本发明涉及植物功能成分提取领域，具体是一种从虎杖中制备白藜芦醇和大黄素的生产方法。
背景技术：
白藜芦醇被喻为继紫杉醇之后的又一新的绿色抗癌药物，有显著的抑制癌细胞、降低血脂、防治心血管疾病、抗氧化、增强免疫力、延缓衰老等作用。在制药、食品、保健品和化妆品等行业中有及广泛的应用。近年来，以白藜芦醇为活性成分的保健食品层出不穷：白藜芦醇（又名芪三酚），化学名为3,4,5，-三羟基二苯乙烯（3,4,5，-trihydrolystilbene），是含有芪类结构的非黄酮多酚类化合物。白藜芦醇是植物在受到应激时自身合成的一种抗毒素，具有重要的顺利活性。白藜芦醇分子结构中富含羟基，具有捕获自由基，抗氧化能力，其分子中的二苯烯结构有吸收紫外光的能力，这些特性被化妆品行业充分应用。白藜芦醇在许多植物中都有分布，但蓼科植物虎杖中白藜芦醇含量是最高的，达0.1-0.4%，是获得天然白藜芦醇的最理想资源。鉴于白藜芦醇在医药，保健品、化妆品市场有越来越广泛的应用，构建操作简单，成本低廉，易于大批量获得白藜芦醇纯品的分离纯化技术，有广泛的应用前景和重要意义。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种低成本、无有毒溶剂、能工业化生产的从虎杖中制备白藜芦醇和大黄素的生产方法。
本发明采用的技术方案为：从虎杖中制备白藜芦醇和大黄素的生产方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）将虎杖粉碎，得10-30目粉；
（2）按粉碎后的虎杖质量，加入0.5-0.8倍的水润湿，加入9-10‰酵母，置于发酵罐内，在45℃～50℃的温度下发酵48-72小时，使虎杖苷转化成白藜芦醇；
（3）按粉碎后的虎杖质量，加入10-14倍的乙醇，回流提取至少2次；其中，乙醇为60-70%乙醇；
（4）将提取液合并、过滤，浓缩回收乙醇，得提取浸膏；在提取浸膏中加入2-3倍质量的水沉淀、离心、得滤渣和离心液；滤渣干燥即为产品大黄素；
（5）离心液上大孔吸附树脂，用纯净水洗脱至无色，然后用2bv的25%乙醇洗脱，弃去；最后用1.5bv的80%乙醇洗脱，收集1.5bv的洗脱液；
（6）将收集到的洗脱液浓缩、干燥，得白藜芦醇粗品；
（7）白藜芦醇粗品重结晶：将白藜芦醇粗品用80%乙醇溶解，配置成固含量为10%的溶液，按粗品白藜芦醇重量添加3‰的活性炭，55-65℃脱色1-1.5小时，离心过滤，滤液浓缩至固含量50%，得浸膏；添加浸膏质量20%的95%乙醇，放置重结晶12-48小时，再过滤，最后将结晶真空干燥即得白藜芦醇。
对上述技术方案的进一步限定：所述大孔吸附树脂为ls101树脂或lx-17树脂。
本发明具有的有益效果：
1、本发明采用醇提水沉的方法，生产成本低，同时得到副产品大黄素；
2、生产周期短，生产中只用到水和乙醇，无其它有机溶剂安全环保；
3、白藜芦醇产品纯度≥98%。
具体实施方式
实施例1
将虎杖药材干燥粉碎成虎杖粉，过10-30目筛，取虎杖粉1000kg，加700kg水润湿；将9.6kg的酵母加入100kg水中，调ph=4.5，然后加入虎杖中搅拌均匀，50℃发酵72h。加入70%乙醇回流提取两次，过滤，合并提取液，浓缩至固含量20%，加入浸膏量的2倍水充分搅拌后离心，得滤渣和离心液。滤渣用水洗后热风干燥得大黄素。取离心液，上ls101树脂，纯净水洗至无色，再用20%乙醇洗脱2bv，最后用80%乙醇洗脱，收集1.5bv洗脱液，洗脱液浓缩、干燥，hplc测定，得纯度62.7%的白藜芦醇粗品。
实施例2
将虎杖药材干燥粉碎成虎杖粉，过10-30目筛，取虎杖粉1000kg，加700kg水润湿；将9.6kg的酵母加入100kg水中，调ph=4.5，然后加入虎杖中搅拌均匀，50℃发酵72h。加入70%乙醇回流提取两次，过滤，合并提取液，浓缩至固含量20%，加入浸膏量的2倍水充分搅拌后离心，得滤渣和离心液。滤渣用水洗后热风干燥得大黄素。取离心液，上lx-17树脂，纯净水洗至无色，再用20%乙醇洗脱2bv，最后用80%乙醇洗脱，收集1.5bv洗脱液，洗脱液浓缩、干燥，hplc测定，得纯度63.3%的白藜芦醇粗品。
实施例3
将虎杖药材干燥粉碎成虎杖粉，过10-30目筛，取虎杖粉1000kg，加700kg水润湿；将9.6kg的酵母加入100kg水中，调ph=4.5，然后加入虎杖中搅拌均匀，50℃发酵72h。加入70%乙醇回流提取两次，过滤，合并提取液，浓缩至固含量20%，加入浸膏量的2倍水充分搅拌后离心，得滤渣和离心液。滤渣用水洗后热风干燥得大黄素。取离心液，上ls101树脂，纯净水洗至无色，再用25%乙醇洗脱2bv，最后用80%乙醇洗脱，收集1.5bv洗脱液，洗脱液浓缩、干燥，hplc测定，得纯度65.4%的白藜芦醇粗品。
实施例4
将虎杖药材干燥粉碎成虎杖粉，过10-30目筛，取虎杖粉1000kg，加700kg水润湿；将9.6kg的酵母加入100kg水中，调ph=4.5，然后加入虎杖中搅拌均匀，50℃发酵72h。加入70%乙醇回流提取两次，过滤，合并提取液，浓缩至固含量20%，加入浸膏量的2倍水充分搅拌后离心，得滤渣和离心液。滤渣用水洗后热风干燥得大黄素。取离心液，上lx-17树脂，纯净水洗至无色，再用25%乙醇洗脱2bv，最后用80%乙醇洗脱，收集1.5bv洗脱液，洗脱液浓缩、干燥，hplc测定，得纯度68.7%的白藜芦醇粗品。
实施例5
白藜芦醇重结晶：将实施例1或实施例2或实施例3或实施例4生产的白藜芦醇粗品品用80%乙醇溶解，配置成固含量为10%的溶液，按粗品白藜芦醇重量添加3‰的活性炭，55-65℃脱色1-1.5小时，离心过滤，滤液浓缩至固含量50%，得浸膏；添加浸膏质量20%的95%乙醇，放置重结晶12-48小时，再过滤，最后将结晶真空干燥即得纯度≥98%的白藜芦醇。