本申请是申请号为201480009556.5、申请日为2014年2月8日、发明名称为“选择性cdk4/6抑制剂的固态形式”的专利申请的分案申请。相关申请的交叉引用本申请主张2013年2月21日提交的美国临时申请第61/767,761号的优先权利益，以引用的方式将该临时申请的全文并入本申请中。本发明涉及具有改良的理化性质的6-乙酰基-8-环戊基-5-甲基-2-(5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基)-8h-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮的游离碱。本发明还涉及包含该游离碱的药物组合物及剂型、以及制备所述化合物、组合物及剂型的方和使用所述化合物、组合物及剂型用于治疗细胞增生疾病(诸如癌症)的方法。
背景技术：
：：化合物6-乙酰基-8-环戊基-5-甲基-2-(5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基)-8h-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮(本申请中亦被称为“化合物1”)可以下示结构表示：且也被称为帕泊西力(palbociclib)或pd-0332991。化合物1为cdk4及cdk6的有效且选择性抑制剂。化合物1及其药学上可接受的盐公开于国际专利公开文本第wo2003/062236号及美国专利第6,936,612号、7,208,489号及7,456,168号中，它们描述了化合物1的盐酸盐的制备。国际专利公开文本第wo2005/005426号及美国专利第7,345,171号及7,863,278号描述了化合物1的游离碱及不同一酸及二酸加成盐的制备，包括羟乙磺酸盐的多晶型形式。制备化合物1的一羟乙磺酸盐的方法描述于国际专利公开文本第wo2008/032157号及美国专利7,781,583号中。以全文引用方式将前述各参考文献的全部内容并入本申请中。虽然化合物1为有效且具选择性的cdk4/cdk6抑制剂，但其以游离碱形式的使用对药物开发显示出挑战。由传统盐断裂程序所提供的游离碱(例如在wo2005/005426的实施例4中)非常容易产生静电且形成小的初级粒子，该初级粒子聚结成大的、硬的聚结物，该聚结物难以通过筛分分散且不适于进一步开发。本发明提供具有较大原生粒径的化合物1游离碱，其证实有改良的理化性质及制备性质。技术实现要素：化合物1，即6-乙酰基-8-环戊基-5-甲基-2-(5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基)-8h-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮的游离碱可以一种或多种多晶型形式存在，包括a型和b型，其中a型为更稳定的晶型。该游离碱可为无水的或可含有不同量的水或一种或多种溶剂。本发明提供化合物1的结晶游离碱，其具有比通过本领域中所述的传统盐断裂方法所提供的游离碱更大原生粒径、极大减少的比表面积及更低的表面能测量值。本申请中公开的大粒径化合物1游离碱可通过多种方法区分。本发明的多晶型及固体形式可通过粉末x射线衍射测定法(pxrd)、固态nmr(ssnmr)、差示扫描量热法(dsc)、振动光谱法(例如ir及拉曼光谱法)、偏振光显微术(plm)、扫描电子显微术(sem)、热载台光学显微术、电子晶体学、单晶x射线衍射法、定量分析、粒径分析(psa)(例如，粒径、粒径分布(psd)及粒子形状)、比表面积(ssa)分析、表面能分析(例如反气相色谱法或igc)、溶解度研究及溶出度研究或这些技术的组合来辨别。一方面，本发明提供具有≤2平方米/克的比表面积的6-乙酰基-8-环戊基-5-甲基-2-(5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基)-8h-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮的结晶游离碱。在一些实施方案中，所述游离碱具有≤1平方米/克的比表面积。在优选的实施方案中，化合物1的结晶游离碱为该游离碱的a型多晶型。在一些这样的实施方案中，所述结晶游离碱具有包含在衍射角(2θ)10.1±0.2的峰的pxrd图案。在其它这样的实施方案中，所述结晶游离碱具有包含在衍射角(2θ)8.0±0.2及10.1±0.2的峰的pxrd图案。在再其它实施方案中，所述结晶游离碱具有包含在衍射角(2θ)8.0±0.2、10.1±0.2及11.5±0.2的峰的pxrd图案。在另外的实施方案中，所述结晶游离碱具有包含在衍射角(2θ)8.0±0.2、10.1±0.2、10.3±0.2及11.5±0.2的峰的pxrd图案。在另外的实施方案中，所述结晶游离碱具有包含在与图1中所示实质上相同的衍射角(2θ)的峰的pxrd图案。在一些实施方案中，化合物1的结晶游离碱(a型)具有包含以下共振(ppm)值的13c固态nmr(ssnmr)光谱：12.5ppm±0.2ppm。在其它实施方案中，所述结晶游离碱具有包含以下共振(ppm)值的13c固态nmr光谱：12.5ppm及112.4ppm±0.2ppm。在另外的实施方案中，所述结晶游离碱具有包含以下共振(ppm)值的13c固态nmr光谱：或12.5ppm、112.4ppm及143.2ppm±0.2ppm。在本申请中所述的一些实施方案中，通过粒径分析辨别本发明的化合物1游离碱。在一些这样的实施方案中，所述结晶游离碱具有约5微米至约150微米，优选约10微米至约100微米，或更优选约15微米至约80微米的原生粒径。在其它这样的实施方案中，所述结晶游离碱具有特征如下所示的原生粒径分布：(i)约5微米至约10微米的d10值；(ii)约10微米至约45微米的d50值；或(iii)约30微米至约125微米的d90值；或(i)、(ii)及(iii)的组合。在另外的实施方案中，所述结晶游离碱具有(d90-d10)/d50为约2至约3的原生粒径分布比。在另外的实施方案中，所述结晶游离碱具有约15微米至约125微米的体积平均直径(d[4,3])。在一些实施方案中，化合物1的结晶游离碱为无水的。在其它实施方案中，化合物1的结晶游离碱为溶剂合物，特别是水合物。在其它方面，本发明提供一种包含根据本发明的具有大原生粒径的化合物1的结晶游离碱，以及药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂的药物组合物。经常地，该药物组合物包含所述游离碱的a型多晶型。本发明另外提供包含本发明的所述药物组合物的胶囊。在一些这样的实施方案中，所述胶囊包含0.1至200毫克及优选25至150毫克的化合物1游离碱(优选a型多晶型)，其具有如本申请中所述的大原生粒径。在其它方面，本发明提供一种治疗哺乳动物(优选人类)的癌症的方法，其包括对所述哺乳动物给予治疗有效量的本发明药物组合物。所述治疗方法可以另外包括与一种或多种额外治疗剂联合给予化合物1。在其它方面，本发明提供用于制备如本申请中所述的具有大原生粒径的化合物1游离碱的方法。一种方法包括将小粒径的化合物1游离碱溶解于第一溶剂与第二溶剂的混合物中并加热以获得溶解，冷却至适当温度，提供化合物1游离碱(a型)的晶种，接着结晶以提供大粒径的化合物1游离碱。该方法中所使用的小粒径游离碱可从传统盐断裂程序，例如通过中间体乙烯基醚的酸水解分离，以提供酸加成盐，接着碱化，如实施例5中所述。另一种方法包括中间体乙烯基醚于水与第一溶剂的混合物中的酸水解，其可能需要加热以获得溶解，添加第二溶剂及碱化以提供包含在原位产生的游离碱的第二混合物，视需要加热以获得溶解并馏出水，并在适当温度下提供化合物1游离碱(a型)的晶种，然后结晶以提供具有大原生粒径的化合物1游离碱。本发明另外提供通过这些方法制备的化合物1游离碱，其具有本申请中所述的性质。在上述各方法中，所述第一溶剂为醇且所述第二溶剂为芳族溶剂。适用的醇包括但不局限于相对高沸点的醇，诸如正丁醇、叔丁醇、正丙醇、戊醇、1,4-丁二醇或丙二醇等。适用的芳族溶剂包括但不局限于茴香醚、1,3,5-三甲苯、间二甲苯、氯苯、吡啶等。为了提高收率，所述方法可包括加热或冷却至高于或低于室温的温度。通常，所述反应混合物可被加热至约30℃至约150℃的温度，更通常为约50℃至约120℃的温度以获得溶解。在结晶期间，可能需要将所述反应混合物冷却至室温或低于室温的温度，例如介于约0℃与约30℃之间，优选约5℃、约10℃、约15℃或约20℃。这些及其它方面和实施方案通过本申请中所提供的详细描述进一步说明。本申请中所述的各实施方案可与本申请中所述的未与其所结合的实施方案抵触的任何其它实施方案结合。附图简要说明图1显示化合物1游离碱(a型多晶型)的pxrd图案。图2显示化合物1游离碱(a型多晶型)的碳cpmas光谱。星号所标记的峰为旋转边带。图3显示化合物1游离碱(b型多晶型)的pxrd图案。图4显示化合物1游离碱(b型多晶型)的碳cpmas光谱。星号所标记的峰为旋转边带。图5显示化合物1游离碱api(a型多晶型，从40％n-buoh/茴香醚再结晶)的扫描电子显微术(200倍放大倍率)图像。图6显示化合物1游离碱api(a型多晶型，从标准游离碱化程序分离)的扫描电子显微术(1500倍放大倍率)图像。图7显示化合物1游离碱api(a型多晶型，从40％n-buoh/茴香醚再结晶)的粒径分布。图8显示化合物1游离碱api(a型多晶型，从标准游离碱化程序分离)的粒径分布。图9显示化合物1游离碱api(a型多晶型，从40％n-buoh/茴香醚再结晶)的偏振光显微术(plm)(200倍)图像。具体实施方式参考以下详细说明及本申请中所包括的实施例可更容易理解本发明。应理解此处所使用的术语仅为了说明特定实施方案，并非想限制。另外应理解，除非本申请中特别界定，否则本申请中所使用的术语应被给予其在相关
技术领域：
：中已知的传统意义。如本申请中所使用，除非另外指示，否则单数形“a”、“an”及“the”包括复数指代。例如，“a”取代基包括一个或多个取代基。如本申请中所使用的，术语“约”意指在某一值(诸如所述的浓度范围、时段、分子量、粒径、温度或ph)的统计学意义范围内。此范围可在一数量级内，通常在所指示值或范围的20％内，更常在10％内，及更常在5％内。有时候，这类范围可在用于测量和/或测定给定值或范围的标准方法的一般实验误差内。通过术语“约”包含的容许偏差将视所研究的特定系统而定，而且本领域普通技术人员可轻易地理解。无论何时在本申请中引用某一范围时，在该范围内的每个整数全部亦被视为本发明的实施方案。如本申请中所使用，除非另外指示，否则术语“异常细胞生长”是指不依赖于正常调节机制(例如失去接触抑制)的细胞生长。“异常细胞增生疾病”是特征为异常细胞生长的疾病，诸如癌症。术语“癌症”包括实体肿瘤及血液学恶性病二者。癌症包括但不局限于乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌、子宫内膜癌、前列腺癌、睾丸癌、胰腺癌、食道癌、头颈癌、胃癌、膀胱癌、肺癌(例如，腺癌、nsclc及sclc)、骨癌(例如，骨肉瘤)、结肠癌、直肠癌、甲状腺癌、脑及中枢神经系统癌症、神经胶质母细胞瘤、神经母细胞瘤、神经内分泌癌、杆状癌、角质棘皮瘤、表皮样癌、精细胞瘤、黑色素瘤、肉瘤(例如，脂质肉瘤)、膀胱癌、肝癌(例如，肝细胞癌)、肾癌(例如，肾细胞癌)、骨髓样障碍(例如，aml、cml、骨髓发育不良综合征及前髓细胞性白血病)及淋巴样障碍(例如，白血病、多发性骨髓瘤、外膜细胞淋巴瘤、all、cll、b细胞淋巴瘤、t细胞淋巴瘤、何杰金淋巴瘤、非何杰金淋巴瘤、毛细胞淋巴瘤)。短语“药学上可接受的”是指在合理医学判断范围内适于与患者的组织接触而无过度毒性、刺激、过敏反应等、相称地具有合理益处/风险比且对其所计划的用途有效的物质。如本申请中所使用，术语“哺乳动物”可为人类或非人类哺乳动物(例如，狗、猫、兔、大鼠、小鼠、马、猴、其它低等灵长类等)。优选地，所述哺乳动物是人类。如本申请中所使用，除非另外指示，否则术语“治疗”意指逆转、减轻、预防应用此术语的障碍或病况或该障碍或病况的一种或多种症状、或抑制所述障碍或病况的进程。如本申请中所使用，除非另外指示，否则术语“治疗”是指前文所定义的作为“治疗”的治疗动作。如本申请中所使用的，“有效”量是指化合物、药剂、物质、制剂或组合物的量，该量具有足以造成疾病症状严重性降低、无疾病症状期间的频率及持续期间增加或防止因疾病侵扰所致的损伤或失能的量。该量可为单一剂量或根据多剂量方案，单独或与其它化合物、药剂或物质组合。本领域普通技术人员能根据诸如受治疗者的身材、受治疗者的症状的严重性及所选择的特定组合物或给药途径来确定所述量。如本申请中所使用的，“单位剂型”是指适于被治疗的对象的发明制剂的物理离散单元。然而，将理解本发明的组合物的总每日使用将由主治医生在合理医学判断范围内决定。