的制备方法及其在医药中的应用，特别是作为降压药和抗动脉粥样硬化剂的应用。
已知一种蛋白水解酰即血管紧张肽原酶在体内由血管紧张肽原切下十肽血管紧张肽Ⅰ，而血管紧张Ⅰ本身在肺、肾或其他组织中降解为高血压八肽血管紧张肽Ⅱ。在血压升高的意义上血管紧张肽Ⅱ的各种效应协同地发挥作用，例如，血管收缩、肾中Na+潴留、肾上腺中醛甾酮的分泌、及交感神经系统的紧张性增强。
此外，血管紧张肽Ⅱ具有增强细胞生长和繁殖的性质，例如，心肌细胞和平滑肌细胞，这些细胞在各种疾病(如高血压、动脉粥样硬化和心机能不全)中生长与殖速度加快。
除了抑制血管紧张肽原酶活性，介入血管紧张肽原酶/血管紧张肽体系(RAS)的一种可能的启动点是抑制血管紧张肽转化酶(ACE)活性，以及阻断血管紧张肽Ⅱ受体。
本发明涉及通式(Ⅰ)的丙烯酰基-咪唑衍生物及其盐
式中
R1代表各自最多含有8个碳原子的直链或支链烷基或烯基，或者代表含有3-8个碳原子的环烷基，R2代表氢，卤素或含有多至5个碳原子的全氟烷基，n代表数字0，1，2或3，R3代表含有3-7个碳原子的环烷基，R4代表羟基，或含有多至6个碳原子的直链或支链烷氧基，或者代表式-CO-NR7R8基团，其中，R7和R8相同或不同，代表氢，含有多至6个碳原子的直链或支链烷基或苯基，R5代表氢，卤素，硝基，羟基，三氟甲基，三氟甲氧基，各自最多含有6个碳原子的直链或支链烷基、烷氧基或烷氧碳基，氰基或羧基，L代表含有3-7个碳原子的环烷基，或可被苯基取代的含有多至8个碳原子的直链或支链烷基，R6代表羟基或最多含有6个碳原子的直链或支链烷氧基，或代表式-NR9SO2R10或下式基团
式中，R9代表氢或含有多至4个碳原子的直链或支链烷基;R10代表含有多至6个碳原子的直链或支链烷基或者代表由含有多至6个碳原子的直链或支链烷基任意取代的苯基;R11代表氢或含有多至6个碳原子的直链或支链烷基或代表羟基保护基。
按照本发明，通式(Ⅰ)化合物也可以其盐的形式存在。一般本文提到的可以是与有机或无机碱或酸形成的盐。
就本发明的范围而言，优选生理学上可以接受的盐。丙烯酰基-咪唑衍生物的生理学上可以接受的盐可以是本发明物质与无机酸、羧酸或磺酸形成的盐。特别优选的盐是与例如下述酸形成的盐盐酸，溴氢酸，硫酸，磷酸，甲磺酸，乙磺酸，甲苯磺酸，苯磺酸，萘二磺酸，乙酸，丙酸，乳酸，酒石酸，柠檬酸，富马酸，马来酸或苯甲酸。
生理学上可以接受的盐也可以是具有游离羧基的本发明化合物的金属盐或铵盐。特别优选的盐是，例如，钠，钾，或钙盐，也可以是由氨或下述有机胺衍生的铵盐例如，乙胺，二-或三乙胺，二-或三乙醇胺，二环己基胺，二甲氨基乙醇，精氨酸，赖氨酸或乙二胺。
本发明化合物可以立体异构体的形式存在，该异构体既可以表现为互为镜像(对映体)，也可以不表现互为镜像(非对映体)。本发明涉及对映体和非对映体两者，也涉及各自的混合物。像非对映体一样，以已知方法可将外消旋体分离成立体异构的单一组份[参见E.L.Eliel，StereochemistryofCarbonCompounds，McGrawHill，1962]。
优选的通式(Ⅰ)化合物是下述化合物及其盐，式中R1代表各自最多含有6个碳原子的直链或支链烷基或链烯基，或者代表环丙基，环丁基，环戊基，环己基或环庚基，R2代表氢，氟，氯，溴或含有多至4个碳原子的全氟烷基，n代表数字0，1或2，R3代表环丙基，环丁基，环戊基，环己基或环庚基，R4代表羟基，含有多至4个碳原子的直链或支链烷氧基，或者代表式-CO-NR7R8基团，式中，R7和R8相同或不同，并代表氢，含有多至4个碳原子的直链或支链烷基，或苯基，R5代表氢，氟，氯，溴，三氟甲基，羧基或各自含有多至4个碳原子的直链或支链烷基、烷氧基或烷氧羰基，L代表环丙基，环丁基，环戊基，环己基或环庚基，或者代表含有多至6个碳原子的直链或支链烷基或苄基，R6代表羟基或含有多至4个碳原子的直链或支链烷氧基，或者代表式-NR9SO2R10或下式基团
式中，R9代表氢，甲基或乙基;R10代表含有多至4个碳原子的直链或支链烷基，或者是由含有多至4个碳原子的直链或支链烷基任意取代的苯基;R11代表氢，含有多至4个碳原子的直链或支链烷基，乙酰基或苄基。
