环氧琥珀酸衍生物的制作方法

专利名称：环氧琥珀酸衍生物的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种新的环氧琥珀酸衍生物，这种衍生物可抑制硫醇蛋白酶如组织蛋白酶L和B，并可作为骨科疾病如骨质疏松症的预防/治疗剂。
在骨组织中，骨吸收和骨形成过程不断进行，这种吸收与形成如达到动态平衡即可保证骨体内平衡;但是，当这种平衡向吸收一侧转移，就可能引起骨疾病如骨质疏松症。
近年来，业已报导了各种对骨疾病具有预防/治疗活性的环氧化合物(例如日本特开昭76-1987，欧州专利公开号269，311)。
在本说明书中，所采用的氨基酸、肽及其它成分的缩写是以IUPAC-IUB委员会以生物化学命名法所特指的缩写为基础的，或者是有关领域常用的缩写。当氨基酸中存在旋光异构体时，如无特别说明，则为L-构型。
目前，骨吸收抑制剂如雌激素和降钙素用于防止和治疗骨质疏松症。但是，这些药物并不能抑制由破骨细胞的溶酶体分泌的硫醇蛋白酶。同时，由于这些药物受给药主体的限制，以及在某些时候它们的功效是不确定的，因而这些治疗用药物还不能提供满意的效力。
考虑到上述问题，本发明人特别留意了硫醇蛋白酶尤其是组织蛋白酶L[H.Ka kegawa等人，FEBSLetters，321卷，247页(1993)]，业已表明这种组织蛋白酶L在骨吸收中起主要作用;本发明人还研究了微生物代谢物并相信，能选择性抑制这种组织蛋白酶L的药物将可用作骨疾病如骨质疏松症的预防/治疗剂。
经过深入研究，本发明人发现了用下述结构式表示的化合物属于气壳菌属微生物中的TAN-1756A，B，C和D;属于Tolypocladium菌属微生物中的TAN-1854A和B;属于木霉属微生物中的TAN-1803;属于曲霉属微生物中的TAN-1868。发明人还开发出了这些化合物的合成方法。本发明人以这些发现为基础对环氧琥珀酸衍生物作了进一步研究，从而得到了本发明。

[(S)表明所标记的碳原子为S-构型]本发明提供了(1)一种如下式的化合物或其盐 其中R1为羧基，该羧基可被酯化或酰胺化或未被酯化或酰胺化;R2为取代或未被取代的环基或为极性基团;n为0-6的整数;R3为氢或烃基，该烃基为取代或未被取代的;R4为(1)被氨基取代的烃基，该氨基可以是被保护或未被保护的，或(2)链烯基;R3和R4可与相邻的氮原子一起形成含至少两个杂原子的杂环基团;
(2)按照第(1)项的化合物，其中R1为可被酯化或未被酯化的羧基;
(3)按照第(1)项的化合物，其中R1为羧基;
(4)按照第(1)项的化合物，其中R2为取代或未被取代的环基;
(5)按照第(4)项的化合物，其中环基为芳基;
(6)按照第(5)项的化合物，其中芳基的C6-14的芳基;
(7)按照第(1)项的化合物，其中R3表示的烃基为烷基;
(8)按照第(1)项的化合物，其中R4为氨烷基;
(9)按照第(1)项的化合物，其中R3和R4与相邻的氮原子一起形成含至少两个杂原子的杂环基团;
(10)按照第(9)项的化合物，其中杂环基团为六元杂环基团;
(11)按照第(1)项的化合物，其中所说的化合物为N-[N-(2s，3s)-3-反-羧基环氧乙烷-2-羰基]-L-苯丙氨酰]-1，4-二氨基丁烷;
(12)按照第(1)项的化合物，其中所说的化合物为N-[N-(2s，3s)-3-反-乙氧羰基环氧乙烷-2-羰基]-L-苯丙氨酰]-1，4-二氨基丁烷;
(13)按照第(1)项的化合物，其中所说的化合物为N-[N-(2s，3s)-3-反-乙氧羰基环氧乙烷-2-羰基]-L-苯丙氨酰]-吗啉;
(14)按照第(1)项的化合物，其中所说的化合物为N-[N-(2s，3s)-3-反-羧基环氧乙烷-2-羰基]-L-苯丙氨酰]吗啉;
(15)按照第(1)项的化合物，其中所说的化合物为N-[N-(2s，3s)-3-反-乙氧羰基环氧乙烷-2-羰基]-L-酪氨酰]吗啉;
(16)按照第(1)项的化合物，其中所说的化合物为N-[N-(2s，3s)-3-反-羰基环氧乙烷-2-羰基]-L-酪氨酰]吗啉;
(17)按照第(1)项的化合物，其中所说的化合物为N-[N-(2s，3s)-3-反-乙氧羰基环氧乙烷-2-羰基]-3-(2-萘基)-L-丙氨酰]吗啉;
(18)按照第(1)项的化合物，其中所说的化合物为N-[N-(2s，3s)-3-反-羧基环氧乙烷-2-羰基]-3-(2-萘基)-L-丙氨酰]吗啉;
(19)一种如下式的化合物或其盐 其中R11为酯化或酰胺化或者未被酯化或酰胺化的羧基;R12为取代或未被取代的芳多环基;n′为0-6的整数;R13和R14可相同或不同，为氢或烷基;
(20)按照第(19)项的化合物，其中R11为酯化或未被酯化的羧基;
(21)按照第(19)项的化合物，其中芳族多环基为C8-12的二环芳基;
(22)按照第(19)项的化合物，其中所说的化合物为N-[N-(2s，3s)-3-反-乙氧羰基环氧乙烷-2-羰基]-3-(2-萘基)-L-丙氨酰]-1-氨基-3-甲基丁烷;
(23)按照第(19)项的化合物，其中所说的化合物为N-[N-(2s，3s)-3-反-羧基环氧乙烷-2-羰基]-3-(2-萘基)-L-丙氨酰]-1-氨基-3-甲基丁烷;
(24)一种如下式的化合物或其盐 其中R21为酯化或酰胺化或未被酯化或酰胺化的羧基;R22为烷基;R23和R24可相同或不同，为氨基取代的烷基，该氨基可以是被保护的或未被保护的;
(25)按照第(24)项的化合物，其中R21为羧基，(26)按照第(24)项的化合物，其中R22为C3-5的烷基;
(27)按照第(24)项的化合物，其中R23和R24均为氨烷基;
(28)一种用于抑制硫醇蛋白酶的组合物，其包含上述第(1)、(19)或(24)项的化合物或它们的盐;
(29)一种用于预防或治疗骨疾病的组合物，其包含上述第(1)、(19)或(24)项的化合物或它们的盐;
(30)按照第(29)项的组合物，其中骨疾病为骨质疏松症。
就上述通式(Ⅰ)而言，R1所代表的酯化或未被酯化的羧基的实例为药物可接受的那些或在体内会变成药物可接受的那些。优选的酯化的羧基用式COOR5表示，其中R5代表，例如(1)C1-6烷基(如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、异戊基、仲戊基、新戊基、叔戊基、己基等)，该烷基可被1-3个取代基取代或未被取代，取代基选自(a)硝基，(b)卤素(如溴、氯、氟等)和(c)C2-6的烷酰氧基(alkanoyloxy)(如，乙酰氧基、丙酰氧基、异丙酰氧基、丁酰氧基、异丁酰氧基、戊酰氧基、异戊酰氧基、新戊酰氧基、己酰氧基等)，(2)C6-14芳基(如苯基、萘基等)，该芳基可被1-3个取代基取代或未被取代，取代基选自(a)硝基，(b)卤素(溴、氯、氟等)和(c)C1-4烷氧基(如甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基等)和(3)C7-12的芳烷基(如苄基、苯乙基等)，该芳烷基可被1-3个取代基取代或未被取代，取代基选自(a)硝基，(b)卤素(如溴、氯、氟等)和(c)C1-4烷氧基(如甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基等)。
R5的优选实例包括C1-6烷基(如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、异戊基、仲戊基、新戊基、叔戊基、己基等)，该烷基可被1-3个取代基取代或未被取代，取代基选自(a)硝基，(b)卤素(如溴、氯、氟等)和(c)C2-6烷酰氧基(如乙酰氧基、丙酰氧基、异丙酰氧基、丁酰氧基、异丁酰氧基、戊酰氧基、异戊酰氧基、新戊酰氧基、己酰氧基等)。
R5更优选的实例包括C1-6的烷基(如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、异戊基、仲戊基、新戊基、叔戊基、己基等)。
就上述通式(Ⅰ)而言，R1所代表的经酰胺化或未被酰胺化的羧基的实例为药物可接受的那些或在体内能变成药物可接受的那些。优选的酰胺化的羧基用式CONHR6表示，其中R6代表，例如(1)氢，(2)C1-6烷基(如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、异戊基、仲戊基、新戊基、叔戊基、己基等)，该烷基可被1-3个取代基取代或未被取代，取代基选自(a)硝基，(b)卤素(如溴、氯、氟等)，(3)C6-14的芳基(如苯基、萘基)，该芳基可被1-3个取代基取代或未被取代，取代基选自(a)硝基，(b)卤素(如溴、氯、氟等)和(c)C1-4烷氧基(如甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基)和(4)C7-12的芳烷基(如苄基、苯乙基等)，该芳烷基可被1-3个取代基取代或未被取代，取代基选自(a)硝基，(b)卤素(如溴、氯、氟等)和(c)C1-4烷氧基(如甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基等)。
R6的优选实例包括C1-6烷基(如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、异戊基、仲戊基、新戊基、叔戊基、己基等)，该烷基可被1-3个取代基取代或未被取代，取代基选自(a)硝基和(b)卤素(如溴、氯、氟等)。
R6更优选的实例包括C1-6烷基(如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、异戊基、仲戊基、新戊基、叔戊基、己基等)。
就上述通式(Ⅰ)而言，R1优选为一个被酯化或未被酯化的羧基。更优选的是，R1为被C1-6烷基(如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、异戊基、仲戊基、新戊基、叔戊基、己基等)酯化或未被酯化的羧基。
就上述通式(Ⅰ)而言，可被取代或未被取代的R2表示的环基的实例为(1)C3-8环烷基(如环丙基、环丁基、环戊基、环己基)，(2)C3-8的环烯基(如环丙烯基、1-环戊烯基、2-环戊烯基、3-环戊烯基、1-环己烯基、2-环己烯基、3-环己烯基)，(3)C6-14芳基(如苯基、1-或2-萘基、1-，2-或9-蒽基、1-，2-，3-，4-或9-菲基、1-，2-，4-，5-或6-薁基，和(4)除了碳原子外包含选自氧、硫、氮等杂原子的1-4个杂原子的5元或6元杂环基或其缩合杂环基(如2-或3-噻吩基、2-或3-呋喃基、2-或3-吡咯基、3-，4-或5-吡唑基、2-，4-或5-噻唑基、3-，4-或5-异噻唑基、2-，4-或5-噁唑基、3-，4-或5-异噁唑基、2-，4-或5-咪唑基、1，2，3-或1，2，4-三唑基、1H或2H-四唑基、2-，3-或4-吡啶基、2-，4-或5-嘧啶基、3-或4-哒嗪基、喹啉基、异喹啉基、吲哚基)。
这些基团中，优选C8-14芳基(如苯基，1-或2-萘基、1-，2-或9-蒽基、1-，2-，3-，4-或9-菲基、1-，2-，4-，5-或6-薁基)，以及除碳原子外包含选自氧、硫、氮等杂原子的1-4个杂原子的5元或6元杂环基团或它们的缩合杂环基团(如，2-或3-噻吩基、2-或3-呋喃基、2-或3-吡咯基、2-或3-吲哚基、2-，4-或5-咪唑基)。更为优选的是C6-14的芳基(如苯基，1-或2-萘基、1-，2-或9-蒽基、1-，2-，3-，4-或9-菲基、1-，2-，4-，5-或6-薁基)，最优选的是C6-10芳基(如苯基、1-或2-萘基)。
上述环基可以在其任一可能的位置上带有1-5个取代基或无取代基，取代基选自，例如(1)C1-15烷基(如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、异戊基、仲戊基、新戊基、叔戊基、己基、庚基、辛基、壬基、癸基、十一烷基、十二烷基、十三烷基、十四烷基、十五烷基等)，该烷基可被1-3个取代基取代或未被取代，取代基选自(a)硝基，(b)卤素(溴、氯、氟等)，(2)C3-10环烷基(如环丙基、环丁基、环戊基、环己基等)，(3)C2-10链烯基(如乙烯基、烯丙基、2-甲基烯丙基、2-丁烯基、3-丁烯基、3-辛烯基等)，该链烯基可被1-3个取代基取代或未被取代，取代基选自(a)硝基，(b)卤素(如溴、氯、氟等)，(4)C2-10链炔基(如乙炔基、2-丙炔基、3-己炔基等)，(5)C3-10的环烯基(如环丙烯基、环戊烯基、环己烯基等)，(6)C6-10芳基(如苯基、萘基等)，(7)C7-12芳烷基(如苄基、苯乙基等)，(8)硝基，(9)羟基，(10)巯基，(11)氧代基团，(12)硫代基团，(13)氰基，(14)氨基甲酰基，(15)羧基，(16)C2-5烷氧羰基(如甲氧羰基、乙氧羰基等)，(17)C7-11的芳氧羰基(如苯氧羰基等)，(18)C8-13芳烷氧羰基(如苄氧羰基、苯乙氧羰基等)，(19)磺基，(20)卤素(如氟、氯、溴或碘)，(21)C1-4烷氧基(如甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基等)，(22)C6-10芳氧基(如苯氧基等)，(23)C7-12芳烷氧基(如苄氧基、苯乙氧基等)，(24)C1-6烷酰氧基(如甲酰氧基、乙酰氧基、丙酰氧基、异丙酰氧基、丁酰氧基、异丁酰氧基、戊酰氧基、异戊酰氧基、新戊酰氧基、己酰氧基等)，(25)C7-11的芳酰氧基(如苯甲酰氧基、对甲苯甲酰氧基、1-萘甲酰氧基、2-萘甲酰氧基等)，(26)C1-4烷硫基(如甲硫基、乙硫基、丙硫基、异丙硫基、丁硫基、叔丁硫基等)，(27)C6-10芳硫基(如苯硫基、萘硫基等)，(28)C1-6烷亚磺酰基(如甲亚磺酰基、乙亚磺酰基、丙亚磺酰基)，(29)C6-10芳亚磺酰基(如苯亚磺酰基等)，(30)C1-6烷磺酰基(如甲磺酰基、乙磺酰基、丙磺酰基等)，(31)C6-10芳磺酰基(如苯磺酰基、甲苯磺酰基等)，(32)氨基，(33)C1-6烷酰氨基(如乙酰氨基、丙酰氨基等)，(34)一或二C1-4烷氨基(如甲氨基、乙氨基、丙氨基、异丙氨基、丁氨基、二甲氨基、二乙氨基等)，(35)C3-8环烷氨基(如环丙氨基、环丁氨基、环戊氨基、环己氨基等)，(36)C6-10芳氨基(苯胺基等)，(37)C7-11芳羰氨基(如苯甲酰氨基，对甲苯甲酰氨基、1-萘甲酰氨基、2-萘甲酰氨基等)，(38)C2-5烷氧羰氨基(如甲氧羰氨基、乙氧羰氨基、叔丁氧羰氨基等)，(39)C8-13芳烷氧羰氨基(如苯甲氧羰氨基、苯乙氧羰氨基等)，(40)C1-6烷磺酰氨基(如甲磺酰氨基、乙磺酰氨基、丙磺酰氨基等)，(41)C6-10芳磺酰氨基(如苯磺酰氨基、甲苯磺酰氨基等)，(42)一或二C1-4烷氨甲酰基(如甲氨甲酰基、乙氨甲酰基、丙氨甲酰基、异丙氨甲酰基、丁氨甲酰基、二甲氨甲酰基、二乙氨甲酰基等)，(43)C1-6烷酰基(如甲酰基、乙酰基、丙酰基、异丙酰基、丁酰基、异丁酰基、戊酰基、异戊酰基、新戊酰基、己酰基等)，(44)C7-11芳羰基(如苯甲酰基、对甲苯甲酰基、1-萘甲酰基、2-萘甲酰基等)，(45)C8-13芳烷基羰基(如苄基羰基、苯乙基羰基等)和(46)除了碳原子外还包含选自氧、硫、氮等杂原子的1-4个杂原子的5元或6元杂环基团或它们的缩合杂环基团(如2-或3-噻吩基、2-或3-呋喃基、2-或3-吡咯基、3-，4-或5-吡唑基、2-，4-或5-噻唑基、3-，4-或5-异噻唑基、2-，4-或5-噁唑基、3-，4-或5-异噁唑基、2-，4-或5-咪唑基、1，2，3-或1，2，4-三唑基、1H或2H-四唑基、2-，3-或4-吡啶基、2-，4-或5-嘧啶基、3-或4-哒嗪基、喹啉基、异喹啉基、吲哚基)。
就通式(Ⅰ)而言，由R2表示的极性基团的实例为(1)硝基，(2)羟基，(3)氧代基团，(4)硫代基团，(5)氰基，(6)氨甲酰基，(7)羧基，(8)C2-5烷氧羰基(如甲氧羰基，乙氧羰基等)，(9)C8-13芳烷氧羰基(如苄氧羰基，苯乙氧羰基等)，(10)C7-11芳氧羰基(如苯氧羰基等)，(11)磺基，(12)巯基，(13)C1-4烷氧基(如甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基等)，(14)C6-10芳氧基(如苯氧基等)，(15)C7-12芳烷氧基(如苄氧基、苯乙氧基等)，(16)C1-6烷酰氧基(如甲酰氧基、乙酰氧基、丙酰氧基、异丙酰氧基、丁酰氧基、异丁酰氧基、戊酰氧基、异戊酰氧基、新戊酰氧基、己酰氧基等)，(17)C7-11芳羰氧基(如苯甲酰氧基、对甲苯甲酰氧基、1-萘甲酰氧基、2-萘甲酰氧基等)，(18)C1-4烷硫基(如甲硫基、乙硫基、丙硫基、异丙硫基、丁硫基、叔丁硫基等)，(19)C6-10芳硫基(如苯硫基、萘硫基等)，(20)C7-19芳烷硫基(如苄硫基、三苯甲硫基等)(21)C1-6烷亚磺酰基(如甲亚磺酰基、乙亚磺酰基、丙亚磺酰基)，(22)C6-10芳亚磺酰基(如苯亚磺酰基等)，(23)C1-6烷磺酰基(如甲磺酰基、乙磺酰基、丙磺酰基等)，该烷磺酰基可被1-3个卤原子取代或未被取代(卤原子如氟、氯、碘等)，(24)C6-10芳磺酰基(如苯磺酰基、甲苯磺酰基等)，(25)氨基，(26)C1-8烷酰氨基(如乙酰氨基、丙酰氨基等)，(27)一或二-C1-4烷氨基(如甲氨基、乙氨基、丙氨基、异丙氨基、丁氨基、二甲氨基、二乙氨基等)，(28)C7-11芳羰氨基(如苯甲酰氨基，对甲苯甲酰氨基、1-萘甲酰氨基、2-萘甲酰氨基等)，(29)C2-5烷氧羰氨基(如甲氧羰氨基、乙氧羰氨基、叔丁氧羰氨基等)，(30)C8-13芳烷氧羰氨基(如苄氧羰氨基、苯乙氧羰氨基等)，(31)C1-6烷磺酰氨基(如甲磺酰氨基、乙磺酰氨基等)，(32)C6-10芳磺酰氨基(如苯磺酰氨基、甲苯磺酰氨基等)，(33)C1-6烷酰基(如甲酰基、乙酰基、丙酰基、异丙酰基、丁酰基、异丁酰基、戊酰基、异戊酰基、新戊酰基、己酰基等)，(34)C8-13芳烷羰基(如苯甲羰基、苯乙羰基等)，(35)C7-11芳羰基(如苯甲酰基、对甲苯甲酰基、1-萘甲酰基、2-萘甲酰基等)，(36)一或二-C1-4烷基氨甲酰基(如甲氨甲酰基、乙氨甲酰基、丙氨甲酰基、异丙氨甲酰基、丁氨甲酰基、二甲氨甲酰基、二乙氨甲酰基等)，(37)膦酰基，(38)一或二-C1-4烷基膦酰基(如甲基膦酰基、乙基膦酰基、丙基膦酰基、异丙基膦酰基、丁基膦酰基、二甲基膦酰基、二乙基膦酰基等)，(39)胍基，可被硝基取代或未被取代，(40)脒基，(41)一或二-C1-4-烷基氨磺酰基(如甲氨磺酰基、乙氨磺酰基、丙氨磺酰基、异丙氨磺酰基、丁氨磺酰基、二甲氨磺酰基、二乙氨磺酰基等)等。
上述基团中优选的是(1)羟基，(2)氨甲酰基，(3)羧基，(4)C2-15烷氧羰基(如甲氧羰基、乙氧羰基等)，(5)C8-13芳烷氧羰基(如苄氧羰基、苯乙氧羰基等)，(6)C7-11芳氧羰基(如苯氧羰基等)，(7)C1-4烷氧基(如甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基等)，(8)C8-10芳氧基(如苯氧基等)，(9)C7-12芳烷氧基(如苄氧基、苯乙氧基等)，(10)C1-6烷酰氧基(如甲酰氧基、乙酰氧基、丙酰氧基、异丙酰氧基、丁酰氧基、异丁酰氧基、戊酰氧基、异戊酰氧基、新戊酰氧基、己酰氧基等)，(11)C7-11芳羰氧基(如苯甲酰氧基，对甲苯甲酰氧基、1-萘甲酰氧基、2-萘甲酰氧基)，(12)氨基，(13)C1-6烷酰氨基(如乙酰氨基、丙酰氨基等)，(14)一或二-C1-4烷氨基(如甲氨基、乙氨基、丙氨基、异丙氨基、丁氨基、二甲氨基、二乙氨基等)，(15)C7-11芳羰氨基(如苯甲酰氨基、对甲苯甲酰氨基、1-萘甲酰氨基、2-萘甲酰氨基等)，(16)C2-5烷氧羰氨基(如甲氧羰氨基、乙氧羰氨基、叔丁氧羰氨基等)，(17)C8-13芳烷氧羰氨基(如苄氧羰氨基、苯乙氧羰氨基等)，(18)C1-6烷磺酰氨基(如甲磺酰氨基，乙磺酰氨基等)，(19)C6-10芳磺酰氨基(如苯磺酰氨基、甲苯磺酰氨基)等。
就通式(Ⅰ)而言，R2优选被取代或未被取代的环基。更优选的是，R2为被取代或未被取代的C6-10芳基(如苯基、1-或2-萘基)。
就上述通式(Ⅰ)而言，由R3表示的可被取代或未被取代的烃基的实例为C1-15烷基(如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、己基、庚基、辛基、壬基、癸基、十一烷基、十二烷基、十三烷基、十四烷基、十五烷基)，C3-8环烷基(如环丙基、环丁基、环戊基、环己基)，C2-10链烯基(如乙烯基、烯丙基、2-甲基烯丙基、2-丁烯基、3-丁烯基、3-辛烯基)，C2-10链炔基(如乙炔基、2-丙炔基、3-己炔基)，C3-10环烯基(如环丙烯基、环戊烯基、环己烯基)，C6-14芳基(如苯基、萘基)，C7-16芳烷基(如苄基、苯乙基)。
上述基团中，优选C1-15烷基(如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、己基、庚基、辛基、壬基、癸基、十一烷基、十二烷基、十三烷基、十四烷基、十五烷基)。
上述烃基可在其任一可能的位置上含有1-5个取代基，该取代基选自例如，(1)硝基，(2)羟基，(3)氧代基，(4)硫代基，(5)氰基，(6)氨甲酰基，(7)羧基，(8)C2-5烷氧羰基(如甲氧羰基，乙氧羰基等)，(9)C8-13芳烷氧羰基(如苄氧羰基，苯乙氧羰基等)，(10)C7-11芳氧羰基(如苯氧羰基等)，(11)磺基，(12)卤素(如氟、氯、溴、碘等)，(13)C1-4烷氧基(如甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基等)，(14)C6-10芳氧基(如苯氧基)，(15)卤代苯氧基(如邻、间或对氯苯氧基、邻、间或对溴苯氧基等)，(16)C7-12芳烷氧基(如苄氧基、苯乙氧基等)，(17)C1-6烷酰氧基(如甲酰氧基、乙酰氧基、丙酰氧基、异丙酰基、丁酰氧基、异丁酰氧基、戊酰氧基、异戊酰氧基、新戊酰氧基、己酰氧基等)，(18)C7-11芳羰氧基(如苯甲酰氧基、对甲苯甲酰氧基、1-萘甲酰氧基、2-萘甲酰氧基等)，(19)C1-4烷硫基(如甲硫基、乙硫基、丙硫基、异丙硫基、丁硫基、叔丁硫基等)，(20)C6-10芳硫基(如苯硫基、萘硫基等)，(21)C1-6烷亚磺酰基(如甲亚磺酰基、乙亚磺酰基、丙亚磺酰基等)，(22)C6-10芳亚磺酰基(如苯亚磺酰基等)，(23)C1-6烷磺酰基(如甲磺酰基、乙磺酰基、丙磺酰基等)，(24)C6-10芳磺酰基(如苯磺酰基、甲苯磺酰基)，(25)氨基，(26)烷酰氨基(如乙酰氨基、丙酰氨基等)，(27)一或二-C1-4烷氨基(如甲氨基、乙氨基、丙氨基、异丙氨基、丁氨基、二甲氨基、二乙氨基等)，(28)C7-11芳羰氨基(如苯甲酰氨基、对甲苯甲酰氨基、1-萘甲酰氨基、2-萘甲酰氨基等)，(29)C1-5烷氧羰氨基(如甲氧羰氨基、乙氧羰氨基、叔丁氧羰氨基等)，(30)C8-13芳烷氧羰氨基(如苄氧羰氨基、苯乙氧羰氨基等)，(31)C1-6烷磺酰氨基(如甲磺酰氨基、乙磺酰氨基等)，(32)C6-10芳磺酰氨基(如苯磺酰氨基、甲苯磺酰氨基)，(33)C1-6烷酰基(如甲酰基、乙酰基、丙酰基、异丙酰基、丁酰基、异丁酰基、戊酰基、异戊酰基、新戊酰基、己酰基等)，(34)C8-13芳烷羰基(如苄羰基、苯乙羰基等)，(35)C7-11芳羰基(如苯甲酰基、对甲苯甲酰基、1-萘甲酰基、2-萘甲酰基等)，(36)一或二-C1-4烷基氨甲酰基(如甲氨甲酰基、乙氨甲酰基、丙氨甲酰基、异丙氨甲酰基、丁氨甲酰基、二甲氨甲酰基、二乙氨甲酰基等)，(37)膦酰基，(38)一或二-C1-4烷基膦酰基(如甲基膦酰基、乙基膦酰基、丙基膦酰基、异丙基膦酰基、丁基膦酰基、二甲基膦酰基、二乙基膦酰基等)，(39)胍基，可被硝基取代或未被取代，(40)脒基，(41)5元或6元杂环基，其包含除碳原子外选自氧、硫、氮的1-4个杂原子，或其缩合杂环基团(如2-或3-噻吩基、2-或3-呋喃基、2-或3-吡咯基、3-，4-或5-吡唑基、2-，4-或5-噻唑基、3-，4-或5-异噻唑基、2-，4-或5-噁唑基、3-，4-或5-异噁唑基、2-，4-或5-咪唑基、1，2，3-或1，2，4-三唑基、1H或2H-四唑基、2-，3-或4-吡啶基、2-，4-或5-嘧啶基、3-或4-哒嗪基、喹啉基、异喹啉基、吲哚基等)，该杂环基可被1-4个取代基取代或不被取代，取代基选自(a)卤素(如溴、氯、氟等)，(b)C1-4烷基(如甲基、乙基、丙基、异丙基等)和(c)卤代苯氧基(如邻、间或对氯苯氧基，邻、间或对溴苯氧基等)，(42)C1-10卤代烷基(如二氟甲基、三氟甲基、三氟乙基、三氯乙基等)，当烃基为环烷基、环烯基、芳基或芳烷基时，可进一步用1-4个C1-4的烷基(如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基等取代，或不取代。
就通式(Ⅰ)而言，R3优选为氢。
就通式(Ⅰ)而言，可被一种未被保护或被保护氨基取代的用R4表示的烃基中的烃基基本上与R3表示的可被取代或未被取代的烃基相同。优选的烃其实例为C1-15烷基(如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、异戊基、新戊基、己基、庚基、辛基、壬基、癸基、十一烷基、十二烷基、十三烷基、十四烷基、十五烷基等)。
就通式(Ⅰ)而言，在用被保护或未被保护氨基取代的R4表示的烃基中氨基保护基团的实例是(1)甲酰基，(2)C2-7烷酰基(如乙酰基、丙酰基、异丙酰基、丁酰基、戊酰基、异戊酰基、新戊酰基、己酰基等)，烷酰基可具有1-3个取代基或无取代基，取代基选自(a)卤素原子(如氯、溴、氟等)，(b)C2-7烷酰基(如乙酰基、丙酰基、异丙酰基、丁酰基、异丁酰基、戊酰基、异戊酰基、新戊酰基、己酰基等)和(c)硝基，(3)C7-11芳羰基(如苯甲酰基、对甲苯甲酰基、1-萘甲酰基、2-萘甲酰基等)，该芳羰基可具有1-3个取代基或无取代基，取代基选自(a)卤素原子(如氯、溴、氟等)，(b)C2-7烷酰基(如乙酰基、丙酰基、异丙酰基、丁酰基、异丁酰基、戊酰基、异戊酰基、新戊酰基、己酰基等)和(c)硝基，(4)C2-7烷氧羰基(如甲氧羰基、乙氧羰基、丙氧羰基、异丙氧羰基、叔丁氧羰基等)，该烷氧羰基可具有1-3个取代基或无取代基，取代基选自(a)卤素原子(如氯、溴、氟等)，(b)C2-7烷酰基(如乙酰基、丙酰基、异丙酰基、丁酰基、异丁酰基、戊酰基、异戊酰基、新戊酰基、己酰基等)和(c)硝基，(5)C7-11芳氧羰基(如苯氧羰基等)，该芳氧羰基可具有1-3个取代基或无取代基，取代基选自(a)卤素原子(如氯、溴、氟等)，(b)C2-7烷酰基(如乙酰基、丙酰基、异丙酰基、丁酰基、异丁酰基、戊酰基、异戊酰基、新戊酰基、己酰基等)和(c)硝基，(6)C8-13芳烷基羰基(如苄基羰基、苯乙基羰基等)，该芳烷基羰基可具有1-3个取代基或无取代基，取代基选自(a)卤素原子(如氯、溴、氟等)，(b)C2-7烷酰基(如乙酰基、丙酰基、异丙酰基、丁酰基、异丁酰基、戊酰基、异戊酰基、新戊酰基、己酰基等)和(c)硝基，(7)C8-13芳烷氧羰基(如苄氧羰基、苯乙氧羰基等)，该芳烷氧羰基可具有1-3个取代基或无取代基，取代基选自(a)卤素原子(如氯、溴、氟等)，(b)C2-7烷酰基(如乙酰基、丙酰基、异丙酰基、丁酰基、异丁酰基、戊酰基、异戊酰基、新戊酰基、己酰基等)和(c)硝基，(8)三苯甲基，其可具有1-3个取代基或无取代基，取代基选自(a)卤素原子(如氯、溴、氟等)，(b)C2-7烷酰基(如乙酰基、丙酰基、异丙酰基、丁酰基、异丁酰基、戊酰基、异戊酰基、新戊酰基、己酰基等)和(c)硝基，(9)邻苯二甲酰基，其可具有1-3个取代基或无取代基，取代基选自(a)卤素原子(如氯、溴、氟等)，(b)C2-7烷酰基(如乙酰基、丙酰基、异丙酰基、丁酰基、异丁酰基、戊酰基、异戊酰基、新戊酰基、己酰基等)和(c)硝基，(10)C6-10芳磺酰基(如苯磺酰基、甲苯磺酰基)其可具有1-3个取代基或无取代基，取代基选自(a)卤素原子(如氯、溴、氟等)，(b)C2-7烷酰基(如乙酰基、丙酰基、异丙酰基、丁酰基、异丁酰基、戊酰基、异戊酰基、新戊酰基、己酰基等)和(c)硝基，(11)C1-6烷磺酰基(如甲磺酰基、乙磺酰基、丙磺酰基)，可具有1-3个取代基或无取代基，取代基选自(a)卤素原子(如氯、溴、氟等)，(b)C2-7烷酰基(如乙酰基、丙酰基、异丙酰基、丁酰基、异丁酰基、戊酰基、异戊酰基、新戊酰基、己酰基等)和(c)硝基，(12)C1-6烷基(如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、乙基)，该烷基可具有1-3个取代基或无取代基，取代基选自(a)卤素原子(如氯、溴、氟等)，(b)C2-7烷酰基(如乙酰基、丙酰基、异丙酰基、丁酰基、异丁酰基、戊酰基、异戊酰基、新戊酰基、己酰基等)和(c)硝基，(13)C1-6氨烷基(如氨甲基、氨乙基、3-氨基丙基、4-氨基丁基、5-氨基戊基、6-氨基己基)，该氨烷基可具有1-3个取代基或无取代基，取代基选自(a)卤素原子(如氯、溴、氟等)，(b)C2-7烷酰基(如乙酰基、丙酰基、异丙酰基、丁酰基、异丁酰基、戊酰基、异戊酰基、新戊酰基、己酰基等)和(c)硝基，(14)C7-12芳烷基(如苄基、苯乙基)，该芳烷基可具有1-3个取代基或无取代基，取代基选自(a)卤素原子(如氯、溴、氟等)，(b)C2-7烷酰基(如乙酰基、丙酰基、异丙酰基、丁酰基、异丁酰基、戊酰基、异戊酰基、新戊酰基、己酰基等)和(c)硝基。
就式(Ⅰ)而言，R4所表示的链烯基的实例为C2-10链烯基(如乙烯基、烯丙基、1-丙烯基、1-，2-或3-丁烯基、2-甲基烯丙基、1-，2-，3-或4-戊烯基、2-或3-甲基-2-丁烯基、1-，2-，3-，4-或5-己烯基，1-，2-，3-，4-，5-或6-庚烯基、1-，2-，3-，4-，5-，6-或7-辛烯基、1-，2-，3-，4-，5-，6-，7-或8-壬烯基和1-，2-，3-，4-，5-，6-，7-，8-或9-癸烯基。
就通式(Ⅰ)而言，R4优选被保护或未被保护氨基取代的烃基。更优选的是R4为被保护或未被保护氨基取代的C1-15烷基(如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、异戊基、新戊基、己基、庚基、辛基、壬基、癸基、十一烷基、十二烷基、十三烷基、十四烷基、十五烷基等)。
就通式(Ⅰ)而言，由R3或R4与相邻的氮原子一起形成的含至少2个杂原子的杂环基团的实例是5-8元杂环基，其除了氮原子外包含选自氧、硫、氮的1-4个杂原子;或者是上述杂环的缩合杂环基团。具体说来，这种杂环基团包括5元杂环基，包含有除氮原子外选自氧、硫、氮的1或3个杂原子，如1，3-二氮杂环戊-1-基、1-氮杂-3-氧杂环戊-1-基、1-氮杂-3-硫杂环戊-1-基、吡唑基、吡唑烷基、3-吡唑啉-2-基、2-咪唑啉-1-基、1H或2H-1，2，3-三唑基、1H或4H-1，2，4-三唑基和1H或2H-四唑基;6元杂环基，包含除氮原子外选自氧、硫、氮的1或2个杂原子，如硫代吗啉代基、吗啉代哌嗪基、4H-1，4-噁嗪基和4H-1，4-噻嗪基，以及二环或三环稠合杂环基，包含除了氮原子外选自氧、硫、氮的1或2个杂原子，如1H-吲唑-1-基、嘌呤-1-基、吩噻嗪-10-基、吩噁嗪-10-基。