对于任何特定受治疗者的特定有效剂量水平将取决于许多因素，包括被治疗的障碍及该障碍的严重性；所使用的特定组合物；受治疗者的年龄、体重、一般健康状况、性别及饮食；给药时间、治疗持续期间；与本发明组合物组合或同时使用的药物和/或另外疗法、以及医疗领域中为人熟知的类似因素。如本申请中所使用，关于x射线衍射峰位置的术语“实质上相同”意指考虑典型峰位置及强度变异性。例如，本领域技术人员将理解，峰位置(2θ)会显示一些仪器间的变异性，通常多达0.2°或0.1°。此外，本领域技术人员将理解，相对峰强度将显示仪器间的变异性以及因结晶性的程度，优选定向、所制备的样品表面及本领域技术人员已知的其它因素所致的变异性，且应被仅视为定性度量。本申请中所使用的，术语“溶剂合物”是指含有溶剂的物质的晶体形式。术语“水合物”指所述溶剂为水的溶剂合物。如本申请中所使用的，术语“加晶种”意指为引发或加强成核或用作进一步结晶的基材的目的将晶体添加至结晶系统。如本申请中所使用的，术语“api”或“活性药物成分”是指6-乙酰基-8-环戊基-5-甲基-2-(5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基)-8h-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮的游离碱。如本申请中所使用的，术语“初级粒子”是指个体api晶体。如本申请中所使用的，术语“聚结物”是指难以在加工及粒径分析期间难以分散成初级粒子的紧密结合的api晶体。本发明提供具有比通过传统盐断裂方法所提供的游离碱更大的原生粒径、极大减少的比表面积及更低的表面能测量值的化合物1的游离碱。为方便起见，本发明所提供的化合物1游离碱在本申请中有时可被称为“大(原生)粒径”游离碱。这与经由传统盐断裂方法所制备的化合物1游离碱相反，该由传统盐断裂方法所制备的化合物1游离碱有时被称为“小(原生)粒径”游离碱。本领域技术人员将理解，在这种情况中提及“小粒径”是指个体api晶体的粒径，不考虑该“小”粒子形成大聚结物的倾向。在本申请中所述的一些实施方案中，化合物1的结晶游离碱通过比表面积(ssa)辨别。因此，一方面，本发明提供一种具有≤2平方米/克的比表面积(ssa)的6-乙酰基-8-环戊基-5-甲基-2-(5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基)-8h-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮的结晶游离碱。在一些实施方案中，所述游离碱具有≤1平方米/克的比表面积(ssa)。在其它实施方案中，所述化合物1游离碱具有≤0.9平方米/克、≤0.8平方米/克或≤0.7平方米/克的ssa。在另外的实施方案中，所述化合物1游离碱具有介于0.2平方米/克与2平方米/克之间、介于0.5平方米/克与1.5平方米/克之间、或介于0.5平方米/克与1平方米/克之间的ssa。在本申请中所述的一些实施方案中，化合物1的结晶游离碱通过分散表面能辨别。因此，一方面，本发明提供一种具有≤60mj/m2的分散表面能的6-乙酰基-8-环戊基-5-甲基-2-(5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基)-8h-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮的结晶游离碱。在一些实施方案中，所述游离碱具有≤55mj/m2、≤50mj/m2、≤45mj/m2或≤40mj/m2的分散表面能。在另外的实施方案中，化合物1游离碱具有介于20mj/m2与60mj/m2之间、介于25mj/m2与50mj/m2之间、或介于30mj/m2与50mj/m2之间的分散表面能。在优选的实施方案中，化合物1的结晶游离碱为该游离碱的a型多晶型。在一些这样的实施方案中，所述晶型具有包含在衍射角(2θ)10.1±0.2的峰的pxrd图案。在其它这样的实施方案中，所述晶型具有包含在衍射角(2θ)8.0±0.2及10.1±0.2的峰的pxrd图案。在再其它实施方案中，所述晶型具有包含在衍射角(2θ)8.0±0.2、10.1±0.2及11.5±0.2的峰的pxrd图案。在另外的实施方案中，所述晶型具有包含在衍射角(2θ)8.0±0.2、10.1±0.2、10.3±0.2及11.5±0.2的峰的pxrd图案。在其它实施方案中，所述晶型具有包含在衍射角(2θ)5.1±0.2、8.0±0.2、10.1±0.2及11.5±0.2的峰的pxrd图案。在另外的实施方案中，所述晶型具有包含在衍射角(2θ)8.0±0.2、10.1±0.2、11.5±0.2及19.7±0.2的峰的pxrd图案。在再另外的实施方案中，所述晶型具有包含在衍射角(2θ)8.0±0.2、10.1±0.2、11.5±0.2及22.5±0.2的峰的pxrd图案。在另外的实施方案中，所述晶型具有包含在与图1中所示实质上相同的衍射角(2θ)的峰的pxrd图案。在一些实施方案中，化合物1的结晶游离碱(a型)具有包含以下共振(ppm)值的13c固态nmr光谱：12.5ppm±0.2ppm。在其它实施方案中，所述晶型具有包含以下共振(ppm)值的13c固态nmr光谱：12.5ppm及112.4ppm±0.2ppm。在另外的实施方案中，所述晶型具有包含以下共振(ppm)值的13c固态nmr光谱：或12.5ppm、112.4ppm及143.2ppm±0.2ppm。在本申请中所述的一些实施方案中，化合物1的结晶游离碱通过粒径分析来辨别。在一些这样的实施方案中，所述游离碱具有约5微米至约150微米，优选约10微米至约100微米，及更优选约15微米至约80微米的原生粒径。在其它这样的实施方案中，所述游离碱具有特征如下所示的原生粒径分布：(i)约5微米至约10微米的d10值；(ii)约10微米至约45微米的d50值；或(iii)约30微米至约125微米的d90值；或(i)、(ii)及(iii)的组合。在另外的实施方案中，所述游离碱具有(d90-d10)/d50为约2至约3的原生粒径分布比。在另外的实施方案中，所述游离碱具有约15微米至约125微米的体积平均直径(d[4,3])。一方面，本发明提供一种具有大于约5微米的原生粒径的6-乙酰基-8-环戊基-5-甲基-2-(5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基)-8h-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮的结晶游离碱。在一些实施方案中，所述游离碱具有大于约7.5微米的原生粒径。在其它实施方案中，所述游离碱具有大于约10微米的原生粒径。在其它这样的实施方案中，所述游离碱具有大于约12.5微米的原生粒径。在其它这样的实施方案中，所述游离碱具有大于约15微米的原生粒径。在其它方面，本发明提供一种具有约5微米至约200微米的原生粒径的6-乙酰基-8-环戊基-5-甲基-2-(5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基)-8h-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮的结晶游离碱。在一些实施方案中，所述游离碱具有以下原生粒径：约5微米至约175微米；约5微米至约150微米；约5微米至约125微米；约5微米至约100微米；约5微米至约75微米；约10微米至约200微米；约10微米至约175微米；约10微米至约150微米；约10微米至约125微米；约10微米至约100微米；约10微米至约75微米；约15微米至约200微米；约15微米至约175微米；约15微米至约150微米；约15微米至约125微米；约15微米至约100微米；或约15微米至约75微米。在其它方面，本发明提供一种具有原生粒径分布的6-乙酰基-8-环戊基-5-甲基-2-(5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基)-8h-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮的结晶游离碱，所述原生粒径分布具有如下至少一种：(a)约5微米至约10微米的d10值；(b)约10微米至约45微米的d50值；以及(c)约30微米至约125微米的d90值。在一些这样的实施方案中，所述游离碱具有约5微米至约10微米的d10值。在其它这样的实施方案中，所述游离碱具有约30微米至约125微米的d90值。在其它这样的实施方案中，所述游离碱具有约10微米至约45微米的d50值。在一些这样的实施方案中，所述游离碱具有约5微米至约10微米的d10值及约30微米至约125微米的d90值。在另外的实施方案中，所述游离碱具有约5微米至约10微米的d10值、约30微米至约125微米的d90值，及约10微米至约45微米的d50值。在其它方面，本发明提供一种具有原生粒径分布的6-乙酰基-8-环戊基-5-甲基-2-(5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基)-8h-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮的结晶游离碱，所述原生粒径分布具有如下至少一种：(d)约5微米至约10微米的d10值；(e)约10微米至约25微米的d50值；以及(f)约30微米至约75微米的d90值。在一些这样的实施方案中，所述游离碱具有约5微米至约10微米的d10值。在其它这样的实施方案中，所述游离碱具有约30微米至约75微米的d90值。在其它这样的实施方案中，所述游离碱具有约10微米至约25微米的d50值。在一些这样的实施方案中，所述游离碱具有约5微米至约10微米的d10值及约30微米至约75微米的d90值。在另外的实施方案中，所述游离碱具有约5微米至约10微米的d10值、约30微米至约755微米的d90值，及约10微米至约25微米的d50值。在其它实施方案中，所述游离碱具有原生粒径分布，该原生粒径分布具有以下d10值：约5微米至约7.5微米；约5微米至约10微米；约5微米至约12.5微米；或约5微米至约15微米。在其它实施方案中，所述游离碱具有原生粒径分布，该原生粒径分布具有以下d50值：约10微米至约50微米；约10微米至约45微米；约10微米至约40微米；约10微米至约35微米；约10微米至约30微米；约10微米至约25微米；或约10微米至约20微米。在再其它实施方案中，所述游离碱具有原生粒径分布，该原生粒径分布具有以下d90值：约30微米至约175微米；约30微米至约160微米；约30微米至约150微米；约30微米至约140微米；约30微米至约130微米；约30微米至约125微米；约30微米至约120微米；约30微米至约115微米；约30微米至约110微米；约30微米至约100微米；约30微米至约75微米；约30微米至约70微米；约30微米至约65微米；约30微米至约60微米；约30微米至约55微米；约30微米至约50微米；或约30微米至约45微米。关于d10的实施方案的上述值各自可与任何不与其抵触的d50和/或d90值组合。关于d50的实施方案的上述值各自可与任何不与其抵触的d10和/或d90值组合。关于d90的实施方案的上述值各自可与任何不与其抵触的d10和/或d50值组合。在其它方面，本发明提供一种具有约2至约3的(d90-d10)/d50的原生粒径分布比的6-乙酰基-8-环戊基-5-甲基-2-(5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基)-8h-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮的结晶游离碱。在一些这样的实施方案中，所述游离碱具有约5微米至约150微米的原生粒径。在此方面的一些实施方案中，所述游离碱具有以下的(d90-d10)/d50原生粒径分布比：约2至约2.75；约2至约2.5；约2至约2.25。在其它实施方案中，所述比为约2.0、约2.1、约2.2、约2.3、约2.4、约2.5、约2.6、约2.7、约2.8、约2.9、或约3.0。在再另一方面，本发明提供具有约15微米至约125微米的体积平均直径(d[4,3])的6-乙酰基-8-环戊基-5-甲基-2-(5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基)-8h-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮的结晶游离碱。在一些实施方案中，所述游离碱具有约50微米至约100微米的d[4,3]。在其它实施方案中，所述游离碱具有约15微米至约30微米的d[4,3]。