特别优选的是下述通式(Ⅰ)化合物及其盐，其中R1代表各自含有多至4个碳原子的直链或支链烷基或烯基，或者代表环丙基，环戊基或环己基，R2代表氢，氟，氯或含有多至2个碳原子的全氟烷基，n代表数字0或1，R3代表环戊基或环己基，R4代表羟基，甲氧基，乙氧基或叔丁氧基，R5代表氢，氟，氯，溴，三氟甲基，三氟甲氧基或甲基，L代表环戊基，环己基或环庚基，或者代表含有多至4个碳原子的直链或支链烷基或苄基，R6代表羟基或含有多至4个碳原子的直链或支链烷氧基，或者代表式-NR9SO2R10或下式基团
式中R9代表氢或甲基，R10代表甲基或对甲苯基，R11代表氢或含有多至3个碳原子的直链或支链烷基或苄基。
本发明中最为优选的通式(Ⅰ)化合物是式中式-CH(L)-CO-R6基团处于咪唑甲基对位的那些化合物。
另外，发现了用于制备本发明通式(Ⅰ)化合物的方法，其特征在于在惰性溶剂中，在碱存在下，由通式(Ⅱ)醛与通式(Ⅲ)化合物反应，转化成通式(Ⅳ)羟基化合物。
式中，R1，R2，R5和L的定义如前述，R12代表C1-4-烷氧基，
式中，R1和n的定义如前述，R13代表前述R4的定义但是不代表羟基，
式中，R1，R2，R3，R5，R12，R13，n和L的定义同前文所述，然后引入保护基团封锁游离羟基;在最后一步，在惰性溶剂中，在碱存在下进行消除反应;如有必要，分离E/Z异构体;
并且，如果制备的是酸(F4＝OH)，则将酯水解;如果制备的是酰胺或磺酰胺，如有必要先将羧基(R12OH)活化，再按惯用方法进行酰胺化或磺酰胺化;如果R9不代表氢，则将官能团NH烷基化;如有必要，通过惯用方法，例如，还原，氧化，烷基化或水解引入R1和R2取代基，或将该取代基转化为其他的基团;如有必要，分离立体异构体;和如果制备的是盐，则与适宜的碱或酸反应。
下文例举的反应式可以解释本发明的方法
在上述限定中的羟基保护基一般代表下述系列的保护基;苄氧羰基，甲磺酰基，甲苯磺酰基，2-硝基苄基，4-硝基苄基，2-硝基苄氧羰基，4-硝基苄氧羰基，叔丁氧羰基，烯丙氧羰基，4-甲氧基苯基羰基，乙酰基，三氯乙酰基，2，2，2-三氯乙氧羰基，2，4-二甲氧基苄氧羰基，2-(甲硫基甲氧基)乙氧羰基，苯甲酰基，4-甲基苯甲酰基，4-硝基苯甲酰基，4-氟苯甲酰基，4-氯苯甲酰基或4-甲氧基苯甲酰基。优选乙酰基，甲磺酰基和甲苯磺酸基。
适用于该方法的溶剂是在该反应条件下不发生改变的惯用有机溶剂。优选者包括;醚类，例如，乙醚，二噁烷，四氢呋喃，乙二醇二甲醚;或烃类，例如，苯，甲苯，二甲苯，己烷，环己烷，或矿物油馏份;或卤代烃类，例如，二氯甲烷，三氯甲烷，四氯甲烷，二氯乙烷，三氯乙烷或氯苯;或乙酸乙酯，三乙胺，吡啶，二甲亚砜，二甲基甲酰胺，六甲基磷酰胺，乙腈，丙酮或硝基甲烷。也可以采用上述溶剂的混合物。用于各步反应的优选溶剂是四氢呋喃，二氯甲烷，甲苯和二恶烷。
可用于本发明方法中的碱一般是无机或有机碱。优选者包括碱金属氢氧化物或碱土金属氢氧化物，例如，氢氧化钠，氢氧化钾，氢氧化锂或氢氧化钡;碱金属碳酸盐例如碳酸钠或碳酸钾;碱土金属碳酸盐例如碳酸钙;或碱金属或碱土金属醇盐或氨基化物，例如，甲醇钠或甲醇钾，乙醇钠或乙醇钾或叔丁醇钾，或二异丙基氨基锂(LDA)，或正丁基锂或正丁基锂或有机胺(三烷基(C1-6)胺)，例如，三乙胺或N，N-二异丙基胺，或杂环类，例如，1，4-二氮杂双环[2，2，2]辛烷(DABCO)，1，8-二氮杂双环[5，4，0]十一碳-7-烯(DBU)，吡啶，N，N-二甲氨基吡啶(DMAP)，二氨基吡啶，甲基哌啶或吗啉。也可以采用碱金属(例如钠)或其氢化物(例如氢化钠)作为碱。优选三乙胺，氢氧化锂，DBU，N，N-二甲氨基吡啶和正丁基锂。
相对于1摩尔式(Ⅲ)化合物，碱的用量一般为0.05至10摩尔，优选1至2摩尔。
本发明方法的各步反应一般在-78℃至+80℃，优选在-40℃至室温下进行。有必要在保护气体存在下进行反应。
本发明方法一般在常压下实施。但是，也可能在加压或减压下实施该方法(例如，其压力范围是0.5至5巴)。
一般在上述某一溶剂中，采用碱，优选在二氯甲烷中采用二甲氨基吡啶引入保护基。
一般在0至60℃，优选在室温，常压下进行保护反应。
一般在上述某一溶剂中，在上述某一碱存在下，优选在甲苯中，在DBU存在下进行消去反应。
