本发明属于应用生物技术领域，更具体地，本发明涉及一种裂蹄木层孔菌(phellinuslinteus)固体培养物及其制备方法和应用。
背景技术：
野生裂蹄木层孔菌(phellinuslinteus)子实体生长周期可长达20～30年，只有在原始森林中才能采集到，资源相当匮乏，价格也相当昂贵。
据文献记载，裂蹄木层孔菌(phellinuslinteus)子实体的热水提取物对小白鼠肉瘤180的抑制率为96.7％，可用于治疗各种肿瘤、肝病、心脏病、中风偏瘫、胃病、胃溃疡、食欲不振等疾病，是一种名贵的药用真菌。
被称为抗癌之王的桑黄，根据现代分子生物学鉴定其实与裂蹄木层孔菌是同一物种(phellinuslinteus)不同的中文名字。
尽管裂蹄木层孔菌或桑黄(phellinuslinteus)具有很强的抗肿瘤活性，但未见提及有降血压、降血糖的功能，此外，由于裂蹄木层孔菌资源匮乏，其用于科学研究也受到局限。
常规的药用真菌培养，一般采用木屑作培养基培养出子实体，再用子实体提取其有效成分，其分离纯化程序非常繁琐。
技术实现要素：
基于此，本发明克服了现有技术的缺陷，提供了一种裂蹄木层孔菌(phellinuslinteus)固体培养物及其制备方法和应用。
为了实现上述发明目的，本发明采取了以下技术方案：
一种用于培养裂蹄木层孔菌(phellinuslinteus)固体培养物的培养基，所述培养基含有100～1000g/l的小麦胚芽以及10～100g/l的黄豆粉。
在其中一些实施例中，所述培养基含有100～500g/l的小麦胚芽以及10～50g/l的黄豆粉。
在其中一些实施例中，所述培养基含有300～400g/l的小麦胚芽以及20～30g/l的黄豆粉。
在其中一些实施例中，所述培养基含有400g/l的小麦胚芽以及20g/l的黄豆粉。
在其中一些实施例中，所述培养基含有300g/l的小麦胚芽以及30g/l的黄豆粉。
本发明还提供了一种裂蹄木层孔菌(phellinuslinteus)固体培养物的制备方法，采用上述培养基，包括以下步骤：
1)将裂蹄木层孔菌(phellinuslinteus)保藏菌种接入至灭菌的培养基中，所述固体培养基含有100～1000g/l的小麦胚芽以及10～100g/l的黄豆粉；
2)接种后，置于恒温培养箱，25～28℃培养10～30天，即得。
在其中一些实施例中，步骤1)中所述裂蹄木层孔菌(phellinuslinteus)分离自野生的裂蹄木层孔菌(phellinuslinteus)子实体中，并经dna鉴定确认。
在其中一些实施例中，步骤1)中所述灭菌条件为：蒸汽高压锅，1kg/cm2，消毒30分钟。
在其中一些实施例中，步骤2)中所述培养条件为：25～28℃培养30天。
本发明还提供了上述制备方法制备得到的裂蹄木层孔菌(phellinuslinteus)固体培养物。
本发明还提供了上述裂蹄木层孔菌(phellinuslinteus)固体培养物在预防和治疗高血压和高血糖方面的应用。
一种防治高血压和高血糖的组合物，所述组合物含有上述裂蹄木层孔菌(phellinuslinteus)固体培养物。
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
1、本发明全部采用可食用的原料(麦胚芽、黄豆粉)，经裂蹄木层孔菌生物转化成可调节人体血压和血糖的活性物质，裂蹄木层孔菌(phellinuslinteus)固体培养物可以根据需要无限放大，解决了关键原料来源的问题；
2、本发明的固体培养物可直接加工成同时具有降血压和降血糖的功能的口服液，省略繁琐的分离纯化程序，大大简化了生产工艺、节省了生产成本；
3、本发明的制备方法工艺简单、成本低廉，有利于在低收入的高血压、高血糖的人群中推广。
具体实施方式
下面结合具体实施例进一步叙述本发明，本发明未述及之处适用于现有技术。下面给出本发明的具体实施例，但实施例仅是为了进一步详细叙述本说明，并不限制本发明的权利要求。以下实施例中所使用的试剂或原料，如无特殊说明，均来源于市售。
本发明实施例中所使用的裂蹄木层孔菌(phellinuslinteus)是从野生的裂蹄木层孔菌(phellinuslinteus)子实体中分离并经dna鉴定确认的菌种，具体分离方法如下：
采集寄生在桦树、桑树上，外观形态与文献描述的裂蹄木层孔菌相似的未纤维化的子实体，表面消毒后用手术剪刀剪开成绿豆粒大小的颗粒。用小镊子把剪碎的裂蹄木层孔菌子实体放在培养基(含400g/l的小麦胚芽以及20g/l的黄豆粉)上，28*c培养10天。