上述基团中，优选的是除氮原子外包含1或2个选自氧、硫、氮的杂原子的5元杂环基，如1，3-二氮杂环戊-1-基、1-氮杂-3-氧杂环戊-1-基、1-氮杂-3-硫杂环戊-1-基、吡唑基、吡唑烷基、3-吡唑啉-2-基、2-咪唑啉-1-基、1H或2H-1，2，3-三唑基、1H或2H-1，2，4-三唑基和1H或2H-四唑基;除氮原子外包含1或2个选自氧、硫、氮的杂原子的6元杂环基、如硫代吗啉代基、吗啉代哌嗪基、4H-1，4-噁嗪基和4H-1，4-噻嗪基。
最优选的是除氮原子外包含1或2个选自氧、硫、氮的杂原子的6元杂环基、如硫代吗啉代基、吗啉代基、哌嗪基、4H-1，4-噁嗪基和4H-1，4-噻嗪基。
这种杂环基可在其可能的任何位置上具有1-5个取代基，取代基选自例如，(1)C1-6烷基(如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、异戊基、仲戊基、新戊基、叔戊基、己基)，(2)C2-10链烯基(如乙烯基、1-甲基乙烯基、1-丙烯基、烯丙基、2-甲基烯丙基、2-丁烯基、3-丁烯基、3-辛烯基)，(3)C2-10链炔基(如乙炔基、1-丙炔基、炔丙基、3-己炔基)，(4)C3-8环烷基(如环丙基、环丁基、环戊基、环己基)，(5)C3-10环烯基(如环丙烯基、环戊烯基、环己烯基)，(6)C7-12芳烷基(如苄基、α-甲基苄基、苯乙基)，(7)C8-10芳基(如苯基、萘基)，(8)C1-6烷氧基(如甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基)，(9)C6-10芳氧基(如苯氧基)，(10)C7-12芳烷氧基(如苄氧基、α-甲基苄氧基、苯乙氧基)，(11)C1-6烷酰基(如甲酰基、乙酰基、丙酰基、异丙酰基、丁酰基、异丁酰基、戊酰基、异戊酰基、新戊酰基、己酰基)，(12)C7-11芳基羰基(如苯甲酰基、对甲苯甲酰基、1-萘甲酰基、2-萘甲酰基)，(13)C8-13芳烷基羰基(如苄基羰基、α-甲基苄基羰基、苯乙基羰基)，(14)C1-6烷酰氧基(如甲酰氧基、乙酰氧基、丙酰氧基、异丙酰氧基、丁酰氧基、异丁酰氧基、戊酰氧基、异戊酰氧基、新戊酰氧基、己酰氧基)，(15)C7-11芳基羰氧基(如苯甲酰氧基、对甲苯甲酰氧基、1-萘甲酰氧基、2-萘甲酰氧基)，(16)羧基，(17)C2-7烷氧羰基(如甲氧羰基、乙氧羰基、丙氧羰基、异丙氧羰基、丁氧羰基、异丁氧羰基、叔丁氧羰基)，(18)C8-13芳烷氧羰基(如苄氧羰基，苯乙氧羰基)，(19)C7-11芳氧羰基(如苯氧羰基)，(20)氨甲酰基，(21)N-一-C1-4烷基氨甲酰基(如N-甲基氨甲酰基、N-乙基氨甲酰基、N-丙基氨甲酰基、N-异丙基氨甲酰基、N-丁基氨甲酰基)，(22)N，N-二-C1-4烷基氨甲酰基(如N，N-二甲基氨甲酰基、N，N-二乙基氨甲酰基，N，N-二丙基氨甲酰基、N，N-二丁基氨甲酰基)，(23)环氨基羰基(如1-氮杂环丙基羰基、1-氮杂环丁基羰基、1-吡咯烷基羰基、1-哌啶基羰基、N-甲基哌嗪基羰基、吗啉代羰基)，(24)卤素原子(如氟、氯、溴、碘)，(25)一，二或三卤代-C1-4烷基(如氯甲基、二氯甲基、三氟甲基、三氟乙基)，(26)氧代基团，(27)硫代基团，(28)脒基，(29)亚氨基，(30)氨基，(31)一-C1-4烷氨基(如甲氨基、乙氨基、丙氨基、异丙氨基、丁氨基)，(32)二-C1-4烷氨基(如二甲氨基、二乙氨基、二丙氨基、二异丙氨基、二丁氨基)，(33)3元-6元环氨基，除了碳原子和一个氮原子外，包含或不包含1-3个选自氧原子、硫原子、氮原子的杂原子(如氮杂环丙基、氮杂环丁基、吡咯烷基、吡咯啉基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、咪唑烷基、哌啶子基、吗啉代基、二氢吡啶基、吡啶基、N-甲基哌嗪基、N-乙基哌嗪基)，(34)C1-6烷酰氨基(如甲酰氨基、乙酰氨基、三氟乙酰氨基、丙酰氨基、丁酰氨基、异丁酰氨基)，(35)C7-11芳基羰基氨基(如苯甲酰氨基、对甲苯甲酰氨基、1-萘甲酰氨基、2-萘甲酰氨基)，(36)C2-7烷氧羰基氨基(如甲氧羰基氨基、乙氧羰基氨基、叔丁氧羰基氨基)，(37)C8-13芳烷氧羰基氨基(如苄氧羰基氨基、苯乙氧羰基氨基)，(38)C1-6烷磺酰氨基(如甲磺酰氨基、乙磺酰氨基、丙磺酰氨基)，(39)C6-12芳磺酰氨基(如苯磺酰氨基、甲苯磺酰氨基)，(40)氨甲酰氨基，(41)N-C1-4烷基氨甲酰氨基(如N-甲基氨甲酰氨基、N-乙基氨甲酰氨基、N-丙基氨甲酰氨基、N-异丙基氨甲酰氨基、N-丁基氨甲酰氨基)(42)N，N-二-C1-4烷基氨甲酰氨基(N，N-二甲基氨甲酰氨基、N，N-二乙基氨甲酰氨基、N，N-二丙基氨甲酰氨基、N，N-二丁基氨甲酰氨基)，(43)C1-3亚烷二氧基(如亚甲二氧基、亚乙二氧基)，(44)-B(OH)2，(45)羟基，(46)环氧基(-O-)，(47)硝基，(48)氰基，(49)巯基，(50)磺基，(51)亚磺基，(52)膦酰基，(53)氨磺酰基，(54)C1-6-烷基氨磺酰基(如N-甲基氨磺酰基、N-乙基氨磺酰基、N-丙基氨磺酰基、N-异丙基氨磺酰基、N-丁基氨磺酰基)，(55)二-C1-4烷基氨磺酰基(如N，N-二甲基氨磺酰基、N，N-二乙基氨磺酰基、N，N-二丙基氨磺酰基、N，N-二丁基氨磺酰基)，(56)C1-6烷硫基(如甲硫基、乙硫基、丙硫基、异丙硫基、丁硫基、异丁硫基、仲丁硫基、叔丁硫基)，(57)C6-10芳硫基(如苯硫基、萘硫基)，(58)C1-6烷基亚磺酰基(如甲亚磺酰基、乙亚磺酰基、丙亚磺酰基、丁亚磺酰基)，(59)C6-10芳基亚磺酰基(如苯亚磺酰基)，(60)C1-6烷基磺酰基(如甲磺酰基、乙磺酰基、丙磺酰基、丁磺酰基)和(61)C6-10芳基磺酰基(如苯磺酰基，甲苯磺酰基)。
就通式(Ⅰ)而言，R3和R4优选与相邻的氮原子组成包含至少两个杂原子的杂环基团。杂环基团优选包含除氮原子外1或2个选自氧、硫、氮的杂原子的6元杂环基团，如硫代吗啉代基团、吗啉代基团、哌嗪基、4H-1，4噁嗪基和4H-1，4-噻嗪基。
化合物(Ⅰ)或其盐的优选实例包括N-[N-[(2S，3S)-3-反-羧基环氧乙烷-2-羰基]-L-苯丙氨酰]-1，4-二氨基丁烷，N-[N-[(2S，3S)-3-反-乙氧羰基环氧乙烷-2-羰基]-L-苯丙氨酰]-1，4-二氨基丁烷，N-[N-[(2S，3S)-3-反-乙氧羰基环氧乙烷-2-羰基]-L-苯丙氨酰]吗啉，N-[N-[(2S，3S)-3-反-羧基环氧乙烷-2-羰基]-L-苯丙氨酰]吗啉，N-[N-[(2S，3S)-3-反-乙氧羰基环氧乙烷-2-羰基]-L-酪氨酰]吗啉，N-[N-[(2S，3S)-3-反-羧基环氧乙烷-2-羰基]-L-酪氨酰]吗啉，N-[N-[(2S，3S)-3-反-乙氧羰基环氧乙烷-2-羰基]-3-(2-萘基)-L-丙氨酰]吗啉，N-[N-[(2S，3S)-3-反-羧基环氧乙烷-2-羰基]-3-(2-萘基)-L-丙氨酰]吗啉。
通式(Ⅺ)中，R11表示的可被酯化或酰胺化或者未被酯化或酰胺化的羧基与上述通式(Ⅰ)中R1所代表的基团基本相同。
通式(Ⅺ)中，由R12代表的芳族多环基团优选为C8-18的芳族多环基团。更具体而言，这些基团的实例包括C8-12二环芳族基团，如1-，2-或3-并环戊二烯基(pentalenyl)、1-或2-萘基、1-，2-，4-，5-或6-薁基、喹啉基、异喹啉基和吲哚基，C12-18三环芳族基团，如1-，2-或9-蒽基、1-，2-，3-，4-或9-菲基。更为优选的是C8-12二环芳族基团，如1-，2-或3-并环戊二烯基、1-或2-萘基、1-，2-，4-，5-或6-薁基、喹啉基、异喹啉基和吲哚基。
芳族多环基团的任一可能的位置上可有1-5个取代基或无取代基。取代基与通式(Ⅰ)中R2代表的环基团中定义的基团基本相同。
就通式(Ⅺ)而言，由R13和R14代表的烷基的实例包括C1-15烷基(如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、异戊基、己基、庚基、辛基、壬基、癸基、十一烷基、十二烷基、十三烷基、十四烷基、十五烷基等)。
化合物(Ⅺ)或其盐的优选实例包括N-[N-[(2S，3S)-3-反-乙氧羰基环氧乙烷-2-羰基]-3-(2-萘基)-L-丙氨酰]-1-氨基-3-甲基丁烷，N-[N-[(2S，3S)-3-反-羰基环氧乙烷-2-羰基]-3-(2-萘基)-L-丙氨酰]-1-氨基-3-甲基丁烷或其盐。
通式(ⅩⅪ)中，R21表示的可被酯化或酰胺化或者未被酯化或酰胺化的羧基与上述通式(Ⅰ)中R1所代表的基团基本相同。
通式(ⅩⅪ)中，R22表示的烷基的实例为C1-15烷基，如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、异戊基、新戊基、己基、庚基、辛基、壬基、癸基、十一烷基、十二烷基、十三烷基、十四烷基、十五烷基等。其中，C2-10烷基是优选的，最优选的是C3-5烷基。
在通式(ⅩⅪ)中，在用被保护或未被保护的氨基取代的R23和R24所表示的烷基中氨基保护基团的实例是(1)甲酰基，(2)C2-7烷酰基如乙酰基、丙酰基、丁酰基、戊酰基，其可具有1-3个取代基、取代基选自(a)卤素原子(如氯、溴、氟)，(b)C2-7烷酰基(如乙酰基、丙酰基、丁酰基、戊酰基)和(c)硝基，(3)C7-11芳基羰基如苯基羰基，其可具有1-3个取代基、取代基选自(a)卤素原子(如氯、溴、氟)，(b)C2-7烷酰基(如乙酰基、丙酰基、丁酰基、戊酰基)和(c)硝基，(4)C1-6烷氧羰基如甲氧羰基、乙氧羰基、其可具有1-3个取代基，取代基选自(a)卤素原子(如氯、溴、氟)，(b)C2-7烷酰基(如乙酰基、丙酰基、丁酰基、戊酰基)和(c)硝基，(5)C7-11芳氧羰基如苯氧羰基，其可具有1-3个取代基，取代基选自(a)卤素原子(如氯、溴、氟)，(b)C2-7烷酰基(如乙酰基、丙酰基、丁酰基、戊酰基)和(c)硝基，(6)C8-13芳烷基羰基如苄基羰基、苯乙基羰基、其可具有1-3个取代基，取代基选自(a)卤素原子(如氯、溴、氟)，(b)C2-7烷酰基(如乙酰基、丙酰基、丁酰基、戊酰基)和(c)硝基，(7)C7-11芳基羰基如苯基羰基，其可具有1-3个取代基，取代基选自(a)卤素原子(如氯、溴、氟)，(b)C2-7烷酰基(如乙酰基、丙酰基、丁酰基、戊酰基)和(c)硝基，(8)C7-12芳烷氧羰基如苄氧羰基和苯乙氧羰基，其可具有1-3个取代基，取代基选自(a)卤素原子(如氯、溴、氟)，(b)C2-7烷酰基(如乙酰基、丙酰基、丁酰基、戊酰基)和(c)硝基，(9)三苯基，其可具有1-3个取代基，取代基选自(a)卤素原子(如氯、溴、氟)，(b)C2-7烷酰基(如乙酰基、丙酰基、丁酰基、戊酰基)和(c)硝基，(10)邻苯二甲酰基，其可具有1-3个取代基，取代基选自(a)卤素原子(如氯、溴、氟)，(b)C2-7烷酰基(如乙酰基、丙酰基、丁酰基、戊酰基)和(c)硝基，(11)C6-10芳磺酰基如苯磺酰基，其可具有1-3个取代基，取代基选自(a)卤素原子(如氯、溴、氟)，(b)C2-7烷酰基(如乙酰基、丙酰基、丁酰基、戊酰基)和(c)硝基。
R23和R24优选为被氨基取代的烷基，氨基可被C8-13芳烷氧羰基如苄氧羰基或苯乙氧羰基保护或未被保护，其中芳烷氧羰基可具有1-3个取代基、取代基选自卤素原子(如氯、溴、氟)、C2-7烷酰基(如乙酰基、丙酰基、丁酰基、戊酰基)和硝基，R23和R24最好为氨烷基。
这种烷基包括C1-15烷基，如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、异戊基、新戊基、己基、庚基、辛基、壬基、癸基、十一烷基、十二烷基、十三烷基、十四烷基、十五烷基。其中，优选C1-10的烷基，最优选C1-6的烷基。
任何一种微生物只要其属于毛壳菌属(Chaetomium)并能生产TAN-1756A、B、C和/或D就可用于生产本发明的化合物TAN-1756A、B、C和/或D。这种微生物包括FL-41927，其为从日本大坂府的土壤中新分离出来的一种霉菌菌株，该菌株的特征如下a)形态在麦芽汁琼脂培养基、土豆-葡萄糖琼脂培养基、燕麦粉培养基等中，该FL-41927菌株生长良好，形成一种子囊壳。该子囊壳表面为深橄榄褐色，呈半球至卵圆形，具有尺寸为65-75μm×95-105μm顶孔。子囊壳还有大量紧簇状的深橄榄褐色顶毛，顶毛有横隔膜，宽度为2.5～3.0μm，顶毛在基部为波形的或适度卷曲的，没有分枝。侧毛为浅橄榄褐色，为直毛或稍有波形，在子囊壳的顶部与顶毛成为一体。其子囊为棒状，具有8个孢子。子囊孢子(7-9μm×10-12μm)为橄榄褐色，柠檬状，并具有轻微的羽状末端。
b)在琼脂培养基上的性质(1)麦芽汁琼脂培养基24℃下生长良好，二星期后菌落直径达到78-83mm。表面有薄绒毛状菌丝;在中心部位有大量黑灰色斑点出现，从中间部分向周缘处可观察到径向的薄薄的扩展。菌落的外缘是规整的。气生菌丝体生长良好;大约第10天时，形成黑色的子囊果，2星期后形成中心团。从中心至中间部分由黑灰色变为灰白色，周缘为奶油色。背面的中心至周缘为浅黑灰色至浅灰色，周缘为乳白色。无可溶性色素形成。
(2)土豆-葡萄糖琼脂培养基24℃下生长良好，二星期后菌落直径达到55-60mm。表面有轻微生长的绒毛状菌丝，其中心为空心的，从中间部分至周缘处有轻微的径向扩展。菌落的外缘是规整的。气生菌丝体生长良好;大约第10天时，形成黑色的子囊果，2星期后在整个菌落上扩展开。中心部位为深黑灰色，中间部分为浅黑灰色，周缘为浅灰色。背面的中心至中心部分为由浅黑灰色变为浅灰色，周缘为乳白色。无可溶性色素形成。
(3)察氏琼脂培养基24℃下生长缓慢且生长不好;二星期后菌落直径达40-50mm。菌落表面平坦，有薄绒毛状菌丝，具有不规整的波曲外缘。气生菌丝体生长不好，并且未形成子囊果。通常为白至黄白色。背面为浅黄棕至黄棕色。无可溶性色素形成。
c)生理特性使用土豆-葡萄糖琼脂培养基来检测这种菌株的生长条件。生长温度为10-36℃，最适温度18-28℃，pH4-12时生长良好。
以这些发现特别是形态特征为基础并参考下述文献，可以鉴定该菌株为球毛壳霉(Chaetomium globosum)FL-41927菌株，这些文献包括“Separatian，Cultivation and Identification of Fungi”(D.Malloch著，S.Udagawa译成日文，1983，Ishiyaku publishers);Kinrui Zukan(Jyo)(S.Udagawa，K.Tsubaki等，1978，Kodansha Scientific);以及“The Ascomycete Genus Chaetomium)”(J.A.von Arx，J.Guarro和M.J.Figueras，1986，J.Cramer Publisher)。
该菌株于1993.8.17在大坂的发酵研究院(the Institute for Fermentation，Osaka)(IFO)以登记号IFO32580保藏，于1993.10.18在国际贸易和工业部，工业科学技术机构，生物科学和人文技术国家研究院(NIBH)(the National Institute of Bioscience and Human-Technology，Agency of Industrial Science and Technology，Ministry of International Trade and Industry)以登记号FERM BP-4443保藏。
任何微生物只要其属于Tolypocladium菌属并能生产TAN-1854A和/或B。则该微生物就可用来生产TAN-1854A和/或B。这种微生物包括FL-43974，其为从日本奈良府的土壤中新分离出来的一种霉菌菌株。
该菌株的特征如下a)形态在麦芽汁琼脂培养基、土豆-葡萄糖琼脂培养基、燕麦粉琼脂培养基中菌株FL-43974生长良好，形成许多分生孢子。菌丝有横隔，由气生菌丝不规则地分枝出分生孢子梗。具有锥形顶端的瓶状梗(0.3-1.6μm×5.0-8.0μm)为单生(mononematous)或轮生(2-3瓶梗)。分生孢子并未连接在一起，为圆筒状的，尺寸为2.1-2.3μm×2.6-2.8μm，其具有光滑的表面，并在瓶梗的顶部形成分生孢子团。
b)在琼脂培养基上的性质(1)麦芽汁琼脂培养基24℃生长状态中等，同时有缓慢且有限的菌落扩展;菌落直径在二星期后为35mm。中心表面有上升绒毛状菌丝体，具有规整的外缘。中心至周缘为白色至淡黄色。中间部分和外缘为白色。背面为浅黄色。无可溶性色素形成。
(2)土豆-葡萄糖琼脂培养基24℃生长状态中等，菌落扩展有限;二周后菌落直径达35-37mm。表面有轻微上升的绒毛状菌丝体，并具有有规整的外缘。中心至周缘为浅灰白色至浅灰黄色。背面为浅黄褐色。无可溶性色素形成。
(3)察氏琼脂培养基24℃下生长状态不好;二星期后菌落直径达25mm。表面平坦，从中心至周缘有薄绒毛状菌丝体。外缘有些不规整。表面中心到周缘为浅灰白色。背面从中心至周缘为乳白色至淡黄色。无可溶性色素形成。
c)生理特性使用土豆-葡萄糖琼脂培养基来检测该菌株的生长条件。生长温度为6-33℃，最适温度18-24℃，pH3-12时生长良好。
以这些发现并参考下述文献，可以鉴定该菌株为Tolypocladium cylindrosporum FL-43974菌株，所说的参考文献是“The Generaof Fungi sporulating in Pure Culture”J.A.Von Arx，1981，J.Cramer Company和“Canadian Journal of Botany，”Vol.61，P.1331(1983)，J.Bissett及Notes on Tolypocladium and Retated Genera。
该菌株于1993.8.17在大坂的发酵研究院(IFO)以登记号IFO32582保藏，于1993.10.18在国际贸易和工业部，工业科学技术机构，生物科学和人文技术国家研究院(NIBH)以登记号FERMBP-4445保藏。
类似的其它霉菌，属于毛壳菌属的TAN-1756A、B、C和/或D生产真菌和属于Tolypocladium的TAN-1854A和/或B生产真菌均可通过各种突变手段而突变，如用紫外线辐照，用放射线辐照等，单细胞分离及各种化学诱变剂而突变。任何人工突变体本身或天然突变体只要其与上述菌株之一在上述分类特征方面基本相同，以及该突变体能生产相应的化合物，那么这些突变体均可用于本发明的方法中。
用于培养TAN-1756A、B、C和/或D的生产真菌或TAN-1854A和/或B生产真菌的培养基可以是液体或固体，只要其包含可利用的营养源。大规模培养时，优选使用液体培养基。如果需要，培养基中应补充生产真菌可吸收的碳源、氮源、无机物和微量营养素。碳源包括葡萄糖、乳糖、蔗糖、麦芽糖、糊精、淀粉、甘油、甘露醇、山梨醇、油和脂(如豆油、猪油、鸡油)和石蜡。氮源包括肉汁、酵母膏、干酵母、豆粉、玉米浆、胨、棉子粉、赤糖糊糖蜜、尿素和铵盐(如硫酸铵、氯化铵、硝酸铵、醋酸铵)。如果必要，可使用金属盐，如钠、钾、钙、镁、铁、锰、锌、钴和镍的盐，无机酸的盐，如磷酸和硼酸的盐，有机酸的盐，如乙酸和丙酸的盐。培养基中还可包括氨基酸(如谷氨酸、天冬氨酸、丙氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、脯氨酸)、肽(如二肽、三肽)，维生素(如B1、B2、烟酸、B12、C)和核酸(如嘌呤、吡啶及它们的衍生物)。也可以添加无机酸、有机酸、碱、缓冲剂，以及其它可以加入以调节培养基的pH值的添加剂。也可加入适量的油脂、表面活性剂和其它添加剂用来消泡。在液体培养基中，优选pH值接近中性范围，特别优选pH值为5.5-8。
培养温度优选约24-30℃。培养时间优选48-168小时。
为了从培养物中收集所需要的化合物TAN-1756A、B、C和/或D，或者TAN-1854A和/或B，可以使用一种常规的方法来收集微生物培养物中的微生物代谢物。例如，TAN-1756A、B、C和/或D及TAN-1854A和B均为水溶性两性物质，它们主要包含在培养物滤液中;优选首先在助滤剂存在下对培养液过滤或离心以除去细胞，然后将剩下的培养物滤液与一种适宜的载体接触以使滤液中的活性成分吸附至载体上，用一种适宜的溶剂使活性成分解析并分别收集之。适用的层析载体包括基于化合物吸附性能差异的载体，如活性炭、硅胶、微晶纤维素和吸附树脂，基于官能团差异的载体如离子交换树脂、离子交换纤维素和离子交换葡聚糖凝胶，以及基于分子量差异的载体如分子筛载体。为了从载体上洗脱所要的化合物，可以使用不同比例的混合溶剂如水可溶混性有机溶剂(如甲醇、乙醇、丙酮、乙腈)，水，稀的碱水溶液(如氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸氢钠)、稀的酸溶液(如盐酸、醋酸、甲酸、磷酸)及缓冲溶液(如醋酸盐缓冲液、磷酸盐缓冲液)，选用哪些取决于载体的种类和性能。
具体说来，当使用阳离子交换树脂如Amberlite IR-120、IRC-50(美国Rohm&Haas，生产)、Dowex 50W(美国的Dow Chemical生产)或Diaion SKIA(Mitsubishi Chemical Industries生产)时，或使用阴离子交换树脂如Amberlite IRA-402、IRA-68(美国的Rohm & Haas生产)，Dowex1(美国的Dow Chemical生产)或Diaion SA 10B.PA-404或WA-30(Mitsubishi Chemical Industries)时，所要的化合物从滤液中吸附出来，并用包含盐、碱或酸的水溶液或缓冲溶液洗脱。所要的化合物也可吸附到离子交换分子筛树脂载体如QAE或CM-Sephadex(由瑞典的Pharmacia生产)上，并用包含盐、碱或酸的水溶液或缓冲溶液洗脱。为了从这些洗脱液中除去盐、着色物质，优选使用活性炭层析处理(Takeda Chemical Industries生产)、吸附性树脂如Diaion HP-20或SP-207(Mitsubishi Chemical Industries生产)、Amberlite XAD-Ⅰ和Ⅱ(美国的Rohm & Haas生产)、分子筛树脂如Sephadex LH-20(由瑞典的Pharmacia生产)、微晶纤维素如Avicel(Asahi Chemical生产)或Funacel(Funakoshi Pharmaceutical生产)。
在对所要的化合物进行最后纯化时，优选使用制备性高效液相色谱(HPLC)。当使用该方法时，优选使用十八烷基硅烷(ODS)载体，氨丙基硅烷载体，聚胺载体和硅胶载体。当使用ODS，YMC胶(Yamamura Kagaku Kenkyujo生产)或TSK胶(Toyo Soda Manufacturing生产)等载体时，流动相优先使用甲醇或乙腈和水或含盐水溶液的混合溶液。
由于TAN-1756A、B、C和D及TAN-1854A和B均为两性物质，它们可通过已知的方法以下述盐的形式得到碱金属盐如钠盐和钾盐，碱土金属盐如钙盐和镁盐或酸加成盐;特别是药物可接受的酸加成盐。这种盐包括与无机酸(如盐酸、硫酸、磷酸)或有机酸(如醋酸、丙酸、柠檬酸、酒石酸、苹果酸、草酸、甲磺酸、辛磺酸)形成的盐。
任何一种微生物只要其属于木霉(Trichoderma)菌属并能生产TAN-1803，就可用于生产本发明的化合物TAN-1803。这种微生物包括FL-42547，其为从印度土壤中分离出来的一种霉菌菌株。
该菌株的特征如下a)形态在麦芽汁琼脂培养基、土豆-葡萄糖琼脂培养基、燕麦粉琼脂培养基中菌株FL-42547生长良好，形成许多分生孢子。菌丝内有横隔;长形分生孢子梗，单生或轮生，从气生菌丝体直立扩展或不规则扩展，没有发育不全的菌丝。存在3-5个轮生瓶状瓶梗(2.5-3.0μm×5.0-6.0μm)。分生孢子未连接在一起，为倒卵形，有裂端(cut end)，尺寸为2.1-2.3μm×2.6-2.8μm，表面光滑。
b)在琼脂培养基上的性质(1)麦芽汁琼脂培养基24℃生长良好;2星期后菌落直径达90mm以上。菌落表面平坦，具有薄的绒毛状气生菌丝体，外缘规整。菌落形成良好，轮生扩展形成环型;随着分生孢子的形成，颜色由深绿变为深兰绿色。背面中心至周缘由浅黄绿色至浅黄灰色。无可溶性色素形成。
(2)土豆-葡萄糖琼脂培养基24℃生长良好;2星期后菌落直径达90mm以上。菌落表面平坦，具有薄的绒毛状气生菌丝体，外缘规整。菌落形成良好，轮生扩展成环型;随着分生孢子形成，颜色由浅绿色变为深绿色。背面中心至周缘由浅黄绿色变成浅黄灰色。无可溶性色素形成。
(3)察氏琼脂培养基24℃生长良好;2星期后菌落直径达90mm以上。外缘规整。薄的气生菌丝体径向扩展。分生孢子形成状况适中。中心至周缘由灰白色至灰色。背面从浅灰至乳白色。无可溶性色素形成。
c)生理特性使用土豆-葡萄糖琼脂培养基检测该菌株的生长条件。生长温度为12-36℃，最适温度为19-23℃。虽然在pH值为3-12内菌株能够生长，但pH为9或更大时，生长状况不良。
以这些发现并参考下述文献，可以鉴定该菌株为木霉菌属Trichoderma aureoviride FL-42547菌株。这些文献是“Separation，Cultivation and Identification of Fungi”(D.Malloch著，S.Udagawa译成日文，1983，Ishiyaku Publishers)及“A Revision of the Genus Trichoderma”(M.A.Rifai，1986，Commonwealth Mycological Institute，Kew，Surrey，England)。
该菌株于1993.8.17在大坂的发酵研究院(IFO)以登记号IFO32581保藏，于1993.10.18在国际贸易和工业部，工业科学技术机构，生物科学和人文技术国家研究院(NIBH)以登记号FERMBP-4444保藏。
任何微生物只要其属于曲霉菌属并能生产TAN-1868，就可用于生产本发明的化合物TAN-1868。这种微生物包括FL-47958，其为一种由日本大坂府的土壤中新分离出的霉菌菌株。
该菌株的特征如下a)形态在麦芽汁琼脂培养基，土豆-葡萄糖琼脂培养基，燕麦粉培养基中菌株FL-47958生长良好。菌丝有横隔;在气生菌丝上形成分生孢子梗。分生孢子梗轻微弯曲，长80-160μm，表面光滑。孢子梗顶端膨大成顶囊。顶囊为半球状，直径15-20μm，在其上半部有梗基。梗基为圆柱形，尺寸为3.5-4.5μm×1.5-2.0μm，具有2-4个瓶状簇生瓶梗(5-6μm×1.0-2.0μm)，瓶梗表面光滑。分生孢子(2.0-2.5μm×1.0-2.0μm)为球形至半球形且连接在一起，具有平滑的表面。
b)在琼脂培养基上的性质(1)麦芽汁琼脂培养基24℃时生长状态中等，菌落扩展有限，2星期后菌落直径达35mm。菌落表面平坦，菌落有绒毛状菌丝，菌丝体中心略有上浮，外缘规整。气生菌丝发育良好，而分生孢子的形成状况不佳。中心至周缘由浅灰白色至浅黄白色。背面中心至周缘由深黄褐色至浅黄褐色。无可溶性色素形成。
(2)土豆-葡萄糖琼脂培养基24℃时生长状态中等，菌落扩展有限;2星期后菌落直径达33mm。菌落表面平坦;菌落有绒毛状菌丝，菌丝体中心略有上浮。外缘有些不规整。气生菌丝的发育良好，而分生孢子的形成状况不佳。中心至中间部为浅灰白色，周缘为白色。背面中心为深红褐色至红褐色，中间部分为深红褐色，周缘为浅黄褐色。无可溶性色素形成。
(3)燕麦粉琼脂培养基24℃时生长状态中等;2星期后菌落直径达30mm。表面有略上升的粉状至绒毛状菌丝，菌丝体的中心略微下沉，周缘较薄，外缘规整。气体菌丝发育良好，分生孢子的形成不也错。中心为带有浅灰白色条纹的黄褐色，中间部分为环形浅黄褐色，中间部分至周缘由奶油色至浅灰白色。背面中心为浅黄褐色至奶油色，中间部分至周缘为浅黄褐色至乳白色。无可溶性色素形成。
c)生理特性使用土豆-葡萄糖琼脂培养基来检测该菌株的生长条件。生长温度为12-37℃，最适温度为23-29℃。在pH值3-12时菌株生长良好。以这些发现为基础并参考“Separation，Cultivation and Identification of Fungi”(D.Malloch著，由S.Udagawa译成日文，1983，Ishiyaku Publishers)可鉴定该菌株属于曲霉菌属，并称为曲霉菌种FL-47958菌株。
该菌株于1993.8.17在大坂的发酵研究院(IFO)以登记号IFO32583保藏;在1993.10.18在国际贸易和工业部，工业科学技术机构，生物科学和人文技术国家研究院(NIBH)以登记号FERM BP-4446保藏。
类似的其它霉菌，属于木霉菌属的TAN-1803生产真菌和属于曲霉菌属的TAN-1868生产真菌均可通过各种突变手段而突变，如用紫外线辐照，用放射线辐照等，单细胞分离及各种化学诱变剂突变。任何人工突变体本身或天然突变体只要其与上述菌株之一在上述分类特征方面基本相同，以及该突变体能产生相应的化合物，那么这些突变体均可用于本发明的方法中。
用于培养TAN-1803生产真菌或TAN-1868生产真菌的培养基与用于培养TAN-1756A、B、C和/或D生产真菌或TAN-1854A和/或B生产真菌的培养基基本相同。
为了从培养物中收集所要的化合物TAN-1803或TAN-1868，可以使用一种常规的方法来收集微生物培养物中的微生物代谢物。用与TAN-1756A、B、C和/或D以及TAN-1854A和/或B的情形基本相同的方法来收集水溶性两性物质TAN-1803及水溶性酸性物质TAN-1868。
由于TAN-1803为两性物质，它可通过已知的方法以下述盐的形式得到碱金属盐如钠盐或钾盐，碱土金属盐如钙盐或镁盐，或酸加成盐，特别是药物可接受的酸加成盐。这些盐包括与无机酸(如盐酸、硫酸、磷酸)或有机酸(如醋酸、丙酸、柠檬酸、酒石酸、苹果酸、草酸、甲磺酸)所形成的盐。由于TAM-1868为酸性物质，它可通过已知的方法以下述盐的形式得到碱金属盐如钠盐或钾盐，或碱土金属盐如钙盐或镁盐。
以下描述一种生产化合物(Ⅰ)或其盐的方法。
下面常提到的保护基和试剂的简写如下Fmoc9-芴基甲氧羰基Z苄氧羰基Boc叔丁氧羰基Bzl苄基Ph.苯基Trt三苯甲基But丁酰基Ts对甲苯磺酰基TFA三氟乙酸Tos对甲苯磺酸DCCN，N′-二环己基碳二亚胺BOP六氟磷酸苯并三唑-1-基氧基三(二甲氨基)磷鎓DICN，N′-二异丙基碳二亚胺HONBN-羟基-5-降冰片烷-2，3-二羧基酰亚胺