在再其它实施方案中，所述游离碱具有以下的d[4,3]：约15微米至约100微米；约15微米至约90微米；约15微米至约80微米；约15微米至约70微米；约15微米至约60微米；约15微米至约50微米；约15微米至约40微米；约25微米至约120微米；约25微米至约100微米；约25微米至约90微米；约25微米至约80微米；约25微米至约70微米；约25微米至约60微米；约25微米至约50微米；约25微米至约40微米；约25微米；约30微米；约35微米；约40微米；约45微米；约50微米；约55微米；约60微米；约65微米；约70微米；约75微米；至约80微米；约90微米；约100微米；约105微米；约110微米；约115微米；或约120微米。在另一方面，本发明提供包含本发明游离碱及药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂的药物组合物。本发明另外提供包含本发明的所述药物组合物的胶囊。在一些实施方案中，所述胶囊包含0.1至200毫克的6-乙酰基-8-环戊基-5-甲基-2-(5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基)-8h-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮的a型多晶型。在其它实施方案中，所述胶囊包含25至150毫克的6-乙酰基-8-环戊基-5-甲基-2-(5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基)-8h-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮的a型多晶型。在其它实施方案中，所述胶囊包含50至150毫克的6-乙酰基-8-环戊基-5-甲基-2-(5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基)-8h-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮的a型多晶型。在其它实施方案中，所述胶囊包含50至100毫克的6-乙酰基-8-环戊基-5-甲基-2-(5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基)-8h-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮的a型多晶型。在其它实施方案中，所述胶囊包含75至150毫克的6-乙酰基-8-环戊基-5-甲基-2-(5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基)-8h-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮的a型多晶型。在另一方面，本发明提供一种治疗哺乳动物(包括人类)的癌症的方法，其包括对所述哺乳动物给予治疗有效量的本发明药物组合物。在一些这样的实施方案中，所述药物组合物以胶囊形式给予。所述胶囊可包含0.1至200毫克的6-乙酰基-8-环戊基-5-甲基-2-(5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基)-8h-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮游离碱的a型多晶型。在其它实施方案中，所述胶囊可包含25至150毫克的6-乙酰基-8-环戊基-5-甲基-2-(5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基)-8h-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮游离碱的a型多晶型。在另外的实施方案中，所述胶囊可包含50至150毫克的6-乙酰基-8-环戊基-5-甲基-2-(5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基)-8h-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮游离碱的a型多晶型。用于表征根据本发明的化合物1的结晶游离碱的技术包括但不局限于粉末x射线衍射测定法(pxrd)、固态nmr(ssnmr)、差示扫描量热法(dsc)、振动光谱法(例如ir及拉曼光谱法)、偏振光显微术(plm)、扫描电子显微术(sem)、热载台光学显微术、电子晶体学、单晶x射线衍射法、定量分析、粒径分析(psa)(例如，粒径、粒径分布(psd)及粒子形状)、比表面积(ssa)分析、表面能分析(例如反相气相色谱法或igc)、通过溶解度研究及溶出度研究、或这些技术的组合。在其它方面，本发明提供用于制备如本申请中所述的具有大原生粒径的化合物1游离碱的方法。一种方法涉及将小粒径的化合物1游离碱溶解于第一溶剂与第二溶剂的混合物中并加热以获得溶解，冷却至适当温度，提供化合物1游离碱(a型)的晶种，接着结晶以提供大粒径的化合物1游离碱。该方法中所使用的小粒径游离碱可从传统盐断裂程序，例如通过中间体乙烯基醚的酸水解分离，以提供酸加成盐，接着碱化，如实施例5中所述。在一个实施方案中，本发明提供一种制备大粒径6-乙酰基-8-环戊基-5-甲基-2-(5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基)-8h-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮的游离碱(a型)的方法，其包括：(a)将6-乙酰基-8-环戊基-5-甲基-2-(5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基)-8h-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮游离碱悬浮于第一溶剂与第二溶剂的混合物中，并加热以获得溶解；(b)冷却至适当温度并提供6-乙酰基-8-环戊基-5-甲基-2-(5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基)-8h-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮游离碱(a型)的晶种；(c)将该混合物逐渐冷却以获得结晶；以及(d)分离该具有大粒径的6-乙酰基-8-环戊基-5-甲基-2-(5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基)-8h-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮的游离碱(a型)。在另一个实施方案中，本发明提供一种制备大粒径6-乙酰基-8-环戊基-5-甲基-2-(5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基)-8h-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮的游离碱(a型)的方法，其包括：(a)将6-乙酰基-8-环戊基-5-甲基-2-(5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基)-8h-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮游离碱悬浮于正丁醇及茴香醚的混合物中，并加热至约95至100℃以获得溶解；(b)冷却至约80℃并提供6-乙酰基-8-环戊基-5-甲基-2-(5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基)-8h-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮游离碱(a型)的晶种；(c)将该混合物在约80℃维持约3小时，然后逐渐冷却至约10℃以获得结晶；以及(d)过滤以分离该具有大粒径的6-乙酰基-8-环戊基-5-甲基-2-(5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基)-8h-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮的游离碱(a型)。另一种方法涉及中间体乙烯基醚于水与第一溶剂的混合物中的酸水解，其可能需要加热以获得溶解，添加第二溶剂及碱化以提供包含在原位产生的游离碱的第二混合物，视需要加热以获得溶解及馏出水，冷却至适当温度，提供化合物1游离碱(a型)的晶种，然后结晶以提供具有大原生粒径的化合物1游离碱。在一个实施方案中，本发明提供一种制备大粒径6-乙酰基-8-环戊基-5-甲基-2-(5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基)-8h-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮的游离碱(a型)的方法，其包括：(a)将4-{6-[6-(1-丁氧基-乙烯基)-8-环戊基-5-甲基-7-氧代-7,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-2-基氨基]-吡啶-3-基}哌嗪-1-甲酸叔丁酯悬浮于水及第一溶剂的混合物中，并加热以获得溶解；(b)添加酸及反应以在原位产生6-乙酰基-8-环戊基-5-甲基-2-(5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基)-8h-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮的酸加成盐；(c)添加第二溶剂及碱水溶液至ph值大于或等于10；(d)将有机层分离并加热以馏出水；(e)冷却至适当温度并提供6-乙酰基-8-环戊基-5-甲基-2-(5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基)-8h-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮游离碱(a型)的晶种；(f)将该混合物逐渐冷却以获得结晶；以及(g)分离该具有大粒径的6-乙酰基-8-环戊基-5-甲基-2-(5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基)-8h-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮的游离碱(a型)。在另一个实施方案中，本发明提供一种制备大粒径6-乙酰基-8-环戊基-5-甲基-2-(5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基)-8h-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮的游离碱(a型)的方法，其包括：(a)将4-{6-[6-(1-丁氧基-乙烯基)-8-环戊基-5-甲基-7-氧代-7,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-2-基氨基]-吡啶-3-基}哌嗪-1-甲酸叔丁酯悬浮于水及正丁醇的混合物中，并加热至约70℃以获得溶解；(b)添加浓hcl并在约70℃加热4至6小时；(c)添加茴香醚及naoh水溶液以获得ph为>10的双相混合物；(d)分离层并加热有机层至约120℃以馏出水；(e)冷却至约80℃并提供6-乙酰基-8-环戊基-5-甲基-2-(5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基)-8h-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮游离碱(a型)的晶种；(g)将该混合物在约80℃维持约3小时，然后逐渐冷却至约10℃以获得结晶；以及(g)过滤以分离该具有大粒径的6-乙酰基-8-环戊基-5-甲基-2-(5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基)-8h-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮的游离碱(a型)。在上述各方法的一些实施方案中，所述方法提供具有≤2平方米/克的比表面积的化合物1游离碱。在上述各方法的其它实施方案中，所述方法提供具有≤1平方米/克的比表面积的化合物1游离碱。在上述各方法的其它实施方案中，所述方法提供具有约5微米至约150微米，优选约10微米至约100微米，及更优选约15微米至约80微米的原生粒径的化合物1游离碱。