抗菌肽大环化合物及其用途的制作方法

本发明涉及式(i)的化合物以及其可药用盐

其中x¹至x⁸和r¹至r⁸如下所述，用于治疗或预防由绿脓杆菌(pseudomonasaeruginosa)引起的感染和所致疾病。

背景

绿脓杆菌被美国疾病预防控制中心(uscentersfordiseasecontrolandprevention)认为是严重的威胁，其属于目前引起大多数医院交叉感染和有效地“逃脱”抗微生物剂的活性的所谓‘eskape’病原体(enterococcusfaecium,staphylococcusaureus,klebsiellapneumoniae,acinetobacterbaumannii,pseudomonasaeruginosa和enterobacterspecies&e.coli(屎肠球菌、金黄色葡萄球菌、肺炎杆菌、鲍氏不动杆菌、绿脓杆菌和肠杆菌属物种&大肠杆菌))。

绿脓杆菌(p.aeruginosa)是一种机会致病菌，很少在健康人群中引起疾病，但对于危重病人或免疫功能低下者来说是一个重大问题。感染是患有囊性纤维化(cf)的个体的主要问题，其中绿脓杆菌是细菌的复发和慢性呼吸道感染所导致的肺功能进行性丧失的致病因子。有绿脓杆菌感染风险的其他人包括机械呼吸机患者、中性粒细胞减少癌症患者和烧伤患者。绿脓杆菌通常对大多数抗生素具有抗性，因此非常需要新的治疗方法。

根据美国传染病协会(idsa)antimicrobialavailabilitytaskforce(aatf)，已经定义了绿脓杆菌并仍然保留为“在未满足的医学需求和现有的抗微生物研究和开发管线之间不相配的主要实例”。因此，对识别出适于治疗绿脓杆菌引起的疾病和感染的化合物存在非常高的要求和需求。

发明详述

除非另有定义，本文所用的所有技术和科学术语具有与本发明所属技术领域的普通技术人员通常所理解相同的含义。虽然在本发明的实施和测试中可以使用与本文所述相似或等同的方法和材料，但是下文描述了适宜的方法和材料。

本文提及的所有出版物、专利申请、专利和其它参考文献整体引入本文作为参考。

本申请中所用的命名法基于iupac系统命名法，另有指示除外。

用于isis/draw的autonom2000(automaticnomenclature)被用于产生iupac化学名。

在本文的结构中的碳、氧、硫或氮原子上出现的任何开放价键指氢的存在，另有指示除外。

术语“结构部分”指如下原子或经化学键合的原子的集合，其通过一个或多个化学价键与另一个原子或分子连接，由此形成分子的一部分。例如，式(i)的变量r¹、r²和r³指通过共价键与式(i)的核心结构连接的结构部分。

当表示取代基的数目时，术语“一个或多个”指从一个取代基至最大可能数目的取代基的范围，即，一个氢被取代基替换至所有氢被取代基替换。

术语“任选”或“任选地”指随后所述的事件或情况可以、但不是必须发生，并且该描述包括其中事件或情况发生的情形和其中不发生的情形。

术语“取代基”指代替母体分子上的氢原子的原子或原子集合。

术语“取代”指特定基团载有一个或多个取代基。当任意基团可以载有多个取代基并且提供了多个可能的取代基时，取代基是独立选择的并且不需要相同。术语“未取代”指特定基团不载有取代基。术语“任选取代”或“任选被…取代”指特定基团是未取代的或者被一个或多个独立地选自可能的取代基的取代基所取代。当表示取代基的数目时，术语“一个或多个”指从一个取代基至最大可能数目的取代基，即，一个氢被取代基替换至所有氢被取代基替换。

术语“该发明的化合物”和“本发明的化合物”指如本文所公开的化合物及其立体异构体、互变异构体、溶剂合物和盐(例如可药用盐)。

当本发明的化合物是固体时，本领域技术人员理解，这些化合物及其溶剂合物和盐可以以不同的固体形式、特别是不同的结晶形式存在，所有这些都旨在包括在本发明和所示式子的范围内。

术语“结构相关物质”指与具有生物学活性的物质共享共同的或核心的结构的物质，例如常规的药效团或olfactophore。但是这类结构相关化合物可以在它们的取代基方面相互不同。

术语“可药用酯”指其中羧基已经被转化为酯的本发明的化合物的衍生物，其中羧基指-c(o)o-。甲基-、乙基-、甲氧基甲基-、甲基硫基甲基-和新戊酰氧基甲基酯是这类适宜酯的实例。而且，术语“可药用酯”还包括其中羟基已经用无机或有机酸转化为相应的酯的本发明的化合物的衍生物，所述的酸例如有硝酸、硫酸、磷酸、柠檬酸、甲酸、马来酸、乙酸、琥珀酸、酒石酸、甲磺酸或对甲苯磺酸，并且其对活生物体是无毒的。

术语“可药用盐”指不是生物学或其它方面不期望的盐。可药用盐包括酸加成盐和碱加成盐。

术语“可药用酸加成盐”指用无机酸和有机酸形成的那些可药用盐，所述的无机酸例如有盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、碳酸、磷酸，所述的有机酸选自有机酸的脂肪族、环脂肪族、芳香族、芳脂族、杂环、羧酸和磺酸类别，例如甲酸、乙酸、丙酸、乙醇酸、葡糖酸、乳酸、丙酮酸、草酸、苹果酸、马来酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、天门冬氨酸、抗坏血酸、谷氨酸、邻氨基苯甲酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、双羟萘酸、苯乙酸、甲磺酸、乙磺酸、对甲苯磺酸和水杨酸。

术语“可药用碱加成盐”指用有机或无机碱形成的那些可药用盐。可接受的无机碱的实例包括钠、钾、铵、钙、镁、铁、锌、铜、锰和铝盐。由可药用无毒碱衍生的盐包括伯胺、仲胺和叔胺、被取代的胺、包括天然存在的被取代的胺、环胺和碱性离子交换树脂如异丙胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺、乙醇胺、2-二乙基氨基乙醇、氨基丁三醇、二环己基胺、赖氨酸、精氨酸、组氨酸、咖啡因、普鲁卡因、哈胺(hydrabamine)、胆碱、甜菜碱、乙二胺、葡糖胺、甲基葡糖胺、可可碱、嘌呤、哌嗪、哌啶、n-乙基哌啶和聚胺树脂的盐。

本文所用的立体化学定义和约定通常遵循s.p.parker,编辑的mcgraw-hilldictionaryofchemicalterms(1984)mcgraw-hillbookcompany,纽约；和eliel,e.和wilen,s.,“stereochemistryoforganiccompounds”,johnwiley&sons,inc.,纽约,1994。在描述具有旋光活性的化合物时，前缀d和l或者r和s用于指分子有关其手性中心的绝对构型。与所考虑的手性中心连接的取代基按照sequenceruleofcahn,ingoldandprelog.(cahn等人angew.chem.inter.edit.1966,5,385；勘误511)进行分级。前缀d和l或者(+)和(-)用于表示化合物使平面偏振光旋转的符号，(-)或l表示化合物是左旋的。带有前缀(+)或d的化合物是右旋的。

术语“卤代”、“卤素”和“卤化物”在本文中交互使用，表示氟、氯、溴或碘。卤素的特别实例是氟和氯。

术语“烷基”指1至12个碳原子的单价直链或支链饱和烃基。在具体的实施方案中，烷基具有1至7个碳原子，在更具体的实施方案中具有1至4个碳原子。烷基的实例包括甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基或叔丁基。烷基的特定实例是甲基、乙基、异丙基、正丁基、仲丁基和叔丁基，更特别是甲基和乙基。

术语“烷氧基”指式-o-r’的基团，其中r’是烷基基团。烷氧基结构部分的实例包括甲氧基、乙氧基、异丙氧基和叔丁氧基。烷氧基的特定实例是甲氧基。

术语“卤代烷基”指其中烷基基团的至少一个氢原子已经被相同或不同的卤素原子、特别是氟原子替换的烷基基团。卤代烷基的实例包括单氟-、二氟-或三氟-甲基、-乙基或-丙基，例如3,3,3-三氟丙基、2-氟乙基、2,2,2-三氟乙基、氟甲基或三氟甲基。术语“全卤代烷基”指其中烷基基团的所有氢原子已经被相同或不同的卤素原子替换的烷基基团。卤代烷基的特定实例是三氟甲基。

术语“卤代烷氧基”指其中烷氧基基团的至少一个氢原子已经被相同或不同的卤素原子、特别是氟原子替换的烷氧基基团。卤代烷氧基的实例包括单氟-、二氟-或三氟-甲氧基、-乙氧基或-丙氧基，例如3,3,3-三氟丙氧基、2-氟乙氧基、2,2,2-三氟乙氧基、氟甲氧基或三氟甲氧基。术语“全卤代烷氧基”指其中烷氧基基团的所有氢原子已经被相同或不同的卤素原子替换的烷氧基基团。

术语“羟基烷基”指其中烷基基团的至少一个氢原子已经被羟基基团替换的烷基基团。羟基烷基的实例包括羟基甲基、2-羟基乙基、2-羟基丙基、3-羟基丙基、1-(羟基甲基)-2-甲基丙基、2-羟基丁基、3-羟基丁基、4-羟基丁基、2,3-二羟基丙基、2-羟基-1-羟基甲基乙基、2,3-二羟基丁基、3,4-二羟基丁基或2-(羟基甲基)-3-羟基丙基。

术语“双环环系”指两个环经由共同的单键或双键(捏合双环环系)、经由三个或更多个共同原子的序列(桥连双环环系)或经由共同的单原子(螺环双环环系)相互稠合。双环环系可以是饱和的、部分不饱和的、不饱和的或芳族的。双环环系可包含选自n、o和s的杂原子。

术语“环烷基”指3至10个环碳原子的单价饱和单环或双环烃基。在具体的实施方案中，环烷基指3至8个环碳原子的单价饱和单环烃基。双环指由两个共享一个或多个碳原子的饱和碳环组成。特定的环烷基基团是单环的。单环环烷基的实例有环丙基、环丁基、环戊基、环己基或环庚基。双环环烷基的实例有双环[2.2.1]庚基或双环[2.2.2]辛基。特定的环烷基有环丙基。

术语“杂环烷基”指包含1、2或3个选自n、o和s的环杂原子且其余环原子为碳的具有3至9个环原子的单价饱和或部分不饱和的单环或双环环系。在具体的实施方案中，杂环烷基是包含1、2或3个选自n、o和s的环杂原子且其余环原子为碳的具有4至7个环原子的单价饱和单环环系。单环饱和杂环烷基的实例有吖丙啶基、环氧乙烷基、氮杂环丁基、氧杂环丁基、吡咯烷基、四氢呋喃基、四氢-噻吩基、吡唑烷基、咪唑烷基、噁唑烷基、异噁唑烷基、噻唑烷基、哌啶基、四氢吡喃基、四氢噻喃基、哌嗪基、吗啉基、硫吗啉基、1,1-二氧代-硫吗啉-4-基、氮杂环庚基、二氮杂环庚基、高哌嗪基或氧杂氮杂环庚烷基。双环饱和杂环烷基的实例有8-氮杂-双环[3.2.1]辛基、奎宁环基、8-氧杂-3-氮杂-双环[3.2.1]辛基、9-氮杂-双环[3.3.1]壬基、3-氧杂-9-氮杂-双环[3.3.1]壬基或3-硫杂-9-氮杂-双环[3.3.1]壬基。部分不饱和的杂环烷基的实例有二氢呋喃基、咪唑烷基、二氢-噁唑基、四氢-吡啶基或二氢吡喃基。杂环烷基的特定实例有吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、2-氧杂-5-氮杂-双环[2.2.1]庚基和二氢吡喃基。饱和杂环烷基的特定实例有吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基和2-氧杂-5-氮杂-双环[2.2.1]庚基。部分不饱和的杂环烷基的特定实例有二氢吡喃基和二氢吲哚基。

术语“芳族”指文献、特别是iupac-compendiumofchemicalterminology,第2版,a.d.mcnaught&a.wilkinson(eds).blackwellscientificpublications,oxford(1997)中定义的芳香性的常规概念。