HOBT1-羟基苯并三唑WSC水溶性碳化二亚胺[1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳化二亚胺盐酸盐]R-R构型S-S构型式(Ⅰ)所示化合物或其盐可通过式(Ⅱ)所示化合物或其盐与式(Ⅲ)所示化合物或其盐反应，随后如果必要进行去保护反应制备，式(Ⅱ)化合物 其中R1、R2和n定义同上;
式(Ⅲ)化合物 其中R3、R4定义同上;
式(Ⅰ)所示化合物或其盐还可通过式(Ⅳ)所示化合物或其盐与式(Ⅴ)所示化合物或其盐反应，随后如果必要进行去保护反应来制备，式(Ⅳ)化合物 其中R1定义同上;
式(Ⅴ)化合物 其中R2、R3、R4和n定义同上。
该制备方法采用传统的肽合成方法，如液相合成法或固相合成法。这类肽合成方法可使用任选的已知方法。例如，所要的化合物可通过以下文献所述的方法生产M.Bondasky和M.Ondetti，和“Peptide Synthesis”(Interscience Publishers，New York(1966));F.M.Finn和K.Hofmann的“The Proteins”(Vol，2，由H.Nenrath和R.L.Hill编辑，Academic Press Inc.，New York(1976));Nobuo Izumiya等的“Peptide Gosei No Kiso To Jikken”(日文)(Maruzen(1985));H.Yajima，S.Sakakibara等的“Seikagaku Jikken Koza l”(由Japanese Biochemical Society编辑，Tokyo Kagaku Dojin(1977);T.Kimura等的“Zoku Seikagaku Jikken Koza 2”(由Japanese Biochemical Society编辑，Tokyo Kagaku Dojin(1987));J.M.Stewart和J.D.Young的“Solid Phase Peptide Synthesis”(Pierce Chemical Company，Illinois(1984))及这些方法的改进方法。具体而言，包括如下方法叠氮化物法、氯化物法、酸酐法、混合酸酐法、DCC法、活性酯法、使用伍德瓦德试剂K的方法，羰基咪唑法，氧化还原法，DCC/HONB法，DCC/HONB法，DCC/HOBT法，WSC/HOBT法及使用BOP试剂的方法，其中式(Ⅱ)化合物或其盐或式(Ⅳ)化合物或其盐具有活性羰酸部分，随后分别与式(Ⅲ)化合物或其盐或者式(Ⅴ)化合物或其盐缩合。
就原始物料反应中未涉及的官能团的保护、所用的保护基、保护基的消除、反应中涉及的官能团的活化等而言，可选用适宜的已知官能团或已知的方法。
该反应可在碱存在下进行。适用的碱包括叔胺如三甲胺、三乙胺、三丙胺、N-甲基哌啶、N-甲基吡咯烷、环己基二甲基胺和N-甲基吗啉，仲胺如二正丁基胺、二异丁基胺和二环己基胺、芳族胺如吡啶、卢剔啶、可力丁，碱金属(如锂、钠和钾)的氢氧化物或盐，和碱土金属(如钙和镁)氢氧化物或盐。
在该方法中，羧酸化合物(Ⅱ)或(Ⅳ)的活性衍生物通常以1mol/mol化合物(Ⅲ)或(Ⅴ)使用，但是可以过量使用，只要反应不互相干扰就行。使用碱时，其量通常为1-5mol，优选约1-3mol/mol化合物(Ⅲ)或(Ⅴ)，其变化取决于所使用的原料化合物、活性羧酸衍生物的种类和其它的反应条件。
该反应一般在反应不受干扰的溶剂中进行。从用于肽的缩合反应中的已知溶剂中选择适合的溶剂。这些溶剂包括酰胺类，例如甲酰胺、N，N-二甲基甲酰胺和N-甲基吡咯烷酮;亚砜类，如二甲亚砜;芳胺类，如吡啶;卤代烃类，如氯仿和二氯甲烷;醚类，如四氢呋喃和二噁烷;腈类，如乙腈;酯类，如醋酸乙酯和甲酸乙酯以及它们适合的混合物。
反应温度通常为约-50℃-150℃，优选-30-80℃，只要反应能进行，对其并没有限制。反应时间通常为几十分钟到几十小时，这取决于所使用的原料、碱、反应温度和溶剂的种类。
通式(Ⅰ)代表的化合物或其盐可以通过由上述方法脱保护反应(如果必须)制备的化合物及其盐来制备。这种脱保护反应通过本来已知的方法来进行，例如在肽化学中通常使用的方法(参见Gosei Kagaku Series，Peptide Gosei，by N.Izumiya，M.Ono，T.Kato and T.Aoyagi，Published by Maruzen 1975)。
被氨基甲酸甲酯型保护的氨基的脱保护反应是在不存在溶剂或反应不受干扰的溶剂中与酸相接触来进行的。这种溶剂的实例包括卤代烃类(例如二氯甲烷、氯仿、1，2-二氯乙烷)、醇类(例如甲醇、乙醇)、水以及它们适合的混合物。酸的实例包括卤代乙酸类(如三氟乙酸)和氢卤酸(如氢氯酸、氢溴酸)。
使用例如钯催化剂(如Pd/硫酸钡、Pd/活性碳、Pd黑)、铑催化剂等通过催化加氢排除N-苄氧基羰基(Z)和N-4甲氧苄氧基羰基是有利的。这种反应在反应不受干扰的溶剂中进行。这些溶剂包括酰胺类(如N，N-二甲基甲酰胺、乙酰胺)、醇类(如甲醇、乙醇)、环醚类(如四氢呋喃)、有机羧酸(如乙酸、丙酸)、水以及它们适合的混合物。
使用有机胺如二乙胺、哌啶、吗啉、4-甲基氨基吡啶或二环己胺排除N-9-芴基甲氧基羰基(Fmoc)是有利的。该反应在反应不受干扰的溶剂中进行。这些溶剂包括酰胺类(如N，N-二甲基甲酰胺、乙酰胺)、醇类(如甲醇、乙醇)以及它们适合的混合物。
使用金属(如锌)和有机羧酸(如乙酸、丙酸)来排除N-2，2，2-三氯乙氧基羰基是有利的。该反应是在反应不受干扰的溶剂中进行。这些溶剂包括上述的有机羧酸类、醇类(如甲醇、乙醇)、水以及它们适合的混合物。
酰化羟基的脱保护反应(脱酰化作用)是在反应不受干扰的溶剂中与酸相接触实现的。这些溶剂包括卤代烃类(如二氯甲烷、氯仿、1，2-二氯乙烷)、醇类(如甲醇、乙醇)、水以及它们适合的混合物。有用的酸包括卤代乙酸类(如三氟乙酸)和氢卤酸类(如氢氯酸、氢溴酸)。
使用例如钯催化剂(如Pd/硫酸钡、Pd/活性碳、Pd黑)或铑催化剂等通过催化加氢排除O-苄基是有利的。在这种情况下，从文献已知的溶剂如环醚(如四氢呋喃)是单独使用的，或在某些情况下，以与其它惰性溶剂的混合物形态使用，该惰性溶剂的实例有低级脂肪酸酰胺(如N，N-二甲基甲酰胺)。
对O-四氢吡喃基或O-叔-丁基来说，脱保护反应可通过如上述的脱酰化作用中的酸的水解来实现。
以上述的相同方式，通过酸的水解可以排除羧基保护基。例如，苄基酯可以通过如上述排除O-苄基的相同方式，由催化加氢来排除。甲基酯或乙基酯在反应不受干扰的溶剂中，与碱相接触来排除。溶剂的实例包括醇类(如甲醇、乙醇)、环醚类(如四氢呋喃)、水以及它们适合的混合物。碱的实例包括氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠和碳酸钾。
2-(三甲基甲硅烷基)-乙基可以由氢氟酸盐在中性条件下，适宜的溶剂中的反应来排除，例如这些盐是氢氟酸的四价氮的碱性盐(如氟化四乙铵)。
通过分离肽的方法如萃取、分配、再沉淀、结晶、重结晶、各种色谱法、高效液相色谱法等，在反应完成后，收集这样制备的化合物(Ⅰ)或其盐。
上述的化合物(Ⅱ)或其盐可以通过化合物(Ⅳ)或其盐与下列通式代表的化合物或其盐的缩合反应来制备 其中R2和n为与上述相同的定义;R7代表保护的羧基。缩合反应是通过与上述相同的肽合成一般方法进行的。随后再进行脱保护反应，从而排除羧基保护基。
上述由R7表示的保护羧基中羧基保护基的实例包括(1)带有1-3个取代基或不带取代基的C1-6烷基(如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲-丁基、叔-丁基、戊基、异戊基、仲-戊基、叔-戊基、己基)，这些取代基选自(a)卤原子(如氯、溴、氟)，(b)C2-7链烷酰基(如乙酰基、丙酰基、丁酰基、戊酰基)和(c)硝基;(2)带有1-3个取代基或不带取代基的C6-10芳基(如苯基、萘基)，这些取代基选自(a)卤原子(如氯、溴、氟)，(b)C1-6烷氧基(如甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、异丁氧基、仲-丁氧基、叔-丁氧基)和(c)硝基;(3)带有1-3个取代基或不带取代基的C7-12芳烷基，这些取代基选自(a)卤原子(如氯、溴、氟)，(b)C1-6烷氧基(如甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、异丁氧基、仲-丁氧基、叔-丁氧基)和(c)硝基;(4)带有1-3个取代基或不带取代基的三苯甲游基，这些取代基选自(a)卤原子(如氯、溴、氟)，(b)C2-7链烷酰基(如乙酰基、丙酰基、丁酰基、戊酰基)和(c)硝基;和(5)三C1-4的烷基甲硅烷基(如三甲基甲硅烷基、三乙基甲硅烷基)。
上述的化合物(Ⅴ)或其盐是由下列通式表示的化合物 其中R2和n为上述相同的定义;R8表示的保护的氨基或其盐，与化合物(Ⅲ)或其盐通过与上述相同的肽合成一般方法发生缩合反应制备的。随后再进行脱保护反应，从而排除氨基保护基。
上述保护氨基中的氨基保护基R8与烃残余物中的氨基保护基相同，它可以被上述R4上被保护的或不被保护的氨基所取代。
制备化合物(Ⅺ)或其盐的方法如下所述。
化合物(Ⅺ)或其盐可以通过下列通式表示的化合物或其盐;
其中R11、R12和n′与上述的定义相同，与下列通式表示的化合物或其盐 其中R13和R14与上述的定义相同，之间发生反应制备而得;如果需要，随后再进行脱保护反应。化合物(Ⅺ)或其盐或者也可以通过下列通式表示的化合物或其盐;
其中R11与上述的定义相同，与下列通式表示的化合物或其盐
其中R12、R13、R14和n′与上述的定义相同，之间发生反应制备而得;如果需要，随后再进行脱保护反应。
在这种制备方法中，化合物(Ⅻ)和化合物(ⅩⅢ)之间的反应是利用与化合物(Ⅱ)和化合物(Ⅲ)之间的上述反应基本相同的方式而进行的。并且化合物(ⅩⅣ)和化合物(ⅩⅤ)之间的反应是利用与化合物(Ⅳ)和化合物(Ⅴ)之间的上述反应基本相同的方式进行的。另外，脱保护反应是以与制备化合物(Ⅰ)中方法基本相同的方式进行的。
这样制备的化合物(Ⅺ)或其盐在反应完成后通过分离肽的方法来收集，这些方法包括萃取、分配、再沉淀、结晶、重结晶、各种色谱法、高性能液相色谱法等等。
上述的化合物(Ⅻ)或其盐可通过化合物(ⅩⅣ)或其盐与下列通式表示的化合物或其盐的缩合反应来制备
其中R12和n′如上述相同的定义;R17代表保护的羧基。该缩合反应是通过与上述相同的肽合成的一般方法进行的。随后再进行脱保护反应，从而排除羧基的保护基。在保护羧基中羧基保护基R17与在保护羧基中的R7相同。
上述的化合物(ⅩⅤ)或其盐可以通过下列通式表示的化合物或其盐和化合物(ⅩⅢ)或其盐的缩合反应来制备 其中R12和n′与上述定义相同，R18代表保护的氨基。该缩合反应是通过与上述相同的肽合成的一般方法进行的。随后再进行脱保护反应，从而排除氨基保护基。
在保护氨基中的氨基保护基R18与在烃残余物中的氨基保护基的定义相同，它可以被上述R4上被保护的或不被保护的氨基所取代。
制备化合物(ⅩⅪ)或其盐的方法如下所述。
上述通式(ⅩⅪ)表示的化合物或其盐可由下列通式的化合物或其盐 其中R21和R22与上述定义相同，与下列通式表示的化合物或其盐 其中R23和R24与上述的定义相同，之间发生反应制备而得;如果需要，随后再进行脱保护反应。化合物(ⅩⅪ)或其盐或者也可以通过下列通式表示的化合物或其盐 其中R21与上述的定义相同，与下列通式表示的化合物或其盐 其中R22、R23、R24与上述的定义相同，之间发生反应制备而得;如果需要，随后再进行脱保护反应。
在这种制备方法中，化合物(ⅩⅫ)和化合物(ⅩⅩⅢ)之间的反应是利用与化合物(Ⅱ)和化合物(Ⅲ)之间的上述反应基本相同的方式而进行的。而化合物(ⅩⅩⅣ)和化合物(ⅩⅩⅤ)之间的反应是利用与化合物(Ⅳ)和化合物(Ⅴ)之间的上述反应基本相同的方式进行的。而且，脱保护反应是以与制备化合物(Ⅰ)中方法基本相同的方式进行的。
这样制备的化合物(ⅩⅪ)或其盐在反应完成后可以通过分离肽的方法来收集，这些方法包括萃取、分配、再沉淀、结晶、重结晶、各种色谱法、高性能液相色谱法等等。
上述的化合物(ⅩⅫ)或其盐可通过化合物(ⅩⅩⅣ)或其盐与下列通式表示的化合物或其盐的缩合反应来制备 其中R22与上述定义相同，R25表示保护的羧基。该反应是通过与上述相同的方法来制备的。随后再进行脱保护反应，排除羧基的保护基。
上述保护羧基的保护基R25与上述用于保护羧基的保护基R7相同。
上述的化合物(ⅩⅩⅤ)或其盐可以通过下列通式化合物或其盐与化合物(ⅩⅩⅢ)或其盐的缩合反应来制备 其中R22与上述定义相同;R26代表保护的氨基。该反应是通过与上述相同的方法来制备的。随后再进行脱保护反应，排除氨基保护基。
上述用于保护氨基的保护基与烷基中的氨基保护基相同，它可以被上述R4上被保护的或不被保护的氨基所取代。
本发明的化合物(Ⅰ)还可以通过本来就已知的方法以碱金属盐如钠盐和钾盐、碱土金属盐如钙盐和镁盐、酸-加成的盐尤其是药物上可接受的酸-加成的盐得到。这些盐包括与无机酸(如盐酸、硫酸、磷酸)生成的盐和与有机酸(如乙酸、丙酸、柠檬酸、酒石酸、马来酸、草酸、甲磺酸、辛磺酸)生成的盐。
关于化合物(Ⅱ)-(Ⅶ)的盐，与化合物(Ⅰ)所施用的相同。
关于化合物(Ⅺ)和化合物(Ⅻ)-(ⅩⅦ)的盐，与化合物(Ⅰ)所施用的相同。
关于化合物(ⅩⅪ)和化合物(ⅩⅫ)-(ⅩⅩⅦ)的盐，与化合物(Ⅰ)所施用的相同。
在下述一些实施例中制备的一些化合物的结构式如下




此外，S和R表明，带标记的碳原子分别是S和R构型;Ph表示苯基;4-OH-Ph表示4-羟苯基;4-Bzl-O-Ph代表4-苄氧苯基;Ac代表乙酰基。
本发明的化合物的生物活性如下。本发明的化合物(Ⅰ)、(Ⅺ)和(ⅩⅪ)或其盐有效地抑制硫醇蛋白酶。它们对组织蛋白酶L和B的抑制活性是由下述的方法测定。结果示如表6。
(a)组织蛋白酶L的抑制活性的测定加入75μl的含1ng人体重组体组织蛋白酶L(如下文的参考实施例1-7制备)、2μM二硫苏糖醇(下文称DTT)、1mM亚乙基二胺四乙酸二钠盐、0.1M乙酸钠缓冲液(pH5.5)和各种浓度的样品、25μl的20μM苄氧基羰基-L-苯基丙氨酰-L-精氨酸-4-甲基香豆酰-7-酰胺(下文称Z-Phe-Arg-7MCA，由Peptide Institute Inc.制备)以起动反应。在37℃孵化20分钟后，加入100μl的含100mM-氯代乙酸钠的反应制止剂。在激发物波长365nm和萤光波长450nm处，利用萤光光度计(FCA;由Baxter生产)测定释放出的4-甲基-7-氨基香豆素的量。产生50%抑制效果的样品浓度用IC50值表示，在无样品时相同反应得到的萤光值取为100%。
(b)组织蛋白酶B抑制活性的测定加入75μl的含30ng组织蛋白酶B(由Sigma生产)、2μMDTT、1mM亚乙基二胺四乙酸二钠盐、0.1M乙酸钠缓冲液(pH5.5)和各种浓度的样品、25μl的20μMZ-Phe-Arg-7MCA，以起动反应。在37℃反应混合物孵化20分钟后，添加100μl含100mM-氯代乙酸钠的反应制止剂。在激发物波长为365nm和萤光波长为450nm处使用萤光光度计测定释放出的4-甲基-7-氨基香豆素的量。产生50%抑制效果的样品浓度用IC50值表示，在无样品时相同反应得到的萤光值取为100%。
表6
化合物(Ⅰ)、(Ⅺ)和(ⅩⅪ)或其盐有效地抑制了骨吸收作用。它们由PTH(甲状旁腺激素)增强的对骨吸收的抑制作用是通过下述的方法测定，结果示于表7。
骨吸收抑制活性的测定从8-10周龄雌性BALB/c鼠无菌地分离出股骨。在骨髓腔用含10%(w/w)的热不活泼的胎牛血清100unit/ml青霉素G和100unit/ml链霉素(下文称培养肉汤)的Ham F12培养基清洗，每根股骨加1ml的培养肉汤并在37℃预孵化3小时，在5%CO2和95%的空气气氛中孵化。每根股骨转移到含PTH(由Peptide Institute Inc.生产，最终的浓度为1μM)的增补的1ml培养肉汤和试验化合物(最终浓度为10μg/ml)中，培养7天以上，此后，培养肉汤中的总钙含量利用钙E-Test Wako(由Wako Pure Chemical Industries生产)测定。试验化合物的骨吸收抑制活性利用下面的方程计算骨吸收抑制活性(%)＝100×(Cp-Cs)/(Cp-Cc)Cc既不含PTH又不含试验化合物的培养肉汤中的总钙含量Cp含PTH的培养肉汤中的总钙含量Cs含PTH和试验化合物中的培养肉汤中的总钙含量表7
毒性研究当以400mg/kg腹膜内施用或口服施用时，TAN-1756A不引起小鼠死亡。
当以400mg/kg于腹膜内施用或口服施用时，TAN-1803的-盐酸化物不引起小鼠死亡。
如上所述，化合物(Ⅰ)、(Ⅺ)和(ⅩⅪ)或其盐对硫醇蛋白酶如组织蛋白酶L和B有抑制活性，它们可以用作硫醇蛋白酶的抑制剂以及用作由硫醇蛋白酶引起的疾病[如肌肉营养不良、气囊性未稍肌病(aerocystic distal myopathy)]的预防剂和治疗剂。此外，由于这些物质抑制硫醇蛋白酶表明了抗炎症活性，故本发明的抑制剂也可以用作抗炎症剂。
另外，化合物(Ⅰ)、(Ⅺ)和(ⅩⅪ)或其盐具有骨吸收抑制活性，它们可以用作骨疾病如骨质疏松、恶性的高钙血和Paget's病的预防和治疗剂。
化合物(Ⅰ)、(Ⅺ)和(ⅩⅪ)或其盐为低毒性，它们对哺乳动物(如狗、猫、马、牛、猴、人)可以安全使用。
例如，当对人施用化合物(Ⅰ)或其盐时，可以口服或非口服安全地施用，或与适合的药理上可接受的载体、赋形剂和稀释剂制成药物组合物的形式施用。
这些药物组合物包括非口服制剂如注射制剂以及口服制剂(如粉末、颗粒、胶囊剂、片剂)。
这些制剂可以通过药物制备中已知的常用方法来制备。
化合物(Ⅰ)或其盐与分散剂[如Tween80(由USAAtlasPowder生产)、HCO60(由Nikko Chemicals生产)、聚乙二醇、羧甲基纤维素、藻酸钠]、保存剂(如对羟基苯甲酸甲酯对羟基苯甲酸丙酯、苄醇、氯代丁醇)、等渗剂(如氯化钠、甘油、山梨醇、葡萄糖)和其它的添加剂制成水溶液的注射剂。
还有，化合物(Ⅰ)或其盐在赋形剂(如乳糖、蔗糖、淀粉)、崩解剂(如CaCO3)、粘合剂(如阿拉伯胶、羧甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基纤维素)、润滑剂(如滑石、硬脂酸镁、聚乙二醇6000)和其它的添加剂存在下，通过压制成形制成口服制剂，如果需要，随后可以通过本来已知的方法包覆，制成无味的、肠溶的或持续释放的制剂。用于这些目的包衣剂包括乙基纤维素、羟甲基纤维素、聚氧亚乙基二醇、醋酸邻苯二甲酸纤维素、邻苯二甲酸羟丙基甲基纤维素和Eudragit(由德国Rohm生产，甲基丙烯酸-丙烯酸共聚物)。
化合物(Ⅰ)或其盐在人体中施用的剂量一般为约1mg-2g/天，优选约10mg-2g/天，更优选约20mg-1g/天，以活性成分计，口服给药体重为50kg的成年病人，可按照目标疾病、给药路线、被治疗个人的年龄和疾病的严重性来改变。
当化合物(Ⅺ)或其盐对人体施用时，它可单独或与适合的药理上可接受的载体，赋形剂和稀释剂一起制成药物组合物以口服或口服的方式安全施用与上述化合物(Ⅰ)或其盐基本上相同。
人体中化合物(Ⅺ)或其盐的剂量与化合物(Ⅰ)或其盐的基本上相同。
当化合物(ⅩⅪ)或其盐施用于人体时，它可以单独或与适合的药理上可接受的载体、赋形剂和稀释剂一起制成药物组合物以口服或非口服的方式安全地施用就像上述化合物(Ⅰ)或其盐的情况那样。
化合物(ⅩⅪ)或其盐在人体中的剂量与上述化合物(Ⅰ)或其盐的基本上相同。
在下文中，通过下述的参考实施例，工作实施例和制备实施例更详细地描述本发明，但不是限制本发明。百分比(%)是以重量/体积的百分比，除非另有说明。混合溶剂的混合比的数字以体积计。
使用Bruker AC-300光谱仪测量NMR光谱。对13C-NMR光谱测定法，使用的内标物是二噁烷(δ69.5ppm)和在重水中的3-(三甲基甲硅烷基)丙酸-d4钠盐，而对1H-NMR光谱测定法，使用的内标物是在其它溶剂中的四甲基硅烷。全部δ值以ppm表示。在本说明书中所用的符号意义如下Q四价碳;CH次甲基;CH2亚甲基;CH3甲基;s单线;d双重线;t三重线;q四重线;dd双重双重线;dt双重三重线;ddd双重双重双重线;ddt双重双重三重线;m多重线;br宽线;CDCl3;氘代氯仿;DMSO-d6氘代二甲基砜;D2O重水。
参考例1人肾起源的组织蛋白酶LcDNA的克隆为了通过聚合酶链反应(PCR)方法放大人体组织蛋白酶cDNA，按照报道的肾起源的组织蛋白酶L的基本顺序[S.Gal和M.M.Gottesman，Biochemical Journal，Vol，253，P.303(1988)]合成了如下的四种引物有义引物1号5′-TTTTCAGGGGGCAGTAAGAT-3′有义引物2号5′-pCCGGATCCGGCTTTTTAGGATTGGTCTA-3′反义引物3号5′-GGGGGCTGGTAGACTGAAGA-3′反义引物4号5′-pCCGGATCCATTCCTCCCATGCATGCGCC-3′
将3μl人肾cDNA基因库λgtll(CLONTECH Laboratories Inc.)的溶液与50μl蒸馏水混合。在95℃保温培养5分钟后，该混合物立即在冰中冰却，加入两种引物(上述的1号和3号，各50pmol)，PCR在由Cetus/Perkin-Elmer供给的试剂盒说明书手册的直接指导下进行，其中在94℃一分钟、55℃两分钟和72℃三分钟条件下，在50个循环中重复发生一系列反应。将两种其它引物(2号和4号，各50pmol)加入反应物，PCR以上述相同的方式进行。PCR产物通过在1.2%琼脂糖凝胶上的电泳法分离;在人肾起源的组织蛋白酶L基本顺序的预期大小(1132bp)的相应位置上看到放大的DNA断片。这种DNA断片从凝胶中重新找到并亚克隆到质粒媒介物pBluescriptRⅡSK+(由STRATAGENE)中。cDNA部分的基本顺序由二脱氧核糖苷合成链测定法[J.Messing等，Nucleic Acid Research，9，309(1981)]测定。测定结果证明与所报道的顺序相同。含这种cDNA断片的质粒命名为pHCL-5。
参考例2在Escherichia coli MM294(DE3)中人体组织蛋白酶L的表达参考例1的cDNA用限制酶EcoRI分裂，而798bp断片(它编码部分人体组织蛋白酶L前体以及整个成熟成年人组织蛋白酶L)被重新找到。用BamHI连接剂(5′-pCCCGGATCCGGG-3′)将该断片的两端连接，连接产物插入质粒的媒介物pET-3c，用于Escherichia coli中的表达[Methods in Enzymology，ed.D.V.Goeddel，Vol.185，P.68，Academic Press(1990)]。这样制得的质粒命名为pET-HClα.Escherichia coli MM294(DE3)在T7起动因子[Methods in Enzymology，Vol.185，P.60(1990)]存在下，用pET-HClα转化，以表达人体组织蛋白酶L。培养这样得到的Escherichia coli转化物[寄生该质粒pTBN-HCLneo的Escherichia coli JM109/pTBN-HCLneo自1992年6月12日起在Institute for Fermentation，Osaka(IFO)以保藏号IFO 15341进行保藏，自1992年6月22日起，在National Institute of Bioscience and Human-Technology(NIBH)，Agency of Indnstrial Science and Technology，Ministry of International Trade and Industry以保藏号FERMBP 3897进行了保藏]，而细胞由超声波分裂，并经受SDS-PAGE;在30KDal附近，出现单一带，与人体的组织蛋白酶L相对应。由于表达的产物生成了内含体，因此人体组织蛋白酶L从超声分裂的转化物的沉淀部分得到了初步地纯化。
参考例3重组人体组织蛋白酶L抗血清的制备参考例2中描述的部分纯化的重组人体组织蛋白酶L与等量的Freund′s完全辅剂混合，约1ml接种到兔子上。此后，部分纯化的人体组织蛋白酶L和等量的Freund′s不完全辅剂的混合以10天的间隔分三次注射，在最后一次注射7天后收集血液。得到的血液在37℃静置30分钟，然后在4℃过夜，此后，离心分离就得到了人体组织蛋白酶L抗血清。
参考例4在动物细胞中用于表达人体组织细胞L基因的重组DNA的制备参考例1中描述的质粒pHCL-5在用限制酶BamHI消化后，人体组织蛋白酶LcDNA的断片通过琼脂糖凝胶电泳法重新得到。此后，这种cDNA断片通过T4DNA连结酶和ATP的作用插到媒介物pTB551的限制酶BglⅡ-位点，用于在运动细胞中[通过从EcoRⅠ位点转换到质粒pTB389中的BglⅡ位点来制备。由Ono等in Science，Vol.236，P.1116(1989)描述]暂时的表达，得到表达质粒pTB-HCL。MuLV-LTR插入限制酶Hin dⅢ和pTB-HCL的ClaⅠ位置之间，就得到了表达质粒pTBN-HCL。
参考例5在动物细胞中用于表达人体组织细胞L基因的重组DNA的制备为了得到稳定表达人体组织蛋白酶L的动物细胞系，将耐药物的标记物新基团以下述方法插入参考例4中描述的媒介物pTBN-HCL;首先，含SV40早期起动因子和新基团的断片插入限制酶ClaⅠ和质粒pTBN-HCL的SaⅡ位置之间，就得到质粒pTBN-HCLneo。
参考例6动物细胞中人体组织蛋白酶L基因的表达利用参考例5中描述的质粒(pTBN-HCLneo)，小鼠的骨髓瘤Sp2/0细胞进行如下转化在补进5%胎腓肠血清FCS(5%FCS/ASF介质)的ASF104培养基中培养的Sp2/0细胞悬浮在磷酸盐-缓冲盐水(PBS)(-)中[与Dullbecco's PBS相同，但是去掉了CaCl2和MgCl2]，调整为1×107细胞/ml。将这种细胞悬浮液500μl注入比色杯，加入10μg的上述质粒DNA，该混合物在冰上静置5分钟。这种液体在125μF和300V的基因脉冲器(由Bio-Rad Laboratories生产)上脉动，然后再在冰上静置10分钟。将这种液体转移到10ml 5% FCS/ASF104培养基中并在37℃5%CO2存在下培养。48小时后，该培养物转移到一选择培养基(5%FCS/ASF104培养基，含200μg/mlG418)上，并在24-井板上培养二周。形成许多菌落，其中的每一个转移到含200μg/ml G418的ASF104培养基中培养，随后，该培养物的上清液，利用参考例3制备的人体组织蛋白酶L的抗血清进行蛋白质印迹技术分析。响应于该抗血清，出现了对应于分子量约为40000-30000和低分子量的独特的谱带;从分子量方面来估计，它们和人体组织蛋白酶L的前体及其产物相同。按照A.J.Barrett和H.Kirschke的方法[Methods in Enzymology，Vol.80，P.535(1981)]，检测培养物上清液对组织蛋白酶的活性;检测人体组织蛋白酶L的活性。
这些发现证实，得到了表达组织蛋白酶L的小鼠骨髓瘤细胞的转化细胞，它被命名为小鼠骨髓瘤Sp-HCL26。
参考例7人体组织蛋白酶的纯化在参考例6中得到的显示出组织蛋白酶L良好表达的菌株(用质粒pTBN-HCLneo转化的小鼠骨髓瘤S-HCL26自1992年6月16日起，以保藏号为IFO50371保藏在InstituteforFermentation，以及自1992年6月24日起，以保藏号FERMBP3902保藏在NationalInstituteofBioscience和Human-Techology(NIBH)、AgencyofIndustrialScienceandTechnology，MinistryofInternationalTradeandIndustry)，在20ml补充了10%FCS和200μg/mlG418的ASF104介质中培养，此后，转移到无血清选择的培养基(ASF104培养基，补充了200μg/mlG418)中，并培养5天。将培养物的上清液置于CM-SephadexC-50(25×4.4cm)柱上，该柱用缓冲剂A(20mMNaAC、1mMEDTA，pH5.5)洗涤，随后用浓度梯度为0-1M的NaCl洗提，在NaCl浓度的0.4M附近，洗提人体组织蛋白酶L。将这部分置于FPLC系统(由Pharmacia生产)的Mono S(HR5/5)柱上，随后清洗柱，以上述相同方式洗提人体组织蛋白酶L。浓缩在NaCl浓度为0.36M附近洗提出的人体组织蛋白酶L部分，就得到纯化的标准制剂。
参考例8(2S，3S)-乙基氢反式-环氧琥珀酸酯将15.1g如在TetrahedronVol，36，P.87(1980)中描述的(2S，3S)-反式-环氧琥珀酸二乙酯溶解在500ml乙醇后，在冰冷却条件下，加入80.3ml1N的NaOH溶液，随后搅拌2小时。向该反应混合物中加入100ml水，随后浓缩。在浓缩物调pH2.5后，加入NaCl至饱和，接着用150ml×6的乙酸乙酯萃取。乙酸乙酯层用100ml×4的饱和盐水洗涤，然后在无水硫酸钠上脱水、浓缩，就制得无色油状的11.6g标题化合物(得率90%)。
1HNMRδppm(CDCl3)1.33(3H，t，J＝7.2Hz)，3.71(1H，d，J＝1.7Hz)，3.72(1H，d，J＝1.6Hz)，4.27(1H，dd，J＝7.1，10.8Hz)，4.31(1H，dd，J＝7.2，10.8Hz)
参考例9(2R，3R)-甲基氢反式-琥珀酸酯在日本专利未审查公开号277373/1987中描述的10.0g(2R，3R)-反式-环氧琥珀酸溶解在100ml乙醇中后，加入2.45ml浓硫酸，接着加热回流7小时。在用饱和的碳酸氢钠溶液中和后，浓缩反应混合物并使其在乙酸乙酯-水之间分配。乙酸乙酯层用2%的NaHCO3溶液、水和饱和盐水洗涤，然后在无水硫酸钠上脱水并浓缩，就制得10.4g无色油状的(2R，3R)-反式-环氧琥珀酸二乙酯(得率73%)。这种物质溶于500ml甲醇后，在冰冷条件下加入53.2ml 1N NaOH溶液，接着搅拌2小时。在反应混合物浓缩和用乙醚(50ml×2)洗涤后，调节pH2.0，此后加入NaCl至饱和，随后用(200ml×5)乙酸乙酯萃取。乙酸乙酯层用水和饱和盐水洗涤后，在无水硫酸钠上脱水和浓缩，就制得无色油状的6.27g标题化合物(得率74%)1H NMR δppm(CDCl3)3.73(1H，d，J＝1.6Hz)，3.74(1H，d，J＝1.6Hz)，3.84(3H，3)，8，74(1H，br s)参考例10N-乙酰基-N′-Z-1，4-二氨基丁烷1.10gN-Z-1，4-二氨基丁烷(如Hoppe-Seylers′ZeitschriftPhysiologischeChemieVol.349，P.251(1968)所描述)溶于5ml吡啶后，在冰冷却的条件下，加入10ml乙酸酐和5ml二氯甲烷，接着在室温下搅拌24小时。该反应混合物在减压下浓缩至干。加入乙酸乙酯后，生成的溶液用饱和盐水洗涤，然后在无水硫酸钠上干燥，随后用硅凝胶色谱法(100ml)用洗提液(甲醇主要添加乙酸乙酯)洗提，从用0-20%(V/V)甲醇洗提的部分中得到0.95克(得率73%)的标题化合物。