在上述各方法的其它实施方案中，所述方法提供具有特征如下所示的原生粒径分布的化合物1游离碱：(i)约5微米至约10微米的d10值；(ii)约30微米至约125微米的d90值；或(iii)约10微米至约45微米的d50值；或(i)、(ii)及(iii)的组合。在上述各方法的另外的实施方案中，所述方法提供具有约2至约3的(d90-d10)/d50原生粒径分布比的化合物1游离碱。在上述各方法的另外的实施方案中，所述方法提供具有约15微米至约125微米的体积平均直径(d[4,3])的化合物1游离碱。在另一方面，本发明提供如本申请中所述根据这些方法之一制备的化合物1游离碱。在一些实施方案中，本发明提供根据本申请中所述方法中的任一方法制备的6-乙酰基-8-环戊基-5-甲基-2-(5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基)-8h-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮的结晶游离碱(a型)。在一些这样的实施方案中，由本申请中所述方法制备的游离碱可以其ssa、psa或表面能、或这些方法的组合，单独或另外与pxrd或ssnmr组合来表征。在一些这样的实施方案中，所述结晶游离碱具有介于0.05至0.25重量百分比(wt％)之间的茴香醚和/或介于0.05至0.25wt％之间的正丁醇的残留溶剂含量。在其它这样的实施方案中，所述结晶游离碱具有≤0.5wt％的茴香醚及≤0.5wt％的正丁醇，优选≤0.25wt％的茴香醚及≤0.25wt％的正丁醇的残留溶剂含量。在上述各方法中，所述第一溶剂为醇且所述第二溶剂为芳族溶剂。适用的醇包括但不局限于相对高沸点的醇，诸如正丁醇、叔丁醇、正丙醇、戊醇、1,4-丁二醇或丙二醇等。适用的芳族溶剂包括但不局限于茴香醚、1,3,5-三甲苯、间二甲苯、氯苯、吡啶等。在一些这样的实施方案中，所述溶剂混合物包含10％的醇、15％的醇、20％的醇、25％的醇、30％的醇、35％的醇、40％的醇、45％的醇、50％的醇、60％的醇、70％的醇、或>70％的醇，其余部分为芳族溶剂。在其它这样的实施方案中，所述溶剂混合物包含90％的芳族溶剂、85％的芳族溶剂、80％的芳族溶剂、75％的芳族溶剂、70％的芳族溶剂、65％的芳族溶剂、60％的芳族溶剂、55％的芳族溶剂、50％的芳族溶剂、40％的芳族溶剂、30％的芳族溶剂、或<30％的芳族溶剂，其余部分为醇溶剂。在一个优选的实施方案中，所述第一溶剂为正丁醇。在另一个优选的实施方案中，所述第二溶剂为茴香醚。在特别优选的实施方案中，所述第一溶剂为正丁醇且所述第二溶剂为茴香醚。在一些这样的实施方案中，所述溶剂混合物包含10％的正丁醇/茴香醚、15％的正丁醇/茴香醚、20％的正丁醇/茴香醚、25％的正丁醇/茴香醚、30％的正丁醇/茴香醚、35％的正丁醇/茴香醚、40％的正丁醇/茴香醚、45％的正丁醇/茴香醚、50％的正丁醇/茴香醚、60％的正丁醇/茴香醚、70％的正丁醇/茴香醚、或>70％的正丁醇/茴香醚。在一些优选的实施方案中，所述溶剂混合物包含约20至约50％的正丁醇/茴香醚。在特别优选的实施方案中，所述溶剂混合物包含约40％的正丁醇/茴香醚。为了提高收率，所述方法可以包括加热或冷却至高于或低于室温的温度。经常地，所述反应混合物可加热至约30℃至约150℃的温度，更常为约50℃至约120℃的温度以获得溶解。在结晶期间，可能需要将所述反应混合物冷却至室温或低于室温的温度，例如介于约0℃与约30℃之间，优选约5℃、约10℃、约15℃或约20℃。在另外的实施方案中，所述化合物1的游离碱为具有包含在衍射角(2θ)10.1±0.2的峰的粉末x射线衍射图案的a型多晶型。在其它实施方案中，所述晶型具有包含在衍射角(2θ)10.1±0.2及22.5±0.2的峰的粉末x射线衍射图案。在该方面的其它实施方案中，所述晶型具有包含在衍射角(2θ)5.1±0.2、10.1±0.2及22.5±0.2的峰的粉末x射线衍射图案。在另外的实施方案中，所述晶型具有包含在衍射角(2θ)5.1±0.2、10.1±0.2、19.7±0.2及22.5±0.2的峰的粉末x射线衍射图案。在再其它实施方案中，所述晶型具有包含在衍射角(2θ)5.1±0.2、10.1±0.2、17.1±0.2、19.7±0.2及22.5±0.2的峰的粉末x射线衍射图案。在另外的实施方案中，所述晶型具有包含在衍射角(2θ)5.1±0.2、10.1±0.2、11.5±0.2、17.1±0.2、19.7±0.2及22.5±0.2的峰的粉末x射线衍射图案。在再其它实施方案中，所述晶型具有包含在衍射角(2θ)5.1±0.2、10.1±0.2、11.5±0.2、17.1±0.2、18.7±0.2、19.7±0.2及22.5±0.2的峰的粉末x射线衍射图案。在该方面的一些实施方案中，所述晶型具有包含在实质上与图1中所示相同的衍射角(2θ)的峰的粉末x射线衍射(pxrd)图案。游离碱a型多晶型的粉末x射线衍射(pxrd)图案显示于图1，且对应数据列表于表1中。化合物1的a型多晶型的pxrd数据2θ(°)±0.2峰强度(％)5.1638.01810.110010.37011.54214.02015.11416.01617.14718.73319.75120.23021.22222.58723.031化合物1的结晶游离碱a型的固态核磁共振(ssnmr)显示于图2中，且对应数据列表于表2中。表2.化合物1的a型多晶型的以每百万之份数表示的13c化学位移13c化学位移[ppm]a±0.212.5025.4026.5429.0432.0346.1551.0155.66107.34112.44125.94131.14140.15143.15144.85156.32157.35158.06161.88201.94(a)参考29.5ppm处的固相金刚烷的外部样品。在另一方面，本发明提供化合物1的结晶游离碱，其中该结晶游离碱为化合物1游离碱的b型多晶型。在该方面的一些实施方案中，所述晶型具有包含在衍射角(2θ)6.0±0.2的峰的粉末x射线衍射图案。在该方面的其它实施方案中，所述晶型具有包含在衍射角(2θ)6.0±0.2及19.8±0.2的峰的粉末x射线衍射图案。在该方面的其它实施方案中，所述晶型具有包含在衍射角(2θ)6.0±0.2、19.8±0.2及26.7±0.2的峰的粉末x射线衍射图案。在其它实施方案中，所述晶型具有包含在衍射角(2θ)6.0±0.2、16.4±0.2、19.8±0.2及26.7±0.2的峰的粉末x射线衍射图案。在再其它实施方案中，所述晶型具有包含在衍射角(2θ)6.0±0.2、12.8±0.2、16.4±0.2、19.8±0.2及26.7±0.2的峰的粉末x射线衍射图案。在另外的实施方案中，所述晶型具有包含在衍射角(2θ)6.0±0.2、12.8±0.2、16.4±0.2、19.8±0.2、22.6±0.2及26.7±0.2的峰的粉末x射线衍射图案。在再其它实施方案中，所述晶型具有包含在衍射角(2θ)6.0±0.2、10.9±0.2、12.8±0.2、16.4±0.2、19.8±0.2、22.6±0.2及26.7±0.2的峰的粉末x射线衍射图案。在该方面的一些实施方案中，所述晶型具有包含在实质上与图3所示相同的衍射角(2θ)的峰的pxrd图案。游离碱b型多晶型的粉末x射线衍射(pxrd)图案显示于图3中，且对应数据列表于表3中。表3：化合物1的b型多晶型的pxrd数据2θ(°)±0.2峰强度(％)6.010010.93912.84016.44119.85018.12412.12322.64026.74828.2206-乙酰基-8-环戊基-5-甲基-2-(5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基)-8h-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮的结晶游离碱b型的固态核磁共振(ssnmr)显示于图4中，对应数据列表于表4中。表4.化合物1的b型多晶型的以每百万之份数表示的13c化学位移13c化学位移[ppm]a±0.213.0627.1028.0430.2346.90b52.32b54.63107.28113.35125.67127.04140.40145.21146.37147.34155.57157.59159.18161.29201.35(a)参考29.5ppm处的固相金刚烷的外部样品。(b)宽峰就各粉末x射线衍射测量而言，将游离碱的样品置入位于支架的平坦表面上的孔穴，并使用载玻片整平该样品表面。将含有该等样品的支架置入衍射仪中，且x射线光束源照射所述样品，最初以相对于所述支架的平坦表面的小角度照射。然后以逐步方式将所述x射线光束移动通过弧，所述方式连续增加在入射光束与所述支架的平坦表面之间的角度。在扫描的每一步，闪烁计数器检测被衍射的照射的量，其作为2θ(°)的函数记录。仪器软件显示所述扫描的被衍射的照射结果，其表示为强度对2θ(°)。表1及表3分别列出了具有a型或b型多晶型的化合物1游离碱的显著pxrd峰(即，展现峰高对噪声比大于3.5峰)。所提供的特征峰列表不是唯一可能的特征峰列表。多晶型鉴别领域中的技术人员可选择亦可将一种多晶型与另一种多晶型相区分的其它组特征峰。在相同多晶型的单独测量中pxrd图案的差异可因许多原因引起。误差来源包括样品制备中的变异(例如样品高度)、仪器误差、校准误差、以及操作者误差(包括确定峰位置的误差)。优先定向(即，pxrd样品中缺乏晶体的随机定向)可造成相对峰高的显著差异。校准误差及样品高度误差经常造成衍射图的全部峰向相同方向和以相同量偏移。在平坦支架上的样品高度的小差异可能导致pxrd峰位置的大幅位移。系统研究显示1毫米的样品高度差异可导致峰偏移高达1°2θ，详见chen等人，j.pharmaceuticalandbiomedicalanalysis(2001)26:63。在许多情况中，由系统误差造成的衍射图案中的峰偏移可通过补偿该偏移(例如对所有峰位置值应用校准因子)或通过再校准衍射仪来消除。通常，相同技术可用以补偿衍射仪之间的差异，使得从两个不同仪器获得的pxrd峰位置能够一致。此外，当将这些技术应用于来自相同或不同衍射仪的pxrd测量时，特定多晶型的峰位置经常一致在约±0.2°2θ内。所公开的化合物包括所有药学上可接受的同位素变化形式。同位素变化形式是至少一个原子被具有相同原子序数但原子质量与自然界中所发现的原子质量不同的原子置换的化合物。可用的同位素包括氢、碳、氮、氧、磷、硫、氟及氯的同位素。因此典型的同位素包括但不局限于2h、3h、13c、14c、15n、17o、18o、32p、35s、18f及36cl。所公开的化合物经诸如氘(即2h)取代可提供某些由较大代谢稳定性(例如活体内半衰期增加或剂量需要减少)的治疗优点，因此在许多状况下可能更有用。此外，特定同位素变化形式(例如结合放射性同位素)可用于药物和/或底物组织分布研究。从容易结合及检测工具便利性的角度看，放射性同位素氚(即3h)及碳14(即14c)特别有用。所公开的化合物的同位素变化形式通常可通过本领域技术人员已知的惯用技术或通过与随后的实施例中所述方法类似的方法，使用适用试剂的适当同位素变化形式来制备。所公开的化合物的药学上可接受的溶剂合物包括其中结晶的溶剂可被同位素取代(例如d2o、d6-丙酮、d6-dmso)的溶剂合物。溶解度实验美国专利第7,345,171号报道，通过传统盐断裂程序所制备的化合物1游离碱于ph7.9下具有不良水溶解度(9μg/ml)，且在动物研究中展现低生物利用度。报道指出所述游离碱为其根据淤浆实验的最稳定晶体相(即，a型)。美国专利第7,345,171号的图17提供了a型的游离碱的水吸附/脱附等温线。如先前所述，该材料对应于本申请中所述的小粒径化合物1游离碱。化合物1游离碱(a型)在药物粒子制备程序中具有高度冲压黏附倾向。由于冲压黏附与api表面积相关，故api粒径控制是最小化药物产品制备期间的黏附的关键。除了冲压黏附问题外，还发现从标准盐断裂程序直接分离的化合物1游离碱极容易产生静电，且发现形成不能通过筛分进行分散的大的(大约500微米)硬聚结物。通过现有羟乙磺酸盐api的游离碱化或通过中和在api合成最终步骤中所形成的原位盐产生具有相似不良物理性质的游离碱api。在任一方法中，因由调整ph产生溶解性剧烈改变导致的快速结晶而产生小api初级粒子。在所有情况下，所述游离碱作为更稳定a型多晶型分离。图6显示通过上述游离碱化及中和实验所形成的典型小初级粒子的扫描电子显微术(sem)图像。通过此游离碱分离方法所产生的一批化合物1(a型)的粒径分布测量提供于图8中。该粒径分布中的第二模式由大聚结物的存在导致，在图6中的sem图像亦可看到它。改变所述游离碱化方法的尝试在改善所产生的api的物理性质方面未能成功。因为所述产生游离碱的方法造成具有不良物理性质的api的分离，进行了研究以鉴别能改善api物理性质的再结晶方法。完成了化合物1游离碱的早期结晶筛选实验以鉴别容许分离具有改良的物理性质的粒子的溶剂系统。