术语“芳基”指包含6-10个碳环原子的单价芳香族碳环单环或双环环系。芳基结构部分的实例包括苯基和萘基，最特别是苯基。特定的被芳基取代的芳基是联苯基。

术语“杂芳基”指具有5-12个环原子的包含1、2、3或4个选自n、o和s的杂原子且其余环原子为碳的单价芳香族杂环单环或双环环系。杂芳基结构部分的实例包括吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、噁唑基、噻唑基、三唑基、噁二唑基、噻二唑基、四唑基、吡啶基、吡嗪基、吡唑基、哒嗪基、嘧啶基、三嗪基、氮杂基、二氮杂基、异噁唑基、苯并呋喃基、异噻唑基、苯并噻吩基、吲哚基、异吲哚基、异苯并呋喃基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、苯并异噁唑基、苯并噻唑基、苯并异噻唑基、苯并噁二唑基、苯并噻二唑基、苯并三唑基、嘌呤基、喹啉基、异喹啉基、喹唑啉基或喹喔啉基。杂芳基的特定实例是咪唑基、吡唑基、吡咯基、异噁唑基、吡啶基、吡嗪基、哒嗪基、嘧啶基、吲哚基和喹啉基。杂芳基的最特定的实例是吡啶基和吲哚基。

术语“保护基”指在合成化学中惯常与之相关的含义上选择性地阻断多官能性化合物的反应活性位点以至可以在其它未保护的反应活性位点选择性地进行化学反应的基团。保护基在适当的点被除去。示例性的保护基有氨基保护基、羧基保护基或羟基保护基。

术语“氨基保护基”指意欲保护氨基基团的基团，其包括苄基、苄氧基羰基(苄氧羰基、cbz)、fmoc(9-芴基甲氧羰基)、对甲氧基苄氧羰基、对硝基苄氧羰基、叔丁氧羰基(boc)和三氟乙酰基。这些基团的其它实例见于t.w.greene和p.g.m.wuts,“protectivegroupsinorganicsynthesis”,第2版,johnwiley&sons,inc.,纽约,ny,1991,第7章；e.haslam,“protectivegroupsinorganicchemistry”,j.g.w.mcomie,编辑,plenumpress,纽约,ny,1973,第5章和t.w.greene,“protectivegroupsinorganicsynthesis”,johnwileyandsons,纽约,ny,1981。术语“被保护的氨基基团”指被氨基保护基取代的氨基基团。

术语“羧基保护基”指意欲保护羧基基团的基团，包括酯基团和杂环烷基基团。这类酯基团的实例包括取代的芳基烷基酯，包括具有被取代的苄基如4-硝基苄基、4-甲氧基苄基、3,4-二甲氧基苄基、2,4-二甲氧基苄基、2,4,6-三甲氧基苄基、2,4,6-三甲基苄基、五甲基苄基、3,4-亚甲二氧基苄基、二苯甲基、4,4’-二甲氧基二苯甲基、2,2’,4,4’-四甲氧基二苯甲基的酯，具有烷基或被取代的烷基如甲基、乙基、叔丁基烯丙基或叔戊基、三苯基甲基(三苯甲基)、4-甲氧基三苯甲基、4,4’-二甲氧基三苯甲基、4,4’,4”-三甲氧基三苯甲基、2-苯基丙-2-基的酯，硫代酸酯如叔丁基硫代酸酯，甲硅烷基酯如三甲基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基酯，苯甲酰基甲基、2,2,2-三氯乙基、β-(三甲基甲硅烷基)乙基、β-(二(正丁基)甲基甲硅烷基)乙基、对甲苯磺酰基乙基、4-硝基苄基磺酰基乙基、烯丙基、肉桂基和1-(三甲基甲硅烷基甲基)丙-1-烯-3-基。羧基保护基的其它实例有杂环烷基基团如1,3-噁唑啉基。这些基团的其它实例见于t.w.greene和p.g.m.wuts,“protectivegroupsinorganicsynthesis”,第2版,johnwiley&sons,inc.,纽约,n.y.,1991,第5章；e.haslam,“protectivegroupsinorganicchemistry”,j.g.w.mcomie,ed.,plenumpress,纽约,n.y.,1973,第5章和t.w.greene,“protectivegroupsinorganicsynthesis”,johnwiley和sons,纽约,ny,1981,第5章。术语“被保护的羧基基团”指被羧基保护基取代的羧基。

术语“羟基保护基”指意欲保护羟基基团的基团，包括形成酯和醚的基团，特别是四氢吡喃基氧基、苯甲酰基、乙酰氧基、氨甲酰基氧基、苄基和甲硅烷基醚(如tbs,tbdps)基团。这些基团的其它实例见于t.w.greene和p.g.m.wuts,“protectivegroupsinorganicsynthesis”,第2版,johnwiley&sons,inc.,纽约,ny,1991,第2-3章；e.haslam,“protectivegroupsinorganicchemistry”,j.g.w.mcomie,ed.,plenumpress,纽约,ny,1973,第5章和t.w.greene,“protectivegroupsinorganicsynthesis”,johnwiley和sons,纽约,ny,1981。术语“被保护的羟基基团”指被羟基保护基取代的羟基。

术语“脱保护”指这样的过程：在选择性反应完成后通过该过程除去保护基。脱保护试剂包括酸、碱或氢，特别是碳酸钾或钠、在醇性溶液中的氢氧化锂、在甲醇中的锌、乙酸、三氟乙酸、钯催化剂或三溴化硼。

术语“活性药物成分”(或“api”)指在药物组合物中具有特定生物活性的化合物或分子。

术语“药物组合物”和“药物制剂”(或“制剂”)互换使用，指意欲施用于需要其的哺乳动物如人的包含治疗有效量的活性药物成分连同可药用赋形剂的混合物或溶液。

术语“可药用”指可用于制备通常是安全无毒的、既非生物学也非其它方面所不希望的、并且是兽医学以及人药用可以接受的物质属性。

术语“可药用赋形剂”、“可药用载体”和“治疗惰性赋形剂”可互换使用，指药物组合物中不具有治疗活性并且对所施用个体无毒的任意可药用成分，例如配制药物产品中所用的崩解剂、粘合剂、填充剂、溶剂、缓冲剂、张力调节剂、稳定剂、抗氧化剂、表面活性剂、载体、稀释剂或润滑剂。

术语“治疗有效量”指本发明的化合物或分子当施用于个体时能够产生如下作用的量：(i)治疗或阻止特定的疾病、病症或障碍；(ii)缓解、改善或消除特定疾病、病症或障碍的一个或多个症状；或(iii)阻止或延迟本文所述的特定疾病、病症或障碍的一个或多个症状的发作。治疗有效量将根据化合物、所治疗的疾病状态、所治疗疾病的严重性、个体的年龄和相对健康、施用途径和方式、参与医生或兽医的判断以及其它因素而变化。

术语“治疗”疾病状态包括抑制该疾病状态、即阻止该疾病状态或其临床症状发展或者缓解该疾病状态，即，使得该疾病状态或其临床症状暂时或永久消退。

术语“预防”或“阻止”疾病状态指在可暴露于或易于出现该疾病状态、但是尚未经历该疾病状态或尚未出现其症状的个体中使得该疾病状态的临床症状不发生。

如本文所用的术语“氨基酸”指在羧基基团连接的位置上具有氨基结构部分的有机分子。氨基酸的实例包括：赖氨酸、甘氨酸、鸟氨酸、赖氨酸、组氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、丙氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸、甲硫氨酸、丝氨酸、脯氨酸。所用氨基酸在各个情况中任选地是l-形式。

详细地，本发明涉及式(i)化合物

其中:

x¹是c-r¹¹或n；

x²是c-r¹²或n；

x³是c-r¹³或n；

x⁴是c-r¹⁴或n，条件是，x¹、x²、x³和x⁴中不多于三个是n；

x⁵是c-r¹⁵或n；

x⁶是c-r¹⁶或n；

x⁷是c-r¹⁷或n；

x⁸是c-r¹⁸或n，条件是，x⁵、x⁶、x⁷和x⁸中不多于三个是n；

r¹是-(ch2)m-杂芳基，其任选地被一个或多个卤代基或c1-7-烷基取代；

r²、r⁴和r⁶各自独立地选自氢或c1-7-烷基；

r³和r⁵各自独立地选自氢、-c1-7-烷基、羟基-c1-7-烷基、-(ch2)m-nr²⁰r²¹、-(ch2)m-c(o)nr²⁰r²¹、-(ch2)m-cf2-(ch2)m-nr²⁰r²¹、-(ch2)m-nh-c(o)-(ch2)m-nr²⁰r²¹或-(ch2)m-o-(ch2)n-nr²⁰r²¹、-(ch2)m-nh-c(nh)-nr²⁰r²¹、-(ch2)m-nh-c(o)-or²¹、-(ch2)o-c3-7-环烷基、-(ch2)o-杂环烷基、-(ch2)o-杂芳基、-(ch2)o-芳基，其中环烷基、杂环烷基、杂芳基和芳基任选地被卤代基、氰基、c1-7-烷基、c1-7-卤代烷基、c1-7-羟基烷基、c1-7-烷氧基或芳基取代；

r^5’是氢或c1-7-烷基；

r⁷、r^7’和r⁸、r^8’各自单独地选自氢或c1-7-烷基；

r¹¹、r¹²、r¹³、r¹⁴、r¹⁵、r¹⁶、r¹⁷和r¹⁸各自单独地选自氢、卤素、c1-7-烷基、c1-7-卤代烷基、羟基、c1-7-羟基烷基、c1-7-烷氧基、c1-7-卤代烷氧基、-nr²⁴r²⁵、c1-7-烷基-nr²⁴r²⁵、芳基-c1-7-烷基-o-c1-7-炔基-、芳基和杂芳基，其中芳基和杂芳基任选地被1、2或3个选自以下的取代基取代：卤素、氰基、c1-7-烷基c1-7-卤代烷基、羟基、c1-7-烷氧基、-nr²⁴r²⁵、c1-7-烷基-nr²⁴r²⁵、-co-nh-(ch2)n-nr²⁴r²⁵、-co-nh-(ch2)r-oh、-co-nh-(ch2)o-杂环烷基、-co-oh、-o-c1-7-羟基烷基、-o-(ch2)r-co-oh、-so2-c1-7-烷基、-so2-nr²⁴r²⁵、杂环烷基、-o-杂环烷基和被c1-7-烷基或氧代取代的杂环烷基；

r²⁰和r²²各自单独地选自氢、c1-7-烷基和苄基；

r²¹和r²³各自单独地选自氢和c1-7-烷基；

r²⁴和r²⁵各自单独地选自氢、c1-7-烷基、c1-7-卤代烷基、c1-7-羟基烷基和c3-7-环烷基；

m是1、2、3、4、5或6；

n是2、3、4、5或6；

o是0、1、2、3、4、5、6、7或8；

或其可药用盐，

其用于治疗或预防由绿脓杆菌引起的感染和所致疾病。

在一个具体的实施方案中，本发明涉及前述段落中描述的式(i)化合物，其中:

x¹是cr¹¹或n；

x²是cr¹²或n；

x³是cr¹³或n；

x⁴是cr¹⁴或n，条件是，x¹、x²、x³和x⁴中不多于两个是n；

x⁵是cr¹⁵或n；

x⁶是cr¹⁶或n；

x⁷是cr¹⁷或n；

x⁸是cr¹⁸或n，条件是，x⁵、x⁶、x⁷和x⁸中不多于两个是n；

r¹是-(ch2)m-杂芳基，其任选地被一个或多个卤代基或c1-7-烷基取代；

r²、r⁴和r⁶各自单独地选自氢或c1-7-烷基；

r³是-(ch2)m-nr²⁰r²¹；

r⁵是-(ch2)m-nr²²r²³或-(ch2)o-杂环烷基，其中杂环烷基任选地被卤代基或c1-7-烷基取代；

r⁷、r^7’和r⁸、r^8’是氢；

r¹¹、r¹²、r¹³、r¹⁴、r¹⁵、r¹⁶、r¹⁷和r¹⁸各自单独地选自氢、卤素、c1-7-烷基、c1-7-卤代烷基、羟基、c1-7-羟基烷基、c1-7-烷氧基、c1-7-卤代烷氧基、-nr²⁴r²⁵、c1-7-烷基-nr²⁴r²⁵、芳基-c1-7-烷基-o-c1-7-炔基-、芳基和杂芳基，其中芳基和杂芳基任选地被1、2或3个选自以下的取代基取代：卤素、氰基、c1-7-烷基c1-7-卤代烷基、羟基、c1-7-烷氧基、-nr²⁴r²⁵、c1-7-烷基-nr²⁴r²⁵、-co-nh-(ch2)n-nr²⁴r²⁵、-co-nh-(ch2)r-oh、-co-nh-(ch2)o-杂环烷基、-co-oh、-o-c1-7-羟基烷基、-o-(ch2)o-co-oh、-so2-c1-7-烷基、-so2-nr²⁴r²⁵、杂环烷基、-o-杂环烷基和被c1-7-烷基或氧代取代的杂环烷基；