一般在+30℃至+130℃，优选在+50℃至+100℃，在常压下进行消去反应。
适用于水解反应的碱是惯用的无机碱。优选的碱包括碱金属氢氧化物或碱土金属氢氧化物，例如，氢氧化锂，氢氧化钠，氢氧化钾，或氢氧化钡;或碱金属碳酸盐，例如，碳酸钠，碳酸钾或碳酸氢钠;或碱金属醇盐，例如，甲醇钠，乙醇钠，甲醇钾，乙醇钾或叔丁醇钾。特别优选氢氧化锂，氢氧化钠或氢氧化钾。
适用于水解反应的溶剂是水或水解反应惯用的有机溶剂，优选的溶剂包括醇类，例如，甲醇，乙醇，丙醇，异丙醇或丁醇;或醚类，例如，四氢呋喃或二噁烷;或二甲基甲酰胺，或二甲亚砜。特别优选的是二噁烷-水混合物。
也可采用下述酸进行水解例如，三氟乙酸(TFA)，乙酸，盐酸，溴氢酸，甲磺酸，硫酸，或过氯酸，优选采用三氟乙酸。
水解温度一般为0℃至+100℃，优选+20℃至+80℃。
一般在常压下进行水解，但是，也可以在减压或加压(例如，0.5至5巴)下进行水解。
在进行水解时，相对于1摩尔酯，碱的用量一般为1至3摩尔，优选1至1.5摩尔。特别优选的是采用摩尔量的反应物。
在进行该反应时，在第一步反应中作为可分离中间体形成本发明化合物的羧酸盐。用惯用的无机酸处理该羟酸盐即可得到本发明的酸。优选的无机酸包括，例如，盐酸，溴氢酸，硫酸或磷酸。实际上，就制备羧酸而言，有利的方法是在第二步反应中不分离羧酸盐将水解后的碱性反应混合物酸化即可。然后按常规方法分离酸。
一般在上述某一溶剂中，优选在四氢呋喃或二氯甲烷中进行酰胺化和磺酰胺化。
酰胺化和磺酰胺化可任选地经过酰卤活化步骤进行，该酰卤可由相应的酸与亚硫酰氯，三氯化磷，五氯化磷，三溴化磷或草酰氯反应制得。
酰胺化和磺酰胺化的反应温度一般为-20℃至+80℃，优选-10℃至+30℃，在常压下进行。
用于该目的适宜的碱除了上述碱外优选采用三乙胺和/或二甲氨基吡啶，DBU，DABCO或N，N-二甲氨基吡啶。
相对于1摩尔通式(Ⅳ)和(Ⅴ)化合物，碱的用量为0.5至10摩尔，优选1至5摩尔。
可以采用的用于酰胺化的酸结合剂是碱金属或碱土金属碳酸盐，例如，碳酸钠，碳酸钾，碱金属或碱土金属氢氧化物，例如，氢氧化钠，或氢氧化钾;或者是有机碱，例如，吡啶，三乙胺，N-甲基哌啶，或者是双环脒类，例如，1，5-二氮杂双环[3，4，0]-壬-5-烯(DBN)或1，5-二氮杂双环[3，4，0]十一碳-5-烯(DBU)。优选碳酸钾。
适宜的脱水剂是碳化二亚胺类，例如，二异丙基碳化二亚胺，二环己基碳化二亚胺或N-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基碳化二亚胺盐酸盐或者是1，2-噁唑翁化合物，例如，2-乙基-5-苯基-1，2-恶唑翁-3-磺酸盐，或者是丙烷磷酸酐或氯甲酸异丁酯或苯并三唑氧基-三-(二乙氨基)鏻六氟磷酸盐或二苯基氨基磷酸酯或甲磺酰氯，如有必要，加入碱，例如，三乙胺或N-甲基吗啉或N-甲基哌啶或二环己基碳化二亚胺，N-羟基苯并三唑或N-羟基琥珀酰亚胺(参见J.C.Sheehan，S.L.Ledis，J.Am，Chem.Soc.95，875(1973);F.E.Frerman等，J.Biol.Chem.225，507(1982)和N.B.Benoton，K.Kluroda，Int.Pept.Prot.Res.13，403(1079)，17，187(1981)]，优选N，N-二环己基碳化二亚胺，如有必要加入三乙胺和N-羟基苯并三唑。
相对于1摩尔相应的羧酸，酸-结合剂和脱水剂的一般用量为0.5至3摩尔，优选1至1.5摩尔。
通式(Ⅱ)化合物是新化合物，并可由下述反应制得在上述某一溶剂中，并在其中加入上述某一碱，优选在二甲基甲酰胺中采用氢化钠或碳酸钾，由通式(Ⅴ)化合物与通式(Ⅵ)化合物反应，
式中R1和R2的定义同前述，
式中R5，L和R12的定义同前述，W代表卤素，优选代表溴。
通式(Ⅲ)化合物是已知化合物或可以由惯用方法制得。
通式(Ⅳ)化合物是新化合物，并可由例如前述方法制得。
通式(Ⅴ)咪唑是已知化合物，或者可以由类似于下述文献所述已知方法制得[参见例如，Beilstein25，163;2345，US4，355，040]。
通式(Ⅵ)化合物在某些情况下是已知化合物，并且可由例如下述方法制得在惰性溶剂中，如有必要在碱存在下，先用通式L-Z(Ⅷ)化合物(式中，L的定义同前，Z代表卤素，优选代表溴)，将通式(Ⅶ)化合物烷化