1H NMRδppm(CDCl3)1.44-1.60(4H，m)，1.96(3H，s)，3.20-3.35(4H，m)，4.95(1H，br)，5.09(2H，s)，5.77(1H，br)，7.28-7.40(5H，m)参考例11主要的培养肉汤的制备生长在马铃薯-葡萄糖琼脂斜面培养基上的曲霉FL-47958菌株接种到40ml吟2%葡萄糖、3%可溶性淀粉、1%大豆粉、0.3%玉米浸液、0.5%胨、0.3%NaCl和0.5%CaCO3的种培养基(pH 7.0)的200ml锥形瓶中，在28℃在一往复式振荡器上培养48小时。将这种培养肉汤1ml转移到40ml含5%糊精、3%玉米浸液、0.5%多胨、1%CaCl2和0.5%CaCO3(pH 7.0)的主要培养基的200ml锥形瓶中，在24℃在一旋转振荡器上培养5天，得到主要培养基肉汤。
参考例12TAN-1868-钠盐使用过滤器(HyfloSuperCel，由Johns-ManvilleProducts，USA)将参考例11中得到的3.3L培养肉汤过滤。在调节pH为7.0后，滤液用DiaionHP-20(200ml)进行柱色谱法分离、用600ml水清洗后，用1000ml50%(V/V)甲醇水溶液洗提。洗提液在减压下浓缩至600ml，通过用AmberliteIRA-68(Cl型，160ml)装填的离子交换柱，用500ml水洗涤，然后用800ml1M盐水洗提。洗提液进行DiaionHP-20(50-100目，150ml)的柱色谱法分离，用300ml水清洗，随后用300ml水和300ml20%(V/V)的甲醇水溶液洗提。洗提液浓缩，通过用QAE-SephadexA-25(Cl型，100ml)装填的离子交换柱，用300ml水清洗，然后用0.05M盐水洗提。在pH调到7.1后，活性部分(400-600ml)用DiaionHP-20(50-100目，50ml)离子交换柱脱盐，得粗粉末52mg。这种粗粉末用来进行制备性HPLC[columnYMC-Pack，D-ODS-5(S-5120A)分离;移动相为9%(V/V)乙腈/0.01M磷酸盐缓冲液(pH6.3);流速10ml/分]。收集在分析HPLC中的单峰处表明的部分，并浓缩，然后用Diaion HP-20(50-100目，25ml)柱脱盐。洗提液浓缩并冷冻干燥，得到N-乙酰基-N'-｛N-(2S，3S)-3-反式-羧环氧乙烷-2-羰基]-L-亮氨酰｝-1，5-二氨基戊烷-钠盐(TAN-1868-钠盐)(化合物95;27mg)1)外观白色粉末2)旋光度+17°(c0.53，水，25℃)3)分子量m/z394(M+H)+，416(M+Na)+(SI-质谱)4)元素分析(%，假设1.5mol水)实测值C，48.97;H，7.73;N，10.17;Na，5.70计算值C，48.57;H，7.43;N，9.99;Na，5.475)分子式C17H28N3O6Na
6)水中的UV光谱末端吸收7)IR光谱(KBr片，主要吸收显示，波数cm-1，

图15)3290、2940、1650、1560、1440、1390、1300、1260、1100、9008)13CNMR 光谱(75Mz，在重水中，δppm，图16)176.9(Q)，176.8(Q)，176.6(Q)，172.5(Q)，57.3(CH)，55.8(CH)，55.6(CH)，42.8(CH2)，42.2(CH2)，42.1(CH2)，30.9(CH2)，30.8(CH2)，27.3(CH)，26.2(CH2)，25.0(CH3)，24.8(CH3)，23.7(CH3)9)着色反应阳性;肽反应，磷钼酸反应阴性;水合茚三酮反应、Sakaguchi反应、Ehrlich反应10)高性能液相色谱(HPLC)柱YMC-Pack A-312，ODS移动相10%(V/V)乙腈/0.01M磷酸盐缓冲液(pH6.3)流速2.0ml/分检测214nm保留时间9.2分11)薄层色谱(TLC)载体硅胶60F254(由德国Merck生产)展开溶剂(以体积计)正-丁醇HAc∶水(2∶1∶1)Rf值0.64
例1主要培养肉汤的制备将生长在马铃薯-葡萄糖琼脂斜面培养基上的Chaetomium globosum FL-41927菌株接种到500ml的含2%葡萄糖、3%可溶性淀粉、1%大豆粉、0.3%玉米浸液、0.5%胨、0.3%NaCl和0.5%CaCO3的种子培养基(pH7.0)的2升Sakaguchi锥形瓶中，在28℃于往复式振荡器上培养48小时。这种培养肉汤转移到120升含5%可溶性淀粉、1.5%玉米谷蛋白肉、0.3%啤酒酵母、1%MgSO4、0.7%KH2PO4、2%磷酸氢二钠和0.7%CaCO3(pH不改变)的主要培养基的200升不锈钢罐中。在120升/分的通风条件下，在180转/分和内压为1kg/cm2进行搅拌发酵5天，得到主要的培养肉汤。
例2TAN-1756A和TAN-1756B例1中的培养肉汤使用过滤助剂(Radiolite 600，由Showa Chemical Industry生产)过滤。在调pH至7.0后，190升滤液进行活性炭4升柱色谱分离，用15升水洗涤，然后用8%(V/V)40升的异丁醇水溶液洗提。在调节pH7后，洗提液通过用Amberlite IRA-402(OH型，4升)装填的柱，用15升水清洗，然后用40升1M盐水洗提。在调pH至7.0后，洗提液用Diaion HP-20(10升)的柱色谱法分离，用30升水洗涤后，用40升50%(V/V)的甲醇水溶液洗提。洗提液在减压下浓缩，通过用Amberlite IRA-402(Cl型，500ml)装填的柱，用1升水洗涤。流出液与洗涤液合并，接着浓缩并冷冻干燥，得到11.4g粗粉末。
将上述得粗粉末溶于20ml水中，然后用微晶纤维素(Funacel，500ml)柱色谱，用顺序洗提液乙腈1升、乙腈∶水[90∶10(1.5升，3-5份)、85∶15(2.5升，6-10份)、80∶20(3升，11-16份)、70∶30(1.5升，17-19份)]进行分离提纯，得到500ml，将其分成三份9-12号、13-16号和17-19号。在浓缩后，每份冷冻干燥，得到3.13g粉末Ⅰ、2.74g粉末Ⅱ和1.98g粉末Ⅲ，均含TAN-1756A和B。此外，粉末Ⅱ进行微晶纤维素(Funacel，200ml)柱色谱提纯，用顺序洗提液乙腈400ml、乙腈∶水[90∶10(600ml)、85∶15(1800ml)、80∶20(1000ml)]洗提。用乙腈∶水[85∶15(800-1800ml)]洗提的部分浓缩并冷冻干燥，得到粉末Ⅳ1.56g，含TAN-1756A。另外，用乙腈∶水[80∶20(0-800ml)]洗提的部分浓缩;通过过滤收集生成的结晶，得到N-{N-[(2S，3S)-3-反式-羧环氧乙烷-2-羰基]-L-酪氨酰｝-1，4-二氨基丁烷[TAN-1756B(化合物2)]的结晶239mg。浓缩母液。然后冷冻干燥，得到含TAN-1756B的粉末Ⅴ(659mg)。
将粉末Ⅰ和Ⅲ合并在一起，用如上所述的微晶纤维素柱色谱的相同方法，进行两个循环的分离提纯，得到含TAN-1756A的粉末Ⅵ(2.6g)和含TAN-1756B的粉末Ⅶ(361mg)。
利用均含TAN-1756A的粉末Ⅳ和Ⅵ进行制备HPLC[柱YMC-Pack，S-363-15，ODS;移动相5%(V/V)乙腈水溶液;流速20ml/分]的分离，收集在分析HPLC中的显示单峰的部分，浓缩后冷冻干燥，得到181mg粉末状的N-{N-[(2S，3S)-3-反式-羧环氧乙烷-2-羰基]-L-苯丙氨酰基｝-1，4-二氨基丁烷[TAN-1756A(化合物1)｝。
利用均含TAN-1756B粉末Ⅴ和Ⅶ进行制备HPLC[柱YMC-Pack，S-363-15，ODS;移动相2%(V/V)乙腈水溶液;流速20ml/分];分离提纯;收集在分析HDLC中显示单峰的部分，浓缩并通过过滤收集生成的结晶，得到(307mg)的结晶状的TAN-1756B(化合物2)。
TAN-1756A1)外观白色粉末2)旋光度+53°(c0.50，0.1N氢氯酸，25℃)3)分子量m/z350(M+H)+，(SI-质谱)4)元素分析(%，假设1.5mol水)实测值C，54.46;H，6.40;N，10.87计算值C，54.25;H，6.96;N，11.165)分子式C17H23N3O56)水中的UV光谱最大;257nm(ε300，肩峰)7)IR光谱(在KBr片，主要吸收显示，波数图1)3280、3080、2930、1650、1600、1560、1450、1390、1310、1240、890、7008)13CNMR光谱(75Mz，重水中，δppm，图2)176.5(Q)，175.4(Q)，172.4(Q)，139.2(Q)，132.1×2(CH)，131.7×2(CH)，130.2(CH)，58.2(CH)，57.3(CH)，55.7(CH)，42.0(CH2)，41.4(CH2)，39.9(CH2)，28.2(CH2)，27.0(CH2)
9)着色反应阳性水合茚三酮反应、肽反应，磷钼酸反应阴性Sakaguchi反应、Ehrlich反应10)高性能液相色谱(HPLC)柱YMC-Pack A-312，ODS移动相5%(V/V)乙腈/0.01M磷酸盐缓冲液(pH6.3)流速2.0ml/分检测214nm保留时间15.5分11)薄层色谱(TLC)载体硅胶60F254(由德国Merck生产)展开剂正-丁醇∶乙酸∶水(2∶1∶1)(体积)Rf值0.49TAN-1756B1)外观无色结晶2)熔点116-118℃3)旋光度+60°(c0.53，0.1N氢氯酸，25℃)4)分子量m/z 366(M+H)+，(SI-质谱)5)元素分析(%，假设0.5mol水)实测值C，54.56;H，6.37;N，11.30计算值C，54.54;H，6.46;N，11.226)分子式C17H23N3O67)水中的UV光谱最大;221nm(ε10，400)，273nm(ε1300)
8)IR光谱(在KBr片，主要吸收显示，波数cm-1图3)3280、3090、2950、1660、1650、1610、1560、1520、1440、1390、1270、1240、1170、900、7009)13CNMR光谱(75Mz，重水中，δppm，图4)176.5(Q)，175.5(Q)，172.4(Q)，157.8(Q)，133.5×2(CH)，130.7(Q)，118.6×2(CH)，58.5(CH)，57.2(CH)，55.7(CH)，42.0(CH2)，41.4(CH2)，39.0(CH2)，28.2(CH2)，27.0(CH2)10)着色反应阳性水合茚三酮反应、肽反应，磷钼酸反应阴性Sakaguchi反应、Ehrlich反应11)高性能液相色谱(HPLC)柱YMC-Pack A-312，ODS移动相5%(V/V)乙腈/0.01M磷酸盐缓冲液(pH6.3)流速2.0ml/分检测214nm，254nm保留时间5.2分12)薄层色谱(TLC)载体硅凝胶60F254(由德国Merck生产)展开剂正-丁醇∶乙酸∶水(2∶1∶1)(体积)Rf值0.41例3主要培养肉汤的制备将生长在马铃薯-葡萄糖琼脂斜面培养基上的Tolypocladiumcylindrosporum FL-43974菌株接种到500ml的含2%葡萄糖、3%可溶性淀粉、1%豆粉、0.3%玉米浸液、0.5%胨、0.3%NaCl和0.5%CaCO3的种子培养基(pH7.0)的2升Sakaguchi锥形瓶中，并在往复式振荡器上在28℃培养48小时。将500ml的这种培养肉汤转移到120升含5%糊精、3%玉米浸液、0.5%胨、1%CaCl2、0.5%CaCO3(pH 7.0)的主培养基的200升不锈钢罐中。在24℃、通风120升/分、180转/分和内部压力为1kg/cm2的条件下发酵5天，制得主要培养基肉汤。
例4TAN-1854A-氢氯化物和TAN-1854B-氢氯化物例3制备的225升培养肉汤利用过滤助剂(Radiolite 600)过滤。pH值调到7.0后，218升滤液进行活性炭(8升)的柱色谱分离，用24升水洗涤后，用80升8%(V/V)异丁醇水溶液洗提。洗提液在减压下浓缩，通过用Amberlite IRC-50(H型，14升)的离子交换柱，用42升水洗涤后，用70升1M盐水洗提。在pH值调到7.0后，洗提液进行DiaionHP-20(30升)的柱色谱分离提纯，用90升水洗涤后，用90升50%(V/V)甲醇/0.01M氢氯酸洗提。在pH值调到7.0后，洗提液在减压下浓缩，并进行DiaionHP-20(100-200目，600ml)柱色谱分离提纯，用900ml水洗涤后，接着用900ml水、820ml50%(V/V)的甲醇水溶液和900ml50%(V/V)甲醇/0.005N氢氯酸洗提。洗提液浓缩，通过用CM-Sephadex C-25(Na型，300ml)装填的离子交换柱，用900ml水洗涤，将其洗提后，用0.05M盐水分馏。生成的部分分成两组联合的部分主要含TAN-1854A部分(2.4-3.0L)和含TAN-1854A与TAN-1854B(3.0-3.9L)的部分。各部分用DiaionHP-20(100-200目)脱盐。洗提液浓缩并冷冻干燥，就得到含TAN-1854A的粉末状物质251mg和其它的含TAN-1854A与TAN-1854B的259mg粉末状物质。
含TAN-1854A和TAN-1854B的257mg粉末状物质进行制备HPLC(柱YMC-Pack，S-363-15，ODS;移动相1-3%(V/V)乙腈/0.02M磷酸盐缓冲液(pH3.0);流速20ml/分]。该洗提液分馏成两部分在分析HPLC中一部分显示TAN-1854A单峰[部分Ⅰ]，而另一部分在分析HPLC中显示TAN-1854B单峰[部分Ⅱ]。部分(Ⅱ)通过Amberlite IRA-402(Cl型，40ml)的离子交换柱，用40ml水洗涤。流出物与洗涤液合并，该混合物浓缩并用Diaion HP-20(100-200目，50ml)的柱脱盐。洗涤液浓缩后冷冻干燥，得到99mg N-｛N-[(2S，3S)-3-反式-羧环氧乙烷-2-羰基]-L-酪氨酰｝-N-(3-氨基丙基)-1，4-二氨基丁烷的-氢氯化物(TAN-1854B-氢氯化物)(化合物4)。
含248mg TAN-1854A粉末进行制备HPLC[柱YMC-Pack，S-363-15，ODS;移动相3%(V/V)乙腈/0.02M磷酸盐缓冲液(pH3.0);流速20ml/分]的分离;收集在分析HPLC中显示单峰的部分。该部分与上述的部分(Ⅰ)合并，该混合物通过Amberlite IRA-402(Cl型，100ml)的柱分离提纯后，用100ml水洗涤。流出物与洗涤液合并，该混合物浓缩并用Diaion HP-20(100-200目，50ml)柱脱盐。洗提液浓缩后冷冻干燥，得到143mg的N-｛N-[(2S，3S)-3-反式-羧环氧乙烷-2-羰基]-L-苯丙氨酰基｝-N-(3-氨基丙基)-1，4-二氨基丁烷-氢氯化物(TAN-1854A-氢氯化物)(化合物3)。
TAN-1854A-氢氯化物1)外观白色粉末2)旋光度+43°(c0.52，0.1N氢氯酸，24℃)3)分子量m/z 407(M+H)+，(SI-质谱)4)元素分析(%，假设1mol水)实测值C，51.97;H，7.15;N，12.12;Cl，8.87计算值C，52.11;H，7.22;N，12.15;Cl，7.695)分子式C20H30N4O5·HCl6)水中UV光谱最大;257nm(ε200，肩峰)7)IR光谱(在KBr片中，主要吸收显示，波数cm-1图5)3430、3260、3060、1630、1380、900、750、7008)13CNMR光谱(75Mz，重水中，δppm，TAN-1854A在重水中以两种构象异构体的混合物出现;主要的构象异构体以单峰显示。图6)176.5(Q)，175.5(Q)，171.8(Q)，138.8(Q)，132.4×2(CH)，131.8×2(CH)，130.4(CH)，57.2(CH)，55.6(CH)，54.1(CH)，50.2(CH2)，46.1(CH2)，42.0(CH2)，40.5(CH2)，39.8(CH2)，27.8×2(CH2)，26.9(CH2)9)着色反应阳性水合茚三酮反应、肽反应，磷钼酸反应阴性Sakaguchi反应、Ehrlich反应10)高性能液相色谱(HPLC)柱YMC-PackA-312，ODS
移动相5%(V/V)乙腈/0.01M磷酸盐缓冲液(pH3.0)流速2.0ml/分检测214nm保留时间7.2分11)薄层色谱(TLC)载体硅胶60F254(由德国Merck生产)展开剂正-丁醇∶HAc∶水(2∶1∶1)(体积)Rf值0.20TAN-1854B-氢氯化物1)外观白色粉末2)旋光度+40°(c0.52，0.1N盐酸，24℃)3)分子量m/z 423(M+H)+，(SI-质谱)4)元素分析(%，假设1.5mol水)实测值C，49.25;H，6.92;N，11.44;Cl，8.97计算值C，49.43;H，7.05;N，11.53;Cl，7.305)分子式C20H30N4O6·HCl6)水中的UV光谱最大;221nm(ε10，300)，273nm(ε1，100)7)IR光谱(在KBr片中，主要吸收显示，波数cm-1图7)3430、3260、3070、1620、1520、1380、1240、900、840、8)13CNMR光谱(75Mz，重水中，δppm，TAN-1854B在重水中以两种构象异构体的混合物出现;主要的构象异构体以单峰显示。图8)176.5(Q)，175.7(Q)，171.7(Q)，157.9(Q)，133.8×2(CH)，130.5(Q)，118.6×2(CH)，57.2(CH)，55.6(CH)，54.3(CH)，50.2(CH2)，46.1(CH2)，42.0(CH2)，39.8(CH2)，39.7(CH2)，27.7(CH2)，27.0(CH2)
9)着色反应阳性水合茚三酮反应、肽反应，磷钼酸反应阴性Sakaguchi反应、Ehrlich反应10)高性能液相色谱(HPLC)柱YMC-PackA-312，ODS移动相5%(V/V)乙腈/0.01M磷酸盐缓冲液(pH3.0)流速2.0ml/分检测214nm保留时间2.9分11)薄层色谱(TLC)载体硅胶 60F254(由德国Merck生产)展开剂正-丁醇∶HAc∶水(2∶1∶1)(体积)Rf值0.19例5N-Z-N′-｛N-[(2S，3S)-3-反式-乙氧羰环氧乙烷-2-羰基]-L-苯丙氨酰基｝-1，4-二氨基丁烷在1.00g N-Z-1，4二氨基丁烷和1.31g(由Peptide Institute，Inc.生产)Boc-L-Phe-OH溶于30ml二氯甲烷后，在冰冷却条件下加入669mg HOBT和949mg WSC，接着在室温下搅拌14小时。加入乙酸乙酯200ml后，反应混合物用10%柠檬酸水溶液、水、2%NaHCO3溶液、水和饱和盐水洗涤，然后在无水硫酸钠上脱水。干的产物用硅胶柱色谱法(Kieselgel 60，由德国E.Merck生产，200ml)进行分离，用连续添加了甲醇的氯仿洗提液洗提，从用3%甲醇洗提的部分中得到1.89g N-(Boc-L-苯丙氨酰基)-N′-Z-1，4-二氨基丁烷(得率90%)。向这种化合物加入19ml三氟乙酸(TFA);将该混合物静置2小时，然后浓缩，排除Boc基。将浓缩物溶于50ml二氯甲烷后，就得到如参考例8所述的709mg(2S，3S)-乙基氢反式环氧琥珀酸酯，在冰冷却条件下加入1.25ml三乙胺、599mg HOBT和849mg WSC，接着在室温下搅拌14小时。加入氯仿后，反应混合物用10%柠檬酸、水饱和的NaHCO3溶液、2%NaHCO3溶液、水和饱和盐水洗涤，然后在无水硫酸钠上干燥。干燥的产物进行硅胶色谱柱(200ml)分离，用连续添加了甲醇的氯仿洗提液洗提，从用1-2%(V/V)甲醇洗提的部分中得到980mg白色粉末的标题化合物(化合物5得率48%)。D26+22°(c 0.51.CHCl3)元素分析(对C27H33N3O7·0.6H2O)计算值C，62.08;H，6.60;N，8.04实测值C，61.94;H，6.44;N，8.131H NMRδppm(CDCl3)1.30(3H，t，J＝7.1Hz)，1.41(4H，m)，3.03(2H，m)，3.12(1H，d，J＝1.9Hz)，3.17(4H，m)，3.62(1H，d，J＝1.9Hz)，4.24(2H，m)，4.55(1H，m)，4.85(1H，brs)，5.10(2H，s)，6.00(1H，brs)，6.73(1H，brd，J＝8.0Hz)，7.15-7.38(10H，m)例6N-Z-N′-｛N-[(2S，3S)-3-反式-羧环氧乙烷-2-羰基]-L-苯丙氨酰基｝-1，4-二氨基丁烷900mg的化合物5溶于100ml甲醇后，在冰冷条件下加入1.94ml(1.1当量)的1N氢氧化钠溶液，接着在室温下搅拌3小时。反应混合物浓缩后，加入水。在pH调到2.0后，该混合物用200ml×3的乙酸乙酯萃取。乙酸乙酯层用水和饱和盐水洗涤，在无水硫酸钠上脱水，然后浓缩，得到白色粉末状的标题化合物(化合物6;790mg，得率93%)。
元素分析(对C25H29N3O7·4H2O)计算值C，61.19;H，6.12;N，8.56实测值C，61.24;H，6.00;N，8.751H NMRδppm(DMSO-d6)1.34(4H，m)，2.79(1H，dd，J＝9.5，13.6Hz)，2.93-3.12(5H，m)，3.28(1H，d，J＝1.8Hz)，3.58(1H，d，J＝1.8Hz)，4.50(1H，dt，J＝5.2，8.9Hz)，5.00(2H，s)，7.15-7.40(11H，m)，8.08(1H，t，J＝5.5Hz)，8.59(1H，d，J＝8.6Hz)例7TAN-1756A将化合物6(730mg)溶于50ml甲醇后，加入20ml水和pd/活性炭[10%(W/W)，由，由Engelhard K.K生产，80mg]催化剂，接着在室温下氢气氛围中搅拌2小时。滤掉催化剂后，滤液浓缩并冷冻干燥，得到460mg白色粉末状的TAN-1756A(化合物1，得率87%)。
这种化合物的物化数据与从培养肉汤中得到的化合物的物化数据相同。
例8N-Z-N′-｛O-苄基-N-[(2S，3S)-3-反式-乙氧羰环氧乙烷-2-羰基]-L-酪氨酰基｝-1，4-二氨基丁烷
1.10gN-Z-1，4-二氨基丁烷和2.02g Boc-L-Tyr(Bzl)-OH(由PeptideInstituteInc.生产)以与例5相同的方式缩合在一起，制备3.01gN-(O-苄基-Boc-L-酪氨酰基)-N′-Z-1，4-二氨基丁烷的白色粉末(得率定量)。用TFA排除Boc基后，该粉末与参考例8中得到628mg(2S，3S)-乙基氢反式-环氧琥珀酸酯缩合，得到1.46g白色粉末状的标题化合物(化合物7，得率66%)。D26+25°(c0.57.CHCl3)元素分析(对C34H39N3O8·0.2CHCl3)计算值C，64.02;H，6.16;N，6.55实测值C，63.99;H，6.05;N，6.401H NMRδppm(CDCl3)1.29(3H，t，J＝7.1Hz)，1.41(4H，m)，2.97(2H，m)，3.16(4H，m)，3.20(1H，d，J＝1.9Hz)，3.64(1H，d，J＝1.9Hz)，4.24(2H，m)，4.50(1H，m)，4.88(1H，brs)，5.03(2H，s)，5.09(2H，s)，5.98(1H，brs)，6.73(1H，brd，J＝8.1Hz)，6.91(2H，d，J＝8.7Hz)，7.08(2H，d，J＝8.7Hz)，7.27-7.44(10H，m)例9N-Z-N′-｛O-苄基-N-[(2S，3S)-3-反式-羧环氧乙烷-2-羰基]-L-酪氨酰基｝-1，4-二氨基丁烷1.35g的化合物7以与例6相同的方式用碱水解，得白色粉末状的1.22g标题化合物(化合物8，得率95%)。
元素分析(对C32H35N3O8·0.25H2O)计算值C，64.69;H，6.02;N，7.07实测值C，64.57;H，5.85;N，6.93
1H NMRδppm(DMSO-d6)1.35(4H，m)，2.73(1H，dd，J＝9.5，13.5Hz)，2.91(1H，dd，J＝5.4，13.7Hz)，2.98(4H，m)，3.29(1H，d，J＝1.8Hz)，3.58(1H，d，J＝1.8Hz)，4.44(1H，dt，J＝5.6，8.8Hz)，5.00(2H，s)，5.05(2H，s)，6.91(2H，d，J＝8.6Hz)，7.14(2H，d，J＝8.6Hz)，7.24(1H，t，J＝5.6Hz)，7.26-7.46(10H，m)，8.08(1H，t，J＝5.5Hz)，8.56(1H，d，J＝8.6Hz)例10TAN-1756B1.10g的化合物8以例7相同的方式进行催化还原，排除Z基，此后，用制备的高性能液相色谱[柱，YMC-PackS-363-15I-15ODS;移动相2.5%(V/V)乙腈水溶液;流率20ml/分;检测波长，214nm]纯化。收集主峰的部分，浓缩并冷冻干燥，得306mg白色粉末状的TAN-1756B化合物(化合物2，得率45%)。
该化合物的物化数据与从培养肉汤得到的化合物的相符合。
例11N-Z-N′-｛N-[(2S，3S)-3-反式-乙氧羰环氧乙烷-2-羰基]-D-苯丙氨酰基｝-1，4-二氨基丁烷用如例5相同的方式使1.00gN-Z-1，4-二氨基丁烷和1.31g Boc-D-Phe-OH缩合在一起，得到1.76g白色粉末状的N-(Boc-D-苯丙氨酰基)-N′-Z-1，4-二氨基丁烷(得率83.4%)。用TFA排除Boc基后，粉末与参考例8中得到的622mg(2S，3S)-乙基氢反式-环氧琥珀酸酯缩合，得到990mg白色粉末状的标题化合物(化合物9，得率57%)。D26+19°(c0.56.CHCl3元素分析(对C27H33N3O7·0.2CHCl3)
计算值C，61.01;H，6.25;N，7.85实测值C，60.98;H，6.26;N，8.171H NMRδppm(CDCl3)1.30(3H，t，J＝7.2Hz)，1.34(4H，m)，2.94-3.21(6H，m)，3.51(1H，d，J＝1.8Hz)，3.65(1H，d，J＝1.9Hz)，4.25(2H，m)，4.51(1H，m)，4.81(1H，brs)，5.10(2H，s)，5.74(1H，brs)，6.77(1H，brd，J＝8.4Hz)，7.18-7.37(10H，m)例12N-Z-N′-｛N-[(2S，3S)-3-反式-羧环氧乙烷-2-羰基]-D-苯丙氨酰基｝-1，4-二氨基丁烷用和实施例6相同的方法使化合物9(900mg)碱水解，得到白色粉末状标题化合物(化合物10;810mg，产率95%)。
元素分析(对C25H29N3O7·0.25H2O)计算值C;61.53，H;6.09，N;8.61实测值C;61.67，H;5.97，N;8.751H NMRδppm(DMSO-d6)1.34(4H，m)，2.78(1H，dd，J＝9.3，13.6Hz)，2.93-3.10(5H，m)，3.31(1H，d，J＝1.8Hz)，3.60(1H，d，J＝1.8Hz)，4.48(1H，dt，J＝5.4，8.8Hz)，5.00(2H，s)，7.15-7.40(11H，m)，8.07(1H，t，J＝5.6Hz)，8.68(1H，d，J＝8.5Hz)实施例13N-｛N-[(2S，3S)-3-反-羧基环氧乙烷-2-羰基]-D-苯丙氨酰基｝-1，4-二氨基丁烷用和实施例7相同的方法使化合物10(750mg)受到催化还原，消除Z基团，然后冷冻干燥，得到白色粉状标题化合物(化合物11;510mg)(产率94%)。D26+33°(CO.56，0.1NHCL)元素分析(对于C17H23N3O5·1.5H2O)计算值C;54.25，H;6.96，N;11.16测定值C;54.44，H;6.93，N;11.251H NMRδppm(D2O)1.45(4H，m)，2.87-3.16(6H，m)，3.34(1H，d，J＝2.1Hz)，3.52(1H，d，J＝2.0Hz)，4.49(1H，t，J＝7.9Hz)，7.24-7.42(5H，m)实施例14N-Z-N′-｛N-[(2R，3R)-3-反-甲氧基羰基环氧乙烷-2-羰基]-L-苯丙氨酰基｝-1，4-二氨基丁烷用和实施例5相同的方法，通过TFA消除BOC基团，然后用参照实施例9得到的(2R，3R)-反-环氧琥珀酸甲酯(604mg)与N-(BOC-L-苯丙氨酰基)-N′-Z-1，4-二氨基丁烷(1.65g)缩合，得到白色粉状标题化合物(化合物12;1.12g)，(产率64%)。D26-19°(CO.53，CHCL3)元素分析(对于C26H31N3O7·0.5H2O)计算值C;61.65，H;6.37，N;8.30测定值C;61.78，H;6.03，N;8.591H NMRδppm(CDCl3)1.34(4H，m)，2.94-3.20(6H，m)，3.54(1H，d，J＝1.8Hz)，3.66(1H，d，J＝1.9Hz)，3.79(3H，s)，4.54(1H，m)，4.87(1H，brt，J＝5.5Hz)，5.09(2H，s)，5.90(1H，brs)，6.88(1H，brd，J＝8.0Hz)，7.17-7.37(10H，m)
实施例15N-Z-N′-｛N-[(2R，3R)-3-反-羧基环氧乙烷-2-羰基]-L-苯丙氨酰基｝-1，4-二氨基丁烷用和实施例6相同的方法使化合物12的甲基酯(1.00g)进行碱水解，得到白色粉末状标题化合物(化合物13;970mg)，(产率定量)。
元素分析(对于C25H29N3O7·0.7CHCL3)计算值C;54.43，H;5.28，N;7.41测定值C;54.58，H;5.62，N;7.061H NMRδppm(DMSO-d6)1.34(4H，m)，2.82(1H，dd，J＝9.5，13.5Hz)，2.91-3.04(5H，m)，3.05(1H，m)，3.30(1H，m)，4.43(1H，m)，5.00(2H，s)，7.14-7.40(11H，m)，8.05(1H，t，J＝5.1Hz)，8.29(1H，d，J＝8.4Hz)实施例16N-｛N-[(2R，3R)-3-反-羧基环氧乙烷-2-羰基]-L-苯丙氨酰基｝-1，4-二氨基丁烷用和实施例7相同的方法把化合物13(860mg)进行催化还原，消除Z基团，然后冷冻干燥，得到白色粉状标题化合物(化合物14;450mg)，(产率72%)[α]D25-35°(CO.51，0.1NHCL)元素分析(对于C17H23N3O5·1.5H2O)计算值C;54.25，H;6.96，H;11.16测定值C;54.52，H;7.05，N;11.16