r²⁰、r²¹、r²²和r²³是氢；

r²⁴和r²⁵各自单独地选自氢和c1-7-烷基；

m、n、o、p、q和r各自单独地选自1、2、3和4；

或其可药用盐，

其用于治疗或预防由绿脓杆菌引起的感染和所致疾病。

在另一个具体的实施方案中，本发明涉及式(ia)的化合物

其中:

x¹是cr¹¹或n；

x²是cr¹²或n；

x³是cr¹³或n；

x⁴是cr¹⁴或n，条件是，x¹、x²、x³和x⁴中不多于两个是n；

x⁵是cr¹⁵或n；

x⁶是cr¹⁶或n；

x⁷是cr¹⁷或n；

x⁸是cr¹⁸或n，条件是，x⁵、x⁶、x⁷和x⁸中不多于两个是n；

r²、r⁴和r⁶各自单独地选自氢或c1-7-烷基；

r³是-(ch2)m-nr²⁰r²¹；

r⁵是-(ch2)m-nr²²r²³或-(ch2)o-杂环烷基，其中杂环烷基任选地被卤代基或c1-7-烷基取代；

r⁷、r^7’和r⁸、r^8’是氢；

r⁹是氢、卤代基或c1-7-烷基；

r¹⁰是氢或c1-7-烷基；

r¹¹、r¹²、r¹³、r¹⁴、r¹⁵、r¹⁶、r¹⁷和r¹⁸各自单独地选自氢、卤素、c1-7-烷基、c1-7-卤代烷基、羟基、c1-7-羟基烷基、c1-7-烷氧基、c1-7-卤代烷氧基、-nr²⁴r²⁵、c1-7-烷基-nr²⁴r²⁵、芳基-c1-7-烷基-o-c1-7-炔基-、芳基和杂芳基，其中芳基和杂芳基任选地被1、2或3个选自以下的取代基取代：卤素、氰基、c1-7-烷基c1-7-卤代烷基、羟基、c1-7-烷氧基、-nr²⁴r²⁵、c1-7-烷基-nr²⁴r²⁵、-co-nh-(ch2)n-nr²⁴r²⁵、-co-nh-(ch2)o-oh、-co-nh-(ch2)o-杂环烷基、-co-oh、-o-c1-7-羟基烷基、-o-(ch2)o-co-oh、-so2-c1-7-烷基、-so2-nr²⁴r²⁵、杂环烷基、-o-杂环烷基和被c1-7-烷基或氧代取代的杂环烷基；

r¹⁹是氢、卤代基、c1-7-烷基；

r²⁰、r²¹、r²²和r²³是氢；

r²⁴和r²⁵各自单独地选自氢和c1-7-烷基；

或其可药用盐，

其用于治疗或预防由绿脓杆菌引起的感染和所致疾病。

在又一个具体的实施方案中，本发明涉及式(ib)的化合物

其中:

x¹是cr¹¹或n；

x⁴是cr¹⁴或n；

r²选自氢和c1-7-烷基；

r⁹是氢、卤代基或c1-7-烷基；

r¹⁵是氢、卤素、c1-7-烷基、c1-7-卤代烷基、-nr²⁴r²⁵、c1-7-烷基-nr²⁴r²⁵、羟基、c1-7-烷氧基、卤代c1-7-烷氧基、苄氧基-丙炔基(-c≡c-ch2-o-苄基)、杂环烷基、芳基和杂芳基，其中芳基任选地被一个-nr²⁰r²¹或被c1-7-烷基取代的杂环烷基取代；

r¹⁷是氢、卤素、c1-7-烷基、c1-7-卤代烷基、-nr²⁴r²⁵、c1-7-烷基-nr²⁴r²⁵、羟基、c1-7-烷氧基、卤代c1-7-烷氧基、苄氧基-丙-1-炔基、杂环烷基、芳基和杂芳基，其中杂环烷基任选地被一个-nr²⁴r²⁵取代，其中芳基和杂芳基任选地被1、2或3个选自以下的取代基取代：卤素、c1-7-烷基、c1-7-卤代烷基、c1-7-羟基烷基、羟基、c1-7-烷氧基、-nr²⁴r²⁵、-so2-c1-7-烷基、-so2-nr²⁴r²⁵、杂环烷基和被c1-7-烷基取代的杂环烷基；

r¹⁸是氢、卤素、c1-7-烷基、c1-7-卤代烷基、羟基、c1-7-羟基烷基、c1-7-烷氧基、c1-7-卤代烷氧基、-nr²⁴r²⁵、c1-7-烷基-nr²⁴r²⁵、芳基和杂芳基，其中芳基和杂芳基任选地被1、2或3个选自以下的取代基取代：卤素、氰基、c1-7-烷基c1-7-卤代烷基、羟基、c1-7-烷氧基、-nr²⁴r²⁵、c1-7-烷基-nr²⁴r²⁵、-co-nh-(ch2)o-nr²⁴r²⁵、-co-nh-(ch2)r-oh、-co-nh-(ch2)o-杂环烷基、-co-oh、-o-c1-7-羟基烷基、-o-(ch2)r-co-oh、-so2-c1-7-烷基、-so2-nr²⁴r²⁵、杂环烷基、-o-杂环烷基和被c1-7-烷基或氧代取代的杂环烷基；

r¹⁹是氢、卤代基、c1-7-烷基；

r²⁰、r²¹、r²²和r²³是氢；

r²⁴和r²⁵各自单独地选自氢和c1-7-烷基；

y是-ch2-或-co-；

或其可药用盐，

其用于治疗或预防由绿脓杆菌引起的感染和所致疾病。

本发明的特定的式(i)的化合物选自:

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-6-氯-12-(1h-吲哚-3-基甲基)-13-甲基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(21),3,5,7,22,24-六烯-11,14,17-三酮；

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-5-氯-12-(1h-吲哚-3-基甲基)-13-甲基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(21),3,5,7,22,24-六烯-11,14,17-三酮；

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-4-氯-12-(1h-吲哚-3-基甲基)-13-甲基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(21),3,5,7,22,24-六烯-11,14,17-三酮；

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-12-(1h-吲哚-3-基甲基)-13-甲基-5-三氟甲基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(21),3,5,7,22,24-六烯-11,14,17-三酮；

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-12-(6-氯-1h-吲哚-3-基甲基)-13-甲基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(21),3,5,7,22,24-六烯-11,14,17-三酮；

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-6-氯-13-甲基-12-(1-甲基-1h-吲哚-3-基甲基)-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(21),3,5,7,22,24-六烯-11,14,17-三酮；

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-6-氯-12-(6-氯-1h-吲哚-3-基甲基)-13-甲基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(21),3,5,7,22,24-六烯-11,14,17-三酮；

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-6-氯-12-(6-氯-1-甲基-1h-吲哚-3-基甲基)-13-甲基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(21),3,5,7,22,24-六烯-11,14,17-三酮；

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-6,7-二氯-12-(1h-吲哚-3-基甲基)-13-甲基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-11,14,17-三酮；

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-4-氯-12-(1h-吲哚-3-基甲基)-13-甲基-7-三氟甲基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-11,14,17-三酮；

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-4-氯-12-(1h-吲哚-3-基甲基)-13-甲基-6-三氟甲基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-11,14,17-三酮；

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-4,6-二氯-23-氟-12-(1h-吲哚-3-基甲基)-13-甲基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-11,14,17-三酮；

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-6-氯-12-(1h-吲哚-3-基甲基)-13-甲基-4-三氟甲基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-11,14,17-三酮；

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-6-氯-12-(1h-吲哚-3-基甲基)-4,13-二甲基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-11,14,17-三酮；

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-6-氯-13-甲基-12-(2-甲基-1h-吲哚-3-基甲基)-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(21),3,5,7,22,24-六烯-11,14,17-三酮；

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-4,13-二甲基-12-(2-甲基-1h-吲哚-3-基甲基)-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(21),3,5,7,22,24-六烯-11,14,17-三酮；

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-4,6-二氯-13-甲基-12-(2-甲基-1h-吲哚-3-基甲基)-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(21),3,5,7,22,24-六烯-11,14,17-三酮；

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-6-乙基-12-(1h-吲哚-3-基甲基)-13-甲基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-11,14,17-三酮；

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-12-(1h-吲哚-3-基甲基)-13-甲基-6-苯基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-11,14,17-三酮；

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-6-叔丁基-12-(1h-吲哚-3-基甲基)-13-甲基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-11,14,17-三酮；

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-12-(1h-吲哚-3-基甲基)-6-异丙基-13-甲基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-11,14,17-三酮；

(11s,14s,17s)-14-(4-氨基-丁基)-11-(3-氨基-丙基)-17-(1h-吲哚-3-基甲基)-16-甲基-23-苯基-25-三氟甲基-2-硫杂-4,10,13,16,19-五氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-12,15,18-三酮；

(11s,14s,17s)-14-(4-氨基-丁基)-11-(3-氨基-丙基)-17-(1h-吲哚-3-基甲基)-16-甲基-23,25-双-三氟甲基-2-硫杂-4,10,13,16,19-五氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-12,15,18-三酮；

(11s,14s,17s)-14-(4-氨基-丁基)-11-(3-氨基-丙基)-25-氯-17-(1h-吲哚-3-基甲基)-16-甲基-23-三氟甲基-2-硫杂-7,10,13,16,19-五氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-12,15,18-三酮；

(11r,14s,17s)-14-(4-氨基-丁基)-11-(3-氨基-丙基)-25-氯-17-(1h-吲哚-3-基甲基)-24-苯基-2-硫杂-4,10,13,16,19-五氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-12,15,18-三酮；

(11s,14s,17s)-14-(4-氨基-丁基)-11-(3-氨基-丙基)-25-氯-17-(1h-吲哚-3-基甲基)-24-苯基-2-硫杂-4,10,13,16,19-五氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-12,15,18-三酮；

(11r,14s,17s)-14-(4-氨基-丁基)-11-(3-氨基-丙基)-25-氯-17-(1h-吲哚-3-基甲基)-16-甲基-24-苯基-2-硫杂-4,10,13,16,19-五氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-12,15,18-三酮；

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-12-(1h-吲哚-3-基甲基)-13-甲基-6-苯基-4-三氟甲基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-11,14,17-三酮；

(11s,14s,17s)-14-(4-氨基-丁基)-11-(3-氨基-丙基)-25-氯-17-(1h-吲哚-3-基甲基)-16-甲基-22-苯基-2-硫杂-4,10,13,16,19-五氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3(8),4,6,21,23-六烯-12,15,18-三酮；

(12s,15s,18s)-15,18-双-(3-氨基-丙基)-4,6-二氯-12-(1h-吲哚-3-基甲基)-13-甲基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-11,14,17-三酮；

(11s,14s,17s)-14-(4-氨基-丁基)-11-(3-氨基-丙基)-25-氯-17-(5-氯-1h-吲哚-3-基甲基)-16-甲基-22-三氟甲基-2-硫杂-4,10,13,16,19-五氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-12,15,18-三酮；

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-4-氯-12-(1h-吲哚-3-基甲基)-13-甲基-6-苯基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-11,14,17-三酮；

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-4-氯-6-(2-氯-苯基)-12-(1h-吲哚-3-基甲基)-13-甲基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-11,14,17-三酮；

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-4-氯-12-(1h-吲哚-3-基甲基)-13-甲基-6-吡啶-3-基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-11,14,17-三酮；

11-(3-氨基-丙基)-25-氯-17-(1h-吲哚-3-基甲基)-16-甲基-23-苯基-2-硫杂-4,10,13,16,19-五氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3(8),4,6,21,23-六烯-12,15,18-三酮；

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-6-溴-4-氯-12-(1h-吲哚-3-基甲基)-13-甲基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-11,14,17-三酮；

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-4-氯-12-(1h-吲哚-3-基甲基)-13-甲基-6-(1-甲基-1h-咪唑-4-基)-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-11,14,17-三酮；

3-[(11s,14s,17s)-14-(4-氨基-丁基)-17-(1h-吲哚-3-基甲基)-16-甲基-12,15,18-三氧代-23-苯基-25-三氟甲基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-11-基]-丙酰胺；

3-[(11s,14s,17s)-11-(3-氨基-丙基)-17-(1h-吲哚-3-基甲基)-16-甲基-12,15,18-三氧代-23-苯基-25-三氟甲基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-14-基]-丙酰胺；

(11s,14s,17s)-14-(4-氨基-丁基)-11-(3-氨基-丙基)-25-氯-23-(2-氯-吡啶-4-基)-17-(1h-吲哚-3-基甲基)-16-甲基-2-硫杂-4,10,13,16,19-五氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(21),3,5,7,22,24-六烯-12,15,18-三酮；