式中，R5和R12的定义同前，并且，在第二步反应中按常规方法将甲基溴化，如有必要加入催化剂。
一般在上述某一溶剂中(优选在二甲基甲酰胺中)，在0℃至+70℃(优选0℃至+30℃)，常压下进行烷化反应。
用于该溴反应的适宜的引物(催化剂)是例如偶氮二异丁腈，过氧二苯甲酰，优选偶氮二异丁腈，相对1摩尔通式(Ⅵ)化合物，引物的用量为0.01至0.1摩尔，优选0.01至0.05摩尔。
通式(Ⅶ)化合物是已知化合物或可按已知方法制得[参见Chem.J.Chem.Soc.，PerkinTrams，1，(9)，1706-1707;J.Chem.Soc.，Chem.Commun.，(2)，167-168]。
通式(Ⅷ)化合物是已知化合物[参见Beilstein，5，19/5，24/5，29]，或者可按惯用方法由相应的醇类或环化烯制得。
本发明的通(Ⅰ)化合物具有出人意料的有用药理作用谱。
本发明化合物具有特异性AⅡ拮抗作用，因为它们抑制血管紧张肽Ⅱ与AⅡAT1受体，AⅡAT2受体的结合，或抑制血管紧张肽Ⅱ同时与AⅡAT1及AT2受体的结合。它们抑制了血管紧张肽Ⅱ的血管收缩作用和醛甾酮分泌刺激作用。此外，它们还抑制平滑肌细胞的繁殖。
因此，本发明化合物可用作药物以治疗动脉高血压和动脉粥样硬化。此外，它们还可用于治疗冠心病、心机能不全、大脑功能紊乱、大脑局部缺血疾病、外周循环紊乱、肾和肾上腺机能障碍、呼吸道的支气管痉挛及血管疾病、钠潴留及浮肿。
抑制兴奋剂诱导的收缩的试验将两种性别的家兔在颈部击昏并放血，或者在某些情况下用戊巴比妥钠(约60-80mg/kg，静脉注射)麻醉，并开胸将其处死。取出胸主动脉，去掉粘连的结缔组织，将其分割成1.5毫米宽的环形小段，并在约3.5g的起始负载下将其分别转移到10ml器官浴中，该器官浴含有充有5%二氧化碳-95%氧气的Krebs-Henseleit营养液，该营养液的温度控制在37℃，其组成如下119mmol/1NaCl;2.5mmol/l CaCl2×2H2O;1.2mmol/l KH2PO4;10mmol/l 葡萄糖;4.8mmol/l KCl;1.4mmol/l MgSO4×7H2O和25mmol/l NaHCO3。
通过桥式放大器(ifdMulheim或DSMAalen)借助StathamUC2传感器等长记录收缩，通过模拟/数字转换器(System570，KeithleyMunich)使其数字化并进行评价。按小时建立兴奋剂剂量应答曲线(DRC)。对每个DRC，以4分钟间隔对器官浴施用3或4个不同的浓度。在DRC结束和随后的洗涤循环(在每种情况下以约5秒/分用上述营养液洗涤16次)之后是28分钟的静止或保温阶段，此过程中收缩通常恢复到初始值。
在正常情况下，用第3条DRC的高度作为在进行一步的操作循环中评价特测试验物质的参照标准，并在后面的DRC中在保温时间开始时在器官浴中加入剂量递增的试验化合物。每个主动脉环全天用同样的兴奋剂刺激。
兴奋剂及其标准浓度(每单剂量的使用体积＝100μm)KCl22.7;32.7;42.7;52.7mmol/lL-去甲肾上腺素 3×10-9;3×10-8,3×10-7;3×10-6g/ml5-羟色胺 10-8;10-7;10-6;10-5g/mlB-HT920 10-7;10-6;10-5g/ml甲氧胺 10-7;10-6;10-5g/ml血管紧张肽II 3×10-9;10-8;3×10-8,10-7g/ml用第3个即将最大兴奋剂浓度作为计算IC50(试验化合物引起50%抑制率的浓度)的基准。
本发明化合物对血管紧张肽Ⅱ诱导的离体家兔主动脉收缩的抑制是剂量的函数。由钾去极化或其他兴奋剂诱导的收缩并未被抑制，或只在使用高浓度时略有抑制。