溶解度筛选与小规模再结晶研究的组合检验了多种可能的溶剂系统。小规模结晶研究进行了一系列小规模结晶实验以鉴别可能的再结晶溶剂系统以及评估溶剂对于所分离的游离碱初级粒子的形状的影响。以10mg模规进行了最初一组14个筛选研究，其使用密封管及外部热源以将50mg/ml样品加温高至回流温度。目视观察鉴别成为溶液的样品，且使用照相显微术来表征所产生的粒子。这些初始结晶筛选实验的结果汇总于表5中。表5：来自初步小规模结晶研究的结果概要溶剂系统再结晶的结果环戊基甲基醚不溶解乙酸正丁酯不溶解正丁醇不溶解三氟甲苯不溶解甲苯不溶解氯苯小的不规则形状粒子dmf小的针状粒子nmp小的不规则形状粒子丙二醇小的不规则形状粒子茴香醚大粒子(车床或斧形)吡啶小车床形粒子环丁砜小的不规则形状粒子间二甲苯小/中等斧形粒子1,3,5-三甲苯小的针状粒子基于这些小规模结晶研究，由于所产生的粒子大且茴香醚为ich第iii类溶剂，茴香醚成为额外结晶及溶解度研究的焦点。基于所产生的粒子，此筛选研究亦将吡啶、间二甲苯及1,3,5-三甲苯鉴别为可能的溶剂系统，但这些溶剂中无一亦具有类似于茴香醚的ich第iii类列表。以下溶剂亦一直用于固体的再结晶：异丙醇、异丁醇、乙醇、乙酸乙酯、甲苯、四氢呋喃及二烷。所述溶剂各产生化合物1的a型多晶型结晶固体，其与从二氯甲烷获得的原始晶型相同。溶解度研究：与初始小规模结晶研究平行，对化合物1游离碱进行了一系列溶解度研究以鉴别可能的再结晶系统。在初始室温溶解度筛选研究中，筛选了总计23种溶剂。此研究显示出化合物1游离碱在一系列有机溶剂中具有低溶解度，只有二氯甲烷显示出大于1mg/ml的溶解度(3.0mg/ml)。进行了随后的靶向较高温度溶解度研究。在追踪研究中，在25mg/ml的固定浓度下检验了一组16种溶剂系统，且使用直到110℃的最大温度的动力学溶解度方法测量了溶解温度。将通过化合物1的cosmotherm溶解度模型预测的协同溶解度行为用于选择此筛选研究中包括的二元及三元溶剂系统。这些研究的结果列于表6中。就该表中所列为>110℃的实验而言，当加热至110℃时，化合物1不溶解于所述溶剂中，这表明在此溶剂中于110℃下溶解度低于25mg/ml。表6.25mg/ml化合物1游离碱溶液的动力学溶解度测量来自表6中的实验编号3及编号11的饱和溶液的随后uplc/ms测试显示存在先前未看到的杂质峰，此表明这些实验中发生了降解。虽然丙二醇/n-buoh/茴香醚混合物显示出相比于n-buoh/茴香醚混合物而言改良的溶解度，但前者溶剂系统因其可能造成规模化问题的高粘度及沸点导致与丙二醇一起操作的潜在挑战，故不推行。基于这些筛选研究，鉴于api的相对高溶解度、化学稳定性及再结晶化合物1api的粒子性质，选择40％的正丁醇与茴香醚的混合物作为用以进一步处理的结晶溶剂系统。此溶剂系统用于随后生产以提供较大原生粒径api，该较大原生粒径api的黏附减少、不易产生静电及无聚结物。使用此溶剂混合物，在使用受控冷却曲线及晶种引发成核而结晶之前，通过加热至95至100℃，以40ml/g溶剂溶解化合物1(浓度为25mg/ml)。图9为使用此再结晶程序再结晶的化合物1的实验室规模批次的plm图像，而图7显示三批再结晶的api的粒径分布。此再结晶过程导致具有较大原生粒径的化合物1api粒子的分离，较大原生粒径导致在药物产品生产过程中的黏附倾向性降低。此再结晶的化合物1api不形成聚结物，且亦具有不易产生静电的正面贡献。溶解度筛选与小规模再结晶研究的组合检验了多种用于再结晶化合物1游离碱的可能溶剂系统。基于这些筛选研究的结果，基于所述api的相对高溶解度、化学稳定性及再结晶化合物1的粒子性质，选择40％的正丁醇/茴香醚的混合物作为优选的结晶溶剂系统。从该再结晶过程分离的api的较大粒径及改良的粒子性质促进了化合物1游离碱的药物产品生产过程的发展。粒径评估使用激光衍射法评估了再结晶材料的粒径。激光衍射由包括iso及astm的标准及指导机构认可，且广泛用以测定粒径分布。在进行评估中，使样品通过导致在一定范围角度散射的激光的激光束。以固定角度放置的检测器测量该位置所散射的光强度。然后应用数学模型(mie或fraunhoffer理论)产生粒径分布。使用激光衍射(或小角度光散射)技术，通过用压缩空气分散干燥样品粉末来分析粒径。特别的是，使用配备有vibri干粉进料器的sympatechelosrodos系统来分析粒径分布。该粉末样品以0.5巴的分散压力来分散。在一些情况中，使用aspiros微定量给料装置，且以0.2巴的分散压力分散粉末样品。选择适用的透镜以涵盖每个样品的粒径范围。在粒径测定中，将中位值定义为一半群体停留在此点上方及一半停留在此点下方的值。就粒径分布而言，该中位数称为d50。该d50为将分布分成一半在此直径上方且一半在此直径下方的以微米计的尺寸。dv50或d[v,0.5]的表达方式有时用于体积分布的中位数。所述模式是频率分布的峰。粒子分布可包括超过一个模式，例如粒子作为初级粒子及聚结物存在的情况。跨距有时用作分布宽度的测量，且定义为(d[v,0.9]-d[v,0.1])/d[v,0.5]或(d90-d10)/d50的比。所述分布宽度亦可通过引用在x轴上的一、二或优选三个值，通常为d10、d50及d90的一些组合，来表征。中位数d50已于上文定义为一半群体位于此值下方的直径。类似地，分布的90％位于d90下方，及群体的10％位于d10下方。术语d[4,3]是指体积平均或质量矩平均值。激光衍射结果以体积为基础报告，且体积平均值可用以定义分布的中心点。d[4,3]值对于分布中大粒子的存在是敏感的。制剂本发明还涉及包含本申请中所述化合物1的游离碱a型多晶型的药物组合物。本发明的药物组合物可例如呈适于口服的形式，诸如片剂、胶囊、药丸、粉末、缓释制剂、溶液、悬浮液；用于肠胃外注射，如灭菌溶液、悬浮液或乳液；用于局部给予，诸如油膏或乳霜；或用于直肠给予，如栓剂。所述药物组合物可为适于单次给予精确剂量的单位剂型。该药物组合物将包括常规药物载体或赋形剂及根据本发明的化合物作为活性成分。此外，可包括其它药物或制药用物质、载体、助剂等。适用的药物载体包括惰性稀释剂或填料、水及各种有机溶剂。视需要，所述药物组合物可含有额外成分，诸如调味剂、粘合剂、赋形剂等。因此，就口服而言，含有各种赋形剂(诸如柠檬酸)的片剂可与各种崩解剂(诸如淀粉、藻酸及特定复合硅酸盐)以及粘合剂(诸如蔗糖、明胶及阿拉伯树胶)一起使用。另外，润滑剂(诸如硬脂酸镁、硫酸月桂酯钠及滑石)经常可用于制片目的。相似类型的固态组合物亦可用于软质及硬质填充明胶胶囊。优选的材料包括乳糖及高分子量聚乙二醇。当需要水性悬浮液或酏剂以供口服时，其中的活性化合物可与各种甜味剂或调味剂、着色物质或染料，以及视需要与乳化剂或悬浮剂，连同稀释剂(诸如水、乙醇、丙二醇、甘油或其组合)并用。制备具有特定量的活性化合物的各种药物组合物的方法为本领域技术人员已知或对本领域技术人员而言显而易见。例如，详见remington'spharmaceuticalsciences，mackpublishingcompany，easter,pa.，第15版(1975)。所公开的化合物可单独给予或与其它药物合并给予，且通常将作为与一种或多种药学上可接受的赋形剂相关联的制剂形式给予。术语“赋形剂”描述任何化合物1及其盐以外的成分。赋形剂的选择在很多程度上取决于特定给药模式。所公开的化合物可口服。口服给予可包括吞咽，因此该化合物进入胃肠道，或可使用颊或舌下给予，藉此该化合物从口腔直接进入血流。适于口服给予的制剂包括固态制剂，诸如片剂、含有颗粒、液体或粉末的胶囊、锭剂(包括填充液体者)、咀嚼剂、多颗粒剂及纳米粒、凝胶、固溶体、脂质体、薄膜剂(包括粘膜黏附剂)、阴道栓、喷雾剂及液态制剂。液态制剂包括悬浮液、溶液、糖浆及酏剂。所述制剂亦可作为填料用于软胶囊或硬胶囊中，且通常包含载体，例如水、etoh、聚乙二醇、丙二醇、甲基纤维素或适用的油，及一种或多种乳化剂和/或悬浮剂。液态制剂亦可通过将固体(例如来自小药囊)复原而制备。所公开的化合物亦可用于快速溶解、快速崩解剂型，诸如liang及chen于expertopinionintherapeuticpatents(2001)11(6):981-986中所描述。至于片剂剂型，视剂量而定，该药物可占剂型的1wt％至80wt％，更常剂型的占5wt％至60wt％。除了药物的外，片剂通常含有崩解剂。崩解剂的实例包括淀粉羟乙酸钠、羧甲基纤维素钠盐、羧甲基纤维素钙、交联羧甲基纤维素钠、交聚维酮、聚乙烯吡咯烷酮、甲基纤维素、微晶纤维素、低级烷基取代的羟丙基纤维素、淀粉、预胶化淀粉及褐藻酸钠。通常，崩解剂占剂型的1wt％至25wt％，更优选为5wt％至20wt％。通常使用粘合剂以使片剂制剂具有粘结性质。适用的粘合剂包括微晶纤维素、明胶、糖、聚乙二醇、天然及合成胶、聚乙烯吡咯烷酮、预胶化淀粉、羟丙基纤维素及羟丙基甲基纤维素。片剂亦可含有稀释剂，诸如乳糖(一水合物、喷雾干燥的一水合物、无水物等)、甘露醇、木糖醇、右旋糖、蔗糖、山梨醇、微晶纤维素、淀粉及磷酸氢钙二水合物。片剂亦可任选地包括表面活性剂，诸如硫酸月桂酯钠及聚山梨酯80，以及助流剂，诸如二氧化硅及滑石。当存在上述物质时，表面活性剂可占片剂的0.2wt％至5wt％，及助流剂可占片剂的0.2wt％至1wt％。片剂亦通常含有润滑剂，诸如硬脂酸镁、硬脂酸钙、硬脂酸锌、反丁烯二酸硬脂酰钠及硬脂酸镁与硫酸月桂酯钠的混合物。润滑剂通常占片剂的0.25wt％至10wt％，更优选为0.5wt％至3wt％。其它成分可包括防腐剂、抗氧化剂、调味剂及着色剂。片剂掺合物可直接压制形成片剂。片剂掺合物或掺合物的部分或者可在制片前经湿式、干式或熔融粒化、熔融凝结或挤出。最终制剂可包含一层或多层，且可具有包衣或无包衣。典型片剂含有至多约80％的药物、约10wt％至约90wt％的粘合剂、约0wt％至约85wt％的稀释剂、约2wt％至约10wt％的崩解剂及约0.25wt％至约10wt％的润滑剂。有关片剂配制的额外细节详见h.lieberman及l.lachman，pharmaceuticaldosageforms:tablets,vol.1(1980)。用于口服的固态制剂可配制成立即释放型和/或改良释放型。改良释出制剂包括延迟释放型、持续释放型、脉冲释放型、控制释放型、靶向释放型及程序释放型。适用的改良释放型制剂的一般描述详见美国专利第6,106,864号。就其它可用释放技术(诸如高能分散体及渗透且经涂覆的粒子)的细节详见verma等人，pharmaceuticaltechnologyon-line(2001)25(2):1-14。用以获得受控制释放的口香糖用途的讨论详见wo00/35298。所公开的化合物亦可直接给予至血流、至肌肉或至内脏。肠胃外给予的适用方式包括静脉内、动脉内、腹膜内、椎管内、室内、尿道内、胸骨内、颅内、肌内及皮下给予。肠胃外给予的适用装置包括针式(包括微针)注射器、无针式注射器及输注技术。肠胃外制剂通常为水溶液，其可含有赋形剂，诸如盐类、碳水化合物及缓冲剂(优选的至ph为3至9)，但就一些应用而言，更适宜配制为灭菌非水溶液或待与适用载体(诸如灭菌无热原水)联合使用的干燥形式。在灭菌条件下例如通过冷冻干燥制备肠胃外制剂可容易地使用本领域技术人员详知的标准医药技术完成。典型肠胃外给予形式包括活性化合物在灭菌水溶液中的溶液或悬浮液形式，例如丙二醇水溶液或右旋糖溶液。若需要，所述剂型适合经缓冲。用于制备肠胃外溶液的所公开化合物的溶解度可通过使用适当配制技术(诸如结合溶解度增强剂)来提高。肠胃外给予的制剂可配制成如上述立即释放型和/或改良释放型。如此，这些公开的化合物可配制成更实体形式以供作为提供该活性化合物的长期释放的植入型贮库给予。本发明化合物亦可局部给予至皮肤或粘膜，表皮或经皮给予。用于此目的的典型制剂包括凝胶、水凝胶、洗剂、溶液、霜剂、软膏、敷粉、敷料、泡体、膜剂、皮肤贴片、糯米纸馕剂、植入物、海绵、纤维、绷带及微乳液。亦可使用脂质体。典型载体包括醇、水、矿油、液态石蜡脂、白石蜡脂、甘油、聚乙二醇及丙二醇。局部制剂亦可包括渗透增强剂。详见例如finnin及morgan，jpharmsci(1999)88(10):955-958。局部给予的其它方式包括通过离子电泳法、电穿孔、音波声波导入法(phonophoresis)、超音波导入(sonophoresis)及无针式(例如powderject)注射来递送。局部给予的制剂可配制成如上述立即释放型和/或改良释放型。所公开化合物亦可鼻内或通过吸入从干粉吸入器通常呈干粉形式(单独或为混合物，例如与乳糖的干燥掺合物，或为混合组分粒子，例如与诸如磷脂酰胆碱的卵磷脂混合)或从加压容器、泵、喷雾器、雾化器(通常为使用电流体力学以产生细微水雾的雾化器)或喷雾器呈气溶胶喷雾投药，其使用或不使用适用推进剂(诸如二氯氟甲烷)。该加压容器、泵、喷雾器、雾化器或喷雾器可含有溶液或悬浮液，该溶液或分散液包含该活性化合物、用于分散、溶解或延长该活性化合物的释放的用剂(例如etoh或含水etoh)、一种或多种用作推进剂的溶剂、以及随意的界面活性剂，诸如山梨醇酐三油酸酯或寡聚乳酸。