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-5-溴-4-氯-12-(1h-吲哚-3-基甲基)-13-甲基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-11,14,17-三酮；

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-4-氯-12-(1h-吲哚-3-基甲基)-13-甲基-5-苯基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-11,14,17-三酮；

(8s,11s,14s)-8-((1h-吲哚-3-基)甲基)-11-(4-氨基丁基)-14-(3-氨基丙基)-3-氯-9-甲基-5,6,8,9,11,12,15,16-八氢苯并[b]吡啶并[3,2-p][1,5,8,11,14]硫杂四氮杂环十七碳因-7,10,13(14h)-三酮(环十七碳因＝cycloheptadecine)；

(11s,14s,17s)-14-(4-氨基-丁基)-11-(3-氨基-丙基)-25-氯-23-(2-氯-吡啶-4-基)-16-甲基-17-(2-甲基-1h-吲哚-3-基甲基)-2-硫杂-4,10,13,16,19-五氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3(8),4,6,21,23-六烯-12,15,18-三酮；

(11s,14s,17s)-14-(4-氨基-丁基)-11-(3-氨基-丙基)-23-(3-苄氧基-丙-1-炔基)-25-氯-17-(1h-吲哚-3-基甲基)-16-甲基-2-硫杂-4,10,13,16,19-五氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3(8),4,6,21,23-六烯-12,15,18-三酮；

(8s,11s,14s)-8-((1h-吲哚-3-基)甲基)-11-(4-氨基丁基)-14-(3-氨基丙基)-9-甲基-2-吗啉代-5,6,8,9,11,12,15,16-八氢苯并[b]吡啶并[3,2-p][1,5,8,11,14]硫杂四氮杂环十七碳因-7,10,13(14h)-三酮；

(11s,14s,17s)-14-(4-氨基-丁基)-11-(3-氨基-丙基)-25-氯-16-甲基-17-(2-甲基-1h-吲哚-3-基甲基)-22-吡啶-4-基-2-硫杂-4,10,13,16,19-五氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3(8),4,6,21,23-六烯-12,15,18-三酮；

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-23-溴-4-氯-12-(1h-吲哚-3-基甲基)-13-甲基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-11,14,17-三酮；

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-4-氯-12-(1h-吲哚-3-基甲基)-13-甲基-23-苯基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-11,14,17-三酮；

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-23-(4-氨基甲基-苯基)-18-(3-氨基-丙基)-4-氯-12-(1h-吲哚-3-基甲基)-13-甲基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-11,14,17-三酮；

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-24-溴-4-氯-12-(1h-吲哚-3-基甲基)-13-甲基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-11,14,17-三酮；

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-4-氯-12-(1h-吲哚-3-基甲基)-13-甲基-24-苯基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-11,14,17-三酮；

4-[(11s,14s,17s)-14-(4-氨基-丁基)-11-(3-氨基-丙基)-25-氯-16-甲基-17-(2-甲基-1h-吲哚-3-基甲基)-12,15,18-三氧代-2-硫杂-4,10,13,16,19-五氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3(8),4,6,21,23-六烯-23-基]-苯磺酰胺；

(11s,14s,17s)-14-(4-氨基-丁基)-22-[3-(2-氨基-乙基)-苯基]-11-(3-氨基-丙基)-25-氯-17-(1h-吲哚-3-基甲基)-16-甲基-2-硫杂-4,10,13,16,19-五氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3(8),4,6,21,23-六烯-12,15,18-三酮；

(11s,14s,17s)-14-(4-氨基-丁基)-11-(3-氨基-丙基)-25-氯-17-(1h-吲哚-3-基甲基)-16-甲基-22-(4-哌嗪-1-基-苯基)-2-硫杂-4,10,13,16,19-五氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3(8),4,6,21,2-六烯-12,15,18-三酮；及

其可药用盐。

制备方法

如上文所定义的式(i)、(i’)、(ia)、(ib)或(ic)化合物及其可药用盐可以按照本领域已知的标准方法进行制备。

1.系链(tether)的通用合成

式(iii)的系链中间体可以按照本领域已知的标准方法、特别是按照如实施例中所述的方法(例如pg＝fmoc)进行制备。

2.三肽的通用合成

式(iv)的三肽可以按照本领域已知的标准方法进行制备。

三肽序列可以例如经由如下的现有技术固相肽合成(spps)方案(例如fmoc-化学)进行合成：

a)给作为固体载体的树脂(例如2-cl-三苯甲基树脂)装载第一种n-被保护的氨基酸和hünig's碱(n,n-二异丙基乙胺或dipea)，然后裂解保护基。

b)将第二种n-被保护的氨基酸与偶联剂和hünig’s碱偶联，然后裂解保护基(例如fmoc)。

c)将第三种n-被保护的氨基酸与偶联剂和hünig’s碱偶联，然后裂解保护基。

当式(iv)化合物中存在n-甲基化氨基酸时，可以在固相上进行烷基化。在spps的适当步骤后，将末端氨基在第一步例如通过将树脂在四氢呋喃(thf)中膨胀和添加hünig’s碱和2-硝基苯-1-1磺酰氯(nbs)进行保护。在第二步中，可以将4-硝基苯磺酸甲基酯连同7-甲基-1,5,7-三氮杂双环[4.4.0]癸-5-烯可以加入在二甲基呋喃(dmf)中的树脂中。对于2-硝基苯-1-1磺酰胺保护基的除去，可以将1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(dbu)加入在dmf中的树脂中，然后添加巯基乙醇。

在具体实施方案中，固体载体是2-氯-三苯甲基氯树脂。

在具体实施方案中，n-被保护的氨基酸是用9-芴基甲氧羰基(fmoc)进行保护的。

在具体实施方案中，在步骤a)中在二氯甲烷(dcm)中给树脂装载0.1-1.0eq的第一种氨基酸和过量的hünig’s碱。

在具体实施方案中，在步骤a)中的偶联反应后将树脂用二甲基甲酰胺(dmf)和二氯甲烷(dcm)充分洗涤。

在具体实施方案中，fmoc保护基在步骤a)中用50％哌啶在dcm/dmf(1:1)中的混合物裂解。

在具体实施方案中，在步骤a)中的脱保护后将树脂用dmf、dcm和甲醇(meoh)充分洗涤，然后真空干燥和称重。

在具体实施方案中，步骤b)中的偶联试剂是mukaiyama’s试剂(2-氯-1-甲基吡啶鎓碘化物)。

在具体实施方案中，步骤b)中的第二种氨基酸与4eq的偶联试剂mukaiyama’s试剂和6eq的hünig’s碱在dmf/dcm(1:1)中偶联。

在具体实施方案中，在步骤b)中的偶联反应后将树脂用二甲基甲酰胺(dmf)和二氯甲烷(dcm)充分洗涤。

在具体实施方案中，fmoc保护基在步骤b)中用50％哌啶在dcm/dmf(1:1)中的混合物裂解。

在具体实施方案中，在步骤b)中的脱保护后将树脂用dmf和dcm充分洗涤，然后真空干燥和称重。

在具体实施方案中，步骤c)中的偶联试剂是hatu(1-[双(二甲基-氨基)亚甲基]-1h-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐)。

在具体实施方案中，步骤c)中的第三种氨基酸与4eq的偶联试剂hatu和6eq的hünig’s碱在dmf/dcm(1:1)中偶联。

在具体实施方案中，在步骤c)中的偶联反应后将树脂用二甲基甲酰胺(dmf)和二氯甲烷(dcm)充分洗涤。

在具体实施方案中，fmoc保护基在步骤c)中用20％哌啶在dmf中的混合物裂解。

在具体实施方案中，在步骤c)中的脱保护后将树脂用dmf和dcm充分洗涤，然后真空干燥和称重。

3.三肽向系链偶联的通用合成

式(i)化合物可以从式(iii)和式(iv)化合物开始按照流程1获得。

将式(iii)的系链醛或酮溶于n-甲基-2-吡咯烷酮(nmp)、原甲酸三甲基酯(tmof)和乙酸(acoh)的混合物中，将包含式(iv)三肽的树脂加入溶液中。搅拌混合物后，加入氰基硼氢化钠(nacnbh3)，得到式(ii)化合物。

在borch反应后，裂解系链上的保护基(pg)，例如用20％哌啶在dmf中的混合物进行。三肽上的树脂可以被裂解、例如通过添加在dcm中的20％六氟异丙醇(hfip)，和过滤。式(i)化合物最终通过用hatu和hünig’s碱使裂解的式(ii)化合物环化、然后使保留的被保护的氨基基团全面脱保护来获得。

本发明的具体实施方案涉及制备式(i)化合物的方法，该方法包括如下步骤：

a)采用氰基硼氢化钠(nacnbh3)使式(iii)化合物与式(iv)化合物反应，得到式(ii)化合物；

b)从式(ii)化合物裂解保护基(pg)和树脂；

c)然后采用hatu和hünig’s碱使所裂解的式(ii)化合物环化。

在具体实施方案中，式(iv)三肽用dcm洗涤，然后将其加入式(iii)的系链醛或酮中。

在具体实施方案中，式(iii)的系链醛的溶剂由n-甲基-2-吡咯烷酮(nmp)、原甲酸三甲基酯(tmof)和乙酸(acoh)的混合物组成。

在具体实施方案中，反应混合物在borch反应后用dmf、dcm、meoh/dcm和/或dmf洗涤。

在具体实施方案中，脱保护和裂解的式(ii)化合物的环化采用hatu和dipea在dmf中进行。

在具体实施方案中，全面boc-脱保护通过用tfa在溶剂、特别是dcm中在室温来完成。

药物组合物

其它实施方案提供了包含本发明的化合物和治疗惰性的载体、稀释剂或可药用赋形剂的药物组合物或药剂以及采用本发明的化合物来制备这类组合物和药剂的方法。

组合物以符合良好医疗实践的方式进行配制、定量和施用。在该背景下的考虑因素包括所治疗的特定障碍、所治疗的特定哺乳动物、个体患者的临床状况、病因、活性物递送位点、施用方法、施用方案和医疗从业者已知的其它因素。

本发明的化合物可以以任意适宜的方式进行施用，包括口服、局部(包括颊和舌下)、直肠、阴道、经皮、胃肠外、皮下、腹膜内、肺内、真皮内、鞘内和硬膜外和鼻内以及如果期望的话用于局部治疗、内部损伤施用。胃肠外输注包括肌内、静脉内、动脉内、腹膜内或皮下施用。

本发明的化合物可以以任意方便的施用方式进行施用，例如片剂、粉末、胶囊剂、溶液剂、分散剂、混悬剂、糖浆剂、喷雾剂、栓剂、凝胶、乳剂、贴剂等。该组合物可以包含药物制剂中常规的组分，例如稀释剂、载体、ph调节剂、防腐剂、增溶剂、稳定剂、湿润剂、乳化剂、甜味剂、着色剂、矫味剂、调节渗透压的盐、缓冲剂、掩蔽剂、抗氧化剂和其它活性剂。它们还可以包含其它有治疗价值的物质。

典型的制剂通过将本发明的化合物与载体或赋形剂混合来制备。适宜的载体和赋形剂是本领域技术人员熟知的，并且在例如如下文献中详细记载：anselh.c.等人,ansel’spharmaceuticaldosageformsanddrugdeliverysystems(2004)lippincott,williams&wilkins,费城；gennaroa.r.等人，remington:thescienceandpracticeofpharmacy(2000)lippincott,williams&wilkins,费城；和rower.c,handbookofpharmaceuticalexcipients(2005)pharmaceuticalpress,芝加哥。制剂还可以包含一种或多种缓冲剂、稳定剂、表面活性剂、湿润剂、润滑剂、乳化剂、助悬剂、防腐剂、抗氧化剂、遮光剂、助流剂、加工助剂、着色剂、甜味剂、芳香剂、矫味剂、稀释剂和优雅呈现药物(即本发明的化合物或其药物组合物)的其它已知添加剂或生产药物产品(即药剂)中的助剂。

本发明的化合物可以施用的剂量可以在宽范围内变化，并且在每个特定情况中适合个体要求。通常，当口服施用时，每人约0.01-1000mg通式(i)化合物的日剂量应当是适当的，虽然当必要时也可以超过上限。

适宜口服剂型的实例是包含如下的片剂：约100mg至500mg的本发明的化合物，配合有约30至90mg无水乳糖、约5至40mg交联羧甲基纤维素钠、约5至30mg聚乙烯吡咯烷酮(pvp)k30和约1至10mg硬脂酸镁。首先将粉末化成分混合在一起，然后与pvp溶液混合。所得复合物可以进行干燥、制粒、与硬脂酸镁混合和采用常规装置压制成片剂形式。