表A家兔离体主动脉环体外血管收缩的抑制抑制由AII诱导的收缩的IC50(g/ml)实施例号: IC50[g/ml]4 6.3×10-87 5.1×10-812 4.6×10-8对输注血管紧张肽Ⅱ的大鼠血压的测定将体重为300-350g的雄性Wistar大鼠(Moellegard，Copenhagen，Denmark)用戊硫巴比妥钠(100mg/kg，腹膜注射)麻醉。进行气管造口术之后，将导管插入股动脉以测量血压，将输注血管紧张肽Ⅱ的导管和施用化合物的导管插入股静脉。在施用神经节阻断剂安血定(5mg/kg，静脉注射)之后，开始输注血管紧张肽Ⅱ(0.3μg/kg/分)。血压值达到稳定水平后立即施用试验物质，或者静脉给药，或者以在0.5%Tylose中的悬浮液或溶液形式口服给药。在该物质的作用下血压的变化列于表中，以平均值±标准偏差表示。在清醒高血压大鼠中抗高血压活性的测定用由于手术诱发了单侧肾动脉狭窄的清醒大鼠来试验本发明化合物的口服抗高血压活性。为此目的，用内径为0.18mm的银钳将右肾动脉缩紧绷。在这种类型的高血压中，手术后前六星期内血浆血管紧张肽原酰活性增加。用“尾套”施用化合物后，在指定的隔内对这些动物的动脉血压进行无血测量。通过管饲法以各种剂量胃内(口服)施用Tylose悬浮液形式的试验化合物。在临床上适用的剂量下，本发明化合物降低了高血压大鼠的动脉血压。
此外，本发明化合物对放射性血管紧张肽Ⅱ特异性结合的抑制是浓度的函数。
本发明化合物与牛肾上腺皮质的膜部分上血管紧张肽Ⅱ受体的相互作用借助于Ultra-Turrax(Janke&Kunkel，Staufeni.B.)将新摘出的仔细去掉了髓质和被膜的牛肾上腺皮质(AGC)在蔗糖溶液(0.32M)中捣碎，得到粗膜匀浆液，以两次离心步骤将其部分纯化，得到膜部分。
用放射性血管紧张肽Ⅱ在0.25ml的试验溶液中对部分纯化的牛AGC膜部分进行受体结合试验，试验溶液含有部分纯化的膜(50-80μg)、3H-血管紧张肽Ⅱ(3-5nM)、试验缓冲液(50mM Tris，pH7.2)5mM MgCl2以及试验化合物。在室温保温60分钟后，通过润湿的玻璃纤维滤膜(Whatman GF/C)分离未结合放射性的样品，将蛋白用冰冷的缓冲液(50mM Tris/HCl，pH7.4，5%PEG6000)洗涤后，通过分光光度法在闪烁液中测定结合的放射性。用计算机程序对原始数据进行分析得到Ki或IC50值(Ki对所用放射性校正后的IC50值;IC50值试验化合物对放射配体的特异性结合产生50%抑制率时的浓度)。
实施例6Ki＝750nM实施例8Ki＝80nM
本发明化合物在牛小脑膜部分上与2型血管紧张肽Ⅱ受体(AT2)的相互作用。
为此实验，采用NEN Dupont的AT2受体“药物发现系统”(“Drug Discovery System”)(Catalogue No.NED-001)。相应地采用另外提供的实验记录仪进行该实验。在235μl的实验溶液进行受体结合实验，在该实验溶液中具体含有125I-血管紧张肽Ⅱ(约0.1nM)，实验缓冲剂(PBS，NaCl，EDTA，PMSF，DTT，DMSO)和受测物质。在37℃保温60分钟后，采用润湿的玻璃纤维滤器(Whatman GF/C)分离样品中的未结合的放射活性，用冰冷却的缓冲液(0.9%NaCl)洗涤蛋白后，在闪烁液中以分光光度计法测定结合放射活性。采用计算机程序对原始数据进行分析以确定IC50值或Ki值(IC50值受测物质引起放射配本特异性结合50%抑制的浓度Ki值对所用放射性校正后的IC50值)。
实施例号4Ki(nM)＝827本发明化合物抑制平滑肌细胞繁殖的试验为测定化合物的抗繁殖作用，使用通过介质移出技术[R.Ross，J.Cell.Biol.50，172，1971]由大鼠主动脉得到的平滑肌细胞。将细胞接种在适当的培养皿(一般为96孔板)中，在5%CO2中在培养基中于37℃培养2-3天，该培养基含有血清，2mML-谷氨酰胺和15mM HEPES.pH7.4。然后通过血清缺乏使细胞同步化2-3天，再用血清或其他因子刺激其生长。同时加入试验化合物。16-20小时后加入1μCi3H-胸苷。再过4小时后测定该物质结合到细胞中可用TCA沉淀的DNA中的量。
为了测定由加入10%FCS引起的胸苷结合量的半最大抑制率(IC50)，将化合物依次稀释到10-6M至10-9M。
实施例号在10-6M时%抑制率590可以按照已知方法，用惰性无毒的可药用赋形剂或溶剂，将新的活性化合物转化为常用的制剂，如片剂、包衣片剂、丸剂、粒剂、气雾剂、糖浆剂、乳剂、悬浮液和溶液。在每一情况下治疗活性化合物的浓度可以是混合物总重量的约0.5%至90%，即足以达到指定剂量范围的量。