在用于干粉或悬浮液制剂之前，该药物产物经微粉化至适于通过吸入递送的大小(通常小于5微米)。此可通过任何适当的粉碎方法获致，诸如螺旋射流粉碎、流体化床射流粉碎、超临界流体处理以形成纳米粒子、高压均质化或喷雾干燥。用于吸入器或吹入器的胶囊、泡罩及筒(例如从明胶或羟丙基甲基纤维素制得)可配制成含有该活性化合物、适用的粉末状基质(诸如诸如乳糖或淀粉)及性能改良剂(诸如诸如l-亮氨酸、甘露醇或硬脂酸镁)的粉末混合物。该乳糖可为无水或优选的呈一水合物形式。其它适用的赋形剂包括聚葡糖、葡萄糖、麦芽糖、山梨醇、木糖醇、果糖、蔗糖及海藻糖。适用于使用电流体力学以产生细微水雾的雾化器的溶液制剂可在每次启动含有1微克至20毫克的本发明化合物，且该启动体积可从1微升至100微升。典型制剂可包含化合物1、丙二醇、灭菌水、etoh及nacl。可用以代替丙二醇的替代溶剂包括甘油及聚乙二醇。吸入式/鼻内给予的制剂可例如使用聚(dl-乳酸-共聚羟乙酸(pgla)配制成立即释出型和/或改良释出型。适用的调味剂(诸如薄荷醇及左薄荷醇或甜味剂(诸如糖精或糖精钠)可添加至欲用于吸入式/鼻内给予的制剂。在干粉吸入器及气溶胶的例中，单位剂量利用递送经计量的量的阀来决定。根据本发明的单元通常配置成给予经计量的剂量或含有100至1000微克该活性药学成分的“按压一次量(puff)”。每日总剂量通常在100微克至10毫克的范围，其可以单剂给予，或更常见的是分成一天数剂。该活性化合物可经直肠/阴道给予，例如呈栓剂、子宫托或灌肠剂形式。可可脂传统栓剂基质，但若情况适当的话，可使用各种替代品。肠胃外给予的制剂可配制成如上述经直肠/阴道给予。所公开的化合物亦可直接给予至眼睛或耳朵，通常呈于等渗压ph经调整的灭菌盐水中的微粉化悬浮液或溶液的滴剂形式。适用于眼部及耳部给予的其它制剂包括软膏、生物可降解(例如可吸收凝胶海绵、胶原)及生物不可降解(例如聚硅氧)植入物、糯米纸馕剂、透镜及微粒，或多孔系统，诸如囊泡(niosome)或脂质体。聚合物(诸如交联聚丙烯酸、聚乙烯醇、玻尿酸)；纤维素聚合物(例如羟丙基甲基纤维素、羟乙基纤维素或甲基纤维素)；或异元多醣聚合物(例如吉兰胶)可结合防腐剂，诸如氯化烷基二甲基苄基铵。所述制剂亦可通过离子电泳法递送。肠胃外给予的制剂可配制成如上述眼部/耳部给予。所公开的化合物可与可溶性大分子实体(诸如环糊精或含聚乙二醇聚合物)结合，以改善其溶解度、溶解速率、掩味性、生物利用度和/或稳定性。例如，已发现药物-环糊精复合物通常可用于大部分剂型及给予途径。可使用包含型或非包含型复合物。与药物直接复合的替代方式可使用环糊精作为辅助添加剂，即，作为载体、稀释剂或助溶剂。α-、β-及γ-环糊精常用于所述目的。详见例如国际专利申请wo91/11172、wo94/02518及wo98/55148。化合物1的治疗有效剂量可从每天大约0.01mg/kg体重至大约100mg/kg体重。通常成人剂量将为大约每天0.1mg至大约3000mg。在单位剂量制剂中的活性组分的量可根据特定应用及该活性组分的效力在0.1mg至大约500mg，优选约0.6mg至100mg变化或调整。视需要，该组合物亦可含有其它兼容治疗剂。对需要治疗的对象给予每天约0.6至约500mg，其为单剂或在24小时期间的多剂。此种治疗可以连续间隔重复必要的时间长度。由异常细胞增生造成的障碍或病况包括癌症及与动脉粥样硬化、手术后血管狭窄和再狭窄相关联的血管平滑肌增生、及子宫内膜异位。自体免疫疾病包括银屑病、炎症样类风湿性关节炎、狼疮、1型糖尿病、糖尿病肾病变、多发性硬化症、肾小球肾炎及器官移植排斥，包括宿主抗移植物病。在一个实施方案中，本发明提供一种治疗需要此种治疗的哺乳动物(包括人类)异常细胞生长的方法，其包括对该哺乳动物给予治疗有效量的本申请中所述的本发明化合物1结晶游离碱。在常见实施方案中，所述游离碱为a型多晶型。在另一个实施方案中，所述异常细胞生长为癌症，包括实体肿瘤及恶性血液疾病二者。在一些这样的实施方案中，所述癌症选自乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌、子宫内膜癌、前列腺癌、睾丸癌、胰腺癌、食道癌、头颈癌、胃癌、膀胱癌、肺癌(例如腺癌、nsclc及sclc)、骨癌(例如骨肉瘤)、结肠癌、直肠癌、甲状腺癌、脑及中枢神经系统癌症、神经胶质母细胞瘤、神经母细胞瘤、神经内分泌癌、杆状癌、角质棘皮瘤、表皮样癌、精细胞瘤、黑色素瘤、肉瘤(例如，脂质肉瘤)、膀胱癌、肝癌、(例如，肝细胞癌)、肾癌(例如，肾细胞癌)、骨髓障碍(例如，aml、cml、骨髓发育不良综合征及前髓细胞性白血病)及淋巴障碍(例如，白血病、多发性骨髓瘤、外膜细胞淋巴瘤、all、cll、b细胞淋巴瘤、t细胞淋巴瘤、何杰金淋巴瘤、非何杰金淋巴瘤、毛细胞淋巴瘤)。一般合成方案以下所提供的实施例及制备例进一步阐明及举例说明本发明实施方案的特定方面。应理解，本发明范围绝不受以下实施例的范围限制。实施例一般方法及材料粉末x射线衍射(pxrd)根据以下方案收集pxrd数据。将样品(2mg)置于零背景的显微镜载玻片上。然后将该样品置入配备有gadds检测器的discoverd8(brukeraxsinstruments)。该系统使用维持在40kv与40ma的铜x射线源以提供1.5406埃的cuα1发射。使用0.02°的步进扫描、60.1秒的步进时间收集4至40°2θ的数据。通常测量衍射峰具有±0.2度(2θ)的误差。ssnmr仪器及方法根据以下方案收集ssnmr数据。在定位于大口径bruker-biospinavanceiii500mhznmr光谱仪内的bruker-biospin4mm及7mmblcpmas探针上收集光谱。使4mm转子以魔角定向且在15.0khz下旋转。使7mm转子以魔角定向且在7.0khz下旋转。所有光谱在环境条件(温度未受控制)下获取。使用质子去耦交叉极化魔角旋转(cpmas)实验收集13c固态光谱。峰共振以每百万分之份数(ppm)±0.2ppm报告。差示扫描量热法(dsc)：使用q1000(热分析仪器)进行dsc测量。将样品置入具有针孔的密封铝盘。典型样品重量为1.6毫克。将样品平衡至25℃，然后以10℃/分钟的扫描速率升温至250℃。使用干燥氮气作为冲洗气体。布鲁诺、埃梅特和特勒(brunauer,emmetandteller)(bet)比表面积(ssa)测量：根据以下方案收集ssa测量值。使用气体分子在晶体表面上的单层形成测定活性药学成分的干燥粉末的比表面积。通过施加热及以氮气冲洗使该样品不含湿气及大气蒸气。然后将样品温度降至用作待吸附的被吸附气体(氮)的液态氮的温度。被吸附气体的量及压力数据用于产生吸附等温线图。然后使用数学算法基于所谓的布鲁诺、埃梅特和特勒(bet)理论，将数据转化成比表面积值(详见例如，j.am.chem.soc.,1938,60:309)。使用静止多点或单点气体吸附法测量比表面积，该方法完整描述于iso9277:2010及以下实验中。反相气相色谱法(igc)表面能测量：根据以下方案使用igc收集表面能测量值。将充分量的样品装填于硅烷化玻璃柱中，通过插在两端的玻璃羊毛塞将该粉末物质固定在所述柱内。通过使干燥氮气流流动通过所述粉末物质充分时间以除去任何表面吸附物，调节所述柱。通过将一系列烷烃蒸气探针(壬烷、辛烷、庚烷及己烷)注入载体气流，其浓度低到足以假定所述烷烃蒸气在所述氮气流中无限稀释，并记录各蒸气通过所述柱洗出所花费的时间来进行测量。保留时间(针对填充柱内的填隙空间的“死体积”进行校准)对横断面积及所使用的烷烃蒸气探针分子的表面张力的函数作图产生直线，斜率具有表示被检验的固态粉末的表面能。合成实施例实施例1.4-(6-氨基-吡啶-3-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备步骤a.4-(6-硝基-吡啶-3-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备于容器中添加5-溴-2-硝基吡啶(10.0g，1.0当量)以及dmso(25ml，2.5vol)。添加n-boc哌嗪(13.8g，1.5当量)，然后添加三乙胺(7.5g，1.5当量)及licl(2.1g，1.0当量)。将该混合物加温至60至65℃至少12小时。将水(5ml，0.5vol)缓慢添加至该于60至65℃的容器内。使该混合物在60至65℃维持1小时，然后冷却至室温。将该淤浆维持在20至25℃为时1小时，然后在#2whatmantm滤纸上过滤。以水清洗该滤饼(50ml，5vol)。收集粗制固体并将其移回清洁容器。将水(100ml，10vol)添加至该含有该固体的容器中，并将该混合物加温至35至40℃为时2小时，然后于温热时在#2whatmantm滤纸上过滤。以水(40ml，4vol)清洗这些固体，然后在真空烘箱中于50至55℃下让其干燥过夜。分离4-(6-硝基-吡啶-3-基)-哌嗪-1-甲酸叔丁酯，为黄色固体(收集14.1g；收率～93％)。步骤b.4-(6-氨基-吡啶-3-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备于容器中添加4-(6-硝基-吡啶-3-基)-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(12.0g，1.0当量)以及乙酸乙酯(48ml，4.0vol)。于淤浆中添加50％水、湿5％pd/c(480mg，4％w/w)且以氮气冲洗该容器三次。该容器以氢气冲洗三次，然后加压50psi氢气。将该混合物加热至42至47℃且允许搅拌直到氢气吸取停止为止(至少8小时)。过滤该产物混合物并以乙酸乙酯清洗(2×1.5ml)。在减压下将合并的滤液浓缩至体积为6ml(2vol)。于该溶液中添加正庚烷(54ml，4.5vol)，并在减压下蒸馏该混合物至体积为6ml(2vol)。于该溶液添加正庚烷(54ml，4.5vol)。将所得的浓稠淤浆冷却至20至25℃并允许搅拌2小时。过滤该淤浆并以正庚烷(36ml，3vol)清洗该滤饼。使该固体在50至55℃的真空烘箱中干燥过夜。分离4-(6-氨基-吡啶-3-基)-哌嗪-1-甲酸叔丁酯，为浅橘色固体(收集10.4g；收率～96％)。1hnmr(500mhz,dmso-d6)：δ7.62(dd,j＝2.99,0.60hz,1h),7.17(dd,j＝8.85,2.99hz,1h),6.40(dd,j＝8.85,0.60hz,1h),5.45(bs,2h),3.43(m,2h),2.85(m,2h),1.41(s,9h)；13cnmr(125mhz,dmso-d6)：δ154.8,153.8,138.7,136.8,125.9,108.3,78.9,50.5,43.8,43.0,28.0；hrms:c14h23n4o2(m+h)+的计算值：279.18155，发现值：279.18173。实施例2.6-溴-2-氯-8-环戊基-5-甲基-8h-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮的制备步骤a.5-溴-2-氯-6-环戊基氨基-嘧啶的制备于容器中添加纯乙醇(3000ml，3.0vol)，然后添加5-溴-2,4-二氯嘧啶(分子量227.87；1000g，1.0当量)。添加三乙胺(612ml，1.0当量)，然后在2小时期间缓慢添加环戊胺(分子量85.15；520ml，1.2当量)以控制温和放热。在完成环戊胺添加之后，视需要，以5-溴-2-氯-6-环戊基氨基-嘧啶(5g，0.5wt％)对反应加晶种来引发结晶。该反应于25℃下搅拌2小时。在20至25℃下以30ml/分钟的速率将水(2500ml，2.5vol)添加至该容器中。以2℃/分钟将该混合物冷却至8至12℃。将该淤浆维持在8至12℃为时1小时，然后在#2whatmantm滤纸上过滤。以正庚烷(2000ml)清洗该滤饼。以正庚烷(2000ml)在过滤干燥器上将该滤饼再浆化。该物质在真空烘箱中于50至55℃下干燥过夜以产生呈白色固体形式的5-溴-2-氯-6-环戊基-氨基嘧啶(1020g；84％)。步骤b.2-氯-8-环戊基-5-甲基-8h-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮的制备在周围温度下于容器中添加5-溴-2-氯-6-环戊基氨基-嘧啶(10.0g，1.0当量)以及n-甲基吡咯烷酮(nmp)(50ml，5.0vol)。于该反应混合物中添加巴豆酸(4.7g，1.5当量)及三乙胺(20.2ml，4.0当量)。将该容器脱气并使用氮气冲洗三次。于该经脱气的反应混合物中添加pd(oac)2(0.25g，0.03当量)。使用与步骤3相同方法将该容器脱气并以氮气冲洗三次。将该混合物加热至65℃，并允许搅拌直到原料消耗为止(至少6小时)。将乙酐(6.8ml，2.0当量)添加至该反应混合物。