1H NMRδppm(D2O)1.47(4H，m)，2.90-3.16(6H，m)，3.35(1H，d，J＝2.1Hz)，3.53(1H，d，J＝1.9Hz)，4.50(1H，t，J＝7.9Hz)，7.25-7.43(5H，m)实施例17N-Z-N′-｛N-[(2S，3S)-3-反-乙氧基羰基环氧乙烷-2-羰基]-L-色氨酰基｝-1，4-二氨基丁烷用实施例5相同的方法把N-Z-1，4-二氨基丁烷(1.20g)和Fmoc-L-Trp-OH(2.54克，由Peptide Institute Inc.制备)缩合在一起，得到白色粉状的N-(Fmoc-L-色氨酰基)-N′-Z-1，4-二氨基丁烷(3.75g，产率定量)。该粉的一部分(3.50g)溶解在N，N-二甲基甲酰胺(DMF，63ml)，然后加入哌嗪(7.0ml)，接着在室温下搅拌1小时。浓缩反应混合物，而后加入乙酸乙酯(300mt)，然后用0.023N的盐酸水溶液(300ml)进行两次萃取。调节PH为6.0后，用己烷(100ml)洗涤水层6次，随后调节PH至8.0并用乙酸乙酯(200ml)萃取3次。萃取物经无水硫酸钠干燥并浓缩，得到无色油状物质N-(L-色氨酰基)-N′-Z-1，4-二氨基丁烷(2.11g)，(产率93%)。上述产物的一部分(2.00g)溶解在DMF(67ml)中，在冰冷却条件下，加入由实施例8得到的(2S，3S)-反-环氧琥珀酸乙酯(862mg)、HOBT(728mg)和WSC(1.33g)，然后室温下搅拌14小时。浓缩反应混合物，加入乙酸乙酯;分别用10%柠檬酸水溶液、饱和的碳酸氢钠水溶液、2%碳酸氢钠水溶液、水和饱和盐水，洗涤混合物，然后经无水硫酸钠干燥。干燥产物经硅胶柱色谱处理(200ml)，用氯仿洗脱，并连续补加甲醇，从用2%(V/V)甲醇洗脱的部分中得到白色粉状的标题化合物(化合物15;1.83g)，(产率68%)。D25+44°(C 0.56，DMSO)元素分析(对C29H34N4O7·0.25H2O)计算值C，62.75;H，6.32;N，10.18测定值C;62.67，H;6.22，N;10.351H NMRδppm(CDCL3)1.20(4H，m)，1.31(3H，t，J＝7.1Hz)，2.91(1H，m)，3.07(3H，m)，3.26(2H，m)，3.31(1H，d，J＝1.5Hz)，3.65(1H，d，J＝1.9Hz)，4.25(2H，m)，4.65(1H，m)，4.84(1H，brs)，5.15(ZH，S)，5.54(1H，brs)，6.92(1H，d，J＝7.2Hz)，6.97(1H，d，J＝2.3Hz)，7.17(2H，m)，7.30-7.41(6H，m)，7.70(1H，d，J＝7.5HZ)，8.60(1H，brs)实施例18N-Z-N′｛N-[(2S，3S)-3-反-羰基环氧乙烷-2-羰基]-L-色氨酰基｝-1，4-二氨基丁烷化合物15的乙酯(1.73g)通过和实施例6相同的方法进行碱水解，得到白色粉状标题化合物(化合物16;1.77g;产率定量)。
元素分析(对C27H30N4O7·0.8H2O)计算值C;60.39，H;5.93，N;10.43测定值C;60.47，H;6.03，N;10.03
1H NMRδppm(DMSO-d6)1.34(4H，m)，3.00(5H，m)，3.11(1H，dd，J＝5.5，14.6Hz)，3.32(1H，d，J＝1.8Hz)，3.62(1H，d，J＝1.8Hz)，4.52(1H，dt，J＝5.5，8.5Hz)，5.00(2H，s)，6.97(1H，ddd，J＝0.9，6.9，7.9Hz)，7.06(1H，ddd，J＝1.1，6.9，8.2Hz)，7.12(1H，d，J＝2.1Hz)，7.22(1H，t，J＝5.7Hz)，7.26-7.40(6H，m)，7.60(1H，d，J＝7.7Hz)，8.10(1H，t，J＝5.5Hz)，8.56(1H，d，J＝8.4Hz)，10.82(1H，d，J＝2.0Hz)实施例19N-｛N-[(2S，3S)-3-反-羧基环氧乙烷-2-羰基]-L-色氨酰基｝-1，4-二氨基丁烷按和实施例7相同的方法使化合物16(1.67g)进行催化还原以消除Z基团，然后冷冻干燥得到白色粉状标题化合物(化合物17;1.06g);(产率85%)。D25+56°(CO.64，0.1NHCl)元素分析(对C19H24N4O5·1.3H2O)计算值C，55.41;H，6.51;N;13.60测定值C;55.28;H，6.61;N;13.721H NMRδppm(D2O)1.29(4H，m)，2.81(2H，t，J＝7.2Hz)，3.01(2H，m)，3.23(2H，m)，3.24(1H，d，J＝1.7Hz)，3.51(1H，d，J＝1.8Hz)，4.54(1H，t，J＝7.5Hz)，7.16(1H，t，J＝7.4Hz)，7.24(1H，t，J＝7.6Hz)，7.24(1H，s)，7.49(1H，d，J＝8.0Hz)，7.62(1H，d，J＝7.8Hz)实施例20N-Z-N′｛N-[(2S，3S)-3-反-乙氧基羰基环氧乙烷-2-羰基]-L-苯丙氨酰基｝-1，2-乙二胺从参照实施8得到(2S，3S)-反-环氧琥珀酸乙酯(5.00g)溶解在二氯甲烷(300ml)中，并用冰冷却。往此溶液中加入H-Phe-OBzl·TOS(12.0g，由Peptide Institute Inc、制备)、HOBT(4.22g)、WSC(5.99g)和三乙胺(3.74ml)，室温下搅拌14小时。浓缩后，反应混合物溶解在乙酸乙酯中，清洗分别用10%柠檬酸水溶液、水、饱和的碳酸氢钠水溶液、2%碳酸氢钠水溶液、水和饱和盐水，然后经无水硫酸钠干燥。浓缩后，干燥产品进行硅胶柱色谱处理，用己烷洗脱。并连续补加乙酸乙酯，从用-30%乙酸乙酯洗脱的部分中得到白色粉状的N-[(2S，3S)-3-反-乙氧基羰基环氧乙烷-2-羰基]-L-苯丙氨酸苄酯(8.56g，产率77%)[α]D26+55°(CO.51，CHCL3)元素分析(对C22H23NO6)计算值C;66.49，H;5.83，N;3.52测定值C;66.38，H;5.82，N;3.331H NMRδppm(CDCl3)1.29(3H，t，J＝7.1Hz)，3.03(1H，dd，J＝6.6，13.9Hz)，3.16(1H，d，J＝1.9Hz)，3.20(1H，dd，J＝5.9，13.9Hz)，3.62(1H，d，J＝1.9Hz)，4.23(2H，m)，4.87(1H，ddd，J＝6.2，6.3，8.0Hz)，5.18(2H，dd，J＝12.1，20.1Hz)，6.54(1H，d，J＝8.0Hz)，6.97(2H，m)，7.21-7.41(8H，m)此物质的一部分(1.50g)溶解在甲醇(50ml)中，往溶液中加钯/活性碳[10%(W/W)，150mg]，随后在氢气环境中室温搅拌1.5小时。催化剂被过滤掉，浓缩滤液得到白色粉状的N-[(2S，3S)-3-反-乙氧基羰基环氧乙烷-2-羰基]-L-苯丙氨酸(1.11g，产率96%)。
上述粉的一部分(870mg)溶解在DMF(30ml)中，N-Z-1，2-乙二胺(549mg，记载在Hoppe-Seylers′Zeitschrift Physiologische Chemie，39卷，251页(1968)、HOBT(382mg)和WSC(543mg)于冰冷却条件下加入，然后室温下搅拌16小时。浓缩反应混合物后，加入乙酸乙酯(200ml);清洗混合物，分别用10%柠檬酸水溶液、水、饱和碳酸氢钠水溶液、2%碳酸氢钠水溶液、水和饱和盐水，然后经无水硫酸钠干燥。干燥产品经硅胶柱色谱处理，用氯仿洗脱并连续补加甲醇，从用2-3%(V/V)甲醇洗脱的部分中得到白色粉状的标题化合物(化合物18;980mg;产率72%)。D26+24°(CO.55，CHCL3)元素分析(对C25H29N3O7·0.25H2O)计算值C，61.53;H，6.09;N;8.61测定值C;61.76;H，5.99;N;8.711H NMRδppm(CDCl3)1.30(3H，t，J＝7.2Hz)，2.97(1H，dd，J＝7.5，13.7Hz)，3.08(1H，dd，J＝7.3，13.7Hz)，3.13(1H，d，J＝1.8Hz)，3.15-3.40(4H，m)，3.63(1H，d，J＝1.8Hz)，4.23(2H，m)，4.57(1H，dt，J＝7.9，7.5Hz)，5.08(2H，s)，6.48(1H，brs)，6.69(1H，brd，J＝8.1Hz)，7.15(2H，m)，7.22-7.39(8H，m)实施例21N-Z-N′-｛(2S，3S)-3-反-羰基环氧乙烷-2-羰基]-L-苯丙氨酰基｝-1，2-乙二胺化合物18的乙酯(900mg)按和实施例6相同的方法进行碱水解，得到白色粉状的标题化合物(化合物19;860mg;产率96%)。
元素分析(对C23H25N3O7)计算值C，60.65;H，5.53;N;9.23测定值C;60.70;H，5.53;N;9.30
1H NMRδppm(DMSO-d6)2.79(1H，dd，J＝9.8，13.7Hz)，2.98-3.22(5H，m)，3.27(1H，d，J＝1.8Hz)，3.57(1H，d，J＝1.8Hz)，4.49(1H，dt，J＝5.0，9.1Hz)，5.01(2H，s)，7.16-7.40(10H，m)，8.19(1H，t，J＝5.5Hz)，8.59(1H，d，J＝8.6Hz)实施例22N-｛N-[(2S，3S)-3-反-羧基环氧乙烷-2-羰基]-L-苯丙氨酰基｝-1，2-乙二胺按和实施例7相同的方法使化合物19(780mg)进行催化还原消除Z基团，然后冷冻干燥，得到白色粉状标题化合物(化合物20;480mg;产率87%)。27D+50°(CO.57，0.1NHCL)元素分析(对C15H19N3O5·1H2O);
计算值C;53.09，H;62.4，N;12.38测定值C;52.89，H;6.48，N;12.471H NMRδppm(D2O)3.02(3H，m)，3.16(1H，d，J＝1.9Hz)，3.18(1H，m)，3.41(2H，m)，3.49(1H，d，J＝1.9Hz)，4.60(1H，dd，J＝6.9，8.7Hz)，7.23-7.43(5H，m)实施例23N-Z-N′-｛N-[(2S，3S)-3-反-乙氧基羰基环氧乙烷-2-羰基]-L-苯丙氨酰基｝-1，8-二氨基辛烷根据Hoppe-Seylers′Zeitschrift Physiologische Chemie(349卷，251页〈1968〉)中记载的方法，从1，8-二氨基辛烷制备N-Z-1，8-二氨基辛烷(1.09g)并和N-[(2S，3S)-3-反-乙氧基羰基环氧乙烷-2-羰基]-L-苯丙氨酸(1.11g)按和实施例20相同的方法缩合在一起，得到白色粉状的标题化合物(化合物21;1.54g;产率76%)。D26+18°(CO.59，CHCL3)元素分析(对C31H41N3O7·0.25H2O)计算值C;65.07，H;7.31，N;7.34测定值C;65.27，H;7.28，N;7.351H NMRδppm(CDCl3)1.15-1.41(12H，m)，1.30(3H，t，J＝7.2Hz)，1.49(2H，m)，3.03(2H，m)，3.13(1H，d，J＝1.9Hz)，3.17(4H，m)，3.62(1H，d，J＝1.9Hz)，4.24(2H，m)，4.53(1H，dt，J＝7.8，7.6Hz)，4.79(1H，brs)，5.09(2H，s)，5.65(1H，brs)，6.73(1H，brd，J＝7.9Hz)，7.17(2H，m)，7.23-7.38(8H，m)实施例24N-Z-N′-｛N-[(2S，3S)-3-反-羧基环氧乙烷-2-羰基]-L-苯丙氨酰基｝-1，8-二氨基辛烷化合物21的乙酯(1.44g)按和实施例6相同的方法进行碱水解，得到白色粉状的标题化合物(化合物22;1.41g;产率定量)。
元素分析(对C29H37N3O7·0.25H2O)计算值C;64.01，H;6.95，N;7.72测定值C;63.96，H;6.98，N;7.701H NMRδppm(DMSO-d6)1.22(8H，m)，1.36(4H，m)，2.80(1H，dd，J＝9.2，13.5Hz)，3.00(5H，m)，3.29(1H，d，J＝1.8Hz)，3.58(1H，d，J＝1.8Hz)，4.50(1H，dt，J＝5.4，8.9Hz)，5.00(2H，s)，7.16-7.40(10H，m)，8.07(1H，t，J＝5.6Hz)，8.61(1H，d，J＝8.6Hz)
实施例25N-｛N-[(2S，3S)-3-反-羧基环氧乙烷-2-羰基]-L-苯丙氨酰基｝-1，8-二氨基辛烷化合物22(1.30g)按和实施例7相同的方法进行催化还原以消除Z基团，然后冷冻干燥得到白色粉状标题化合物(化合物23;872mg;产率90%)。D27+46°(C O.53，0.1N HCL)元素分析(对C21H31N3O5·0.25H2O)计算值C;61.52，H;7.74，N;10.25测定值C;61.75，H;7.60，N;10.081H NMRδppm(D2O)1.33(10H，m)，1.64(2H，m)，2.98(2H，m)，3.10(4H，m)，3.22(1H，d，J＝1.9Hz)，3.50(1H，d，J＝2.1Hz)，4.53(1H，t，J＝7.8Hz)，7.24-7.42(5H，m)实施例26N-甲基-N′｛N-[(2S，3S)-3-反-乙氧基羰基环氧乙烷-2-羰基]-L-苯丙氨酰基｝哌嗪通过和实施例20相同的方法把N-[(2S，3S)-3-反-乙氧基羰基环氧乙烷-2-羰基]-L-苯丙氨酸(1.50g)和N-甲基哌嗪(651μl)缩合起来，得到无色油状标题化合物(化合物24;1.59g;产率84%)。D26+30°(C O.59，CHCL3)元素分析(对C20H27N3O5·0.22CHCL3)计算值C;58.42，H;6.60，N;10.11测定值C;58.31，H;6.60，N;10.35
1H NMRδppm(CDCl3)1.31(3H，t，J＝7.2Hz)，1.90(1H，m)，2.21(3H，s)，2.23(1H，m)，2.30(2H，m)，2.97(2H，m)，3.04(1H，m)，3.32(1H，d，J＝1.9Hz)，3.36(1H，m)，3.51(1H，m)，3.62(1H，d，J＝1.9Hz)，3.66(1H，m)，4.25(2H，m)，5.13(1H，ddd，J＝6.4，8.2，8.2Hz)，6.99(1H，brd，J＝8.2Hz)，7.15(2H，m)，7.22-7.34(3H，m)实施例27N-甲基-N′｛N-[(2S，3S)-3-反-羧基环氧乙烷-2-羰基]-L-苯丙氨酰基｝哌嗪化合物24的乙酯(1.50g)按和实施例6相同的方法进行碱水解并浓缩。加水并调节PH为6.5，然后用DiaionHP-20(30ml，由Mitsubishi Chemical Industries制造)对混合物进行柱色谱处理，水洗，而后用50%(V/V)甲醇水溶液洗脱。浓缩洗脱物，冷冻干燥，得到白色粉状的标题化合物(化合物25;1.17g;产率84%)。D27+78°(C O.58，0.1N HCL)元素分析(对C18H23N3O5·1.5H2O)计算值C;55.66，H;6.75，N;10.82测定值C;55.52，H;6.89，N;10.761H NMRδppm(D2O)2.12(1H，m)，2.64(3H，s)，2.78(1H，m)，3.07(4H，m)，3.36(1H，d，J＝1.8Hz)，3.49(1H，m)，3.53(1H，d，J＝1.8Hz)，3.60(2H，m)，3.85(1H，m)，5.07(1H，dd，J＝6.7，9.2Hz)，7.27-7.47(5H，m)实施例28N-｛N-[(2S，3S)-3-反-乙氧基羰基环氧乙烷-2-羰基]-L-苯丙氨酰基｝吗啉按和实施例20相同的方法把N-[(2S，3S)-3-反-乙氧基羰基环氧乙烷-2-羰基]-L-苯丙氨酸(1.00g)和吗啉(313μl)缩合起来，得到无色油状的标题化合物(化合物26;1.09g;产率89%)。D25+41°(C 0.64，CHCL3)元素分析(对C19H24N2O6·0.35CHCL3)计算值C;55.57，H;5.87，N;6.70测定值C;55.48，H;5.85，N;6.731H NMRδppm(CDCl3)1.31(3H，t，J＝7.2Hz)，2.99(4H，m)，3.31(1H，m)，3.35(1H，d，J＝1.9Hz)，3.40-3.62(5H，m)，3.63(1H，d，J＝1.9Hz)，4.26(2H，m)，5.10(1H，q，J＝7.6Hz)，6.95(1H，d，J＝8.2Hz)，7.17(2H，m)，7.30(3H，m)实施例29N-｛N-[(2S，3S)-3-反-羧基环氧乙烷-2-羰基]-L-苯丙氨酰基｝吗啉-钠盐化合物26的乙酯(990mg)按和实施例27相同的方法进行碱水解，用树脂脱盐，浓缩并冷冻干燥，得到标题化合物(化合物27;700mg;产率72%)。D25+70°(C 0.63，H2O)元素分析(对C17H19N2O6Na·0.7H2O)计算值C;53.31，H;5.37，N;7.32，Na;6.00测定值C;53.52，H;5.72，N;7.32，Na;6.001H NMRδppm(D2O)2.98(1H，m)，3.06(2H，m)，3.26(1H，m)，3.35(1H，d，J＝2.0Hz)，3.46(3H，m)，3.53(1H，d，J＝2.0Hz)，3.56(2H，m)，3.66(1H，m)，5.07(1H，dd，J＝7.0，8.6Hz)，7.28(3H，m)
实施例30N-乙酰基-N′-｛N-[(2S，3S)-3-反-乙氧基羰基环氧乙烷-2-羰基]-L-苯丙氨酰基｝-1，4-二氨基丁烷由实施例10得到N-乙酰基-N′-Z-1，4-二氨基丁烷(0.94g)溶解在甲醇(32ml)中，加入钯/活性碳[10%(W/W)，94mg]，然后在氢气环境中25℃下搅拌1.5小时。过滤掉催化剂后，浓缩滤液，干燥得到N-乙酰基-1，4-二氨基丁烷(0.47g)。
按和实施例20相同的方法把N-[(2S，3S)-3-反-乙氧基羰基环氧乙烷-2-羰基]-L-苯丙氨酸(1.22g)和N-乙酰基-1，4-二氨基丁烷(0.47g)缩合起来，得到白色粉状的标题化合物(化合物28;0.96g;产率63%)。
元素分析(对C21H29N3O6·0.3H2O)计算值C;59.37，H;7.02，N;9.89，测定值C;59.37，H;6.89，N;9.79，1H NMRδppm(DMSO-d6)1.22(3H，t，J＝7.0Hz)，1.32(4H，m)，1.78(3H，s)，2.79(1H，dd，J＝9.5，14.0Hz)，2.92-3.10(5H，m)，3.42(1H，d，J＝2.0Hz)，3.64(1H，d，J＝2.0Hz)，4.17(2H，m)，4.50(1H，m)，7.16-7.31(5H，m)，7.79(1H，brt，J＝5.5Hz)，8.11(1H，brt，J＝5.5Hz)，8.66(1H，brd，J＝8.5Hz)实施例31N-乙酰基-N′-｛N-[(2S，3S)-3-反-羧基环氧乙烷-2-羰基]-L-苯丙氨酰基｝-1，4-二氨基丁烷-钠盐化合物28的乙酯(950mg)按和实施例27相同的方法进行碱水解，用树脂脱盐，浓缩并冷冻干燥，得到标题化合物(化合物29;858mg;产率92%)。D24+39°(C 0.52，H2O)元素分析(对C19H24N3O6Na·H2O)计算值C;52.90，H;6.07，N;9.74，Na;5.33测定值C;53.02，H;6.36，N;9.84，Na;5.401H NMRδppm(DMSO-d6)1.34(4H，m)，1.78(3H，s)，2.83(1H，dd，J＝10.5，13.5Hz)，2.90(1H，d，J＝2.0Hz)，2.92-3.12(5H，m)，3.24(1H，d，J＝2.0Hz)，4.34(1H，m)，7.16-7.32(5H，m)，8.08(1H，brt，J＝5.5Hz)，8.70(1H，brt，J＝5.0Hz)，9.45(1H，brd，J＝8.0Hz)实施例32TAN-1854A-氢氯化物根据日本专利特许公开号192347/1982描述的方法从3-氨基-1-丙醇和1，4-二氨基丁烷制备N-Z-N′-(Z-3-氨基丙基)-1，4-二氨基丁烷(116mg)，和Boc-L-Phe-OH(118mg，由Peptide Institute，Ine制备)按和实施例5相同的方法缩合起来，得到白色粉状的N-(Boc-L-苯丙氨酰基)-N-(Z-3-氨基丙基-N′-Z-1，4-二氨基丁烷(162mg，产率61%)。此化合物(157mg)的Boc基团用TFA去保护，所得粉和参照实施例8得到的(2S，3S)-反-环氧琥珀酸乙酯(35mg)缩合，得到白色粉状的N-Z-N′-｛N-[(2S，3S)-3-反-乙氧基羰基环氧乙烷-2-羰基]-L-苯丙氨酰基｝-N′-(Z-3-氨基丙基)-1，4-二氨基丁烷(88mg，产率53%)。
此化合物(87mg)按实施例6同样的方法进行碱水解，得到N-Z-N′-｛N-[(2S，3S)-3-反-羰基环氧乙烷-2-羰基]-L-苯丙氨酰基｝-N′-(Z-3-氨基丙基)-1，4-二氨基丁烷(82mg，产率98%)。
此化合物(81mg)溶解在甲醇(7ml)中，加入水(3.5ml)、乙酸(8μl)和钯/活性碳[10%(W/W)，23mg]，室温氢气环境下搅拌1.5小时。过滤掉催化剂后，浓缩滤液，用CM-SephadexC-25(钠型，10ml)进行柱色谱处理，洗脱液用0.05M的盐水。收集主要为TAN-1854A的部分，浓缩，然后用制备HPLC[柱YMC-Pack，D-ODS-5(S-5120A);流动相3%(V/V)乙腈/0.01M磷酸盐缓冲液(PH6.3);流动速率10ml/min]处理。收集分析HPLC中显示TAN-1854A单一峰的部分，并通过以Amberlite IRA-402(氯型，20ml)填充的柱，水洗(20ml)。洗脱液和清洗液混合，浓缩混合物，用DiaionHP-20(100-200目，15ml)脱盐。浓缩洗脱液，然后冷冻干燥，得到TAN-1854A-氢氯化物(化合物3;31mg;产率58%)。
此化合物的物理化学数据和从培养液中得到的化合物的相应数据一致。
实施例33制备TAN-1756A，B，C，D的主培养液生长在土豆-葡萄糖琼脂斜面培养基上的Chaetomium globosum FL-41927菌株接种到2LSakaguchi烧瓶中的含2%葡萄糖、3%可溶淀粉、1%大豆粉、0.3%玉米浸渍液、0.5%蛋白胨、0.3%氯化钠和0.5%碳酸钙的500ml种子培养基上(PH 7.0)，在往复振荡器上28℃下培养48小时。
把500ml培养液转移到200升不锈钢罐中的120升种子培养基(PH 7.0)中。24℃下发酵48小时，通气120升/分钟，搅拌120rpm，内压1kg/cm2。12升此培养液转移到2000升不锈钢罐中的1200升主培养基中，此主培养基含有5%可溶性淀粉、1.5%玉米谷蛋白粉、0.3%啤酒酵母、1%硫酸镁、0.7%磷酸二氢钾、2%磷酸氢二钠和0.7%碳酸钙(PH未调)。28℃下发酵5天，通气1200升/分，搅拌120rpm，内压1kg/cm2，得到主培养液。
实施例34TAN-1756C1/2硫酸化物，TAN-1756D1/2硫酸化物用助滤剂(Radiolite 600)过滤实施例33得到的培养液(1100L)。调节PH为6.8，滤液(1420L)用DiaionHP-20(150L)进行柱色谱处理，水洗(450L)，然后用70%(V/V)甲醇水溶液(750L)洗脱)。在减压下浓缩洗脱液，通过以Amberlite IRA-402(cl型，25L)装填的柱，用水(50L)洗。流出物和清洗液混合，调PH到7，用DiaionHP-20(60L)进行柱色谱处理。用水(180L)清洗柱，再以70%(V/V)甲醇水溶液(120L)洗脱，洗脱液减压下浓缩。在清洗液中，通过HPLC分析检测出TAN-1756B(2.6g)。浓缩物再用DiaionHP-20(100-200目，2L)进行柱色谱处理，柱依次用水(6L)和20%(V/V)甲醇水溶液(6L)充分进行分段脱洗。在流出物和清洗液(0-2L)中，通过HPLC分析检测TAN-1756A(4.3g)。混合用水(2-6L)和用20%(V/V)(0-2L)洗脱的部分，浓缩。通过基本相同的步骤从培养液(1200L)中得到的浓缩物和上述浓缩物混合，得到400ml浓缩物。
由此得到的浓缩物(400ml)用Amberlite IRC-50(钠型，1L)进行柱色谱处理。分别用水(4L)和1M盐水(6L)对柱依次进行分段洗脱。混合用水(1.5-4L)洗脱的部分和用1M盐水洗脱的部分，以DiaionHP-20(500ml)进行柱色谱处理。用水(2L)和50%(V/V)甲醇水溶液(1.5L)清洗柱，然后用50%(V/V)甲醇/0.005MHCL(1L)洗脱。浓缩洗脱液，冷冻干燥，得到含TAN-1756C和D的粗粉(987mg)。
此粗粉(980mg)溶解在水(100ml)中。使溶液通过以CM-sephadex C-25(Na型，80ml)填充的柱，水洗(240ml)，然后用0.05M盐水分段洗脱。所得的部分分成两个混合部分以TAN-1756C(1000-1240ml)为主导的部分和以TAN-1756D(740-1000ml)为主导的部分。每个部分用DiaionHP-20脱盐。浓缩洗脱液，冷冻干燥，得到含TAN-1756C的粉(330mg)和含TAN-1756D的粉(150mg)。
含TAN-1756C(320mg)的粉用制备HPLC[柱，YMC-Pack，S-363-15，ODS;流动相，4%(V/V)乙腈/0.01M磷酸盐缓冲溶液(PH3.0);流速20ml/分钟]处理。收集分析HPLC中有TAN-1756C单一峰的部分，使其通过以Amberlite IRA-402(cl型，100ml)填充的柱，水洗(100ml)。流出物和清洗液混合，混合物浓缩，以Diaion HP-20(30ml)脱盐处理。洗脱液浓缩并冷冻干燥，得到TAN-1756C一氢氯化物(181mg)。TAN-1756C-氢氯化物(178mg)溶解在水(20ml)中，通过以Amberlite IRA-402(SO4型，10ml)填充的柱，然后水(20ml)洗柱。混合流出物和清洗液，浓缩，冷冻干燥，得到TAN-1756C 1/2硫酸化物(化合物30;173mg)。
含有TAN-1756D的粉(145mg)用制备HPLC[柱，YMC-Pack，D-ODS-5;流动相，3%(V/V)乙腈/0.01M磷酸盐缓冲液(PH3.0);流速，10ml/分]处理。收集分析HPLC中显示单一峰的部分，使其通过以Amberlite IRA-402(SO4型，50ml)填充的柱，水洗(90ml)柱。混合流出物和清洗液，浓缩，用Diaion HP-20(15ml)脱盐，浓缩洗脱液，而后冷冻干燥得到TAN-1756D 1/2硫酸化物(化合物31;78mg)。
TAN-1756C1/2硫酸化物1)外观白色粉2)旋光度+39°(C0.51，0.1N HCL，24℃)3)分子量m/z 407(M+H)+，(SI-质谱)4)元素分析1%，(假设1mol水)测定值C，50.27;H，7.00;N，12.05;S，2.95计算值C，50.73;H，7.02;N，11.83;S，3.395)分子式C20H30N4O5·1/2H2SO46)UV光谱水中最大值257nm(ε250，肩峰)7)IR光谱KBr片剂中，主要吸收显示(波数，cm-1)(图9)3430，3280，3060，2950，1650，1550，1450，1380，1250，1120，900，750，6208)13CNMR光谱75Mz，重水中，δppm(图10)176.5(Q)，175.5(Q)，172.4(Q)，139.2(Q)，132.1×2(CH)，131.7×2(CH)，130.2(CH)，58.3(CH)，57.2(CH)，55.7(CH)，50.2(CH2)，47.3(CH2)，41.3(CH2)，39.7(CH2)，39.5(CH2)，28.3(CH2)，26.7(CH2)，25.7(CH2)，9)显色反应阳性水合茚三酮反应，肽反应，磷钼酸反应阴性Sakaguchi反应，Ehrlich反应，10)高效液相色谱法(HPLC)柱YMC-Pack A-312，ODS流动相7%(v/v)乙腈/0.01M磷酸盐缓冲液(PH6.3)流连2.0ml/分钟检测214nm保留时间7.2分钟11)薄层色谱(TLC)载体硅胶60F254展开溶剂正-丁醇∶乙酸∶水(2∶1∶1)Rf值0.14TAN-1756D1/2硫酸化物1)外观白色粉2)旋光度+46°(c0.58，0.1NHCl，24℃)3)分子量m/z 407(M+H)+，(SI-质谱)4)元素分析(%，假设1.5mol水)测定值C，50.08;H，7.07;N，12.02计算值C，49.78;H，7.10;N，11.615)分子式C20H30N4O5·1/2H2SO46)UV光谱水中最大值257nm(ε200，肩峰)
7)IR光谱KBr片剂中，主要吸收显示(波数，cm-1)(图11)3430，3270，3060，2950，1650，1550，1450，1380，1250，1120，900，750，700，6208)13CNMR光谱75Mz，重水，Sppm(图12)176.5(Q)176.0(Q)，172.5(Q)，139.1(Q)，132.1×2(CH)，131.8×2(CH)，130.2(CH)，58.3(CH)，57.2(CH)，55.6(CH)，49.8(CH2)，47.8(CH2)，41.7(CH2)，39.6(CH2)，38.9(CH2)，28.3(CH2)，26.8(CH2)，25.6(CH2)，9)显色反应阳性水合茚三酮反应，肽反应，磷钼酸反应阴性Sakaguchi反应，Ehrlich反应，10)高效液相色谱法(HPLC)柱YMC-Pack A-312，ODS流动相7%(v/v)流连2.0ml/分钟检测214nm保留时间5.5分钟11)薄层色谱法(TLC)载体硅胶60F254展开溶剂正-丁醇∶乙酸∶水(2∶1∶1)Rf值0.14实施例35N-甲苯磺酰基-N′-｛N-[(2S，3S)-3-反-乙氧基羰基环氧乙烷-2-羰基]-L-苯丙氨酰基｝-1，4-二氨基丁烷N-Z-1，4-二氨基丁烷(1.40g)溶解在吡啶(20ml)中，在冰冷冻条件下加入甲苯磺酰氯(1.38g)。混合物室温下搅拌7小时。减压下反应混合物浓缩至干，加入乙酸乙酯，依次用0.2NHCl，2%碳酸氢钠水溶液和饱和盐水充分清洗。有机层经无水硫酸钠干燥，然后进行硅胶柱色谱(100ml)处理，洗脱液用己烷并连续加入乙酸乙酯，从用50%(v/v)乙酸乙酯洗脱的部分中得到N-甲苯磺酰基-N′-Z-1，4-二氨基丁烷(1.97g)(产率83%)。
所得到的N-甲苯磺酰基-N′-Z-1，4-二氨基丁烷(1.90g)溶解在甲醇中(60ml)，加入钯/活性碳(10%(w/w)，190mg]。混合物在氢气环境中25℃下搅拌1.5小时。过滤掉催化剂，浓缩滤液，干燥，得到N-甲苯磺酰基-1，4-二氨基丁烷(1.27g，产率定量)。
