1.星形聚合物接枝多肽和聚乙烯亚胺的基因载体的制备方法,其特征是包括如下步骤:
(1)将山梨醇、LA和MMD放入干燥的聚合管中,再加入辛酸亚锡作催化剂,密封;
所述山梨醇、LA、MMD和辛酸亚锡的摩尔比为33-66:616:62-616:20-25;
所述LA为丙交酯的简称,所述MMD为3(S)-甲基-吗啉-2,5-二酮的简称;
(2)对聚合管抽真空,通氮气;
(3)重复步骤(2)8-12次,于140-150℃反应24-28小时,得到P(LA-co-MMD)粗品;
(4)将P(LA-co-MMD)粗品用三氯甲烷溶解得到溶液1,将溶液1滴加入搅拌下的正己烷中,有沉淀生成;固液分离,所述三氯甲烷和正己烷的体积比为1:8-12;
(5)重复步骤(4)2-3次,得到的沉淀在真空干燥箱中干燥至恒重,得到P(LA-co-MMD);
(6)按摩尔比为1:15-30:15-30的比例,将P(LA-co-MMD)、丁二酸酐和二甲氨基吡啶,以及三乙胺溶解在干燥的1,4-二氧六环中,在25-30℃、氮气保护下反应20-25小时,得到溶液2,将溶液2滴加入搅拌下的0-10℃的乙醇中,有沉淀生成;固液分离,固体溶解于三氯甲烷中,依次用饱和NaHCO3水溶液洗涤2-3次,稀盐酸洗涤3-4次,饱和NaCl水溶液洗涤4-5次,得到的溶液加入无水硫酸钠干燥,抽滤,滤液滴加入搅拌下的正己烷中,有沉淀生成,固液分离,固体真空干燥至恒重,得端基为羧基的P(LA-co-MMD);所述三乙胺为P(LA-co-MMD)质量的1-3倍;
(7)按摩尔比为1:15-30:15-30的比例,将端基为羧基的P(LA-co-MMD)、EDC和NHS溶解在DMSO中,室温搅拌1-2小时,加入PEI的二甲基亚砜溶液中,使端基为羧基的P(LA-co-MMD)和PEI的摩尔比为1:15-30,室温搅拌反应20-24小时,置于截留分子量为1.4万的透析袋中,用超纯水透析2-3天,透析液冷冻干燥得P(LA-co-MMD)-g-PEI;
所述EDC为(1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐)的简称;
所述NHS为(N-羟基丁二酰亚胺)的简称;
所述PEI为(聚乙烯亚胺)的简称;
所述DMSO为二甲基亚砜的简称;
(8)将P(LA-co-MMD)-g-PEI溶解于二甲基亚砜中得溶液3,向溶液3中逐滴加入MAL-PEG-NHS的DMSO溶液和CREDVW多肽的DMSO溶液;在25℃下搅拌10-15小时,置于截留分子量为7000的透析袋中,用超纯水透析2-3天,透析液冷冻干燥得P(LA-co-MMD)-g-PEI-g-PEG-CREDVW多肽;
所述P(LA-co-MMD)-g-PEI、MAL-PEG-NHS和CREDVW多肽的摩尔比为1:6-12:9-18;
(9)以DMSO为溶剂,配制浓度为2-5毫克/毫升的P(LA-co-MMD)-g-PEI-g-PEG-CREDVW多肽溶液为溶液4,将溶液4以10秒一滴的速度滴入搅拌的pH=7.4的PBS缓冲溶液中,密封、静置10-14小时,移入截留分子量为3500的透析袋中,透析2-3天,得到星形聚合物接枝多肽和聚乙烯亚胺的基因载体;
溶液4与pH=7.4的PBS缓冲溶液的体积比为1:5-20。
2.权利要求1的方法制备的星形聚合物接枝多肽和聚乙烯亚胺的基因载体。
3.权利要求2的星形聚合物接枝多肽和聚乙烯亚胺的基因载体在制备促进内皮细胞迁移和增殖药物的应用。