使该反应在65℃下反应，直到原料消耗为止(通常为1至2小时)。将该反应混合物冷却至20℃并添加h2o(100ml，10vol)以溶解三乙胺·hbr盐，并沉淀出2-氯-8-环戊基-5-甲基-8h-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮。该物质在20℃下粒化1小时。将该固体过滤并以h2o(20ml，2.0vol)以及4:1的异丙醇/h2o混合物(50ml，5.0vol)清洗。该粗制产物在真空下于55至70℃干燥以产生呈黄褐色至灰色固体形式的2-氯-8-环戊基-5-甲基-8h-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮(7.8g；81％)。步骤c.6-溴-2-氯-8-环戊基-5-甲基-8h-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮的制备于衬有玻璃的容器中添加2-氯-8-环戊基-5-甲基-8h-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮(9.35g，1.0当量)以及乙腈(65ml，7.0vol)。添加n-溴琥珀酰亚胺(9.67g，1.5当量)及草酸(0.65g，0.2当量)。然后将该反应混合物加热至60±5℃。该反应在60℃下搅拌直到原料消耗为止(至少6小时)。将该淤浆冷却至20℃且添加h2o(9ml，1vol)。于该淤浆中添加于h2o(38ml，4vol)中的亚硫酸氢钠溶液(3.88g，1.0当量)。使该淤浆粒化1小时，然后在#2whatman滤纸上直接过滤。以水(19ml，2vol)，然后以7:3的甲醇/乙腈混合物(28ml，3vol)清洗该反应容器，然后将该清洗液转移至该滤饼上。该产物在真空烘箱中于50至55℃下干燥。分离出呈浅黄色固体形式的6-溴-2-氯-8-环戊基-5-甲基-8h-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮(10.52g；87％)。通过从甲苯及正庚烷再结晶进一步纯化该产物。将甲苯(60ml，6vol)及6-溴-2-氯-8-环戊基-5-甲基-8h-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮(10.00g，1当量)添加至反应容器并加热至80℃。将该温热反应混合物通过适当筒过滤以确保除去不可溶的pd及其它不可溶的污染物。该过滤器筒以80℃甲苯(5ml，0.5vol)清洗。以1℃/分钟将该淤浆冷却至25℃。以1ml/分钟将正庚烷(70ml，7vol)添加至该反应淤浆。以1℃/分钟将该淤浆进一步冷却至0℃。该淤浆于0℃粒化至少1小时。将该淤浆直接在#2whatman滤纸上过滤。将正庚烷(30ml，3vol)装入该反应容器，并将清洗液转移至该滤饼上，且在真空烘箱中于50至55℃下干燥该产物。分离出呈乳化色固体形式的6-溴-2-氯-8-环戊基-5-甲基-8h-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮(8.73g，87％)。1hnmr(500mhz,dmso-d6)：δ9.20(s,1h),5.82(m,1h),2.65(s,3h),2.11(m,2h),2.04(m,2h),1.86(m,2h),1.64(m,2h)；13cnmr(125mhz,dmso-d6)：δ158.2,158.2,157.6,154.1,144.0,120.9,113.0,54.4,28.3,25.7,18.3；hrms:c13h14n3o1br1cl1(m+h)+的计算值：342.00033，发现值：342.00037。实施例3.4-{6-[6-溴-8-环戊基-5-甲基-7-氧代-7,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-2-基氨基]吡啶-3-基}-哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备以四氢呋喃(900ml，15ml/g)装填干燥、经氮气冲洗的反应器。批料温度设于20℃，且开始以250rpm搅动。以4-(6-氨基-吡啶-3-基)-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(63.4g，0.2278摩尔，1.3当量)装填该反应器，并使该混合物保持在20℃下30分钟以使该原料溶解。通过泵在30分钟期间以氯化异丙基镁(93.9g，0.193摩尔，第1次装填1.1当量)(于thf中2.0m，1.1当量)装填反应器。该批料维持在20℃下40分钟。以6-溴-2-氯-8-环戊基-5-甲基-8h-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮(60.1g，0.1755摩尔，1当量)一次装填该反应器，并以thf冲洗(50ml冲洗)。通过泵在30分钟期间添加氯化异丙基镁的额外装填(93.9g，0.193摩尔，1.1当量，第2次装填(于thf中2.0m，1.1当量)。该批料保持在20℃下90分钟，然后从20℃加热至60℃。反应之后，thf(2.86vol)及hoac(1当量)的混合物用于淬灭反应。然后以0.5wt/wt％的4-{6-[6-溴-8-环戊基-5-甲基-7-氧代-7,8-二氢-吡啶并[2,3-d]嘧啶-2-基氨基]-吡啶-3-基}-哌嗪-1-甲酸叔丁酯对该批料加晶种并装填thf(1.14vol)与hoac(0.4当量)的混合物来完成沉淀。冷却至20℃之后，过滤该批料，以丙酮(4vol)、水(6vol)及丙酮(4vol)清洗。该湿滤饼在真空下于65℃干燥至恒定重量以产生4-{6-[6-溴-8-环戊基-5-甲基-7-氧代-7,8-二氢-吡啶并[2,3-d]嘧啶-2-基氨基]-吡啶-3-基}-哌嗪-1-甲酸叔丁酯，收率为93％。1hnmr(600mhz,thf-d8)：δ9.36(s,1h),8.87(s,1h),8.22(d,j＝8.8hz,1h),8.04(d,j＝2.9hz,1h),7.39(dd,j＝8.8,2.9hz,1h),6.10(m,1h),3.55(宽，4h),3.09(宽，4h),2.60(s,3h),2.30(m,2h),2.09(m,2h),1.85(m,2h),1.66(m,2h),1.46(s,9h)；13cnmr(150mhz,thf-d8)：δ159.5,158.9,157.7,156.0,155.0,147.2,144.62,144.56,138.0,126.7,117.6,114.2,108.4,79.9,55.5,50.6,44.7,29.0,28.7,26.9,18.1；hrms:c27h35n7o3br1(m+h)+的计算值：584.19797，发现值：584.19811。实施例4.4-{6-[6-(1-丁氧基-乙烯基)-8-环戊基-5-甲基-7-氧代-7,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-2-基氨基]-吡啶-3-基}-哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备以1-丁醇(60ml，6ml/g)装填干燥、经氮气冲洗的反应器且添加4-{6-[6-溴-8-环戊基-5-甲基-7-氧代-7,8-二氢-吡啶并[2,3-d]嘧啶-2-基氨基]-吡啶-3-基}-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(10g，0.017摩尔)及丁基乙烯基醚(5.1g，0.051摩尔，3.0当量)。添加二异丙基乙胺(5.3g，0.041摩尔，2.4当量)且使氮气通过充气管为时30分钟来使该混合物充气。添加乙酸钯(0.16g，0.00068摩尔，0.0400当量)及双(2-二苯基膦基苯基)醚(0.45g，0.00082摩尔，0.04800当量)。在30分钟期间将该混合物加热至95℃，且在95℃下搅拌该批料2小时。将该混合物冷却至80℃，并取样以监测反应完成。于完成之后，添加水(15ml，1.5ml/g)及1-丁醇(30ml，3ml/g)。该溶液经由0.45微米的过滤器过滤以除去沉淀的钯。添加水(35ml，3.5ml/g)，然后添加1,2-二氨基丙烷(6.3g，0.085摩尔，5.0当量)。该混合物在70℃下搅拌至少30分钟。停止搅动，并使该混合物沉降15分钟。分离出底部水相，并在30分钟期间使该混合物冷却至60℃。以4-{6-[6-(1-丁氧基-乙烯基)-8-环戊基-5-甲基-7-氧代-7,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-2-基氨基]吡啶-3-基}-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(c型)(50mg，0.005g/g)对该混合物加晶种并保持于60℃为时90分钟。一旦观察到结晶，在1小时期间将该混合物冷却至50℃，并在50℃保持3小时。在3小时期间将该混合物冷却至30℃，并在30℃保持2小时，然后在4小时期间冷却至20℃，并在20℃保持4小时。过滤该淤浆并以1-丁醇(10ml，1ml/g)清洗。排出该滤饼，并装填1-丁醇(10ml，1ml/g)，且在20℃下搅拌该淤浆1小时。排出该滤饼。用甲基叔丁基醚(20ml，2ml/g)清洗该混合物，并使用延长吹过时间(2小时或更长)使该滤饼完全脱液。在70℃下干燥该滤饼。收率为75至80％。1hnmr(600mhz,dmso-d6)：δ10.0(s,1h),8.87(s,1h),8.07(d,j＝2.9hz,1h),7.91(d,j＝9.0hz,1h),7.48(dd,j＝9.0,2.9hz,1h),5.83(m,1h),4.47(d,j＝1.6hz,1h),4.05(d,j＝1.6hz,1h),3.77(t,j＝6.4hz,2h),3.48(宽，4h),3.11(宽，4h),2.37(s,3h),2.22(m,2h),1.89(m,2h),1.75(m,2h),1.61(m,2h),1.58(m,2h),1.43(s,9h),1.38(m,2h),0.90(t,j＝7.39hz,3h)；13cnmr(150mhz,dmso-d6)：δ160.9,158.2,157.3,155.2,154.6,153.7,145.0,143.0,142.6,136.0,125.8,125.5,114.6,106.6,87.8,78.9,66.8,52.8,48.5,43.4,42.5,30.3,28.0,27.4,25.1,18.8,14.4,13.6；hrms:c33h46n7o4(m+h)+的计算值：604.36058，发现值：604.36049。所述中间体丁氧基-乙烯基醚可被分离成数种多晶型之一。a型在不加晶种的情况下作为动力学产物分离，而b型在少数情况下分离但极少观察到。通过以c型晶体对反应混合物加晶种获得丁氧基-乙烯基醚的最稳定晶型，即c型。这些多晶型中的任一种可用于制备化合物1游离碱，但因为容易过滤，丁氧基-乙烯基醚的c型为优选。所述中间体丁氧基-乙烯基醚的a、b及c型多晶型的pxrd数据分别列表于表7、8及9。表7.中间体丁氧基-乙烯基醚的a型多晶型的pxrd数据2θ(°)±0.2峰强度(％)4.31004.8856.239表8.中间体丁氧基-乙烯基醚的b型多晶型的pxrd数据2θ(°)±0.2峰强度(％)5.51007.539.7311.1414.8316.7417.5520.14表9.中间体丁氧基-乙烯基醚的c型多晶型的pxrd数据2θ(°)±0.2峰强度(％)5.41009.71110.85812.71013.32413.52716.11216.6817.01417.52218.1818.8819.61620.61621.71722.9823.8824.4825.08实施例5.通过盐断裂法制备小粒径化合物1游离碱于反应器中添加4-{6-[6-(1-丁氧基-乙烯基)-8-环戊基-5-甲基-7-氧代-7,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-2-基氨基]-吡啶-3-基}-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(2.70kg，4.47摩尔，1.0当量)，然后添加水(27.00l，10l/kg)及丙酮(13.50l，5l/kg)的混合物。将该黄色淤浆加温至介于50℃与55℃之间。在大约10分钟期间，将以水(5.40l，2l/kg的原料)及丙酮(5.40l，2l/kg的原料)稀释的甲磺酸溶液(2.15kg，22.36摩尔，5.0当量)添加至该反应器。使反应混合物保持在45℃与55℃之间至少12小时。在该反应期间获致透明黄色溶液。