按照和实施例5基本相同的方法，N-甲苯磺酰基-1，4-二氨基丁烷(1.27g)和BOC-L-Phe-OH(1.47g)缩合，得到N-(BOC-L-苯丙氨酰基)-N′-甲苯磺酰基-1，4-二氨基丁烷(2.19g，产率85%)。用TFA消除BOC基团后，产物和参照实施例8得到的(2S，3S)-反-环氧琥珀酸乙酯(774mg)缩合，得到标题化合物(化合物32;1.55g，产率67%)。
对C26H33N3O7S元素分析计算值C，58.74;H，6.26;N，7.90;S，6.03测定值C，58.25;H，6.21;N，7.80;S，6.04
1H NMRδppm(DMSO-d6)1.22(3H，t，J＝7.0Hz)，1.32(4H，m)，2.38(3H，s)，2.67(2H，dt，J＝6.0，6.0Hz)，2.78(1H，dd，J＝9.5，13.5Hz)，2.88-3.08(3H，m)，3.42(1H，d，J＝1.5Hz)，3.64(1H，d，J＝1.5Hz)，4.17(2H，m)，4.49(1H，m)，7.16-7.30(5H，m)，7.39(2H，d，J＝8.0Hz)，7.47(1H，t，J＝6.0Hz)，7.67(2H，d，J＝8.0Hz)，8.08(1H，t，J＝6.0Hz)，8.65(1H，d，J＝8.5Hz)实施例36N-甲苯磺酰基-N-′｛N-[(2S，3S)-3-反-羧基环氧乙烷-2-羰基]-L-苯丙氨酰基｝-1，4-二氨基丁烷-钠盐按照和实施例27基本相同的方法，化合物32(934mg)进行乙酯碱水解，然后用Diaion HP-20提纯，得到标题化合物(化合物33;890mg;产率96%)。
对C24H28N3O7SNa·H2O元素分析计算值C;53.03，H;5.56，N;7.73，S;5.90，Na;4.23测定值C;52.89，H;5.72，N;7.63，S;5.92，Na;4.101H NMRδppm(D2O)1.20(4H，m)，2.39(3H，s)，2.76(2H，t，J＝6.5Hz)，2.84-3.12(4H，m)，3.21(1H，d，J＝2.0Hz)，3.49(1H，d，J＝2.0Hz)，4.49(1H，t，J＝7.7Hz)，7.16-7.36(5H，m)，7.42(2H，d，J＝8.3Hz)，7.72(2H，d，J＝8.3Hz)实施例37N-丁酰基-N-′-｛N-[(2S，3S)-3-反-乙氧基羰基环氧乙烷-2-羰基]-L-苯丙氨酰基｝-1，4-二氨基丁烷化合物1(560mg)溶解在吡啶/DMF(1∶1.40ml)中后，在冰冷却条件下加入丁酰氯(300μl)，混合物在冰冷却条件下搅拌1小时。浓缩反应混合物后，加水。调节PH为2.5，混合物用乙酸乙酯萃取。有机层用饱和盐水清洗，经无水硫酸钠干燥，然后浓缩至干，得到油状产物(640mg)。此油状产物溶解在乙醇(25ml)中，加入浓硫酸(212μl)，回流1小时。往此反应混合物中加入冰冷却水，用乙酸乙酯萃取，然后依次用饱和碳酸氢钠水溶液和饱和盐水充分清洗。所得物经无水硫酸钠干燥，然后进行硅胶柱色谱(100ml)处理，洗脱液用氯仿并连续补加甲醇，从用3%(V/V)甲醇洗脱的部分中得到白色粉状标题化合物(化合物34;290mg;产率50%)。D+46°(C 0.61，MeOH，24℃)对C23H33N3O6元素分析计算值C;61.73，H;7.43，N;9.39，测定值C;61.30，H;7.46，N;9.32，1H NMRδppm(DMSO-d6)0.84(3H，t，J＝7.5Hz)，1.22(3H，t，J＝7.0Hz)，1.23-1.42(4H，m)，1.50(2H，m)，2.02(2H，t，J＝7.5Hz)，2.79(1H，dd，J＝9.0，14.0Hz)，2.90-3.13(5H，m)，3.42(1H，d，J＝2.0Hz)，3.64(1H，d，J＝2.0Hz)，4.10-4.23(2H，m)，4.50(1H，ddd，J＝5.0，9.0Hz)，7.13-7.32(5H，m)，7.72(1H，t，J＝5.5Hz)，8.11(1H，t，J＝5.5Hz)，8.65(1H，d，J＝9.0Hz)实施例38N-丁酰基-N′-｛N-[(2S，3S)-3-反-羧基环氧乙烷-2-羰基]-L-苯丙氨酰基｝-1，4-二氨基丁烷-钠盐按照和实施例27基本相同的方法，化合物34(122mg)进行乙酯的碱水解，树脂脱盐，然后浓缩。浓缩物冷冻干燥，得到白色粉状标题化合物(化合物35;62mg;产率51%)。D+36°(C 0.53，H2O，24℃)对C21H28N3O6Na·2H2O元素分析计算值C;52.82，H;6.75，N;8.80，测定值C;53.24，H;6.70，N;8.92，1H NMRδppm(D2O)0.91(3H，t，J＝7.5Hz)，1.20-1.44(4H，m)，1.61(2H，m)，2.22(2H，t，J＝7.5Hz)，2.98-3.25(6H，m)，3.25(1H，d，J＝2.0Hz)，3.52(1H，d，J＝2.0Hz)，4.55(1H，t，J＝8.0Hz)，7.22-7.46(5H，m)实施例39N-Z-N′-｛N-[(2S，3S)-反-乙氧基羰基环氧乙烷-2-羰基]-邻-氟-L-苯丙氨酰基｝-1，4-二氨基丁烷在二噁烷(10ml)和水(5ml)混合物中，溶解邻-氟-L-苯丙氨酸(1.00g，Wako Pure Chemical Industries，Ltd.制)。在冰冷却条件下搅拌的同时，往溶液中加1N氢氧化钠水溶液(5.46ml)和重碳酸二叔丁基酯(1.38ml)，然后室温下搅拌1小时。浓缩反应混合物，调节PH到2.5，接着用乙酸乙酯萃取(100ml×3)。乙酸乙酯用水和饱和盐水清洗，经无水硫酸钠干燥。浓缩后，浓缩物用乙酸乙酯-石油醚结晶，得到无色晶体N-BOC-邻-氟-L-苯丙氨酸1.32g(产率85%)。按基本和实施例5相同的方法，上述部分产物(1.20g)和N-Z-1，4-二氨基丁烷(847mg)缩合，得到白色粉状N-(BOC-邻-氟-L-苯丙氨酰基)-N′-1，4-二氨基丁烷(1.77g)(产率95%)。用TFA消除BOC基团后，此产物和参照实施例8得到的(2S，3S)-反-环氧琥珀酸乙酯(522mg)缩合，得到白色粉状标题化合物(化合物36;1.39g;产率81%)。D+13°(C 0.56，CHCL3，22℃)对C27H32N3O7F0.25 CHCL3元素分析计算值C;58.51，H;5.81，N;7.51;F，3.40测定值C;58.59，H;5.83，N;7.60;F，3.501H NMRδppm(CDCl3)1.30(3H，t，J＝7.2Hz)，1.45(4H，m)，3.05(1H，dd，J＝8.2，13.9Hz)，3.17(5H，m)，3.22(1H，d，J＝1.9Hz)，3.62(1H，d，J＝1.9Hz)，4.24(2H，m)，4.62(1H，m)，4.92(1H，brs)，5.10(2H，s)，6.34(1H，brs)，6.84(1H，d，J＝8.1Hz)，7.06(2H，m)，7.21(2H，m)，7.35(5H，m)实施例40N-Z-N-′-｛N-[(2S，3S)-3-反-羰基环氧乙烷-2-羰基]邻-氟-L-苯丙氨酰基｝-1，4-二氨基丁烷按照和实施例6基本相同的方法，化合物36(1.29g)进行碱水解，得到白色粉状标题化合物(化合物37;1.07g;产率88%)。
对C25H28N3O7F·0.25H2O元素分析计算值C;59.34，H;5.68，N，8.30，F，3.75测定值C;59.32，H;5.66，N，8.22，F，3.761H NMRδppm(DMSO-d6)1.32(4H，m)，2.84(1H，dd，J＝9.0，13.9Hz)，2.96(4H，m)，3.06(1H，dd，J＝5.9，13.9Hz)，3.30(1H，d，J＝1.8Hz)，3.59(1H，d，J＝1.8Hz)，4.55(1H，dt，J＝6.0，8.8Hz)，5.00(2H，s)，7.11(2H，m)，7.24(3H，m)，7.34(5H，m)，8.10(1H，t，J＝5.6Hz)，8.59(1H，d，J＝8.7Hz)实施例41N-｛N-[(2S，3S)-3-反-羧基环氧乙烷-2-羰基]-邻-氟-L-苯丙氨酰基｝-1，4-二氨基丁烷按照和实施例7基本相同的方法，化合物37(970g)进行催化还原以去保护Z基，然后冷冻干燥，得到白色粉状标题化合物(化合物38;670mg;产率94%)。D+46°(C0.52，0.1NHCl，25℃)计算值C;53.48，H;6.23，N，11.01，F，4.98测定值C;53.43，H;6.03，N，10.83，F，4.881H NMRδppm(D2O)1.50(4H，m)，2.95(2H，t，J＝7.3Hz)，3.07(1H，dd，J＝8.1，13.9Hz)，3.15(2H，m)，3.19(1H，m)，3.25(1H，d，J＝1.9Hz)，3.50(1H，d，J＝2.1Hz)，4.57(1H，dd，J＝7.6，7.9Hz)，7.18(2H，m)，7.30(2H，m)实施例42N-Z-N-′-｛N-[(2S，3S)-3-反-乙氧基羰基环氧乙烷-2-羰基]-Nim-甲苯磺酰基-L-组氨酰基｝-1，4-二氨基丁烷按照和实施例5基本相同的方法，N-Z-1，4-二氨基丁烷(1.20g)和BOC-Nim-甲苯磺酰基-L-组氨酸(2.44g，Peptide Institute，Inc，制)缩合，得到白色粉状N-(BOC-Nim-甲苯磺酰基-L-组氨酰基)-N′-Z-1，4-二氨基丁烷(3.27g，产率99%)。用TFA消除BOC基团后，产物和参照实施例8得到(2S，3S)-反-环氧琥珀酸乙酯(776mg)缩合，得到白色粉状标题化合物(化合物39;2.42g，产率84%)。D+31°(C0.54，CHCl3，22℃)对C31H37N5O9S·H2O元素分析
计算值C，55.26;H，5.83;N，10.40;S，4.76测定值C，55.23;H，5.52;N，10.39;S，4.741H NMRδppm(CDCl3)1.31(3H，t，J＝7.1Hz)，1.42(4H，m)，2.44(3H，s)，2.83(1H，dd，J＝6.4，14.8Hz)，3.02(1H，dd，J＝5.4，14.8Hz)，3.16(4H，m)，3.54(1H，d，J＝1.8Hz)，3.67(1H，d，J＝1.8Hz)，4.26(2H，m)，4.59(1H，m)，5.00(1H，brs)，5.10(2H，s)，6.80(1H，brs)，7.09(1H，m)，7.27-7.39(7H，m)，7.51(1H，d，J＝7.3Hz)，7.81(2H，d，J＝8.4Hz)，7.94(1H，d，J＝1.2Hz)实施例43N-Z-N-′-｛N-[(2S，3S)-3-反-羧基环氧乙烷-2-羰基]-L-组氨酰基｝-1，4-二氨基丁烷按照和实施例6基本相同的方法，化合物39(2.30g)进行碱水解，得到标题化合物(化合物40;1.46g;产率88%)。
对C22H27N5O7·2H2O元素分析计算值C;51.86，H;6.13，N，13.75测定值C;51.89，H;6.09，N，13.861H NMRδppm(D2O)1.37(4H，m)，3.07(6H，m)，3.27(1H，d，J＝2.0Hz)，3.51(1H，d，J＝2.0Hz)，4.57(1H，dd，J＝6.7，8.0Hz)，5.08(2H，s)，7.05(1H，s)，7.39(5H，m)，8.02(1H，s)实施例44N-｛N-[(2S，3S)-3-反-羧基环氧乙烷-2-羰基]-L-组氨酰基｝-1，4-二氨基丁烷按照和实施例7基本相同的方法，化合物40(960mg)进行催化还原以去保护Z基，然后冷冻干燥，得到白色粉状标题化合物(化合物41;455mg;产率47%)。D+22°(C0.57，0.1NHCl，22℃)对C14H21N5O5·2.6H2O元素分析计算值C;43.54，H;6.84，N，18.14测定值C;43.45，H;6.89，N，18.101H NMRδppm(D2O)1.61(4H，m)，3.03(2H，t，J＝7.3Hz)，3.15(1H，dd，J＝8.9，15.2Hz)，3.26(3H，m)，3.34(1H，d，J＝2.0Hz)，3.57(1H，d，J＝2.1Hz)，4.67(1H，dd，J＝6.0，8.9Hz)，7.25(1H，brs)，8.39(1H，d，J＝1.1Hz)实施例45N-Z-N-′-｛N-[(2S，3S)-3-反-乙氧基羰基环氧乙烷-2-羰基]-Nε-Z-L-赖氨酰基｝-1，4-二氨基丁烷通过和实施例5基本相同的方法，N-Z-1，4-二氨基丁烷(1.20g)和BOC-L-Lys(Z)-OH(2.26g，Peptide Institute，Inc，)缩合，得到白色粉状N-(BOC-Nε-Z-L-赖氨酰基)-N'-Z-1，4-二氨基丁烷(3.32g，产率定量)。用TFA消除BOC基团后，再和参照实施例8得到的(2S，3S)-反-环氧琥珀酸乙酯(661mg)缩合，得到白色粉状标题化合物(化合物42;2.11g，产率82%)。D+10°(C0.60，CHCl3，22℃)元素分析(对C32H42N4O9·0.5H2O)计算值C，60.46;H，6.82;N，8.81测定值C，60.30;H，6.65;N，8.85
1H NMRδppm(CDCl3)1.30(3H，t，J＝7.2Hz)，1.30(2H，m)，1.52(6H，m)，1.62(1H，m)，1.83(1H，m)，3.17(4H，m)，3.26(2H，m)，3.51(1H，d，J＝1.6Hz)，3.68(1H，d，J＝1.8Hz)，4.25(2H，m)，4.32(1H，m)，4.98(1H，m)，5.08(5H，m)，6.44(1H，brs)，6.89(1H，d，J＝7.2Hz)，7.34(10H，m)实施例46N-Z-N-′-｛N-[(2S，3S)-3-反-羰基环氧乙烷-2-羰基]-Nε-Z-L-赖氨酰基｝-1，4-二氨基丁烷通过和实施例6基本相同的方法，使化合物42(2.00g)碱水解，得到白色粉状的标题化合物(化合物43;1.40g;产率73%)。
对C30H38N4O9·0.3CHCl3元素分析计算值C;57.36，H;6.08，N，8.83测定值C;57.30，H;6.13，N，8.991H NMRδppm(DMSO-d6+D2O)1.23(2H，m)，1.38(6H，m)，1.58(2H，m)，2.98(6H，m)，3.11(1H，d，J＝1.9Hz)，3.37(1H，d，J＝1.9Hz)，4.19(1H，m)，5.00(4H，s)，7.35(10H，m)，8.09(1H，t，J＝5.4Hz)，8.22(1H，d，J＝8.0Hz)实施例47N-Z-N-′-｛O-苄基-N-[(2S，3S)-3-反-乙氧基羰基环氧乙烷-2-羰基]-L-丝氨酰｝-1，4-二氨基丁烷通过和实施例5基本相同的方法，N-Z-1，4-二氨基丁烷(1.20g)和BOC-L-Ser(Bzl)-OH(1.76g，由Peptide Institute，Inc.制造)缩合，得到白色粉状N-(O-苄基-Boc-L-丝氨酰)-N′-Z-1，4-二氨基丁烷(2.42g，产率90%)。用TFA消除BOC基团后，上述产物再和参照实施例8得到的(2S，3S)-反-环氧琥珀酸乙酯(677mg)缩合，得到白色粉状标题化合物(化合物44;4.67g，产率73%)。D+41°(C0.55，CHCl3，22℃)对C28H35N3O8·0.5H2O)元素分析计算值C，61.08;H，6.59;N，7.63测定值C，60.91;H，6.31;N，7.771H NMRδppm(CDCl3)1.30(3H，t，J＝7.1Hz)，1.48(4H，m)，3.15(2H，m)，3.27(2H，m)，3.44(1H，d，J＝1.8Hz)，3.48(1H，dd，J＝7.5，9.1Hz)，3.69(1H，d，J＝1.9Hz)，3.82(1H，dd，J＝4.3，9.2Hz)，4.25(2H，m)，4.48(1H，d，J＝11.8Hz)，4.49(1H，m)，4.57(1H，d，J＝11.8Hz)，4.88(1H，brs)，5.09(2H，s)，6.60(1H，brs)，7.05(1H，d，J＝6.8Hz)，7.34(10H，m)实施例48N-Z-N-′-｛O-苄基-N-[(2S，3S)-3-反-羧基环氧乙烷-2-羰基]-L-丝氨酰｝-1，4-二氨基丁烷通过和实施例6基本相同的方法，使化合物44(1.55g)碱水解，得到白色粉状的标题化合物(化合物45;1.30g;产率89%)。
对C26H31N3O8·0.67H2O元素分析计算值C;59.42，H;6.20，N，8.00测定值C;59.44，H;6.09，N，7.791H NMRδppm(DMSO-d6)1.38(4H，m)，2.97(2H，m)，3.05(2H，m)，3.46(1H，d，J＝1.8Hz)，3.60(2H，m)，3.75(1H，d，J＝1.8Hz)，4.48(2H，s)，4.52(1H，m)，4.99(2H，s)，7.23(1H，t，J＝5.5Hz)，7.33(10H，m)，8.12(1H，t，J＝5.7Hz)，8.67(1H，d，J＝8.2Hz)
实施例49N-｛O-苄基-N-[(2S，3S)-3-反-羧基环氧乙烷-2-羰基]-L-丝氨酰｝-1，4-二氨基丁烷(化合物46)，N-｛N-[(2S，3S)-3-反-羧基环氧乙烷-2-羰基]-L-丝氨酰｝-1，4-二氨基丁烷(化合物47)通过和实施例7基本相同的方法，化合物45(800mg)经催化还原以去保护Z基，然后用HP-20(100ml)进行柱色谱处理，以水分段洗脱的部分经冷冻干燥，得到白色粉状标题化合物47(310mg，产率69%)，以50%(v/v)甲醇分段洗脱的部分经冷冻干燥，得到白色粉状化合物46(60.0mg，产率10%)。
化合物46[α]D+33°(C0.61，0.1NHCl，25℃)对C18H25N3O6·1.1H2O元素分析计算值C;54.15，H;6.87，N，10.53测定值C;54.01，H;6.76，N，10.561H NMRδppm(D2O)1.57(4H，m)，2.95(2H，m)，3.23(2H，m)，3.39(1H，d，J＝2.1Hz)，3.58(1H，d，J＝2.0Hz)，3.81(1H，dd，J＝4.8，10.5Hz)，3.87(1H，dd，J＝5.6，10.5Hz)，4.49(1H，dd，J＝4.9，5.4Hz)，4.56(1H，d，J＝12.0Hz)，4.60(1H，d，J＝12.0Hz)，7.41(5H，m)化合物47[α]D+30°(C0.53，0.1NHCl，25℃)对C11H19N3O6·0.5H2O元素分析
计算值C;44.29，H;6.76，N，14.09测定值C;44.37，H;6.68，N，14.101H NMRδppm(D2O)1.61(4H，m)，3.01(2H，m)，3.27(2H，m)，3.44(1H，d，J＝2.1Hz)，3.63(1H，d，J＝2.1Hz)，3.88(2H，d，J＝5.4Hz)，4.40(1H，t，J＝5.1Hz)实施例50N-Boc-N′-｛S-三苯甲基-N-[(2S，3S)-3-反-乙氧基羰基环氧乙烷-2-羰基]-L-半胱氨酰基｝-1，4-二氨基丁烷N-Z-1，4-二氨基丁烷(10.0g)溶解在二氯甲烷(100ml)中，加重碳酸二叔丁酯(10.3ml)。此混合物室温下搅拌一小时，静置过夜。依次用10%柠檬酸水溶液、水、饱和碳酸氢钠水溶液、水、饱和盐水清洗反应混合物，再用无水硫酸钠干燥，然后浓缩干燥，得到白色粉状的N-Z-N′-Boc-1，4-二氨基丁烷(14.6g，产率定量)。部分产物(1.74g)溶解在甲醇(60ml)中，往此溶液中加钯/活性碳混合物[10%(w/w)，180mg]，然后室温下搅拌2小时。过滤掉催化剂，过滤物浓缩至干得到白色粉状的N-Boc-1，4-二氨基丁烷(1.02g，产率定量)。按基本和实施例5相同的方法，把所得的化合物和Fmoc-S-三苯甲基-L-半胱氨酸(3.48g，Peptide Institute，Inc.)缩合，得到白色粉状的N-(Fmoc-S-三苯甲基-L-半胱氨酸)-N′-Boc-1，4-二氨基丁烷(3.25g，产率80%)。部分产物(3.15g)溶解在二氯甲烷(28.8ml)中，加入哌啶(3.2ml)，然后室温下搅拌1小时。浓缩反应混合物，进行硅胶柱色谱(200ml)处理。用50%(V/V)乙酸乙酯/己烷清洗柱，再用100%甲醇洗脱。洗脱物浓缩至干得到白色粉状的N-(S-三苯甲基-L-半胱氨酰)-N′-Boc-1，4-二氨基丁烷(1.92g，产率85%)。部分产物(1.82g)和参照实施例8得到的(2S，3S)-反-环氧琥珀酸乙酯(546mg)缩合，得到白色粉状的标题化合物(化合物48;1.55g;产率67%)。D+30°(C0.51，CHCL3，22℃)对C37H45N3O7S·0.25CHCL3元素分析计算值C;63.40，H;6.46，N，5.95;S，4.54测定值C;63.26，H;6.40，N，6.07;S，4.531H NMRδppm(CDCl3)1.32(3H，t，J＝7.1Hz)，1.43(9H，s)，1.46(4H，m)，2.52(1H，dd，J＝6.0，13.0Hz)，2.65(1H，dd，J＝7.4，13.1Hz)，3.08(2H，m)，3.18(2H，m)，3.44(1H，d，J＝1.8Hz)，3.61(1H，d，J＝1.8Hz)，3.94(1H，m)，4.26(2H，m)，4.56(1H，brs)，6.00(1H，brs)，6.55(1H，d，J＝7.9Hz)，7.20-7.44(15H，m)实施例51N-Boc-N′-｛S-三苯甲基-N-[(2S，3S)-3-反-羧基环氧乙烷-2-羰基]-L-半胱氨酰｝-1，4-二氨基丁烷用和实施例6基本相同的方法，使化合物48(1.45g)进行碱水解，得到白色粉状的标题化合物(化合物49;1.32g;产率95%)。
对C35H41N3O7S·0.75H2O元素分析计算值C;63.57，H;6.48，N，6.35;S，4.85测定值C;63.51，H;6.47，N，6.12;S，4.791H NMRδppm(DMSO-d6)1.32(4H，m)，1.36(9H，s)，2.34(2H，d，J＝6.6Hz)，2.87(2H，m)，2.99(2H，m)，3.42(1H，d，J＝1.8Hz)，3.68(1H，d，J＝1.8Hz)，4.35(1H，dt，J＝8.2，6.6Hz)，6.74(1H，t，J＝5.6Hz)，7.29(15H，m)，8.06(1H，t，J＝5.4Hz)，8.74(1H，d，J＝8.6Hz)
实施例52N-｛S-三苯甲基-N-[(2S，3S)-3-反-羰基环氧乙烷-2-羰基]-L-半胱氨酰基｝-1，4二氨基丁烷化合物49(600mg)溶解在二氯甲烷(10ml)中，加入TFA(4ml)。此混合物室温下静置2小时。浓缩反应混合物，加入2%的碳酸氢钠水溶液调节PH为7.5，然后用氯仿∶甲醇(2∶1)萃取七次。水洗萃取物，浓缩至干得到白色粉状的标题化合物(化合物50;390mg;产率77%)。D+31°(C0.74，MeOH，26℃)对C30H33N3O5S·2.5H2O元素分析计算值C;60.79，H;6.46，N，7.09;S，5.41测定值C;60.66，H;5.97，N，7.14;S，5.721H NMRδppm(DMSO-d6)1.44(4H，m)，2.34(1H，dd，J＝5.0，11.7Hz)，2.47(1H，dd，J＝9.2，11.7Hz)，2.72(2H，m)，2.99(2H，m)，3.05(1H，d，J＝1.3Hz)，3.36(1H，d，J＝1.2Hz)，4.18(1H，dt，J＝5.3，8.6Hz)，7.30(15H，m)，8.11(2H，brs)，8.52(1H，brs)，9.60(1H，d，J＝8.3Hz)实施例53N-Z-N′-｛N-[(2S，3S)-3-反-乙氧基羰基环氧乙烷-2-羰基]-L-谷氨酰胺酰基｝-1，4-二氨基丁烷用和实施例5基本相同的方法，把N-Z-1，4-二氨基丁烷(1.57g)和Boc-L-Gln-OH(1.92，Peptide Institute Inc.)缩合，得到白色粉状的N-(Boc-L-谷氨酰胺酰基)-N′-Z-1，4-二氨基丁烷(3.06g，产率96%)。用TFA消除BOC基团后，产物和参照实施例8得到的(2S，3S)-反-环氧琥珀酸乙酯(602mg)缩合，得到白色粉状的标题化合物(化合物51;734mg;产率44%)。D+44°(C0.52，DMF，24℃)(对C23H32N4O8元素分析计算值C，56.09;H，6.55;N，11.38测定值C;55.80，H;6.15，N;11.631H NMRδppm(DMSO-d6)1.24(3H，t，J＝7.0Hz)，1.31-1.48(4H，m)，1.63-1.95(2H，m)，2.05(2H，t，J＝7.5Hz)，2.91-3.13(4H，m)，3.60(1H，d，J＝1.5Hz)，3.71(1H，d，J＝1.5Hz)，4.11-4.27(3H，m)，4.99(2H，s)，6.74(1H，brs)，7.21(1H，t，J＝5.5Hz)，7.21-7.41(6H，m)，8.01(1H，t，J＝5.0Hz)，8.53(1H，d，J＝8.0Hz)实施例54N-Z-N′-｛N-[(2S，3S)-3-反-羧基环氧乙烷-2-羰基]-L-谷氨酰胺酰｝-1，4-二氨基丁烷用和实施例6基本相同的方法，化合物51(665mg)进行碱水解。反应混合物被浓缩后，加水。调节PH为2.5，用乙酸乙酯/异丁醇(1∶1)萃取混合物。以饱和盐水清洗有机层，然后浓缩，得到白色粉状的标题化合物(化合物52;284mg;产率45%)。D+35°(C0.53，DMF，24℃)(对C21H28N4O8·2H2O元素分析计算值C，50.40;H，6.44;N，11.19测定值C;50.42，H;5.74，N;11.25
1H NMRδppm(DMSO-d6)1.30-1.46(4H，m)，1.64-1.96(2H，m)，2.05(2H，t，J＝7.5Hz)，2.90-3.11(4H，m)，3.34(1H，d，J＝1.5Hz)，3.54(1H，d，J＝1.5Hz)，4.21(1H，dt，J＝8.0，5.0Hz)，5.00(2H，s)，6.76(1H，brs)，7.22-7.41(7H，m)，8.07(1H，t，J＝5.5Hz)，8.47(1H，d，J＝8.0Hz)实施例55N-｛N-[(2S，3S)-3-反-羧基环氧乙烷-2-羰基]-L-谷氨酰胺酰｝-1，4-二氨基丁烷通过和实施例7基本相同的方法，使化合物52(400mg)进行催化还原去保护Z基，然后冷冻干燥，得到白色粉状的标题化合物(化合物53;284mg;产率定量)。D+18°(C0.55，H2O，20℃)(对C13H22N4O6·4.5H2O元素分析计算值C，37.95;H，7.59;N，13.62测定值C;38.30，H;6.40，N;13.141H NMRδppm(D2O)1.50-1.70(4H，m)，1.89-2.20(2H，m)，2.38(2H，t，J＝7.5Hz)，2.98(2H，t，J＝7.0Hz)，3.25(2H，t，J＝6.0Hz)，3.46(1H，d，J＝2.0Hz)，3.58(1H，d，J＝2.0Hz)，4.28(1H，dd，J＝5.0，9.0Hz)实施例56N-Z-N′-｛γ-苄基-N-[(2S，3S)-3-反-乙氧基羰基环氧乙烷-2-羰基]-L-谷氨酰基｝-1，4-二氨基丁烷通过和实施例5基本相同的方法，N-Z-1，4-二氨基丁烷(1.00g)和Boc-L-Glu(Bzl)-OH(1.67g，由Peptide Institute，Inc.)缩合，得到白色粉状的N-(Boc-γ-苄基-L-谷氨酰基)-N′-Z-1，4-二氨基丁烷(2.43g)，产率定量)。用TFA消除BOC基团后，产物和参照实施例8得到的(2S，3S)-反-环氧琥珀酸乙酯(400mg)缩合，最后得到白色粉状的标题化合物(化合物54;840mg;产率58%)。D+13°(C0.60，CHCL3，24℃)(对C30H37N3O9元素分析计算值C，61.74;H，6.39;N，7.20测定值C，61.29，H;6.49，N;7.101H NMRδppm(CDCl3)1.30(3H，t，J＝7.0Hz)，1.43-1.58(4H，m)，1.85-2.02(1H，m)，2.03-2.20(1H，m)，2.38(1H，dt，J＝17.0，6.5Hz)，2.52(1H，dt，J＝17.0，7.0Hz)，3.10-3.32(4H，m)，3.51(1H，d，J＝2.0Hz)，3.67(1H，d，J＝2.0Hz)，4.18-4.32(2H，m)，4.42(1H，dt，J＝5.5，7.5Hz)，4.98(1H，t，J＝5.5Hz)，5.09(2H，s)，5.10(1H，d，J＝12.0Hz)，5.15(1H，d，J＝12.0Hz)，6.63(1H，t，J＝5.0Hz)，7.11(1H，d，J＝7.5Hz)，7.26-7.41(10H，m)实施例57N-Z-N′-｛γ-甲基-N-[(2S，3S)-3-反-甲氧基羰基环氧乙烷-2-羰基]-L-谷氨酰基｝-1，4-二氨基丁烷化合物54(585mg)溶解在甲醇(60ml)中，在冰冷却条件下加入1N氢氧化钠水溶液(500μl)，并在冰冷却条件下搅拌此混合物1小时。反应混合物经浓缩后，加水。调节PH到2.5，以乙酸乙酯萃取混合物。用饱和盐水清洗有机层，经无水硫酸钠干燥，然后进行硅胶柱色谱处理(50ml)，洗脱液用的是己烷并连续补充乙酸乙酯。从用80%-100%(v/v)乙酸乙酯洗脱的部分中得到白色粉状的标题化合物(化合物55;338mg;产率69%)。
1H NMRδppm(DMSO-d6)1.30-1.46(4H，m)，1.70-2.01(2H，m)，2.30(2H，t，J＝7.5Hz)，2.90-3.12(4H，m)，3.58(3H，s)，3.65(1H，d，J＝2.0Hz)，3.72(4H，m)，4.26(1H，ddd，J＝6.0，8.0Hz)，5.00(2H，s)，7.24(1H，t，J＝5.5Hz)，7.26-7.42(5H，m)，8.07(1H，t，J＝5.5Hz)，8.61(1H，d，J＝8.0Hz)实施例58N-｛N-[(2S，3S)-3-反-乙氧基羰基环氧乙烷-2-羰基]-L-苯丙氨酰基｝-1，4-二氨基丁烷1/2硫酸化物化合物1(500mg)溶解在乙醇(20ml)中，然后加入浓硫酸(115μl)。混合物回流70分钟，而后加入冰冻水。调节PH到5.7，混合物用CM-Sephadex C-25(Na型，50ml)进行柱色谱处理，再用0.03M的硫酸钠水溶液洗脱。洗脱物通过Diaion HP-20(30ml)进行脱盐处理，得到白色粉状的标题化合物(化合物56;503mg;产率82%)。D+54°(C0.53，H2O，20℃)对C19H27N3O5·1/2H2SO4·H2O元素分析计算值C，51.34;H，6.80;N，9.45;S，3.61测定值C;51.60，H;6.80，N;9.34;S，3.661H NMRδppm(D2O)1.29(3H，t，J＝7.0Hz)，1.36-1.57(4H，m)，2.86-3.23(6H，m)，3.47(1H，d，J＝2.0Hz)，3.72(1H，d，J＝2.0Hz)，4.27(2H，q，J＝7.0Hz)，4.57(1H，t，J＝8.0Hz)，7.23-7.44(5H，m)