这些制剂是通过例如用溶剂和/或赋形剂使活性化合物分散来制备的，如果需要，可以使用浮化剂和/或分散剂，也可以使用有机溶剂作为助溶剂，例如用水作稀释剂时。
按常规方法给药，优选口服或肠胃外给药，特别是经舌给药或静脉内给药。
在肠胃外给药的情况下，可以使用活性化合物在适当液体赋形剂中的溶液。
通常，已证明在静脉内给药的情况下，为达到有效的结果给药剂量为每千克体重约0.001至1mg，优选0.01至0.5mg，在口服给药的情况下，剂量为每千克体重约0.01至20mg，优选0.1至10mg。
然而，如果需要可能必须偏离上述剂量，也就是说剂量要随着体重或给药方式、对药物的个体反应、制剂性质以及给药时间或间隔等诸多因素而变化。因此，在某些情况下，用低于上述最小剂量的剂量便足够了，而在另一些情况下，必须超过上述剂量的上限。在采用相对大剂量服药时，最好将这些剂量分成一天当中的多个剂量服用。
溶剂混合物A乙酸乙酯/石油醚40-60＝7∶3B二氯甲烷/甲醇＝9∶1C二氯甲烷/甲醇/冰乙酸＝9∶1∶0.1D乙酸乙酯/石油醚40-60＝1∶1E甲苯/乙酸乙酯＝1∶3起始化合物实施例Ⅰ2-[4-[2-正丁基-4-氯-5-(1-(3-环己基-1-羟基-2-甲氧基羰基)丙基)-1H-咪唑-1-基甲基｝苯基]-2-环戊基-2-乙酸叔丁酯
于-78℃，搅拌，充氩下，将25.9ml1.6N的正丁锂在正己烷中的溶液(41.4mmol)滴加到4.4g(44mmol)二异丙胺在50ml四氢呋喃中的溶液中。温热至0℃反应5分钟后，再次将该混合物冷却到-78℃，滴加6.4g(37.7mmol)3-环己基丙酸甲酯在25ml四氢呋喃中的溶液，滴加温度不能超过-60℃。将该混合物在-78℃再搅拌30分钟，然后滴加11.5g(25.1mmol)2-[4-(2-正丁基-4-氯-5-甲酰基咪唑-1-基甲基)苯基]-2-环戊基乙酸叔丁酯在25ml四氢呋喃中的溶液，滴加温度不超过-60℃。于-78℃反应45分钟后，使该混合物融化，用20ml氯化铵水溶液处理。用乙酸乙酯提取3次后，合并有机相，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩，残余物在硅胶60上层析，用石油醚40-60/乙酸乙酯＝6∶1洗脱。
得量11.2g(收率74%)Rf＝0.72/0.83(石油醚40-60/乙酸乙酯＝1∶1)。
实施例Ⅱ2-[4-｛2-正丁基-4-氯-5-(1-(1-乙酰氧基-3-环己基-2-甲氧基羰基)丙基)-1H-咪唑-1-基甲基｝苯基]-2-环戊基-乙酸叔丁酯
用0.9g(7.2mmol)N，N-二甲氨基吡啶和1.8g(18.3mmol)乙酐处理在300ml二氯甲烷中的11.0g(17.5mmol)实施例Ⅰ化合物的溶液，在室温下将该混合物搅拌3小时。加入乙醚后，依次用水，碳酸氢盐水溶液，氯化钠水溶液和再用水与有机层一起振荡，分离有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。
得量11.3g(收率97%)，Rf＝0.84(石油醚40-60/乙酸乙酯＝5∶4)。
制备实施例实施例1和实施例2(E)-2-[4-｛2-正丁基-4-氯-5-(1-(3-环己基-2-甲氧基羰基)丙-1-烯基)-1H-咪唑-1-基-甲基｝苯基]-2-环戊基乙酸叔丁酯
(Z)-2-[4-｛2-正丁基-4-氯-5-(1-(3-环己基-2-甲氧基羰基)-丙-1-烯基)-1H-咪唑-1-基甲基｝苯基]-2-环戊基乙酸叔丁酯
将11.2g(16.7mmol)实施例2化合物溶解在130ml甲苯中，在室温下，用6.4g(41.9mmol)1.8-二氮杂双环[5，4，0]十一碳-7-烯处理上述溶液，于80℃搅拌18小时。在加入相同量的新鲜碱后，于80℃再搅拌10小时，将该混合物冷却，用甲苯稀释，并与氯化钠水溶液一起振荡。分出有机层，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩，残余物在硅胶60上层析，用石油醚40-60/乙酸乙酯(4∶1)洗脱。