气雾剂制剂的实例可以通过将本发明的化合物、例如10-100mg本发明的化合物溶于适宜的缓冲溶液、例如磷酸盐缓冲液中来制备，如果需要的话加入张力调节剂如盐如氯化钠。溶液可以进行过滤、例如采用0.2μm滤器进行过滤以除去杂质和污染物。

用途

如上所述，式(i)、(ia)和(ib)化合物和它们的可药用盐具有用于治疗或预防由病原体、特别是细菌、更特别是假单胞菌属(pseudomonasspecies)、最特别是绿脓杆菌引起的感染和所致疾病、特别是菌血症、肺炎、脑膜炎、尿道感染和伤口感染的有价值的药理性质。

式(i)、(ia)和(ib)化合物和它们的可药用盐呈现出作为抗生素、特别是作为对抗假单胞菌属物种的抗生素、更特别是作为对抗绿脓杆菌的抗生素、最特别是作为对抗绿脓杆菌的病原体特异性抗生素的活性。

式(i)、(ia)和(ib)化合物和它们的可药用盐可以用作抗生素，即，用作抗细菌药用成分，适于治疗和预防细菌感染，特别是治疗和预防由假单胞菌属物种引起的细菌感染，更特别是治疗和预防由绿脓杆菌引起的细菌感染。

本发明的化合物可以单独或与其它药物组合用于治疗或预防由病原体、特别是细菌、更特别是假单胞菌属物种、最特别是绿脓杆菌引起的感染和所致疾病、特别是菌血症、肺炎、脑膜炎、尿道感染和伤口感染。

本发明的具体实施方案涉及包含如上文定义的式(i)、(ia)和(ib)化合物或它们的可药用盐和一种或多种可药用赋形剂的药物组合物。

本发明的具体实施方案涉及用于治疗或预防由病原体、特别是细菌、更特别是假单胞菌属物种、最特别是绿脓杆菌引起的感染和所致疾病、特别是菌血症、肺炎、脑膜炎、尿道感染和伤口感染的包含如上文定义的式式(i)、(ia)和(ib)化合物或它们的可药用盐和一种或多种可药用赋形剂的药物组合物。

本发明的具体实施方案涉及如上文定义的式(i)、(ia)和(ib)化合物或它们的可药用盐，用作治疗活性物质，特别是用作用于治疗或预防由病原体、特别是细菌、更特别是假单胞菌属物种、最特别是绿脓杆菌引起的感染和所致疾病、特别是菌血症、肺炎、脑膜炎、尿道感染和伤口感染的治疗活性物质。

本发明的具体实施方案涉及用于治疗或预防由病原体、特别是细菌、更特别是假单胞菌属物种、最特别是绿脓杆菌引起的感染和所致疾病、特别是菌血症、肺炎、脑膜炎、尿道感染和伤口感染的如上文定义的式(i)、(ia)和(ib)化合物或它们的可药用盐。

本发明的具体实施方案涉及用于治疗或预防由病原体、特别是细菌、更特别是假单胞菌属物种、最特别是绿脓杆菌引起的感染和所致疾病、特别是菌血症、肺炎、脑膜炎、尿道感染和伤口感染的方法，该方法包括给个体施用如上文定义的式(i)、(ia)和(ib)化合物或它们的可药用盐。

本发明的具体实施方案涉及如上文定义的式(i)、(ia)和(ib)化合物或它们的可药用盐用于治疗或预防由病原体、特别是细菌、更特别是假单胞菌属、最特别是绿脓杆菌引起的感染和所致疾病、特别是菌血症、肺炎、脑膜炎、尿道感染和伤口感染的用途。

本发明的具体实施方案涉及如上文定义的式(i)、(ia)和(ib)化合物或它们的可药用盐在制备药剂中的用途，所述药剂用于治疗或预防由病原体、特别是细菌、更特别是假单胞菌属、最特别是绿脓杆菌引起的感染和所致疾病、特别是菌血症、肺炎、脑膜炎、尿道感染和伤口感染。这类药剂包含如上文定义的式(i)、(ia)和(ib)化合物或它们的可药用盐。

实施例

通过参考如下实施例将更充分地理解本发明。但是，它们不应当解释为限制本发明的范围。

所用缩略语

agp:2-氨基-3-胍基-丙酸

boc:叔丁氧羰基

dcm:二氯甲烷

dipea:n,n-二异丙基胺

dmf:n,n-二甲基甲酰胺

ea:乙酸乙酯

etoac:乙酸乙酯

etoh:乙醇

fmoc:9-芴基甲氧羰基

fmoc-osu:n-(9-芴基甲氧羰基氧基)琥珀酰亚胺

hatu:o-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-n,n,n′,n′-四甲基脲鎓-六氟磷酸盐

hfip:六氟异丙醇

hobt:羟基-苯并三唑

lah:氢化铝锂

lys:赖氨酸

mecn:乙腈

mukaiyama’s试剂:2-氯-1-甲基-吡啶鎓碘化物

mtbd:7-甲基-1,5,7-三氮杂双环[4.4.0]癸-5-烯

nmp:n-甲基吡咯烷酮

orn:鸟氨酸

pd2(dba)3:三(双苯亚甲基丙酮)二钯(0)

thf:四氢呋喃

tlc:薄层色谱法

tmof:原甲酸三甲基酯

trp:色氨酸

p-tsa:对甲苯磺酸

hmpa:六甲基磷酰胺

中间体1

n-[[3-氯-2-(2-甲酰基苯基)硫烷基-苯基]甲基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲酯

向3-氯-2-氟-苯甲醛(2.8g,16.64mmol)和k2co3(4.5g,33.29mmol)在dmf(15ml)中的混悬液中加入2-巯基-苯甲酸甲酯(7.9g,49.93mmol)，反应混合物于室温搅拌2小时。通过tlc监测反应进程。完成后，反应混合物用水(100ml)稀释，用乙酸乙酯萃取(3x100ml)。合并的有机层经硫酸钠干燥，在减压下浓缩，得到粗制化合物，将其经硅胶柱色谱法纯化(20％乙酸乙酯和己烷)，得到2-(2-氯-6-甲酰基-苯基)硫烷基苯甲酸甲酯(4.4g,86.17％)，为白色固体。lc-ms:307.2[m+h]⁺。

向2-(2-氯-6-甲酰基-苯基)硫烷基苯甲酸甲酯(4.4g,14.37mmol)和叔丁基亚磺酰胺(2.61g,21.56mmol)在thf(50ml)中的溶液中加入四乙醇钛(4.92g,21.56mmol)，反应混合物加热至80℃达3小时。通过tlc监测反应进程。完成后，反应混合物用水(100ml)稀释，用乙酸乙酯萃取(3x100ml)。合并的有机层经硫酸钠干燥，在减压下浓缩，得到粗制化合物，将其经硅胶柱色谱法纯化(20％乙酸乙酯和己烷)，得到2-[2-[(e)-叔丁基亚磺酰基亚氨基甲基]-6-氯-苯基]硫烷基苯甲酸甲酯(4.2g,71.25％)，为棕色固体。lc-ms:＝409.8[m+h]⁺。

向2-[2-[(e)-叔丁基亚磺酰基亚氨基甲基]-6-氯-苯基]硫烷基苯甲酸甲酯(4.2g,10.26mmol)在thf(50ml)中的冰冷溶液中分批加入lah(1.1g,37.95mmol)，反应混合物在相同温度搅拌1小时。通过tlc监测反应进程。完成后，反应混合物用硫酸钠水溶液(50ml)稀释，用乙酸乙酯萃取(3x100ml)。合并的有机层经硫酸钠干燥，在减压下浓缩，得到粗制化合物，将其用己烷、继之以戊烷研磨进行纯化，得到n-[[3-氯-2-[2-(羟基甲基)苯基]硫烷基-苯基]甲基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(3.7g,94.06％)，为棕色固体。lc-ms:383.8[m+h].

向n-[[3-氯-2-[2-(羟基甲基)苯基]硫烷基-苯基]甲基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(3.7g,9.64mmol)在dcm(100ml)中的溶液中加入dess-martin过碘烷(1,1,1-三乙酰氧基-1,1-二氢-1,2-苯并碘杂氧杂环戊二烯-3(1h)-酮)(12.26g,28.90mmol)，反应混合物于室温搅拌4小时。通过tlc监测反应进程。完成后，反应混合物用水(100ml)稀释，用dcm萃取(3x100ml)。合并的有机层经硫酸钠干燥，在减压下浓缩，得到粗制化合物。粗制化合物经硅胶柱色谱法(乙酸乙酯)纯化，得到n-[[3-氯-2-(2-甲酰基苯基)硫烷基-苯基]甲基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(0.7g,19.02％)，为白色固体。lc-ms:381.8[m+h]⁺。

向n-[[3-氯-2-(2-甲酰基苯基)硫烷基-苯基]甲基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(0.800g,2.09mmol)在二噁烷(10ml)中的冰冷溶液中加入hcl在二噁烷中的4m溶液(0.9ml)，所得反应混合物于室温搅拌2小时。通过tlc监测反应进程。在减压下除去挥发物，得到2-[2-(氨基甲基)-6-氯-苯基]硫烷基苯甲醛(0.660g,定量)，为灰白色固体。lc-ms:278.0[m+h]⁺。

向2-[2-(氨基甲基)-6-氯-苯基]硫烷基苯甲醛(0.660g,2.09mmol)在5％nahco3水溶液(6ml)中的溶液中加入在ch3cn(20ml)中的fmoc-osu(0.754g,2.24mmol)，反应混合物于室温搅拌3小时。通过tlc监测反应混合物的进程。完成后，反应混合物用乙酸乙酯稀释，用水、继之以盐水进行洗涤。有机层经硫酸钠干燥，在减压下蒸发，得到粗制化合物，将其经快速色谱法纯化(乙酸乙酯在己烷中的5-7％溶液)，得到n-[[3-氯-2-(2-甲酰基苯基)硫烷基-苯基]甲基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲酯(0.460g,44％)，为灰白色固体。lc-ms:500.3[m+h]

¹h-nmr:(400mhz,dmso-d6):δ4.22-4.19(1h,m),4.33-4.29(4h,m),6.47(1h,d,j＝8.00hz),7.37-7.28(4h,m),7.47-7.40(3h,m),7.57(1h,t,j＝7.8hz),7.64(1h,d,j＝7.6hz),7.68(2h,d,j＝7.4hz),7.90-7.81(3h,m),8.00(1h,d,j＝7.5hz),10.20(1h,s)。

中间体2

n-[[4-氯-2-(2-甲酰基苯基)硫烷基-苯基]甲基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯

从相应的被取代的苯甲醛起始类似于中间体1制备中间体2。

¹h-nmr:(400mhz,dmso-d6)δ4.20-4.22(m；3h)；4.32(2h；d；j＝6.8hz)；7.6(1h；d；j＝7.6hz)；7.31-7.36(m；4h)；7.40(3h；t；j＝7.4hz)；7.46(1h；brs)；7.54(2h；t；j＝8.4hz)；7.69(2h；d；j＝7.6hz)；7.82-7.84(m；1h)；7.90(2h；d；j＝7.2hz)；7.99(1h；d；j＝7.2hz)；10.21(1h；s)。

中间体3

n-[[5-氯-2-(2-甲酰基苯基)硫烷基-苯基]甲基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯

从相应的被取代的苯甲醛起始类似于中间体1制备中间体3。

1h-nmr:(400mhz,dmso-d6)δ4.23-4.25(m；3h)；4.32(2h；d；j＝6.8hz)；6.7(1h；d；j＝8.0hz)；7.31(2h；t；j＝7.4hz)；7.39-7.43(4h；m)；7.44-7.54(2h；m)；7.70(2h；d；j＝7.6hz)；7.82-7.84(m；2h)；7.98(2h；d；j＝7.2hz)；10.20(1h；s)。

中间体4

n-[[2-(2-甲酰基苯基)硫烷基苯基]甲基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯

相应地从可购买获得的[2-[2-(氨基甲基)苯基]硫烷基苯基]甲醇制备中间体4。

1hnmr(600mhz,chcl3-d6)δppm4.15-4.22(m,1h)4.38(d,j＝6.9hz,2h)4.48(d,j＝6.3hz,2h)5.12-5.20(m,1h)6.77(d,j＝7.8hz,1h)7.17-7.25(m,1h)7.27-7.58(m,12h)7.76(d,j＝7.6hz,2h)7.86(d,j＝7.6hz,1h)10.13-10.40(m,1h)。