将该反应混合物冷却至35℃，并将5wt％的氢氧化钠溶液的混合物分数部分添加至该反应器以使该反应混合物升高至ph>9。将该反应器冷却至介于20℃与25℃之间，粒化及过滤。以水然后以丙酮清洗该滤饼，并在真空下干燥。该方法产生小原生粒径化合物1游离碱，其与从wo2005/005426的实施例4中使用naoh水溶液处理化合物1盐酸盐所制备的物质等效。除了上文提供的代表性程序(对应于表10中实验s)以外，还筛选了一定范围的酸及水性溶剂系统以测定对该反应及随后淬灭及分离化合物1游离碱的影响。进行了实验室规模筛选实验以鉴别用于将中间体乙烯基醚转化成游离碱化合物1的反应条件。这些反应筛选实验的结果汇总于表10中，其表明所述方法的一般性。表10：得自反应筛选实验的结果汇总实验酸溶剂系统收率纯度a羟乙磺酸水9999.93b羟乙磺酸16％thf/水>10098.77c羟乙磺酸28％thf/水9597.95dhcl水>10099.59eh2so4水9898.6fmsa水9899.42gmsa16％thf/水>10097.86h羟乙磺酸15％nmp/水8897.7i羟乙磺酸15％dmf/水9098.94jtfa(8当量)水10099.14k羟乙磺酸15％ch3cn/水>10099.56l羟乙磺酸15％丙酮/水9299.54m羟乙磺酸15％dmac/水>10098.91n羟乙磺酸15％环丁砜/水9298.67omsa15％ch3cn/水10099.52pmsa15％丙酮/水9799.54qcf3so3h(不完全)水n/an/armsa33％ch3cn/水9999.7smsa33％丙酮/水9899.74tmsa33％meoh/水9899.74umsa33％thf/水9699.76实施例6.化合物1的小粒径游离碱成为大粒径游离碱的转化于反应器中添加根据实施例5制备的化合物1游离碱(20g，44.69毫摩尔，1.0当量)，然后添加1-丁醇(320ml，16ml/g)与茴香醚(480ml，24ml/g)。将该黄色淤浆加温至介于95℃与100℃之间以获得溶解。将该反应器冷却至80℃。于该反应器中的溶液中，装填含有悬浮液于1-丁醇(5ml，0.25ml/g的原料)中的化合物1游离碱(a型)晶种(0.1g，0.2毫摩尔，0.005当量)的晶种淤浆以引发结晶。将所得到的淤浆于80℃下搅拌3小时。将该淤浆以0.2℃/分钟在350分钟期间冷却至10℃、粒化及过滤。以茴香醚然后以庚烷清洗该滤饼，并在真空下干燥它。此方法产生了化合物1游离碱的大原生粒径晶体，其与使用下文实施例7中所述的一锅法所制备的游离碱等效。实施例7.用于制备大粒径化合物1游离碱的一锅法于反应器中添加水(200ml，10ml/g)及4-{6-[6-(1-丁氧基-乙烯基)-8-环戊基-5-甲基-7-氧代-7,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-2-基氨基]-吡啶-3-基}-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(20g，33.1毫摩尔，1.0当量)，然后添加1-buoh(232ml，11.6ml/g)以将任何固体冲入反应器。将该黄色淤浆加温至70℃。形成两液相混合物。在大约10分钟期间将浓hcl溶液(16.3g，165.5毫摩尔，5.0当量)加入该反应器。使该反应混合物保持在70℃为时4至6小时。在3小时后获致透明黄色双相溶液。于该反应混合物中添加茴香醚(356ml，17.8ml/g)。在将该混合物维持在70℃时，在20分钟期间将naoh(17.2g，172.1毫摩尔，5.2当量)水溶液(40wt％溶液)添加至该反应器以使该反应混合物提高至ph>10。于naoh添加完成之后，搅拌该两相混合物30分钟。将所述相分离并以水清洗有机相两次。然后将该批料加热至80℃并无碎屑过滤至结晶容器，以丁醇冲洗该过滤器。然后蒸馏该批料以除去水并达到120℃的温度。然后将该批料冷却至80℃，以化合物1游离碱(a型)晶种晶体((0.015g，0.033毫摩尔，0.1wt％wrt化合物1)及1-buoh(10ml，0.5ml/g)的晶种淤浆加晶种。然后以0.2℃/分钟将该批料冷却至30℃，然后以每次使温度逐步下降10℃的三个回合使其成熟。在最终回合时，将该批料冷却至10℃、粒化及过滤。以庚烷清洗该滤饼两次，并在真空下干燥。干燥后，确认该样品为单晶a型多晶型。1hnmr(600mhz,dmso-d6/tfa)：δ10.41(s,0.75h),9.03(s,0.25h),8.98(s,2h),8.12(d,j＝3.0hz,1h),7.90(d,j＝9.1hz,1h),7.63(dd,j＝9.1,3.0hz,1h),5.84(m,1h),3.40(宽，4h),3.29(宽，4h),2.43(s,3h),2.33(s,3h),2.21(m,2h),1.91(m,2h),1.79(m,2h),1.59(m,2h)；13cnmr(150mhz,dmso-d6/tfa)：δ202.4,160.7,154.8,158.3,158.0,144.9,142.3,142.0,134.6,129.7,126.7,115.3,107.0,53.0,45.6,42.6,31.3,27.6,25.2,13.7；hrms:c24h30n7o2(m+h)+的计算值：448.24555，发现值：448.24540。以下提供化合物1游离碱的小原生粒径及大原生粒径制剂的对比psa、ssa及表面能数据。在所有情况下，所述游离碱作为a型多晶型分离。粉末x射线衍射(pxrd)实验：使用配备cu辐射源、固定狭缝(发散＝1.0mm，抗散射＝0.6mm及接收＝0.6mm)及闪烁计数器检测器的brukerd8衍射仪进行粉末衍射分析。数据于cu波长从3.0至40.0度的2θ使用0.040度的步幅及2.0秒的步时收集在θ-θ测角仪中。x射线管电压及安培值分别设于40kv及40ma。样品通过放置在镍盘(gasser&sons,inc.commack,ny)中来制备并于数据收集期间使其旋转。收集数据并使用brukerdiffracplus软件(2.6版)分析。pxrd数据文件(.raw)在峰搜寻之前未经处理。通常，使用临限值1及宽度值0.3来进行初步峰指定。目视检查自动化指定的输出以确保有效性及视需要进行人工调整。另外，若情况适当，在光谱内人工指定峰。ssnmr实验：a型的碳光谱在4mm转子上2048次扫描获取，其中再循环延迟为25秒及交叉极化为2ms。于获取期间应用100khz质子去耦。b型的碳光谱在4mm转子上2048次扫描获取，针对再循环延迟为4.5秒及交叉极化为2ms的128次扫描收集。于获取期间应用70khz质子去耦及旋转边带总抑制(toss)。仪器方法：将大约80毫克的样品装入4mmzro2转子。在周围温度及压力下，于定位于大口径bruker-biospinavanceiii500mhz(1h频率)nmr光谱仪内的bruker-biospin4mmcpmas探针上收集光谱。该经装填的转子以魔角定向且在15.0khz下旋转。13c固态光谱使用质子去耦交叉极化魔角旋转(cpmas)实验收集。交叉极化接触时间设为2.0ms。在获取期间施加大约100khz的质子去耦场。获取再循环延迟为25秒的512次扫描的化合物1a型的碳光谱。该光谱示于图2，且数据列表于表2。获取再循环延迟为4.5秒的2048次扫描的化合物1b型的碳光谱。这些碳光谱使用高场共振设于29.5ppm的结晶金刚烷的外部标准参考。该光谱示于图4中，且数据列表于表4中。粒径分析粒径使用激光衍射(或小角度光散射)技术，通过压缩空气分散干燥样品粉末来分析。特别是，该粒径分布使用配备vibri干粉进料器的sympatechelosrodos系统来分析。该粉末样品以0.5巴的分散压力来分散。在一些实施例中，使用aspiros微调剂装置，且以0.2巴的分散压力分散该粉末样品。选择适用的透镜以涵盖每一样品的粒径范围。结果api四个批料的对照数据提供于下表11中，使用vibri或aspiros装置来分散样品。4号批料具有约75μm的d90，然而1号及2号批料二者均具有大约45微米的d90。激光衍射粒径数据确认这些批料的sem观察。表11.比较性尺寸分布数据扫描电子显微术(sem)扫描电子显微术在标准条件下进行。图5提供从40％buoh/茴香醚再结晶的化合物1游离碱a型的sem(200倍放大倍率)图像。图6提供从标准游离碱化程序分离的化合物1游离碱a型的sem(1500倍放大倍率)图像。黏附分析内部开发mass(用于黏附的物质粘着筛选)冲压以通过在一系列压制之后秤重可除去冲压尖端上黏附的粉末的量来定量评估片剂制剂的黏附倾向。此测试使配制者能客观且迅速评估药品发展期间的冲压黏附风险以及排除临床片剂制备期间所观察到的黏附问题。为了制备mass冲压用的样品，将10g的api稀释于经稍微润滑的标准掺合物中(10％api，89.75％avicelph102及0.25％硬脂酸镁)且在瓶(500ml琥珀色玻璃瓶)中旋转500次掺合的。使用微量天平，在目前固体摩擦力为0.85下定期评估至高达100次压制～250mgw片剂时黏附于该可除去冲压尖端(1/2"圆形平面)的粉末重量。混合于该标准掺合物中的化合物1游离碱的mass冲压曲线显示正响应。压制结束时的冲压尖端的相片确认粉末黏附于这些尖端(数据未显示)。为了供参考，该标准掺合物的对照样品不具黏附性，且具有少于10μg的黏附粉末。已发现该测试方法将新api批料的黏附倾向相对于已知物质的黏附做排序。比表面积(ssa)测量(bet氮)装置比表面积(ssa)测量(bet氮)使用micromeriticstristarii3020比表面积分析仪与micromeriticssmartprep站(micromeriticsu.k.ltd.,ste2,thestableshextonmanor,hexton,hertfordshiresg53jh,英格兰)一起测定。对样品进行该bet-氮吸附分析以测定这些样品的比表面积。设定软件版本tristariiconfirm(1.03或等效物)被吸附物：氮样品管：具有玻璃填料棒的3/8”mm平底单元样品量*:单元的大约3/4满样品制备：smartprep(使用氮流动脱气)脱气条件：于25℃在气体流下16小时(升温速率为10℃/分钟)等温套：使用等温收集点：在0.05-0.30p/po范围中的11点bet等温数据分析范围：在0.05-0.20p/po范围中的7点bet渗漏测试：120s自由空间：测得抽空时间：1hr脱气测试持续期间：180s平衡化间隔：10s平衡化时限：600s*样品的量根据测试样品的粒径而变化。就粒径相对小的样品而言，需要大约0.50g的物质以填满该单元圆头的3/4，及而样品的粒径较大的情况下，需要0.75g的物质填满该单元圆头的3/4。计算及报告使用来自一式三份测定的7点bet报告在0.05-0.20p/po范围内的比表面积。测定各复制物的样品量、比表面积、bet常数(“c”值)及相关数。结果表12提供4批化合物1游离碱api批料的bet-n2ssa，其中一者包含通过传统盐断裂法所制备的小原生粒径api(批料5)，及三种批料包含根据本发明所制备的大粒径api。批料5含有具有小初级粒子及大型聚结物的化合物1游离碱，其非常容易产生静电及非常粘。批料6使用温度循环制备，且具有大粒径化合物1游离碱的典型粒径分布(psd)，vmd为大约17微米。批料7显示与批料6相似的psd。批料8为显示大粒径化合物1游离碱的代表性ich批料，其亦通过温度循环制备。在以下表面能测定中使用相同批料。表12.使用n2的betssa批次no.使用n2的betssa56.660.6270.6980.67反相气相色谱法(igc)表面能测量：将充分量的样品装填于硅烷化玻璃管中，这些粉末通过插在两端的玻璃羊毛塞固定在该管内。该管通过使干燥氮气流流动经过所述粉末充分时间以使任何表面被吸附物被除去来调理。通过将一系列烷烃蒸气探针(壬烷、辛烷、庚烷及己烷)注入该载体气体流使其浓度低到足以假设所述烷烃蒸气在所述氮气流中无限稀释，并记录各蒸气经由该管洗出所花费的时间来进行测量。保留时间(针对该装填的管内的填隙空间的“死体积”校准)与横断面积及所使用的烷烃蒸气探针分子的表面张力的函数作图产生直线，斜率表示被检验的固态粉末的表面能。结果表13提供针对ssa数据所产生的四批化合物1游离碱批料(即，上述批料5至8)的分散表面能(mj/m2)数据。批料5为小粒径游离碱，及批料6至8包括大粒径游离碱api。表13.分散表面能(mj/m2)批次no.分散表面能(mj/m2)561.63649.42735.75842.27本说明书中所提及的所有公开案及专利申请及其中引用的所有参考数据以引用方式并入本申请中的程度如同个别公开案或专利申请或参考数据明确个别指示为以引用方式并入。虽然前述发明已经由为求清楚理解的说明及实施例而详细描述，但本技术的一般技术人士根据本发明教示将很容易理解可对其进行特定改变及修改而不违背附录申请专利范围的精神与范围。当前第1页12当前第1页12