实施例1，得量4.5g(收率44%)，实施例1，Rf＝0.35(石油醚40-60/乙酸乙酯＝4∶1)实施例2，得量1.2g(收率11%)实施例2，Rf＝0.21(石油醚40-60/乙酸乙酯＝4∶1)实施例3(E)-2-[4-｛2-己丁基-4-氯-5-(1-(3-环己基-2-甲氧羰基)丙-1-烯基)-1H-咪唑-1-基甲基｝苯基]-2-环戊基乙酸
将溶于20ml二氯甲烷中的4.4g(7.2mmol)实施例1化合物在室温下与20ml三氟乙酸一起搅拌4小时。然后用碳酸氢盐将其调至碱性，用乙醚处理，用1NHCl水溶液将其调至pH2，振荡提取，分离。用乙酸乙酯再将水相提取2次后，合并有机相，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。
得量3.9g(收率98%)Rf＝0.49(二氯甲烷/甲醇/冰乙酸＝9∶1∶0.1)。
实施例4(E)-2-[4-｛2-正丁基-4-氯-5-(1-(2-羧基-3-环己基-丙-1-烯基)-1H-咪唑-1-基甲基｝苯基]-2-环戊基乙酸
在室温下，用溶于6ml水中的50mg(1.2mmol]氢氧化锂处理溶于20ml二恶烷/水(1∶1)中的实施例3化合物(300mg，0.5mmol)，将该混合物在室温下搅拌18小时。然后浓缩，用水稀释，用乙醚提取。用1N盐酸酸化水相，用乙酸乙酯提取3次，合并乙酸乙酯相，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。
得量274mg(收率99%)。
Rf＝0.28(二氯甲烷/甲醇/冰乙酸＝9∶1∶0.1)
实施例5(E)-N-(L)-1-苯基-2-羟基乙基-2-[4-｛2-正丁基-4-氯-5-(3-环己基-2-甲氧基羰基-丙-1-烯基)-1H-咪唑-1-基甲基｝苯基]-2-环戊基乙酰胺
在室温，氩气氛下，用0.51g(3.3mmol)1-羟基-1H-苯并三唑处理溶于40ml二氯甲烷中的1.2g(2.2mmol)实施例3化合物，冷却至0℃，加入0.44g(4.4mmol)三乙胺和0.68g(3.3mmol)N，N′-二环己基碳化二亚胺，然后搅拌30分钟，然后滴加溶于20ml二氯甲烷中的0.36g(2.6mmol)L-苯基乙醇氨。搅拌1小时后，使该混合物缓慢地温热至室温，搅拌过夜。用水进行后处理，用二氯甲烷提取3次。合并有机相，用硫酸钠干燥，过滤，在硅胶60上层析，用甲苯/乙酸乙酯(1∶1)洗脱。
得量1.13g(收率76%)，Rf＝0.50/0.55(二氯甲烷/甲醇9∶1)实施例6(E)-N-4-甲苯磺酰基-2-[4-｛2-正丁基-4-氯-5-(3-环基-2-甲氧羰基-丙-1-烯基)-1H-咪唑-1-基甲基｝苯基]-2-环戊基-乙酰胺
在-30℃，氩气氛下，用0.44g(4.4mmol)三乙胺和0.28(2.4mmol)甲磺酰氯处理溶于40ml四氢呋喃中的1.2g(2.2mmol)实施例3化合物，将混合物搅拌2小时。然后滴加溶于20ml四氢呋喃中的0.45g(2.6mmol)对甲苯磺酰胺和0.29g(2.2mmol)N，N-二甲基氨基吡啶，将该混合物再搅拌1小时，缓慢温热至室温，搅拌过夜。用10ml1N乙酸进行后处理，用乙酸乙酯提取3次，合并有机相，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩，残余物经硅胶60层析，用甲苯/乙酸乙酯(1∶3)洗脱。
得量0.82g(收率55%)Rf＝0.83(乙酸乙酯/石油醚40-60＝7∶3)按类似于给定的实施例的方法，制得了表1和2中示出的化合物
权利要求
1.式(Ⅰ)丙烯酰基-咪唑衍生物及其盐
式中，R1代表各自含有多至8个碳原子的直链或支链烷基或烯基，或者代表含有3-8个碳原子的环烷基，R2代表氢，卤素或含有多至5个碳原子的全氟烷基，n代表整数0，1，2或3，R3代表含有3-7个碳原子的环烷基，R4代表羟基，或含有多至6个碳原子的直链或支链烷氧基，或者代表式-CO-NR7R8基团，式中R7和R8相同或不同，并代表氢，含有多至6个碳原子的直链或支链烷基或苯基，R5代表氢，卤素，硝基，羟基，三氟甲基，三氟甲氧基，各自含有多至6个碳原子的直链或支链烷基，烷氧基或烷氧羰基，氰基或羧基，L代表含有3-7个碳原子的环烷基，或者代表含有多至8个碳原子的直链或支链烷基，该烷基任选地被苯基取代，R6代表羟基或含有多至6个碳原子的直链或支链烷氧基，或者代表式-NR9SO2R10基团或下式基团