实施例59N-｛N-[(2S，3S)-3-反-乙氧羰基环氧乙烷-2-羰基]-L-苯丙氨酰基｝-1，4-二氨基丁烷辛磺酸酯通过和实施例58基本相同的方法，酯化化合物1(309mg)，用CM-Sephadex C-25(Na型，20ml)进行柱色谱处理。用0.2M盐水洗脱，通过利用DiaionHP-20(15ml)对洗脱物脱盐，得到N-｛N-[(2S，3S)-3-反-乙氧基羰基环氧乙烷-2-羰基]-L-苯丙氨酰基｝-1，4-二氨基丁烷-氢氯化物(315mg)(产率88%)。所得的化合物(105mg)通过以Amberlite IRA-402(辛磺酸型，5ml)装填的柱，然后用水(10ml)清洗该柱。混合流出物和清洗液，混合物经浓缩，冷冻干燥得到白色粉状的标题化合物(化合物57;127mg)。D+40°(C0.67，MeOH，24℃)对C19H27N3O5·C8H17SO3H·0.5H2O元素分析计算值C，55.84;H，7.98;N，7.24;S，5.52测定值C，55.66，H;7.98，N，7.19;S，5.511H NMRδppm(D2O)0.87(3H，t，J＝7.0Hz)，1.30(3H，t，J＝7.0Hz)，1.22-1.60(14H，m)，1.66-1.80(2H，m)，2.85-3.25(8H，m)，3.49(1H，d，J＝2.0Hz)，3.74(1H，d，J＝2.0Hz)，4.29(2H，q，J＝7.0Hz)，4.58(1H，t，J＝8.0Hz)，7.24-7.46(5H，m)实施例60N-｛0-苄基-N-[(2S，3S)-3-反-乙氧基羰基环氧乙烷-2-羰基]-L-酪氨酰基｝吗啉通过和实施例5基本相似的方法，吗啉(1.41ml)和Boc-L-Tyr(Bzl)-OH(6.00g，由Peptide Institute，Inc.制造)缩合，得到白色粉状的N-(O-苄基-Boc-L-酪氨酰基)吗啉(8.10g)(产率定量)。用TFA消除Boc基后，此产物和参照实施例8得到的(2S，3S)-反-环氧琥珀酸乙酯(2.76g)缩合，得到白色粉状的标题化合物(化合物58;6.14g;产率81%)。D+39°(C0.58，CHCL3，24℃)对C26H30N2O7·0.7H2O元素分析计算值C，63.07;H，6.39;N，5.66;
测定值C;63.04，H;6.00，N;5.78;
1H NMRδppm(CDCl3)1.31(3H，t，J＝7.1Hz)，2.91(2H，d，J＝7.3Hz)，2.98(1H，ddd，J＝3.0，6.5，13.3Hz)，3.05(1H，ddd，J＝2.9，6.6，11.6Hz)，3.31(1H，ddd，J＝3.1，6.7，13.4Hz)，3.37(1H，d，J＝1.8Hz)，3.45(1H，ddd，J＝2.9，6.4，11.4Hz)，3.50(1H，m)，3.55(2H，t，J＝4.3Hz)，3.60(1H，m)，3.64(1H，d，J＝1.8Hz)，4.25(2H，m)，5.05(1H，m)，5.06(2H，s)，6.91(2H，d，J＝8.6Hz)，6.95(1H，d，J＝8.8Hz)，7.07(2H，d，J＝8.6Hz)，7.40(5H，m)实施例61N-｛N-[(2S，3S)-3-反-乙氧基羰基环氧乙烷-2-羰基]-L-酪氨酰基｝吗啉化合物58(5.98g)溶解在乙醇(200ml)中后，加入钯/活性碳[10%(W/W)，600mg]。在氢气环境下，于室温中搅拌上述混合物5小时。过滤掉催化剂，再浓缩滤液，然后进行硅胶柱色谱(500ml)处理，洗脱液用氯仿，并连续补加甲醇。从用2%(V/V)甲醇洗脱的部分中得到白色粉状的标题化合物(化合物59;4.04g;产率83%)。D+44°(C0.55，CHCL3，25℃)对C19H24N2O7·0.27CHCL3元素分析计算值C，54.50;H，5.76;N，6.60;
测定值C;54.44，H，5.63，N，6.64;
1H NMRδppm(CDCl3)1.31(3H，t，J＝7.2Hz)，2.87(1H，dd，J＝6.4，13.5)，2.93(1H，dd，J＝8.0，13.5)，3.08(1H，ddd，J＝2.9，6.4，13.0Hz)，3.17(1H，ddd，J＝2.9，6.4，11.3Hz)，3.38(1H，ddd，J＝2.9，6.4，12.9Hz)，3.39(1H，d，J＝1.8Hz)，3.51(1H，ddd，J＝2.9，6.5，11.4Hz)，3.57(2H，m)，3.60(2H，m)，3.66(1H，d，J＝1.8Hz)，4.25(2H，m)，5.08(1H，dt，J＝8.1，6.7Hz)，6.49(1H，s)，6.75(2H，d，J＝8.5Hz)，7.00(2H，d，J＝8.5Hz)，7.08(1H，d，J＝8.3Hz)实施例62N-｛N-[(2S，3S)-3-反-羧基环氧乙烷-2-羰基]-L-酪氨酰基｝吗啉单钠盐通过和实施例27基本相同的方法，使化合物59(300mg)进行碱水解。水解物用树脂脱盐处理，然后浓缩并冷冻干燥，得到白色粉状的标题化合物(化合物60;233mg;产率79%)。D+72°(C0.60，H2O，25℃)对C17H19N2O7Na·H2O元素分析计算值C，50.50;H，5.23;N，6.93;Na，5.69;
测定值C;50.68，H;5.41，N;7.04;Na，5.701H NMRδppm(D2O)2.93(1H，dd，J＝9.2，13.3Hz)，2.96(1H，m)，3.03(1H，dd，J＝6.6，13.4Hz)，3.25(1H，ddd，J＝2.8，5.3，13.4Hz)，3.37(1H，d，J＝2.1Hz)，3.41(1H，m)，3.44(2H，m)，3.53(1H，d，J＝2.1Hz)，3.58(2H，m)，3.67(1H，m)，5.01(1H，dd，J＝6.6，9.2Hz)，6.88(2H，d，J＝8.6Hz)，7.15(2H，d，J＝8.6Hz)
实施例63N-｛N-[(2S，3S)-3-反-乙氧基羰基环氧乙烷-2-羰基]-3-(3，4-二羟基苯基)-L-丙氨酰基｝吗啉在二噁烷(40ml)和水(20ml)混合溶剂中溶解3-(3，4-二羟基苯基)-L-丙氨酸(3.94g，由Tokyo Kasei Co.，Ltd.制备)。在冰冷却条件下搅拌的同时，往溶液中加1N氢氧化钠水溶液(20ml)和重碳酸二叔丁基酯(5.05ml)，然后在室温下搅拌16小时。浓缩反应混合物，PH调到3.0，再用乙酸乙酯(100ml×2)萃取。用水和饱和盐水清洗乙酸乙酯层，经无水硫酸钠干燥，而后浓缩。浓缩物进行硅胶柱色谱处理，洗脱液为氯仿并连续补加甲醇和乙酸。浓缩以5%甲醇(含1%乙酸)洗脱的部分。乙酸和甲苯共沸蒸馏，得到白色粉状的N-Boc-3-(3，4-二羟基苯基)-L-丙氨酸(5.41g，产率91%)。部分产物(3.00g)按基本和实施例5相同的方法与吗啉(883μl)缩合，得到白色粉状的N-[Boc-3-(3，4-二羟基苯基)-L-丙氨酰基]吗啉(3.10g，产率84%)。用4NHCl/乙酸乙酯(Kokusan Kagaku Co.Ltd.制)消除Boc基团，然后产物和参照实施例8得到的(2S，3S)-反-环氧琥珀酸乙酯(423mg)缩合，得到白色粉状的标题化合物(化合物61;626mg;产率58%)。D+46°(C0.55，CHCl3，26℃)元素分析(对C19H24N2O8)计算值C，55.88;H，5.92;N，6.86测定值C;55.62，H;6.06，N;6.59
1H NMRδppm(CDCl3)1.30(3H，t，J＝7.2Hz)，2.85(2H，d，J＝7.2Hz)，3.11(2H，m)，3.36(1H，m)，3.48(1H，d，J＝1.8Hz)，3.52(3H，m)，3.61(2H，m)，3.71(1H，d，J＝1.8Hz)，4.25(2H，m)，5.07(1H，dt，J＝8.0，7.4Hz)，6.55(1H，dd，J＝2.0，8.1Hz)，6.70(1H，d，J＝1.9Hz)，6.79(1H，d，J＝8.0Hz)，7.33(1H，d，J＝8.2Hz)实施例64N-｛N-[(2S，3S)-3-反-羧基环氧乙烷-2-羰基]-3-(3，4-二羟基苯基)-L-丙氨酰基｝吗啉单钠盐按基本和实施例27相同的方法，使化合物61(100mg)进行乙酯碱水解。溶液的PH调到7，浓缩溶液，然后冷冻干燥。冷冻干燥后的物质用制备HPLC(柱，YMCPackD-ODS-5;流动相，7%(v/v)乙腈/0.01M磷酸缓冲溶液PH6.3;流动速率10ml/分钟;检测214nm)处理。收集显示主要峰的部分并浓缩。浓缩物以HP-20(10ml)进行柱色谱处理，用水(20ml)清洗柱。然后用水(20ml)洗脱。浓缩洗脱液，再冷冻干燥，得到白色粉状的标题化合物(化合物62;26.0mg;产率26%)。
1H NMRδppm(D2O)2.83(1H，m)，2.84(1H，dd，J＝9.7，13.2Hz)，2.99(1H，dd，J＝6.2，13.1Hz)，3.26(1H，m)，3.37(1H，d，J＝2.0Hz)，3.40(3H，m)，3.53(1H，d，J＝2.1Hz)，3.63(4H，m)，4.98(1H，dd，J＝6.2，9.7Hz)，6.68(1H，dd，J＝2.1，8.1Hz)，6.76(1H，d，J＝2.0Hz)，6.87(1H，d，J＝8.1Hz)实施例65N-｛N-[(2S，3S)-3-反-乙氧基羰基环氧乙烷-2-羰基]-L-苯基甘氨酰基｝吗啉按和实施例5基本相同的方法使吗啉(1.04ml)和Boc-L-苯基甘氨酸(3.00g，由Kokusan Kagaku Co.Ltd.制)缩合，得到白色粉状的N-(Boc-L-苯基甘氨酰基)吗啉(3.36g，产率88%)。用TFA消除Boc基团后，产物和参照实施例8得到的(2S，3S)-反-环氧琥珀酸乙酯(486g)缩合，得到白色粉状的标题化合物(化合物63;940mg;产率85%)。D+171°(C0.62，CHCL3，25℃)对C18H22N2O6·0.2H2O元素分析计算值C，59.07;H，6.17;N，7.65;
测定值C;59.11，H;6.02，N;7.21;
1H NMRδppm(CDCl3)1.28(3H，t，J＝7.1Hz)，3.10(1H，ddd，J＝3.0，7.1，11.4Hz)，3.23(1H，ddd，J＝2.9，5.9，13.3Hz)，3.35(1H，d，J＝1.8Hz)，3.41(1H，ddd，J＝3.0，7.1，13.3Hz)，3.52(1H，ddd，J＝3.0，6.0，11.4Hz)，3.57(2H，m)，3.66(1H，d，J＝1.8Hz)，3.72(2H，m)，4.22(2H，m)，5.78(1H，d，J＝7.3Hz)，7.36(5H，m)，7.63(1H，d，J＝7.2Hz)实施例66N-｛N-[(2S，3S)-3-反-羧基环氧乙烷-2-羰基]-L-苯基甘氨酰基｝吗啉-钠盐根据和实施例27基本相同的方法，化合物63(250mg)进行乙酯的碱水解。用树脂脱盐，然后浓缩。浓缩物冷冻干燥，得到白色粉状的标题化合物(化合物64;222mg;产率90%)。D+144°(C0.59，H2O，25℃)对C16H17N2O6Na·0.5H2O元素分析
计算值C，52.61;H，4.97;N，7.67;Na，6.29测定值C;52.68，H;5.21，N;7.93;Na，6.311H NMRδppm(D2O)3.19(1H，m)，3.39(1H，m)，3.43(1H，d，J＝2.1Hz)，3.58(1H，d，J＝2.0Hz)，3.60(4H，m)，3.74(2H，m)，5.90(1H，s)，7.44(5H，m)实施例67N-｛N-[(2S，3S)-3-反-乙氧基羰基环氧乙烷-2-羰基]-L-高苯丙氨酰基｝吗啉按照和实施例5基本相同的方法，吗啉(280μl)和Boc-L-高苯丙氨酸(900mg，BachemFein Chemikalien AG.瑞士制)缩合，得到白色粉状的N-(Boc-L-高苯丙氨酰基)吗啉(1.06g，产率95%)。用4NHCl/乙酸乙酯消除Boc基团，产物和参照实施例8得到的(2S，3S)-反-环氧琥珀酸乙酯(338mg)缩合，得到白色粉状的标题化合物(化合物65;630mg;产率77%)。D+53°(C0.75，CHCL3，26℃)对C20H26N2O6元素分析计算值C，61.53;H，6.71;N，7.17;
测定值C;61.28，H;6.84，N;7.02;
1H NMRδppm(CDCl3)1.33(3H，t，J＝7.2Hz)，1.92(1H，dt，J＝14.2，7.4Hz)，2.04(1H，ddd，J＝4.3，7.8，14.2Hz)，2.62(2H，dt，J＝1.5，7.6Hz)，3.22(1H，ddd，J＝3.8，6.0，13.5Hz)，3.34(1H，ddd，J＝3.9，5.7，12.6Hz)，3.59(6H，m)，3.66(1H，d，J＝1.9Hz)，4.27(2H，m)，4.91(1H，dt，J＝4.3，8.0Hz)，7.01(1H，d，J＝8.1Hz)，7.25(5H，m)
实施例68N-｛N-[(2S，3S)-3-反-羧基环氧乙烷-2-羰基]-L-高苯丙氨酰基｝吗啉-钠盐按照和实施例27基本相同的方法，化合物65(100mg)进行乙酯的碱水解，用树脂脱盐，然后浓缩并冷冻干燥，得到白色粉状的标题化合物(化合物66;94.9mg;产率96%)。D+35°(C0.56，H2O，26℃)对C18H21N2O6Na·1.2H2O元素分析计算值C，53.25;H，5.81;N，6.90;Na;5.66测定值C;53.25，H;5.82，N;7.08;Na;5.861H NMRδppm(D2O)2.04(2H，m)，2.65(1H，dt，J＝14.4，7.3Hz)，2.80(1H，dt，J＝14.2，6.7Hz)，3.27(1H，dt，J＝13.9，5.0Hz)，3.37(1H，dt，J＝13.5，4.7Hz)，3.40(1H，d，J＝2.0Hz)，3.52(2H，m)，3.55(1H，d，J＝2.0Hz)，3.63(2H，t，J＝4.8Hz)，3.68(2H，t，J＝4.9Hz)，4.65(1H，dd，J＝5.0，8.7Hz)，7.33(5H，m)实施例69N-｛N-[(2S，3S)-反-乙氧基羰基环氧乙烷-2-羰基]-对-氯-L-苯丙氨酰基｝吗啉按照和实施例5基本相同的方法，吗啉(257μl)和Boc-对-氯-L-苯丙氨酸(800mg，由瑞士的Bachem Fein Chemikalien AG.制造)缩合，得到无色油状产物N-(Boc-对-氯-L-苯丙氨酰基)吗啉(913mg，产率93%)。用4NHCl/乙酸乙酯消除Boc基团后，产物和参照实施例8中得到的(2S，3S)-反-环氧琥珀酸乙酯(238mg)缩合，得到白色粉状标题化合物(化合物67;357mg;产率58%)。D+43°(C0.51，CHCL3，24℃)对C19H23N2O6CL·0.5H2O元素分析计算值C，54.35;H，5.76;N，6.67;CI，8.44测定值C;54.51，H;5.59，N;6.78;CI，8.591H NMRδppm(CDCl3)1.32(3H，t，J＝7.1Hz)，2.92(1H，dd，J＝6.1，13.3Hz)，2.99(1H，dd，J＝6.1，13.3Hz)，3.08(1H，ddd，J＝3.0，6.7，13.1Hz)，3.20(1H，ddd，J＝3.0，6.4，11.5Hz)，3.31(1H，d，J＝1.9Hz)，3.39(1H，ddd，J＝3.0，6.4，13.1Hz)，3.57(5H，m)，3.63(1H，d，J＝1.9Hz)，4.26(2H，m)，5.09(1H，dt，J＝6.2，8.2Hz)，6.96(1H，brd，J＝8.2Hz)，7.10(2H，d，J＝8.4Hz)，7.29(2H，d，J＝8.4Hz)实施例70N-｛N-[(2S，3S)-反-羧基环氧乙烷-2-羰基]-对-氯-L-苯丙氨酰基｝吗啉-钠盐按照和实施例27基本相同的方法，化合物67(100mg)进行乙酯的碱水解，并用树脂脱盐，浓缩所得物，冷冻干燥，得到白色粉状的标题化合物(化合物68;92mg;产率93%)。D+66°(C0.47，H2O，24℃)对C17H18N2O6ClNa·1.5H2O元素分析计算值C，47.29;H，4.90;N，6.49;CI，8.21;Na;5.32测定值C;47.51，H，5.07，N;6.24;CI，7.86;Na;5.411H NMRδppm(D2O)3.06(3H，m)，3.24(1H，ddd，J＝2.8，6.0，13.6Hz)，3.36(1H，d，J＝2.0Hz)，3.52(4H，m)，3.54(1H，d，J＝2.0Hz)，3.65(2H，m)，5.07(1H，dd，J＝7.2，8.4Hz)，7.25(2H，d，J＝8.4Hz)，7.42(2H，d，J＝8.4Hz)
实施例71N-｛N-[(2S，3S)-3-反-乙氧基羰基环氧乙烷-2-羰基]-对-氯-L-苯丙氨酰基｝吗啉按照和实施例5基本相同的方法，吗啉(278μl)和Boc-对-氟-L-苯丙氨酸(900mg，由瑞士的Bachem Fein Chemikalien AG.制造)缩合，得到白色粉状N-(Boc-对-氟-L-苯丙氨酰基)吗啉(1.02g，产率91%)。用4N HCl/乙酸乙酯消除Boc基团后，产物和参照实施例8中得到的(2S，3S)-反-环氧琥珀酸乙酯(333mg)缩合，得到白色粉状标题化合物(化合物69;520mg;产率63%)。D+43°(C0.62，CHCL3，25℃)对C19H23N2O6F·0.25H2O元素分析计算值C，57.21;H，5.94;N，7.02;
测定值C;57.23，H;5.92，N;6.82;
1H NMRδppm(CDCl3)1.32(3H，t，J＝7.2Hz)，2.92(1H，dd，J＝6.1，13.3Hz)，2.99(1H，dd，J＝8.2，13.4Hz)，3.05(1H，ddd，J＝3.0，6.7，13.3Hz)，3.17(1H，ddd，J＝3.0，6.5，11.5Hz)，3.32(1H，d，J＝1.9Hz)，3.37(1H，ddd，J＝2.9，6.5，13.3Hz)，3.51(1H，m)，3.57(4H，m)，3.63(1H，d，J＝1.9Hz)，4.27(2H，m)，5.08(1H，dt，J＝6.3，8.2Hz)，6.90(1H，d，J＝7.6Hz)，7.01(2H，m)，7.13(2H，m)实施例72N-｛N-[(2S，3S)-3-反-羧基环氧乙烷-2-羰基]-对-氟-L-苯丙氨酰基｝吗啉-钠盐按照和实施例27基本相同的方法，化合物69(100mg)进行乙酯的碱水解，用树脂脱盐，然后浓缩并冷冻干燥，得到白色粉状标题化合物(化合物70;95.6mg;产率97%)。D+67°(C0.56，H2O，26℃)对C17H18N2O6F Na·0.5H2O元素分析计算值C，51.39;H，4.82;N，7.05;F，4.78;Na;5.79测定值C;51.31，H;4.99，N;7.20;F，4.82;Na;5.821H NMRδppm(D2O)3.00(1H，dd，J＝8.5，13.3Hz)，3.06(1H，dd，J＝7.0，13.6Hz)，3.10(1H，ddd，J＝2.9，7.1，11.8Hz)，3.26(1H，ddd，J＝3.0，6.3，13.8Hz)，3.34(1H，d，J＝2.1Hz)，3.50(4H，m)，3.52(1H，d，J＝2.1Hz)，3.60(1H，ddd，J＝3.2，6.1，11.7Hz)，5.05(1H，dd，J＝7.1，8.4Hz)，7.12(2H，m)，7.26(2H，m)，实施例73N-｛N-[(2S，3S)-3-反-乙氧基羰基环氧乙烷-2-羰基]-对-硝基-L-苯丙氨酰基｝吗啉按照和实施例5基本相同的方法，吗啉(290μl)和Boc-对-硝基-L-苯丙氨酸(996mg，Bachem Fein Chemikalien AG.瑞士)缩合，得到白色粉状的N-(Boc-对-硝基-L-苯丙氨酰基)吗啉(1.22g，产率96%)。用4N HCl/乙酸乙酯消除Boc基团后，产物和参照实施例8中得到的(2S，3S)-反-环氧琥珀酸乙酯(465mg)缩合，得到白色粉状的标题化合物(化合物71;878mg;产率81%)。D+33°(C0.59，CHCL3，26℃)对C19H23N3O8元素分析
计算值C，54.15;H，5.50;N，9.97;
测定值C;54.22，H;5.51，N;9.96;
1H NMRδppm(CDCl3)1.32(3H，t，J＝7.0Hz)，3.03(1H，dd，J＝6.5，13.5Hz)，3.12-3.27(1H，m)，3.18(1H，dd，J＝8.5，13.5Hz)，3.26(1H，d，J＝2.0Hz)，3.35(1H，ddd，J＝2.5，6.0，11.0Hz)，3.42-3.75(6H，m)，3.63(1H，d，J＝2.0Hz)，4.17-4.35(2H，m)，5.17(1H，ddd，J＝6.5，8.0，8.0Hz)，6.97(1H，d，J＝8.0Hz)，7.35(2H，d，J＝9.0Hz)，8.20(2H，d，J＝9.0Hz)实施例74N-｛N-[(2S，3S)-3-反-羧基环氧乙烷-2-羰基]-对-硝基-L-苯丙氨酰基｝吗啉-钠盐按照和实施例27基本相同的方法，化合物71(260mg)进行乙酯的碱水解，用树脂脱盐，然后浓缩和冷冻干燥，得到标题化合物(化合物72;250mg;产率98%)。D+54°(C0.51，H2O，26℃)对C17H18N3O8Na·1.5H2O元素分析计算值C，46.16;H，4.78;N，9.50;
测定值C;46.15，H;4.57，N;9.78;
1H NMRδppm(D2O)3.20(2H，d，J＝7.5Hz)，3.21-3.41(2H，m)，3.33(1H，d，J＝2.0Hz)，3.43-3.76(6H，m)，3.53(1H，d，J＝2.0Hz)，5.17(1H，t，J＝7.5Hz)，7.50(2H，d，J＝9.0Hz)，8.24(2H，d，J＝9.0Hz)实施例75N-｛N-[(2S，3S)-3-反-乙氧基羰基环氧乙烷-2-羰基]-3-(2噻吩基)-L-丙氨酰基｝吗啉按照和实施例5基本相同的方法，吗啉(319μl)和Boc-3-(2-噻吩基)-L-丙氨酸(900mg，由瑞士的Bachem Fein Chemikalien AG.制造)缩合，得到无色油状的产物N-(Boc-3-(2-噻吩基)-L-丙氨酰基)吗啉(1.13g，产率定量)。用4NHCl/乙酸乙酯消除Boc基团后，产物和参照实施例8中得到的(2S，3S)-反-环氧琥珀酸乙酯(315mg)缩合，得到白色粉状的标题化合物(化合物73;563mg;产率75%)。D+47°(C0.53，CHCL3，24℃)对C17H22N2O6S元素分析计算值C，53.39;H，5.80;N，7.32;S，8.38测定值C;53.04，H;5.69，N;7.41;S，8.411H NMRδppm(CDCl3)1.32(3H，t，J＝7.1Hz)，3.17(1H，dd，J＝5.9，14.6Hz)，3.26(1H，dd，J＝7.5，14.6Hz)，3.30(2H，m)，3.44(1H，d，J＝1.8Hz)，3.47(1H，m)，3.54-3.70(5H，m)，3.66(1H，d，J＝1.8Hz)，4.26(2H，m)，5.11(1H，ddd，J＝5.9，7.5，8.0Hz)，6.83(1H，dd，J＝1.2，3.4Hz)，6.96(1H，dd，J＝3.4，5.2Hz)，7.04(1H，brd，J＝8.0Hz)，7.20(1H，dd，J＝1.2，5.1Hz)实施例76N-｛N-[(2S，3S)-3-反-羧基环氧乙烷-2-羰基]-3-(2-噻吩基)-L-丙氨酰基｝吗啉-钠盐按照和实施例27基本相同的方法，化合物73(114mg)进行乙酯的碱水解，用树脂脱盐，然后浓缩和冷冻干燥，得到白色粉状标题化合物(化合物74;98mg;产率85%)。D+57°(C0.50，H2O，25℃)对C15H17N2O6SNa·0.5H2O元素分析计算值C，46.75;H，4.71;N，7.27;S，8.32;Na，5.97测定值C;46.60，H;4.89，N;7.32;S，8.48;Na，5.831H NMRδppm(D2O)3.31(2H，d，J＝7.4Hz)，3.33(1H，m)，3.40(1H，d，J＝2.0Hz)，3.44-3.78(7H，m)，3.55(1H，d，J＝2.0Hz)，5.10(1H，t，J＝7.4Hz)，6.98(1H，dd，J＝1.2，3.4Hz)，7.05(1H，dd，J＝3.4，5.2Hz)，7.36(1H，dd，J＝1.2，5.2Hz)实施例77N-｛N-[(2S，3S)-3-反-乙氧基羰基环氧乙烷-2-羰基]-3-环己基-L-丙氨酰基｝吗啉按照和实施例5基本相同的方法，吗啉(210μl)和Boc-3-环己基-L-丙氨酸(590mg，由瑞士Bachem Fein Chemikalien AG.制造)得到无色油状N-(Boc-3-环己基-L-丙氨酰基)吗啉(702mg，产率95%)。用4NHCl/乙酸乙酯消除Boc基团后，产物和参照实施例8中得到的(2S，3S)-反-环氧琥珀酸乙酯(210mg)缩合，得到无色油状产物即标题化合物(化合物75;379mg;产率76%)。D+42°(C0.57，CHCL3，25℃)对C19H30N2O6·0.5H2O元素分析计算值C，58.30;H，7.98;N，7.16;
测定值C;58.70，H;7.90，N;6.52;
1H NMRδppm(CDCl3)0.96(2H，m)，1.27(4H，m)，1.40(3H，t，J＝7.1Hz)，1.55(2H，m)，1.72(4H，m)，1.99(1H，brd，J＝12.1Hz)，3.56(1H，d，J＝1.9Hz)，3.61(2H，m)，3.75(1H，d，J＝1.9Hz)，3.76(6H，m)，4.35(2H，m)，5.05(1H，dt，J＝8.6，7.1Hz)，7.00(1H，brd，J＝8.6Hz)实施例78N-｛N-[(2S，3S)-3-反-羧基环氧乙烷-2-羰基]-3-环己基-L-丙氨酰基｝吗啉-钠盐按照和实施例27基本相同的方法，化合物75(100mg)进行乙酯的碱水解，树脂脱盐，然后浓缩和干燥，得到白色粉状标题化合物(化合物76;90mg;产率91%)。D+48°(C0.49，H2O，25℃)对C17H25N2O6Na·H2O元素分析计算值C，51.77;H，6.90;N，7.10;Na，5.83测定值C;51.76，H;7.16，N;7.18;Na，5.971H NMRδppm(D2O)0.96(2H，m)，1.20(4H，m)，1.66(7H，m)，3.44(1H，d，J＝2.0Hz)，3.58(1H，d，J＝2.0Hz)，3.67(8H，m)，4.90(1H，dd，J＝4.7，10.0Hz)实施例79N-｛N-[(2S，3S)-3-反-乙氧基羰基环氧乙烷-2-羰基]-对-甲氧基-L-苯丙氨酰基｝吗啉化合物59(392mg)溶解在DMF(10ml)中，加入碳酸钾(76mg)和甲基碘(69μl)，然后搅拌14小时。往此混合物中加甲基碘(280μl)，再搅拌20小时。浓缩反应混合物，加入10%氯化铵水溶液，再用乙酸乙酯萃取。用水和饱和盐水清洗乙酸乙酯层，经无水硫酸钠干燥，进行硅胶柱色谱(50ml)处理，洗脱液用1%(V/V)甲醇/氯仿。浓缩洗脱液，得到无色油状标题化合物(化合物77;107mg;产率26%)。
1H NMRδppm(CDCl3)1.32(3H，t，J＝7.2Hz)，2.92(2H，d，J＝7.3Hz)，3.03(1H，ddd，J＝3.0，6.5，13.2Hz)，3.12(1H，ddd，J＝3.0，6.5，11.4Hz)，3.34(1H，d，J＝1.9Hz)，3.35(1H，ddd，J＝3.1，6.5，13.2Hz)，3.44(1H，ddd，J＝3.0，6.5，11.4Hz)，3.58(4H，m)，3.63(1H，d，J＝1.9Hz)，3.80(3H，s)，4.26(2H，m)，5.06(1H，dt，J＝8.0，7.4Hz)，6.84(2H，d，J＝8.7Hz)，6.92(1H，d，J＝8.1Hz)，7.07(2H，d，J＝8.7Hz)实施例80N-｛N-[(2S，3S)-3-反-羧基环氧乙烷-2-羰基]-对-甲氧基-L-苯丙氨酰基｝吗啉-钠盐按照和实施例27基本相同的方法，化合物77(105mg)进行乙酯的碱水解，树脂脱盐，然后浓缩并冷冻干燥，得到白色粉状标题化合物(化合物78;93mg;产率90%)。D+70°(C0.51，H2O，25℃)对C18H21N2O7Na·0.5H2O元素分析计算值C，52.81;H，5.42;N，6.84;
测定值C;52.72，H;5.66，N;7.01;
1H NMRδppm(D2O)2.96(2H，m)，3.04(1H，dd，J＝6.5，13.3Hz)，3.23(1H，m)，3.35(1H，d，J＝2.0Hz)，3.44(3H，m)，3.52(1H，d，J＝2.0Hz)，3.56(2H，m)，3.65(1H，m)，3.82(3H，s)，5.01(1H，dd，J＝6.9，9.0Hz)，6.98(2H，d，J＝8.6Hz)，7.21(2H，d，J＝8.6Hz)
实施例81N-｛N-[(2S，3S)-3-反-乙氧基羰基环氧乙烷-2-羰基]-3-(1-萘基)-L-丙氨酰基｝吗啉按照和实施例5基本相似的方法，吗啉(275μl)和Boc-3-(1-萘基)-L-丙氨酸(970mg，瑞士Bachem Fein ChemikalienAG.制造)缩合，得到白色粉状N-[Boc-3-(1-萘基)-L-丙氨酰基]吗啉(1.18g，产率定量)。用TFA消除Boc基团后，产物和参照实施例8中得到的(2S，3S)-反-环氧琥珀酸乙酯(620mg)缩合，得到白色粉状标题化合物(化合物79;1.09g;产率75%)。D+48°(C0.60，CHCL3，26℃)对C23H26N2O6元素分析计算值C，64.78;H，6.14;N，6.57;
测定值C;64.88，H;6.25，N;6.64;