中间体5

n-[[2-(2-甲酰基苯基)硫烷基-3-甲基-苯基]甲基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯

将na2s.9h2o(4.79g,61.41mmol)和mgso4(10.87g,90.31mmol)在nmp(100ml)中的混悬液在氩气气氛下于80℃搅拌30分钟的时间。于80℃向所得反应混合物中滴加2-氟-3-甲基苯甲醛(5g,36.12mmol)在nmp(25ml)中的溶液，于80℃继续搅拌30分钟。然后反应混合物在冰浴中冷却。向所得反应混合物中滴加乙酸酐(6ml)，反应混合物搅拌30分钟。通过tlc监测反应进程。然后反应混合物在水和乙酸乙酯之间分配；分离出有机层，经无水硫酸钠干燥，在减压下浓缩，得到粗制化合物。粗制化合物经快速色谱法纯化(乙酸乙酯在己烷中的25％溶液)，得到硫羟乙酸s-(2-甲酰基-6-甲基-苯基)酯(3.2g,45.64％)，为棕色固体。lc-ms:194.25(m+h)。

向硫羟乙酸s-(2-甲酰基-6-甲基-苯基)酯(3.2g,16.47mmol)在无水thf(100ml)中的溶液中依次加入2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(1.99g,16.47mmol)和四乙醇钛(3.76g,16.474mmol)。所得反应混合物在氩气气氛下于60℃搅拌2小时的时间。然后反应混合物冷却至环境温度，倒入冰水中，经硅藻土短柱过滤。滤液用乙酸乙酯萃取(100mlx2)，合并的有机层用盐水洗涤(100mlx2)，经无水硫酸钠干燥，在减压下浓缩，得到粗制化合物，将其经快速色谱法纯化(乙酸乙酯在己烷中的10-20％溶液)，得到硫羟乙酸s-[2-[(e)-叔丁基亚磺酰基亚氨基甲基]-6-甲基-苯基]酯(2.9g,59.30％)，为粘稠油。lc-ms:297.44(m+h)。

将硫羟乙酸s-[2-[(e)-叔丁基亚磺酰基亚氨基甲基]-6-甲基-苯基]酯(2.7g,9.091mmol)在thf-乙醇(4:1；75ml)中的溶液用氩气脱气15分钟，然后于0℃分批加入硼氢化钠(2.75g,72.727mmol)。所得反应混合物于0℃搅拌30分钟，于室温搅拌30分钟。然后反应混合物用丙酮/乙醇(1:1；30ml)(用氩气脱气)淬灭，于0℃搅拌1小时。挥发物在减压下蒸发，在氩气下释放，得到2-甲基-n-[(3-甲基-2-硫烷基-苯基)甲基]丙烷-2-亚磺酰胺(粗制品)，为黄色固体。该化合物未经进一步纯化原样用于下一步骤。lc-ms:257.41(m+h)。

向2-甲基-n-[(3-甲基-2-硫烷基-苯基)甲基]丙烷-2-亚磺酰胺(2.31g,8.98mmol)在dmf(80ml)(在添加前用氩气脱气10分钟)中的溶液中加入碳酸钾(2.48g,17.947mmol)和2-氟苯甲醛(3.34g,26.92mmol)，反应混合物加热至70℃达5小时。然后反应混合物用乙酸乙酯(50ml)稀释，用水(50ml)、继之以盐水(50mlx2)洗涤，经硫酸钠干燥，在减压下浓缩，得到粗制化合物。由此获得的粗制化合物经硅胶(100-200目)柱色谱法(甲醇在dcm中的3％溶液)纯化，得到n-[[2-(2-甲酰基苯基)硫烷基-3-甲基-苯基]甲基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(1.0g,历经两步为25％)，为棕色粘稠油。lc-ms:361.53(m+h)。

向n-[[2-(2-甲酰基苯基)硫烷基-3-甲基-苯基]甲基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(0.950g,2.63mmol)在二噁烷(10ml)中的冰冷溶液中加入hcl在二噁烷中的4m溶液(0.95ml)，所得反应混合物于室温搅拌2小时。通过tlc监测反应进程。挥发物在减压下蒸发，得到粗制化合物，将其用二乙醚洗涤和干燥，得到2-[2-(氨基甲基)-6-甲基-苯基]硫烷基苯甲醛(0.670g,87.10％)，为白色固体。该化合物未经进一步纯化原样用于下一步骤。lc-ms:257.36(m+h)。

向2-[2-(氨基甲基)-6-甲基-苯基]硫烷基苯甲醛(0.670g,2.607mmol)在5％碳酸氢钠(5ml)中的搅拌混悬液中加入fmoc-osu(0.879g,2.607mmol)在乙腈(10ml)中的溶液，反应混合物于室温搅拌3小时。然后反应混合物用乙酸乙酯(50ml)稀释，用盐水洗涤(50ml)，经无水硫酸钠干燥，在减压下浓缩，得到粗制化合物。将如此获得的粗制品经快速色谱法纯化(乙酸乙酯在己烷中的25％溶液)，得到n-[[2-(2-甲酰基苯基)硫烷基-3-甲基-苯基]甲基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲酯(0.48g,44.12％)，为白色固体。lc-ms:479.60(m+h)。

¹h-nmr:(400mhz,dmso-d6):δ2.29(3h,s),4.20(1h,t,j＝6.7hz),4.26(2h,d,j＝6.00hz),4.30(2h,t,j＝6.8hz),6.45(1h,d,j＝8.00hz),7.21(1h,d,j＝7.56hz),7.35-7.29(4h,m),7.48-7.38(4h,m),7.69(2h,d,j＝7.52hz),7.78(1h,t,j＝6.00hz),7.89(2h,d,j＝7.5hz),7.97(1h,d,j＝6.2hz),10.22(1h,s)。

中间体6

n-[[2-(2-甲酰基苯基)硫烷基-4-(三氟甲基)苯基]甲基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯

向2-氟-4-三氟甲基-苯甲醛(2.0g,10.41mmol)在dmf(4ml)中的溶液中加入k2co3(2.8g,20.82mmol)、继之以2-巯基-苯甲酸甲基酯(2.62g,15.61mmol)，反应混合物于室温搅拌6小时。通过tlc监测反应进程。完成后，反应混合物用水(30ml)稀释，用乙酸乙酯(70ml)萃取。有机层经硫酸钠干燥，在减压下浓缩，得到2-[2-甲酰基-5-(三氟甲基)苯基]硫烷基苯甲酸甲基酯(3.0g,84.67％)，为灰白色固体。lc-ms:341.1(m+h)。

向2-[2-甲酰基-5-(三氟甲基)苯基]硫烷基苯甲酸甲基酯(3g,8.81mmol)在无水thf(50ml)中的溶液中加入叔丁基亚磺酰胺(1.6g,13.22mmol)、继之以乙醇钛(iv)(2.77g,13.22mmol)，反应混合物在氩气气氛下加热至80℃达1小时。通过tlc监测反应进程。完成后，反应混合物用水(30ml)稀释，用乙酸乙酯(70ml)萃取。有机层经无水硫酸钠干燥，在减压下浓缩，得到2-[2-[(e)-叔丁基亚磺酰基亚氨基甲基]-5-(三氟甲基)苯基]硫烷基苯甲酸甲基酯(3.8g,97.19％)，为浅黄色粘稠油。lc-ms:443.9(m+h)。

向lah(0.977g,25.73mmol)在thf(30ml)中的冰冷混悬液中加入在thf(30ml)中的2-[2-[(e)-叔丁基亚磺酰基亚氨基甲基]-5-(三氟甲基)苯基]硫烷基苯甲酸甲基酯(3.8g,8.57mmol)，反应混合物于0℃搅拌2小时。通过tlc监测反应进程。完成后，反应混合物用饱和硫酸钠溶液(3ml)淬灭，经硅藻土过滤。残余物用乙酸乙酯洗涤(80ml)，将滤液浓缩，得到n-[[2-[2-(羟基甲基)苯基]硫烷基-4-(三氟甲基)苯基]甲基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(3.5g,99％)，为黄色油。lc-ms:418.1(m+h)。

向n-[[2-[2-(羟基甲基)苯基]硫烷基-4-(三氟甲基)苯基]甲基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(3.5g,8.39mmol)在dcm(100ml)中的冰冷溶液中加入dess-martin过碘烷(10.67g,25.18mmol)，反应混合物于室温搅拌1小时。通过tlc监测反应进程。完成后，反应混合物倒入饱和碳酸氢钠溶液中，用dcm萃取(3x100ml)。合并的有机层用硫代硫酸钠洗涤，经硫酸钠干燥，在减压下浓缩，得到粗制化合物。粗制化合物经combiflash纯化(乙酸乙酯)，得到n-[[2-(2-甲酰基苯基)硫烷基-4-(三氟甲基)苯基]甲基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(1.7g,48.75％)，为黄色粘稠油。lc-ms:415.9(m+h)。

向n-[[2-(2-甲酰基苯基)硫烷基-4-(三氟甲基)苯基]甲基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(1.7g,4.091mmol)在二噁烷(17ml)中的冰冷溶液中加入hcl在二噁烷中的4m溶液(1.7ml)，反应混合物于室温搅拌1小时。通过tlc监测反应进程。完成后，挥发物在减压下蒸发，得到2-[2-(氨基甲基)-5-(三氟甲基)苯基]硫烷基苯甲醛(1.1g,86％)，为灰白色固体。lc-ms:311.9(m+h)。

向2-[2-(氨基甲基)-5-(三氟甲基)苯基]硫烷基苯甲醛(1.1g,3.53mmol)在乙腈(15ml)和5％nahco3水溶液(8ml)中的冰冷混悬液中加入fmoc-osu(1.19g,3.53mmol)在ch3cn(15ml)中的溶液，反应混合物于室温搅拌3小时。通过tlc监测反应进程。完成后，反应混合物用乙酸乙酯(50ml)稀释，分离出有机层。有机层用水、继之以盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，在减压下蒸发，得到粗制化合物。粗制化合物经快速色谱法纯化(etoac在己烷中的5-7％溶液)，得到n-[[2-(2-甲酰基苯基)硫烷基-4-甲基-苯基]甲基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯(0.530g,31％)，为灰白色固体。lc-ms:534.2(m+h)。

¹h-nmr:(400mhz,dmso-d6):δ4.22(1h,t,j＝6.7hz),4.29(2h,d,j＝5.7hz),4.35(2h,d,j＝6.7hz),6.76(1h,d,j＝7.9hz),7.35-7.31(2h,m),7.46-7.40(3h,m),7.52(1h,d,j＝7.2hz),7.56(1h,d,j＝7.8hz),7.69(2h,d,j＝7.4hz),7.91-7.85(3h,m),7.73(1h,s).,7.94(1h,t,j＝8.00hz),8.00(1h,d,j＝7.4hz),10.22(1h,s)。

中间体7

n-[[2,3-二氯-6-(2-甲酰基苯基)硫烷基-苯基]甲基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯

向2,3-二氯-6-氟-苯甲醛(3g,15.54mmol)和k2co3(4.29g,31.08mmol)在dmf(10ml)中的冰冷混悬液中加入2-巯基-苯甲酸甲基酯(2.12ml,15.54mmol)，反应混合物搅拌1小时。通过tlc监测反应进程。完成后，反应混合物倒入水中，用乙酸乙酯萃取(50mlx3)。合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，在减压下蒸发，得到粗制化合物，将其经快速柱色谱法纯化(etoac在己烷中的10％溶液)，得到2-(3,4-二氯-2-甲酰基-苯基)硫烷基苯甲酸甲基酯(3g,57％)，为灰白色固体。

向2-(3,4-二氯-2-甲酰基-苯基)硫烷基苯甲酸甲基酯(3g,8.79mmol)在无水thf(100ml)中的溶液中依次加入叔丁基亚磺酰胺(1.60g,13.19mmol)和乙醇钛(iv)(3ml,13.19mmol)，所得反应混合物在氩气气氛下加热至60℃达1小时。通过tlc监测反应进程。完成后，反应混合物倒入水(100ml)中，经硅藻土过滤，硅藻土床用乙酸乙酯洗涤。分离出有机层，用盐水洗涤。有机层经无水硫酸钠干燥，在减压下浓缩，得到粗制化合物，将其用己烷研磨，得到2-[2-[(e)-叔丁基亚磺酰基亚氨基甲基]-3,4-二氯-苯基]硫烷基苯甲酸甲基酯(3.8g,92％)，为灰白色固体。