式中，R9代表氢或含有多至4个碳原子的直链或支链烷基，R10代表含有多至6个碳原子的直链或支链烷基或者代表任选地由含有多至6个碳原子的直链或支链烷基取代的苯基，R11代表氢，含有多至6个碳原子的直链或支链烷基或羟基保护基。
2.权利要求1的丙烯酰基咪唑衍生物及其盐，式中R1代表各自含有多至6个碳原子的直链或支链烷基或烯基，或者代表环丙基，环丁基，环戊基，环己基或环庚基，R2代表氢，氟，氯，溴或含有多至4个碳原子的全氟烷基，n代表整数0，1或2，R3代表环丙基，环丁基，环戊基，环己基或环庚基，R4代表羟基，含有多至4个碳原子的直链或支链烷氧基，或者代表式-CO-NR7R8基团，式中R7和R8相同或不同，并代表氢，含有多至4个碳原子的直链或支链烷基或苯基，R5代表氢，氟，氯，溴，三氟甲基，羧基或各自含有多至4个碳原子的直链或支链烷基，烷氧基或烷氧羰基，L代表环丙基，环丁基，环戊基，环己基或环庚基，或者代表含有多至6个碳原子的直链或支链烷基或苄基，R6代表羟基或含有多至4个碳原子的直链或支链烷氧基，或者代表式-NR9SO2R10基团或下式基团
式中R9代表氢，甲基或乙基，R10含有多至4个碳原子的直链或支链烷基或者是任选地由多至4个碳原子的直链或支链烷基取代的苯基，R11代表氢，含有多至4个碳原子的直链或支链烷基，乙酰基或苄基。
3.权利要求1的丙烯酰基咪唑衍生物及其盐，式中R1代表各自含有多至4个碳原子的直链或支链烷基或烯基，或者代表环丙基，环戊基或环己基，R2代表氢，氟，氯或含有多至2个碳原子的全氟烷基，n代表整数0或1，R3代表环戊基或环己基，R4代表羟基，甲氧基，乙氧基或叔丁氧基，R5代表氢，氟，氯，溴，三氟甲基，三氟甲氧基或甲基，L代表环戊基，环己基或环庚基，或代表含有多至4个碳原子的直链或支链烷基或苄基，R6代表羟基或含有多至4个碳原子的直链或支链烷氧基，或代表式-NR9SO2R10基团或下式基团
式中R9代表氢或甲基，R10代表甲基或对甲苯基，R11代表氢或含有多至3个碳原子的直链或支链烷基或苄基。
4.权利要求1的丙烯酰基-咪唑衍生物，式中式-CH(L)-CO-R4基团处于咪唑甲基的对位。
5.权利要求1的丙烯酰基咪唑衍生物用于治疗的用途。
6.制备权利要求1的丙烯酰基-咪唑衍生物的方法，其特征在于在惰性溶剂中，在碱存在下，通式(Ⅱ)醛与通式(Ⅲ)化合物反应，转化成通式(Ⅳ)羟基化合物，
式中，R1，R2，R5和L的定义如权利要求1中所述，R12代表C1-4烷氧基，式中R3和n的定义如权利要求1中所述，R13的定义如权利要求1中R4的定义，但不代表羟基，
式中R1，R2，R3，R5，R12，R13，n和L的定义如权利要求1中所述，然后，引入保护基保护游离羟基，在最后一步，在惰性溶剂中，在碱存在下进行消除反应，如有必要、分离E/Z异构体，如果制备酸(R4＝OH)，将酯水解，如果制备酰胺或磺酰胺，根据需要先将羧酸(R12＝OH)活化，然后按常规方法酰胺化或磺酰胺化，如果其中的R9不代表氢，则将官能团NH烷基化，如有必要，用常规方法，例如，还原，氧化，烷化或水解，将取代基R1和R2转化为其他基团，如有必要，分离立体异构体，欲制备盐，则与适宜的碱或酸反应。
7.含有至少一种权利要求1所述的丙烯酰基-咪唑衍生物的药物。
8.权利要求7的药物，用于治疗动脉高血压和动脉粥样硬化。
9.权利要求1的丙烯酰基-咪唑衍生物在生产药物中的用途。
10.权利要求9的用途，用于生产治疗动脉高血压和动脉粥样硬化的药物。
全文摘要
由适宜的咪唑醛与CH-酸性化合物反应，然后使中间体脱水，制得丙烯酰基-咪唑衍生物。该丙烯酰基-咪唑衍生物可作为药物的活性成分，用于治疗动脉高血压和动脉粥样硬化。
文档编号C07D233/64GK1082030SQ9310422
公开日1994年2月16日 申请日期1993年4月15日 优先权日1992年4月16日
发明者M·米勒-格里曼, J·德雷塞尔, P·费, R·汉科, W·胡布什, T·克雷默, U·E·米勒, M·博克, S·卡茨达, A·克诺尔, J·P·施塔什, S·沃尔费尔 申请人:拜尔公司