1H NMRδppm(CDCl3)1.33(3H，t，J＝7.0Hz)，2.09(1H，ddd，J＝3.0，8.0，11.5Hz)，2.28(1H，ddd，J＝3.0，5.5，13.0Hz)，2.84(1H，ddd，J＝3.0，8.0，13.0Hz)，2.99(1H，ddd，J＝3.0，5.5，11.5Hz)，3.02-3.13(1H，m)，3.21-3.35(1H，m)，3.27(1H，dd，J＝10.5，13.0Hz)，3.41-3.54(2H，m)，3.47(1H，d，J＝2.0Hz)，3.65(1H，dd，J＝5.0，13.0Hz)，3.69(1H，d，J＝2.0Hz)，4.19-4.37(2H，m)，5.31(1H，ddd，J＝5.0，7.5，10.5Hz)，7.18(1H，d，J＝7.5Hz)，7.33(1H，dd，J＝1.0，7.5Hz)，7.41(1H，t，J＝7.5Hz)，7.52(1H，ddd，J＝1.0，7.0，8.0Hz)，7.61(1H，ddd，J＝1.5，7.0，8.5Hz)，7.81(1H，d，J＝8.0Hz)，7.87(1H，dd，J＝1.0，8.0Hz)，8.24(1H，d，J＝8.5Hz)实施例82N-｛N-[(2S，3S)-3-反-羧基环氧乙烷-2-羰基]-3-(1-萘基)-L-丙氨酰基｝吗啉-钠盐按照和实施例27基本相同的方法，化合物79(332mg)进行乙酯的碱水解，树脂脱盐，然后浓缩和冷冻干燥，得到标题化合物(化合物80;309mg;产率94%)。D+94°(CO.59，H2O，26℃)对C21H21N2O6Na·1.5H2O元素分析计算值C，56.37;H，5.41;N，6.26;
测定值C;56.40，H;5.28，N;6.51;
1H NMRδppm(D2O)1.99(1H，ddd，J＝3.0，8.5，11.5Hz)，2.56-2.71(1H，m)，2.85(1H，ddd，J＝3.0，8.5，11.5Hz)，2.94-3.23(3H，m)，3.31-3.66(4H，m)，3.41(1H，d，J＝2.0Hz)，3.59(1H，d，J＝2.0Hz)，5.18(1H，dd，J＝5.5，10.5Hz)，7.38(1H，d，J＝7.0Hz)，7.50(1H，t，J＝7.5Hz)，7.54-7.69(2H，m)，7.90(1H，d，J＝8.0Hz)，7.98(1H，dd，J＝2.0，7.5Hz)，8.08(1H，d，J＝8.0Hz)实施例83N-｛N-[(2S，3S)-3-反-乙氧基羰基环氧乙烷-2-羰基]-3-(2-萘基)-L-丙氨酰基｝吗啉按照和实施例5基本相同的方法，吗啉(275μl)和Boc-3-(2-萘基)-L-丙氨酸(900mg，瑞士Bachem Fein Chemikalien AG.制造)缩合，得到白色粉状N-[Boc-3-(2-萘基)-L-丙氨酰基]吗啉(1.10g，产率定量)。用三氟乙酸消除Boc基团后，产物和参照实施例8中得到的(2S，3S)-反-环氧琥珀酸乙酯(312mg)缩合，得到白色粉状标题化合物(化合物81;695mg;产率84%)。D+47°(C0.53，CHCL3，24℃)对C23H26N2O6·0.5H2O元素分析
计算值C，63.44;H，6.25;N，6.43;
测定值C;63.90，H;6.16，N;6.27;
1H NMRδppm(CDCl3)1.29(3H，t，J＝7.1Hz)，2.83(1H，ddd，J＝3.0，6.7，11.3Hz)，2.95(1H，ddd，J＝3.0，6.9，13.9Hz)，3.14(2H，brd，J＝7.6Hz)，3.32(1H，d，J＝1.9Hz)，3.35(3H，m)，3.56(3H，m)，3.64(1H，d，J＝1.9Hz)，4.23(2H，m)，5.19(1H，dt，J＝6.9，8.2Hz)，7.04(1H，brd，J＝8.2Hz)，7.29(1H，dd，J＝1.7，8.4Hz)，7.48(2H，m)，7.61(1H，brs)，7.80(3H，m)实施例84N-｛N-[(2S，3S)-3-反-羧基环氧乙烷-2-羰基]-3-(2-萘基)-L-丙氨酰基｝吗啉-钠盐按照和实施例27基本相同的方法，化合物81(100mg)进行乙酯的碱水解，树脂脱盐，然后浓缩并冷冻干燥，得到白色粉状标题化合物(化合物82;96mg;产率97%)。D+78°(C0.47，H2O，24℃)对C21H21N2O6Na·1.5H2O元素分析计算值C，56.37;H，5.41;N，6.26;Na，5.14测定值C;56.22，H;5.59，N;6.07;Na，5.171H NMRδppm(D2O)2.55(1H，m)，3.15(4H，m)，3.35(3H，m)，3.38(1H，d，J＝2.0Hz)，3.52(2H，m)，3.55(1H，d，J＝2.0Hz)，5.08(1H，dd，J＝6.7，9.2Hz)，7.39(1H，dd，J＝1.5，8.5Hz)，7.57(2H，m)，7.72(1H，brs)，7.92(3H，m)实施例85N-｛N-[(2S，3S)-3-反-乙氧基羰基环氧乙烷-2-羰基]-L-苯丙氨酰基｝硫吗啉按照和实施例20基本相同的方法，N-[(2S，3S)-3-反-乙氧基羰基环氧乙烷-2-羰基]-L-苯丙氨酸(1.00g)和硫吗啉(350μl，Tokyo Kasei Co.，Ltd.制)缩合，得到白色粉状标题化合物(化合物83;1.00g;产率78%)。D+53°(C0.57，CHCL3，24℃)对C19H24N2O5S·0.5H2O元素分析计算值C，56.84;H，6.28;N，6.98;S，7.99测定值C;57.03，H;5.99，N;7.04;S，8.441H NMRδppm(CDCl3)1.31(3H，t，J＝7.0Hz)，1.96(1H，ddd，J＝2.5，7.5，13.5Hz)，2.36-2.65(3H，m)，2.94(1H，dd，J＝6.0，13.0Hz)，3.02(1H，dd，J＝8.5，13.0Hz)，3.33(1H，d，J＝2.0Hz)，3.43(1H，ddd，J＝2.5，7.5，14.0Hz)，3.57(1H，ddd，J＝2.5，7.5，14.0Hz)，3.63(1H，d，J＝2.0Hz)，3.82(2H，t，J＝5.0Hz)，4.16-4.34(2H，m)，5.12(1H，ddd，J＝6.0，8.5，8.5Hz)，7.01(1H，d，J＝8.5Hz)，7.10-7.37(5H，m)实施例86N-｛N-[(2S，3S)-3-反-羧基环氧乙烷-2-羰基]-L-苯丙氨酰基｝-硫吗啉-钠盐按照和实施例27基本相同的方法，化合物83(220mg)进行乙酯的碱水解，树脂脱盐，然后浓缩并冷冻干燥，得到标题化合物(化合物84;133mg;产率62%)。D+58°(C0.57，H2O，24℃)对C17H19N2O5SNa·H2O元素分析
计算值C，50.49;H，5.23;N，6.93;
测定值C;50.70，H;5.35，N;7.00;
1H NMRδppm(D2O)1.90-2.03(1H，m)，2.42-2.68(3H，m)，3.07(2H，d，J＝7.5Hz)，3.35(1H，d，J＝2.0Hz)，3.53(1H，d，J＝2.0Hz)，3.56-3.88(4H，m)，5.09(1H，t，J＝7.5Hz)，7.23-7.48(5H，m)实施例87N-Z-N′-｛N-[(2S，3S)-3-反-正-丙基氨基甲酰基环氧乙烷-2-羰基]-L-苯丙氨酰基｝-1，4-二氨基丁烷化合物6(300mg)悬浮于DMF(10ml)中，在冰冷冻条件下，加入正-丙胺(56μl)，Wako Pure Chemical Industries，Ltd.制造)、HOBT(92mg)和WSC(131mg)，室温下搅拌15小时。反应混合物浓缩至干，加入乙酸乙酯(150ml)。混合物用10%柠檬酸水溶液、3%碳酸氢钠水溶液和饱和盐水清洗。混合物经无水硫酸钠干燥，浓缩至干。往浓缩物中加乙醚，过滤回收所得的沉淀，得到标题化合物(化合物85;303mg;产率93%)。D+37°(C0.63，DMF，24℃)对C28H36N4O6·0.5H2O元素分析计算值C，63.02;H，6.99;N，10.50测定值C;63.01，H;6.99，N;10.501H NMRδppm(DMSO-d6)0.83(3H，t，J＝7.5Hz)，1.34(4H，m)，1.42(2H，m)，2.79(1H，dd，J＝9.5，13.5Hz)，2.90-3.12(7H，m)，3.37(1H，d，J＝1.5Hz)，3.55(1H，d，J＝1.5Hz)，4.49(1H，m)，5.00(2H，s)，7.14-7.40(11H，m)，8.11(1H，t，J＝5.5Hz)，8.31(1H，t，J＝5.5Hz)，8.72(1H，d，J＝8.5Hz)
实施例88N-｛N-[(2S，3S)-3-反-乙氧基羰基环氧乙烷-2-羰基]-L-苯丙氨酰基｝-3-氨基-1-丙烯按照和实施例20基本相同的方法，N-[(2S，3S)-3-反-乙氧基羰基环氧乙烷-2-羰基]-L-苯丙氨酸(600mg)和3-氨基-1-丙烯氢氯化物(201mg，Wako Pure Chemical Industries，Ltd.制)缩合，得到白色粉状标题化合物(化合物86;481mg;产率71%)。D+23°(C0.51，CHCL3，25℃)对C18H22N2O5·0.1H2O元素分析计算值C，62.09;H，6.43;N，8.05测定值C;62.01，H;6.38，N;8.071H NMRδppm(CDCl3)1.30(3H，t，J＝7.2Hz)，3.02(1H，dd，J＝7.7，13.7Hz)，3.09(1H，dd，J＝8.0，13.8Hz)，3.10(1H，d，J＝1.9Hz)，3.62(1H，d，J＝1.9Hz)，3.81(2H，m)，4.24(2H，m)，4.57(1H，dt，J＝8.0，7.6Hz)，5.08(2H，m)，5.69(1H，ddt，J＝10.4，17.0，5.7Hz)，5.78(1H，t，J＝4.7Hz)，6.67(1H，d，J＝8.0Hz)，7.18(2H，m)，7.30(3H，m)实施例89N-｛N-[(2S，3S)-3-反-羧基环氧乙烷-2-羰基]-L-苯丙氨酰基｝-3-氨基-1-丙烯-钠盐按照和实施例27基本相同的方法，化合物86(100mg)进行乙酯的碱水解，树脂脱盐，然后浓缩和冷冻干燥，得到标题化合物(化合物87;96mg;产率98%)。D+43°(C0.52，H2O，25℃)对C16H17N2O5Na·1.5H2O元素分析计算值C，52.32;H，5.49;N，7.63;
测定值C;52.38，H;5.44，N;7.81;
1H NMRδppm(D2O)3.01(1H，dd，J＝8.6，13.8Hz)，3.16(1H，d，J＝2.1Hz)，3.18(1H，dd，J＝6.9，13.8Hz)，3.48(1H，d，J＝2.2Hz)，3.73(2H，dt，J＝4.9，1.6Hz)，4.61(1H，dd，J＝7.0，8.5Hz)，5.02(1H，dd，J＝1.5，17.2Hz)，5.07(1H，dd，J＝1.5，10.5Hz)，5.73(1H，ddt，J＝10.3，17.2，5.1Hz)，7.33(5H，m)实施例90N-｛N-[(2S，3S)-3-反-乙氧基羰基环氧乙烷-2-羰基]-L-色氨酰基｝-1-氨基-3-甲基丁烷按照基本和实施例5相同的方法，1-氨基-3-甲基丁烷(450μl)和Fmoc-Trp-OH(1.35g，Peptide Institute，Inc.)缩合，得到白色粉状N-(Fmoc-L-色氨酰基)-1-氨基-3-甲基丁烷(1.54g，产率98%)。部分产物(1.44g)按基本和实施例17相同的方法，进行脱保护Fmoc基，然后和参照实施例8得到的(2S，3S)-反-环氧琥珀酸乙酯(432mg)缩合，得到白色粉状标题化合物(化合物88;734mg);产率72%)。[α]D+31°(C0.53，CHCL3，25℃)。
对C22H29N3O5·0.15CHCL3元素分析计算值C，61.38;H，6.78;N，9.70;
测定值C;61.55，H;6.88，N;9.78;
1H NMRδppm(CDCl3)0.81(3H，d，J＝6.6Hz)，0.81(3H，d，J＝6.6Hz)，1.13(2H，q，J＝7.3Hz)，1.30(3H，t，J＝7.2Hz)，1.37(1H，m)，3.12(3H，m)，3.16(1H，d，J＝1.9Hz)，3.25(1H，ddd，J＝0.6，6.0，14.4Hz)，3.62(1H，d，J＝1.9Hz)，4.23(2H，m)，4.63(1H，dt，J＝6.0，8.1Hz)，5.50(1H，t，J＝5.6Hz)，6.86(1H，d，J＝7.7Hz)，7.04(1H，d，J＝2.4Hz)，7.16(1H，ddd，J＝1.1，7.1，7.8Hz)，7.23(1H，ddd，J＝1.3，7.1，8.1Hz)，7.38(1H，dd，J＝1.1，7.8Hz)，7.67(1H，dd，J＝0.9，7.8Hz)，8.18(1H，brs)实施例91N-｛N-[(2S，3S)-3-反-羧基环氧乙烷-2-羰基]-L-色氨酰基｝-1-氨基-3-甲基丁烷-钠盐按照和实施例27基本相同的方法，化合物88(200mg)进行乙酯的碱水解，树脂脱盐，然后浓缩和冷冻干燥，得到标题化合物(化合物89;181mg;产率92%)。D+59°(C0.56，H2O，25℃)对C20H24N3O5Na·1.5H2O元素分析计算值C，55.04;H，6.24;N，9.63;Na，5.27测定值C;55.15，H;6.34，N;9.71;Na，5.371H NMRδppm(D2O)0.71(6H，d，J＝6.2Hz)，1.01(2H，m)，1.10(1H，m)，2.91(1H，dt，J＝13.5，6.8Hz)，3.09(1H，dt，J＝13.7，6.9Hz)，3.23(2H，d，J＝7.6Hz)，3.25(1H，d，J＝2.2Hz)，3.51(1H，d，J＝2.0Hz)，4.57(1H，t，J＝7.6Hz)，7.16(1H，ddd，J＝1.1，7.0，7.9Hz)，7.22(1H，s)，7.24(1H，ddd，J＝1.1，7.1，8.1Hz)，7.50(1H，d，J＝8.1Hz)，7.64(1H，d，J＝7.8Hz)
实施例92N-｛N-[(2S，3S)-3-反-乙氧基羰基环氧乙烷-2-羰基]-3-(2-萘基)-L-丙氨酰基｝-1-氨基-3-甲基丁烷按照和实施例5基本相同的方法，1-氨基-3-甲基丁烷(128μl)和Boc-3-(2-萘基)-L-丙氨酸(315mg，瑞士Bachem Fein Chemikalien AG.制造)缩合，得到白色粉状N-[Boc-3-(2-萘基)-L-丙氨酰基]-1-氨基-3-甲基丁烷(374mg，产率97%)。用三氟乙酸消除Boc基团后，产物和参照实施例8中得到的(2S，3S)-反-环氧琥珀酸乙酯(153mg)缩合，得到白色粉状标题化合物(化合物90;276mg;产率75%)。D+41°(C0.58，CHCL3，25℃)对C24H30N2O5元素分析计算值C，67.58;H，7.09;N，6.57;
测定值C;67.34，H;7.07，N;6.64;
1H NMRδppm(CDCl3)0.74(3H，d，J＝6.6Hz)，0.76(3H，d，J＝6.6Hz)，1.13(2H，m)，1.27(3H，t，J＝7.2Hz)，1.29(1H，m)，3.10(2H，m)，3.16(1H，d，J＝1.8Hz)，3.19(2H，d，J＝7.5Hz)，3.63(1H，d，J＝1.9Hz)，4.21(2H，m)，4.63(1H，dt，J＝7.8，7.6Hz)，5.57(1H，t，J＝5.5Hz)，6.86(1H，d，J＝7.9Hz)，7.32(1H，dd，J＝1.7，8.4Hz)，7.47(2H，m)，7.62(1H，brs)，7.80(3H，m)实施例93N-｛N-[(2S，3S)-3-反-羧基环氧乙烷-2-羰基]-3-(2-萘基)-L-丙氨酰基｝-1-氨基-3-甲基丁烷按照和实施例27基本相同的方法，化合物90(100mg)进行乙酯的碱水解，反应混合物调节到PH3，再浓缩。过滤回收所得的粉状的沉淀，干燥得到标题化合物(化合物91;81mg;产率87%)。D+65°(C0.61，MeOH，25℃)对C22H26N2O5·0.8H20元素分析计算值C，64.00;H，6.74;N，6.79测定值C;64.00，H;6.75，N;6.901H NMRδppm(CDCl3)0.64(3H，d，J＝6.5Hz)，0.68(3H，d，J＝6.6Hz)，0.99(2H，m)，1.16(1H，m)，2.94(1H，m)，3.18(3H，m)，3.52(1H，d，J＝1.5Hz)，3.61(1H，d，J＝1.5Hz)，4.80(1H，dt，J＝7.9，8.0Hz)，5.73(1H，brs)，6.38(1H，t，J＝5.5Hz)，7.29(1H，dd，J＝1.5，8.5Hz)，7.45(2H，m)，7.61(1H，brs)，7.76(3H，m)，8.26(1H，d，J＝8.5Hz)实施例94制备主培养液生长在土豆-葡萄糖琼脂斜面培养基上的木霉属aureoviride FL-42547菌株在2升Sakaguchi烧瓶中接种到500ml含2%葡萄糖、3%可溶淀粉、1%大豆粉、0.3%玉米浸渍液、0.5%蛋白胨、0.3%氯化钠和0.5%碳酸钙的种子培养基中(PH7.0)，在往复振荡器上28℃下培养48小时。把此500ml的培养液转移到200升不锈钢罐中含5%糊精、3%玉米浸渍液、0.5%聚蛋白胨、1%氯化钙和0.5%碳酸钙(PH7.0)的120升主培养基中。24℃下发酵5天，通气120升/分钟，搅拌180rpm/分钟，内压1kg/cm2，得到主培养液。
实施例95TAN-1903-氢氯化物用助滤剂(Radiolite 600，Showa Chemical Industry剂备)过滤实施例94中得到的培养液(225L)。调节PH为7.0，过滤液(180L)用Diaion HP-20(30L)进行柱色谱处理，水洗(90L)并用50%(V/V)甲醇水溶液(150L)洗脱。在减压下洗脱物浓缩到50L，通过以Amberlite IRC-50(H型，14L)填充的柱，水洗(42L)并用1M盐水(70L)洗脱。调节PH7.0，洗脱液用Diaion HP-20(30L)进行柱色谱处理，水洗(90L)，然后用50%(V/V)甲醇水溶液/0.01M盐酸(90L)洗脱。调节PH为7.0，减压下浓缩洗脱物，以DiaionHP-20(100-200目，500ml)进行柱色谱处理，水洗(1.5L)，然后用50%(V/V)甲醇水溶液(1.0L)洗脱。浓缩洗脱物，通过以CM-Sephadex C-25(钠型，200ml)填充的柱，水洗(600ml)，再洗脱，用0.05M盐水分馏。收集分析HPLC中显示单一峰的部分，以Diaion HP-20(100-200目，150ml)脱盐。浓缩后，洗脱物冷冻干燥，得到N-｛N-[(2S，3S)-3-反-羧基环氧乙烷-2-羰基]-L-亮氨酰基｝-N-(3-氨基丙基)-1，4-二氨基丁烷(TAN-1803单氢氯化物)(化合物92;880mg)。
1)外观白色粉2)旋光度+20°(C0.53，0.1N盐酸，24℃)3)分子量m/z373(M+H)+，(SI-质谱)4)元素分析(%，假定1mol水)测定值C，47.33;H，8.23;N，13.53;CL，9.16计算值C，47.83;H，8.26;N，13.12;CL，8.30
5)分子式C17H32N4O5·HCL6)水中UV光谱未端吸收7)IR光谱(KBr片剂中，显示主要吸收，波数cm-1，图13)3430，3260，3060，2960，1630，1470，1390，900，7608)13C NMR光谱(75MZ，重水中，δppm.TAN-1803在重水中以两个构象异构体的混合物的形式存在;主要构象异构体的信号被显示出。图14)177.1(Q)，176.6(Q)，172.4(Q)，57.2(CH)，55.6(CH，51.8(CH)，50.3(CH2)，45.9(CH2)，42.5(CH2)，42.1(CH2)，39.8(CH2)，28.1(CH2)，27.9(CH2)，27.4(CH)，27.0(CH2)，25.3(CH3)，23.3(CH3)，9)显色反应阴性水合茚三酮反应，肽反应，磷钼酸反应阴性Sakaguchi反应，Ehrlich反应10)高效液相色谱法(HPLC)柱;YMC-Pack A-312，ODS流动相;5%(V/V)乙腈/0.01M磷酸盐缓冲液(PH3.0)流动速率;2.0ml/分钟检测;214nm保留时间;3.9分钟11)薄层色谱(TLC)载体硅胶60F254(德国Merck制)展开溶剂(体积计);正-丁醇∶乙酸∶水(2∶1∶1)Rf值0.19
实施例96N-Z-N′｛N-[(2S，3S)-3-反-乙氧基羰基环氧乙烷-2-羰基]-L-亮氨酰基｝-N′-(Z-3-氨基丙基)-1，4-二氨基丁烷根据日本专利未审公开号192347/1982记载的方法从3-氨基-1-丙醇和1，4-二氨基丁烷制备N-Z-N′-(Z-3-氨基丙基)-1，4-二氨基丁烷(1.15g)，悬浮在DMF(30ml)中，在冰冷却条件下加入三乙胺(427μl)、BOC-L-Leu-OH·H2O(763mg，Peptide Institute，Inc.制)、HOBT(413mg)和WSC(587mg)，然后室温下搅拌12小时。反应混合物经浓缩至干，加入乙酸乙酯(200ml);混合物连续用10%柠檬酸水溶液、2%碳酸氢钠水溶液和饱和盐水清洗，然后经无水硫酸钠干燥。干产物进行硅胶柱色谱处理，(Kieselgel 60，德国E.Merck制，120ml)，洗脱液用己烷并连续补加乙酸乙酯，从用50-60%(v/v)乙酸乙酯洗脱的部分得到N-(Boc-L-亮氨酰基)-N-(Z-3-氨基丙基)-N′-Z-1，4-二氨基丁烷(1.40g，产率81%)。向此化合物(1.38g)中加TFA(14ml);混合物静置1小时。加入乙酸乙酯(200ml)后，反应混合物连续用2%碳酸氢钠水溶液和饱和盐水清洗。经无水硫酸钠干燥后，浓缩混合物至干，得到N-(L-亮氨酰基)-N-(Z-3-氨基丙基)-N′-Z-1，4-二氨基丁烷(1.09g，产率94%)。
此化合物(1.06g)溶解在二氯甲烷(30ml)中，加入参照实施例8记载的(2S，3S)-反-环氧琥珀酸乙酯(356mg)、HOBT(300mg)和WSC(426mg)，然后室温搅拌14小时。反应混合物浓缩至干后，加入乙酸乙酯;混合物连续用10%柠檬酸水溶液、2%碳酸氢钠水溶液和饱和盐水清洗，然后经无水硫酸钠干燥。干制品进行硅胶柱色谱(60ml)处理，洗脱液用己烷并连续补加乙酸乙酯，从用65%(v/v)乙酸乙酯洗脱的部分得到标题化合物(化合物93;601mg;产率45%)。D+18°(C0.50，CHCl3，24℃)对C35H48N4O9·H2O元素分析计算值C，61.21;H，7.34;N，8.16测定值C;61.42，H;7.20，N;7.991HNMRδppm(DMSO-d6)化合物93在DMSO-d6中以两个构象异构体的混合物的形式存在0.87(6H，m)，1.23(3H，t×2，J＝7.0Hz)，1.23-1.85(9H，m)，2.90-3.40(8H，m)，3.59(1H，d，J＝2.0Hz)，3.71(1H，d，J＝2.0Hz)，4.17(2H，m)，4.69(1H，m)，5.00(4H，s)，7.15-7.40(12H，m)，8.75(1H，d×2，J＝7.0Hz)实施例97N-Z-N′-｛N-[(2S，3S)-3-反-羧基环氧乙烷-2-羰基]-L-亮氨酰基｝-N′-(Z-3-氨基丙基)-1，4-二氨基丁烷化合物93(476mg)溶解在甲醇(30ml)中，1N氢氧化钠水溶液(784μl)于冰冷却条件下加入，随后室温下搅拌1.5小时。反应混合物在1N盐酸(140μl)存在下浓缩，加水(50ml)。调节PH为2.5，水溶液用乙酸乙酯(50ml)萃取3次。有机溶剂层用饱和盐水清洗，经无水硫酸钠干燥，然后浓缩至干，得到标题化合物(化合物94;450mg;产率99%)。D+25°(C0.51，MeOH，24℃)元素分析(对C33H44N4O9·0.5H2O)
计算值C，61.00;H，6.98;N，8.62测定值C;61.15，H;6.96，N;8.671HNMRδppm(DMSO-d6)(在DMSO-d6中，化合物94以两个构象异构体的混合物的形式存在)0.87(6H，m)，1.20-1.85(9H，m)，2.87-3.60(8H，m)，3.44(1H，d，J＝2.0Hz)，3.64(1H，d×2，J＝2.0Hz)，4.70(1H，m)，5.00(4H，s)，7.15-7.40(12H，m)，8.69(1H，d×2，J＝6.0Hz)实施例98TAN-1803-氢氯化物化合物94(343mg)溶解在甲醇(8ml)中，加入水(4ml)、乙酸(31μl)和10%(W/W)钯/活性碳(34mg)，然后在氢气环境中于室温下搅拌1.5小时。过滤催化剂后，浓缩过滤物，然后制备HPLC[柱YMC-Pack，DODS-5(S-5 120A);流动相2%(v/v)乙腈/0.01M磷酸缓冲剂(PH6.3);流动速率10ml/分钟]处理。收集分析HPLC中显示TAN-1803单一峰的部分，通过以Amberlite IRA-402(Cl型，100ml)填充的柱，水洗(100ml)。洗脱物和清洗液混合，浓缩，然后用DiaionHP-20(100-200目，80ml)脱盐。浓缩洗脱物，冷冻干燥，得到TAN-1803-氢氯化合物(化合物92;107mg;产率49%)。
此化合物的物理-化学数据和从培养液得到的化合物一致。
制剂实施例1所有下述组分，包括实施例7得到的TAN-1756A，混合在一起，装在明胶胶囊中，制得胶囊制剂，每个胶囊含30mgTAN-1756A。
TAN-1756A30mg乳糖100mg玉米淀粉40mg硬脂酸镁10mg总计180mg制剂实施例2所有下述组分，包括实施例95得到的TAN-1803-氢氯化物，混合在一起，装于明胶胶囊中，制得胶囊制剂，每个胶囊含30mgTAN-1803-氢氯化物。
TAN-1803-氢氯化物30mg乳糖100mg玉米淀粉40mg硬脂酸镁10mg总计180mg附图简述图1是TAN-1756A的IR光谱图2是TAN-1756A的13C-NMR光谱图3是TAN-1756B的IR光谱图4是TAN-1756B的13C-NMR光谱图5是TAN-1854A-氢氯化物的IR光谱图6是TAN-1854A-氢氯化物的13C-NMR光谱图7是TAN-1854B-氢氯化物的IR光谱图8是TAN-1854B-氢氯化物的13C-NMR光谱图9是TAN-1756C1/2硫酸化物的IR光谱图10是TAN-1756C 1/2硫酸化物的13C-NMR光谱图11是TAN-1756D1/2硫酸化物的IR光谱图12是TAN-1756D 1/2硫酸化物的13C-NMR光谱图13是TAN-1803-氢氯化物的IR光谱图14是TAN-1803-氢氯化物的13C-NMR光谱图15是TAN-1868-钠盐的IR光谱图16是TAN-1868-钠盐的13C-NMR光谱[符号释义]X表示二噁烷吸收
权利要求
1.一种如下式的化合物或其盐 其中R1为羧基，该羧基可被酯化或酰胺化或未被酯化或酰胺化；R2为取代或未被取代的环基或为极性基团；n为0～6的整数；R3为氢或烃基，该烃基为取代或未被取代的；R4为(1)被未被保护的或被保护的氨基取代的烃基或(2)链烯基；R3和R4可与相邻的氮原子一起形成含至少两个杂原子的杂环基团。
2.按照权利要求1的化合物，其中R1为可被酯化或未被酯化的羧基。
3.按照权利要求1的化合物，其中R1为羧基。
4.按照权利要求1的化合物，其中R2为取代或未被取代的环基。
5.按照权利要求4的化合物，其中环基为芳基。
6.按照权利要求5的化合物，其中芳基为C6-14的芳基。
7.按照权利要求1的化合物，其中R3表示的烃基为烷基。
8.按照权利要求1的化合物，其中R4为氨烷基。
9.按照权利要求1的化合物，其中R3和R4与相邻的氮原子一起形成含至少两个杂原子的杂环基团。
10.按照权利要求9的化合物，其中杂环基团为六元杂环基团。
11.按照权利要求1的化合物，其中所说的化合物为N-[N-(2S，3S)-3-反-羧基环氧乙烷-2-羰基]-L-苯丙氨酰]-1，4-二氨基丁烷。
12.按照权利要求1的化合物，其中所说的化合物为N-[N-(2S，3S)-3-反-乙氧羰基环氧乙烷-2-羰基]-L-苯丙氨酰]-1，4-二氨基丁烷。
13.按照权利要求1的化合物，其中所说的化合物为N-[N-(2S，3S)-3-反-乙氧羰基环氧乙烷-2-羰基]-L-苯丙氨酰]吗啉。
14.按照权利要求1的化合物，其中所说的化合物为N-[N-(2S，3S)-3-反-羧基环氧乙烷-2-羰基]-L-苯丙氨酰]吗啉。
15.按照权利要求1的化合物，其中所说的化合物为N-[N-(2S，3S)-3-反-乙氧羰基环氧乙烷-2-羰基]-L-酪氨酰]吗啉。
16.按照权利要求1的化合物，其中所说的化合物为N-[N-(2S，3S)-3-反-羧基环氧乙烷-2-羰基]-L-酪氨酰]吗啉。
17.按照权利要求1的化合物，其中所说的化合物为N-[N-(2S，3S)-3-反-乙氧羰基环氧乙烷-2-羰基]-3-(2-萘基)-L-丙氨酰]吗啉。
18.按照权利要求1的化合物，其中所说的化合物为N-[N-(2S，3S)-3-反-羧基环氧乙烷-2-羰基]-3-(2-萘基)-L-丙氨酰]吗啉。
19.一种如下式的化合物或其盐 其中R11为酯化或酰胺化或者未被酯化或酰胺化的羧基;R12为取代或未被取代的芳多环基;n′为0～6的整数;R13和R14可相同或不同，为氢或烷基。
20.按照权利要求19的化合物，其中R11为酯化或未被酯化的羧基。
21.按照权利要求19的化合物，其中芳族多环基为C8-12的二环芳基。
22.按照权利要求19的化合物，其中所说的化合物为N-[N-(2S，3S)-3-反-乙氧羰基环氧乙烷-2-羰基]-3-(2-萘基)-L-丙氨酰]-1-氨基-3-甲基丁烷。
23.按照权利要求19的化合物，其中所说的化合物为N-[N-(2S，3S)-3-反-羧基环氧乙烷-2-羰基]-3-(2-萘基)-L-丙氨酰]-1-氨基-3-甲基丁烷。
24.一种如下式的化合物或其盐 其中;R21为酯化或酰胺化或者未被酯化或酰胺化的羧基;R22为烷基;R23和R24可相同或不同，为由被保护的或未被保护的氨基取代的烷基。
25.按照权利要求24的化合物，其中R21为羧基。
26.按照权利要求24的化合物，其中R22为C3-5的烷基。
27.按照权利要求24的化合物，其中R23和R24均为氨烷基。
28.一种用于抑制硫醇蛋白酶的组合物，其包含权利1、19或24的化合物或其盐。
29.一种用于防止或治疗骨疾病的组合物，其包含权利1、19或24的化合物或其盐。
30.按照权利要求29的组合物，其中骨疾病为骨质疏松症。
全文摘要
一种如上式的化合物或其盐其中R
文档编号C07D303/00GK1112555SQ9411868
公开日1995年11月29日 申请日期1994年10月28日 优先权日1993年10月29日
发明者坪谷重利, 泷泽正之, 白崎干雄, 藤泽幸夫 申请人:武田药品工业株式会社