向lah(0.97g,25.67mmol)在thf(40ml)中的冰冷混悬液中加入在thf(30ml)中的2-[2-[(e)-叔丁基亚磺酰基亚氨基甲基]-3,4-二氯-苯基]硫烷基苯甲酸甲基酯(3.8g,8.56mmol)，反应混合物搅拌30分钟。然后反应混合物用饱和硫酸钠溶液(5ml)淬灭，经硅藻土过滤，硅藻土床用乙酸乙酯洗涤(3x50ml)。将滤液浓缩，由此获得的粗制化合物用己烷研磨，得到n-[[2,3-二氯-6-[2-(羟基甲基)苯基]硫烷基-苯基]甲基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(2.5g,70％)，为灰白色固体。lc-ms:417.8(m+h)。

向n-[[2,3-二氯-6-[2-(羟基甲基)苯基]硫烷基-苯基]甲基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(2.5g,5.98mmol)在dcm(100ml)中的冰冷溶液中加入dess-martin过碘烷(3.80g,8.97mmol)，所得反应混合物于环境温度搅拌1小时。完成后，反应混合物倒入饱和碳酸氢钠溶液中，用dcm萃取(100mlx3)。合并的有机层用硫代硫酸钠溶液洗涤，经无水硫酸钠干燥。有机层在减压下浓缩，由此获得的粗制化合物经快速柱色谱法纯化(etoac在己烷中的10％溶液)，得到n-[[2,3-二氯-6-(2-甲酰基苯基)硫烷基-苯基]甲基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(1.7g,69％)，为灰白色固体。lc-ms:416.0(m+h)。

向n-[[2,3-二氯-6-(2-甲酰基苯基)硫烷基-苯基]甲基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(1.7g,4.08mmol)在二噁烷(25ml)中的冰冷溶液中加入hcl在二噁烷中的4m溶液(10ml)，使所得反应混合物于环境温度搅拌6小时。挥发物在减压下蒸发，得到粗制化合物，将其用二乙醚研磨，得到2-[2-(氨基甲基)-3,4-二氯-苯基]硫烷基苯甲醛(1.27g,99％)，为白色固体。lc-ms:311.9(m+h)。

向2-[2-(氨基甲基)-3,4-二氯-苯基]硫烷基苯甲醛(1.3g,4.16mmol)在乙腈(40ml)中的冰冷混悬液中加入5％nahco3水溶液(10ml)、继之以fmoc-osu(1.40g,4.16mmol)在ch3cn(15ml)中的溶液，反应混合物于环境温度搅拌3小时。然后反应混合物用乙酸乙酯(100ml)和水(100ml)稀释。分离出有机层，用盐水洗涤。有机层经无水硫酸钠干燥，在减压下蒸发，得到粗制化合物。由此获得的粗制化合物经快速柱色谱法纯化(etoac在己烷中的20％溶液)，得到n-[[2,3-二氯-6-(2-甲酰基苯基)硫烷基-苯基]甲基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯(0.610g,28％)，为白色固体。lc-ms:534.1(m+h)。

¹h-nmr:(400mhz,cdcl3):δ4.17-4.15(1h,m),4.22-4.21(2h,m),4.50(2h,d,j＝4.4hz),6.89(1h,d,j＝7.8hz),7.30(2h,t,j＝7.4hz),7.42-7.38(4h,m),7.51(2h,t,j＝7.5hz),7.70-7.64(3h,m),7.88(2h,d,j＝7.6hz),7.97(1h,d,j＝7.8hz),10.19(1h,s)。

中间体8

n-[[3-氯-2-(2-甲酰基苯基)硫烷基-6-(三氟甲基)-苯基]甲基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯

向2-巯基-苯甲酸甲基酯(2g,11.89mmol)和2,3-二氯-6-(三氟甲基)苯甲醛(2.89g,11.889mmol)在dmf(20ml)中的搅拌溶液中加入k2co3(1.64g,11.89mmol)，反应物于25℃搅拌30分钟。反应混合物用乙酸乙酯稀释，用水洗涤。分离的有机层用盐水溶液洗涤，经无水硫酸钠干燥，在减压下蒸发。如此获得的粗制品经正相二氧化硅柱采用乙酸乙酯在己烷中的0-5％溶液纯化，得到2-[6-氯-2-甲酰基-3-(三氟甲基)苯基]硫烷基苯甲酸甲基酯(2.3g,51％)，为白色固体。ms实测:375(m+h)。

向2-[6-氯-2-甲酰基-3-(三氟甲基)苯基]硫烷基-苯甲酸甲基酯(4.5g,12.007mmol)在thf(50ml)中的搅拌溶液中加入2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(1.45g,12.0mmol)、ti(oet)4(12.68ml,60.04mmol)，反应物加热至70℃达16小时。反应物用饱和氯化钠溶液淬灭，所得固体经硅藻土垫过滤，用乙酸乙酯洗涤。分离的有机层经无水硫酸钠干燥，在减压下蒸发，得到2-[2-[(e)-叔丁基亚磺酰基亚氨基甲基]-6-氯-3-(三氟甲基)苯基]硫烷基苯甲酸乙基酯(5.8g粗制品)，将其未经进一步纯化直接用于下一步骤。ms实测:491.8(m+h)。

向2-[2-[(e)-叔丁基亚磺酰基亚氨基甲基]-6-氯-3-(三氟甲基)苯基]硫烷基苯甲酸乙基酯(5.8g,15.185mmol)在thf(60ml)中的搅拌溶液中加入libh4(3.2g,151.85mmol)，反应物加热至50℃达4小时。反应混合物用饱和氯化铵溶液淬灭，用乙酸乙酯萃取。分离的有机层用水、盐水溶液洗涤，经无水硫酸钠干燥，在减压下蒸发。如此获得的粗制品经正相二氧化硅柱采用乙酸乙酯在己烷中的5-40％溶液纯化，得到n-[[3-氯-2-[2-(羟基甲基)苯基]硫烷基-6-(三氟甲基)苯基]甲基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(3.7g,69％,2步)，为灰白色固体。ms实测:452.2(m+h)。

于0℃向n-[[3-氯-2-[2-(羟基甲基)苯基]硫烷基-6-(三氟甲基)苯基]甲基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(3.7g,8.18mmol)在meoh(40ml)中的搅拌溶液中加入hcl在二噁烷中的4m溶液(20ml)，反应混合物于25℃搅拌1小时。反应完成后，反应混合物在减压下浓缩，得到[2-[2-(氨基甲基)-6-氯-3-(三氟甲基)苯基]硫烷基苯基]甲醇(3.6g,粗制品)，将其未经进一步纯化直接用于下一步骤。ms实测:347.8(m+h)。

于25℃向[2-[2-(氨基甲基)-6-氯-3-(三氟甲基)苯基]硫烷基苯基]甲醇(3.6g,9.368mmol)在5％nahco3(35ml)中的搅拌混悬液中加入在ch3cn(35ml)中的fmocosu(3.1g,9.368mmol)，反应混合物于25℃搅拌2小时。然后反应物用水稀释，用乙酸乙酯萃取。分离的有机层用盐水溶液洗涤，经无水硫酸钠干燥，在减压下蒸发。如此获得的粗制品经正相二氧化硅柱采用乙酸乙酯在己烷中的5-30％溶液纯化，得到n-[[3-氯-2-[2-(羟基甲基)苯基]硫烷基-6-(三氟甲基)苯基]甲基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯(2.96g,63％,2步)，为灰白色固体。ms实测:569.9(m+h)。

向n-[[3-氯-2-[2-(羟基甲基)苯基]硫烷基-6-(三氟甲基)苯基]甲基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯(2.9g,5.087mmol)在dcm/thf(1:1,60ml)中的搅拌溶液中加入mno2(8.84g,101.749mmol)，反应混合物于25℃搅拌2小时。反应物经硅藻土垫过滤，滤液在减压下蒸发。如此获得的粗制品经正相二氧化硅柱采用乙酸乙酯在己烷中的5-20％溶液纯化，得到n-[[3-氯-2-(2-甲酰基苯基)硫烷基-6-(三氟甲基)苯基]甲基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯(2g,69％)，为灰白色固体。ms实测:567.9(m+h)。

¹h-nmr:(400mhz,dmso-d6)δ4.01-4.03(1h；m)；4.22-4.28(2h；m)；4.41(2h；d；j＝5.6hz)；6.53(1h；d；j＝7.76hz)；7.30(2h；t；j＝7.4hz)；7.42(3h；t；j＝7.4hz)；7.49-7.51(1h；m)；7.67(2h；d；j＝7.36hz)；7.74(1h；brs)；7.89(2h；d；j＝7.8hz)；7.99-8.03(2h；m)；8.07(1h；s)；10.20(1h；s)。

中间体9

n-[[5-氯-2-(2-甲酰基苯基)硫烷基-3-(三氟甲基)苯基]甲基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯

向5-氯-2-氟-3-三氟甲基-苯甲醛(1.5g,6.62mmol)和k2co3(1.8g,13.24mmol)在dmf(15ml)中的混悬液中加入2-巯基-苯甲酸甲基酯(1.1g,6.62mmol)，反应混合物于室温搅拌2小时。通过tlc监测反应进程。完成后，反应混合物用水(100ml)稀释，用乙酸乙酯萃取(3x250ml)。合并的有机层经硫酸钠干燥，在减压下浓缩，得到粗制化合物，将其经硅胶(100-200目)柱色谱法(20％乙酸乙酯和己烷)纯化，得到2-[4-氯-2-甲酰基-6-(三氟甲基)苯基]硫烷基苯甲酸甲基酯(2.3g,93％)，为棕色固体。

向2-[4-氯-2-甲酰基-6-(三氟甲基)苯基]硫烷基苯甲酸甲基酯(2.6g,6.95mmol)和叔丁基亚磺酰胺(1.8g,15.29mmol)在thf(50ml)中的溶液中加入四乙醇钛(3.48g,15.29mmol)，反应混合物加热至60℃达3小时。通过tlc监测反应进程。完成后，反应混合物用水(100ml)稀释，用乙酸乙酯萃取(3x100ml)。合并的有机层经硫酸钠干燥和浓缩，得到粗制化合物，将其经硅胶(100-200目)柱色谱法(30％乙酸乙酯和己烷)纯化，得到2-[2-[(e)-叔丁基亚磺酰基亚氨基甲基]-4-氯-6-(三氟甲基)苯基]硫烷基苯甲酸甲基酯(1.9g,57％)，为棕色固体。lc-ms:477.9(m+h)。

向lah(0.45g,11.95mmol)在thf(20ml)中的冰冷混悬液中加入2-[2-[(e)-叔丁基亚磺酰基亚氨基甲基]-4-氯-6-(三氟甲基)苯基]硫烷基苯甲酸甲基酯(1.9g,3.98mmol)在thf(30ml)中的溶液，反应混合物搅拌1小时。通过tlc监测反应进程。完成后，反应混合物用硫酸钠水溶液(50ml)淬灭，用乙酸乙酯萃取(3x100ml)。合并的有机层经硫酸钠干燥，在减压下浓缩，得到粗制化合物，将其用己烷、继之以戊烷洗涤，得到n-[[5-氯-2-[2-(羟基甲基)苯基]硫烷基-3-(三氟甲基)苯基]甲基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(1.6g,89％)，为灰白色固体。lc-ms:452.0(m+h)。

向n-[[5-氯-2-[2-(羟基甲基)苯基]硫烷基-3-(三氟甲基)苯基]甲基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(1.6g,3.54mmol)在dcm(50ml)中的混悬液中加入dess-martin过碘烷(3.7g,8.86mmol)，反应混合物在室温搅拌2小时。反应进程通过tlc监测。完成后，反应混合物用水(100ml)稀释，用dcm萃取(3x100ml)。合并的有机层经硫酸钠干燥，在减压下浓缩，得到粗制化合物。由此获得的粗制化合物经硅胶(100-200目)柱色谱法(乙酸乙酯)纯化，在减压下浓缩，得到n-[[5-氯-2-(2-甲酰基苯基)硫烷基-3-(三氟甲基)苯基]甲基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(0.900g,56％)，为白色固体。lc-ms:449.7(m+h)。

向n-[[5-氯-2-(2-甲酰基苯基)硫烷基-3-(三氟甲基)苯基]甲基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(0.9g,0.0020mol)在1,4-二噁烷(20ml)中的冰冷溶液中加入hcl在二噁烷中的4m溶液(4ml)，反应混合物于环境温度搅拌2小时。在减压下除去挥发物，得到2-[2-(氨基甲基)-4-氯-6-(三氟甲基)苯基]硫烷基苯甲醛(0.65g,94％)，为灰白色固体。lc-ms:346.0(m+h)。