培养好的菌丝体送专业的dna公司作菌种鉴定。dna分子鉴定结果与genbank数据库记载的phellinuslinteus相似度大于99％。
实施例1
本实施例的一种裂蹄木层孔菌(phellinuslinteus)固体培养物的制备方法，包括以下步骤：
1)在100克水中添加了50克麦胚芽和1克黄豆粉，装于广口玻璃瓶，纱布封口，置于蒸汽高压锅，1kg/cm2，消毒30分钟，得到培养基；
2)将裂蹄木层孔菌(phellinuslinteus)斜面菌种接入至灭菌的培养基中；
3)接种后，置于恒温培养箱，25～28℃培养30天，即得。
实施例2
本实施例的一种裂蹄木层孔菌(phellinuslinteus)固体培养物的制备方法，包括以下步骤：
1)在100克水中添加了40克麦胚芽和2克黄豆粉，装于广口玻璃瓶，纱布封口，置于蒸汽高压锅，1kg/cm2，消毒30分钟，得到培养基；
2)将裂蹄木层孔菌(phellinuslinteus)斜面菌种接入至灭菌的培养基中；
3)接种后，置于恒温培养箱，25～28℃培养30天，即得。
实施例3
本实施例的一种裂蹄木层孔菌(phellinuslinteus)固体培养物的制备方法，包括以下步骤：
1)100克水中添加了30克麦胚芽和3克黄豆粉，装于广口玻璃瓶，纱布封口，置于蒸汽高压锅，1kg/cm2，消毒30分钟，得到培养基；
2)将裂蹄木层孔菌(phellinuslinteus)斜面菌种接入至灭菌的培养基中；
3)接种后，置于恒温培养箱，25～28℃培养30天，即得。
实施例4
本实施例的一种裂蹄木层孔菌(phellinuslinteus)固体培养物的制备方法，包括以下步骤：
1)在100克水中添加了20克麦胚芽和4克黄豆粉，装于广口玻璃瓶，纱布封口，置于蒸汽高压锅，1kg/cm2，消毒30分钟，得到培养基；
2)将裂蹄木层孔菌(phellinuslinteus)斜面菌种接入至灭菌的培养基中；
3)接种后，置于恒温培养箱，25～28℃培养30天，即得。
实施例5
本实施例的一种裂蹄木层孔菌(phellinuslinteus)固体培养物的制备方法，包括以下步骤：
1)在100克水中添加了10克麦胚芽和5克黄豆粉，装于广口玻璃瓶，纱布封口，置于蒸汽高压锅，1kg/cm2，消毒30分钟，得到培养基；
2)将裂蹄木层孔菌(phellinuslinteus)斜面菌种接入至灭菌的培养基中；
3)接种后，置于恒温培养箱，25～28℃培养30天，即得。
试验例1实施例1～5的裂蹄木层孔菌(phellinuslinteus)固体培养物的总黄酮含量测定
黄酮类化合物泛指由两个具有酚羟基的苯环通过中央三碳原子相互连结而成的一系列化合物。据报道，很多天然的黄酮类化合物具有非常强的生理功能，如降血压、降血糖、降血脂、降胆固醇，有血管清道夫之称。
采用分光光度法测定裂蹄木层孔菌(phellinuslinteus)固体培养物中总黄酮的含量。固体培养物第10天开始每隔5天取样，样品中的黄酮类化合物经提取纯化后，用分光光度法于510nm波长下测定其吸光度，与芦丁标准品对照，计算出每克样品中总黄酮的含量，结果如表1所示。
表1裂蹄木层孔菌(phellinuslinteus)固体培养物的总黄酮含量
表1结果表明，本发明实施例2所制备的裂蹄木层孔菌(phellinuslinteus)总黄酮含量最高；并且发现麦胚芽与黄豆粉的配比直接影响固体培养物中总黄酮的含量。
试验例2实施例2的裂蹄木层孔菌(phellinuslinteus)固体培养物对降血糖和降血压的影响
在100克水中加入实施例2的裂蹄木层孔菌(phellinuslinteus)固体培养物40克和罗汉果10克，置于蒸汽高压锅中，1kg/cm2，蒸煮30分钟，冷却后用500目滤布过滤，滤清液分装于20ml的玻璃瓶，压盖机压盖密封；置于蒸汽高压锅中，1kg/cm2，高压消毒30分钟，制得口服液。
寻找5年以上收缩压180mmhg以上的高血压志愿者100名、空腹血糖10mmol/l以上高血糖志愿者100名，服用上述口服液，每天1瓶(20毫升)。服用30天。
有效率判断：收缩压下降40mmhg、空腹血糖下降3mmol/l为有效。
结果：高血压患者治愈有效率为83％，高血糖患者治愈有效率为95％，总有效率达到89％，说明含有本发明的裂蹄木层孔菌(phellinuslinteus)固体培养物对降血糖和降血压都有显著的治疗作用。
以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。