向n-[[5-氯-2-(2-甲酰基苯基)硫烷基-3-(三氟甲基)苯基]甲基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(0.9g,0.0020mol)在5％nahco3水溶液(12ml)中的溶液中加入在ch3cn(50ml)中的fmoc-osu(0.558g,0.0020mol)，反应混合物于室温搅拌3小时。然后反应混合物用乙酸乙酯稀释，用水、继之以盐水洗涤。分离出有机层，经硫酸钠干燥，在减压下蒸发，得到粗制化合物，将其经快速色谱法纯化，得到n-[[5-氯-2-(2-甲酰基苯基)硫烷基-3-(三氟甲基)苯基]甲基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯(0.435g,32％)，为灰白色固体。lc-ms:568.0(m+h)。

¹h-nmr:(400mhz,dmso-d6):δ4.23-4.20(3h,m),4.32-4.30(2h,m),6.43(1h,d,j＝8.0hz),7.34-7.30(2h,m),7.44-7.37(4h,m),7.67(2h,d,j＝7.4hz),7.70(1h,brs),7.89(3h,d,j＝7.5hz),8.03-8.00(2h,m),10.15(1h,s)。

中间体10

n-[[3-氯-2-(2-甲酰基苯基)硫烷基-5-(三氟甲基)苯基]甲基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯

将3-氯-2-氟-5-三氟甲基-苯甲醛(2.5g,11.06mmol)和k2co3(3.0g,22.12mmol)在dmf(15ml)中的混悬液加入2-巯基-苯甲酸甲基酯(1.8g,11.06mmol)，反应混合物于室温搅拌2小时。通过tlc监测反应进程。完成后，反应混合物用水(100ml)稀释，用乙酸乙酯萃取(3x250ml)。合并的有机层经硫酸钠干燥，在减压下浓缩，得到粗制化合物。由此获得的粗制化合物经硅胶柱色谱法(100-200目)采用20％乙酸乙酯和己烷作为洗脱剂纯化，得到2-[2-氯-6-甲酰基-4-(三氟甲基)苯基]硫烷基苯甲酸甲基酯(3.5g,85％)，为棕色固体。

向2-[2-氯-6-甲酰基-4-(三氟甲基)苯基]硫烷基苯甲酸甲基酯(3.5g,9.36mmol)和叔丁基亚磺酰胺(1.6g,14.03mmol)在thf(50ml)中的混悬液中加入四乙醇钛(3.2g,14.03mmol)，反应混合物加热至60℃达3小时。通过tlc监测反应进程。完成后，反应混合物用水(100ml)稀释，用乙酸乙酯萃取(3x100ml)。合并的有机层经硫酸钠干燥，在减压下浓缩，得到粗制化合物。由此获得的粗制化合物经硅胶(100-200目)柱色谱法(30％乙酸乙酯和己烷)纯化，得到2-[2-[(e)-叔丁基亚磺酰基亚氨基甲基]-6-氯-4-(三氟甲基)苯基]硫烷基苯甲酸甲基酯(4g,89％)，为棕色固体。lc-ms:477.9(m+h)。

向lah(0.955g,25.15mmol)在thf(25ml)中的冰冷混悬液中加入2-[2-[(e)-叔丁基亚磺酰基亚氨基甲基]-6-氯-4-(三氟甲基)苯基]硫烷基苯甲酸酯(4g,8.38mmol)在thf(25ml)中的溶液，反应混合物搅拌1小时。通过tlc监测反应进程。完成后，反应混合物用硫酸钠水溶液(100ml)稀释，用乙酸乙酯萃取(3x250ml)。合并的有机层经硫酸钠干燥，在减压下浓缩，得到粗制化合物，将其用己烷、继之以戊烷洗涤进行纯化，得到n-[[3-氯-2-[2-(羟基甲基)苯基]硫烷基-5-(三氟甲基)苯基]甲基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(3.9g,95％)，为棕色固体。lc-ms:452.1(m+h)。

向n-[[3-氯-2-[2-(羟基甲基)苯基]硫烷基-5-(三氟甲基)苯基]甲基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(3.9g,8.64mmol)在dcm(100ml)中的溶液中加入dess-martin过碘烷(9.17g,21.62mmol)，反应混合物在室温搅拌3小时。通过tlc监测反应进程。完成后，反应混合物用nahco3溶液(100ml)稀释，用dcm萃取(3x100ml)。合并的有机层经硫酸钠干燥，在减压下浓缩，得到粗制化合物。由此获得的粗制化合物经硅胶(100-200目)柱色谱法(乙酸乙酯)纯化，得到n-[[3-氯-2-(2-甲酰基苯基)硫烷基-5-(三氟甲基)苯基]甲基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(2g,51％)，为白色固体。lc-ms:449.7(m+h)。

向n-[[3-氯-2-(2-甲酰基苯基)硫烷基-5-(三氟甲基)苯基]甲基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(2g,4.45mmol)在1,4-二噁烷(50ml)中的冰冷溶液中加入hcl在二噁烷中的4m溶液(4ml)，所得反应混合物于环境温度搅拌2小时。挥发物在减压下蒸发，得到2-[2-(氨基甲基)-6-氯-4-(三氟甲基)苯基]硫烷基苯甲醛(1.5g,98％)，为灰白色固体。lc-ms:346.1(m+h)。

向2-[2-(氨基甲基)-6-氯-4-(三氟甲基)苯基]硫烷基苯甲醛(2g,5.24mmol)在5％nahco3水溶液(12ml)中的溶液中加入在ch3cn(50ml)中的fmoc-osu(1.42g,4.19mmol)，反应混合物于环境温度搅拌3小时。通过tlc监测反应进程。完成后，反应混合物用乙酸乙酯稀释，用水、继之以盐水洗涤。合并的有机层经硫酸钠干燥，在减压下蒸发，得到粗制化合物，将其经纯化快速色谱法，得到n-[[3-氯-2-(2-甲酰基苯基)硫烷基-5-(三氟甲基)苯基]甲基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯(0.700g,34％)，为灰白色固体。lc-ms:568.1(m+h)。

¹h-nmr:(400mhz,cdcl3):δ4.15(1h,t,j＝6.9hz),4.37(2h,d,j＝6.9hz),4.55(2h,d,j＝6.4hz),5.29-5.26(1h,br),6.52(1h,d,j＝7.0hz),7.29-7.27(2h,m),7.34-7.30(2h,m),7.41-7.36(2h,m),7.51(2h,d,j＝7.4hz),7.76-7.73(4h,m),7.87-7.85(1h,m),10.25(1h,s)。

中间体11

n-[[3,5-二氯-2-(4-氟-2-甲酰基-苯基)硫烷基-苯基]甲基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯

于0℃向5-氟-2-巯基-苯甲酸(1g,5.808mmol)在thf(20ml)中的搅拌溶液中加入2,2,2-三氯-乙亚胺酸叔丁基酯(3.6ml,20.328mmol)、继之以缓慢加入bf3.oet2(0.615ml,5.808mmol)，于25℃搅拌2小时。反应完成后，反应混合物用水淬灭，用乙酸乙酯萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，在减压下浓缩，得到粗制品，将其经正相二氧化硅柱采用乙酸乙酯在己烷中的2％溶液纯化，得到5-氟-2-硫烷基-苯甲酸叔丁基酯(620mg,47％)，为无色液体。

向5-氟-2-硫烷基-苯甲酸叔丁基酯(600mg,2.628mmol)在dmf(10ml)中的搅拌溶液中加入2,3,5-三氯-苯甲醛(660mg,3.154mmol)、cs2co3(2.13g,6.571mmol)，反应混合物于60℃加热3小时。反应完成后，反应混合物用水淬灭，用乙酸乙酯萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，在减压下浓缩，得到粗制品，将其经正相二氧化硅柱采用乙酸乙酯在己烷中的2％溶液纯化，得到2-(2,4-二氯-6-甲酰基-苯基)硫烷基-5-氟-苯甲酸叔丁基酯(660mg,62％)，为无色液体。

向2-(2,4-二氯-6-甲酰基-苯基)硫烷基-5-氟-苯甲酸酯(900mg,2.243mmol)在thf(20ml)中的搅拌溶液中加入2-甲基2-丙烷磺酰胺(271mg,2.243mmol)和ti(oet)4(2.3ml,11.214mmol)，加热至70℃达16小时。反应混合物用盐水溶液淬灭，用乙酸乙酯萃取。分离的有机层经无水硫酸钠干燥，在真空下浓缩，得到2-[2-[(e)-叔丁基亚磺酰基亚氨基甲基]-4,6-二氯-苯基]硫烷基-5-氟-苯甲酸叔丁基酯(1g,粗制品)，为黄色液体。ms实测:504.1(m+h)。

向2-[2-[(e)-叔丁基亚磺酰基亚氨基甲基]-4,6-二氯-苯基]硫烷基-5-氟-苯甲酸叔丁基酯(1g,1.982mmol)在thf(20ml)中的搅拌溶液中加入libh4(215mg,9.911mmol)，反应物加热至50℃达4小时。反应物用饱和氯化铵淬灭，用乙酸乙酯萃取。分离的有机层用盐水溶液洗涤，经无水硫酸钠干燥，在减压下蒸发，得到n-[[3,5-二氯-2-[4-氟-2-(羟基甲基)苯基]硫烷基-苯基]甲基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(1.2g,粗制品)，为灰白色固体。ms实测:435.7(m+h)。

于0℃向n-[[3,5-二氯-2-[4-氟-2-(羟基甲基)苯基]硫烷基-苯基]甲基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(1.2g,2.75mmol)在meoh(20ml)中的搅拌溶液中加入4mhcl/二噁烷(10ml)，反应混合物于25℃搅拌1小时。反应完成后，反应混合物在减压下浓缩，得到[2-[2-(氨基甲基)-4,6-二氯-苯基]硫烷基-5-氟-苯基]甲醇(1g,粗制品)，为灰白色固体。ms实测:332(m+h)。

于25℃向[2-[2-(氨基甲基)-4,6-二氯-苯基]硫烷基-5-氟-苯基]甲醇(1g,2.712mmol)在5％nahco3(20ml)中的搅拌混悬液中加入在ch3cn(20ml)中的fmocosu(914mg,2.712mmol)，反应物于25℃搅拌2小时。然后反应物用水稀释，用乙酸乙酯萃取。分离的有机层用盐水溶液洗涤，经硫酸钠干燥，在减压下蒸发。如此获得的粗制品经正相二氧化硅柱采用乙酸乙酯在己烷中的5-30％溶液纯化，得到n-[[3,5-二氯-2-[4-氟-2-(羟基甲基)苯基]硫烷基-苯基]甲基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯(800mg,64％,4步)，为灰白色固体。ms实测:554(m+h)。

向n-[[3,5-二氯-2-[4-氟-2-(羟基甲基)苯基]硫烷基-苯基]甲基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯(800mg,1.661mmol)在dcm/thf(1:1,20ml)中的搅拌溶液中加入mno2(2.88g,33.221mmol)，反应混合物于25℃搅拌2小时。反应混合物经硅藻土垫过滤；滤液在减压下蒸发。如此获得的粗制品经正相二氧化硅柱采用乙酸乙酯在己烷中的5-20％溶液纯化，得到n-[[3,5-二氯-2-(4-氟-2-甲酰基-苯基)硫烷基-苯基]甲基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯(700mg,76％)，为灰白色固体。ms实测:552.3(m+h)。

¹h-nmr:(400mhz,dmso-d6):δ4.17-4.12(3h,m),4.35(2h,d,j＝5.1hz),7.45-7.28(6h,m),7.67-7.60(4h,m),7.88(2h,d,j＝7.5hz),8.35(1h,dd,j＝7.6,1.8hz),8.41(1h,dd,j＝4.8,1.8hz),10.19(1h,s)。

中间体12

n-[[3-氯-2-[(3-甲酰基-2-吡啶基)硫烷基]-6-(三氟甲基)苯基]甲基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯

向nah(1.13g,27.80mmol)在dmf(10ml)中的冰冷溶液中加入在dmf(10ml)中的2-硫代烟酸(2.15g,13.90mmol)，反应混合物搅拌15分钟。向所得反应混合物中加入3-氯-2-氟-6-甲基-苯甲醛(2.1g,9.26mmol)在dmf(10ml)中的溶液，反应混合物于室温搅拌9小时。然后反应混合物冷却至0℃，加入k2co3(3.84g,27.80mmol)、继之以甲基碘(3.10ml,27.80mmol)。所得反应混合物于室温搅拌16小时。然后反应混合物通过饱和nh4cl溶液(20ml)淬灭，用乙酸乙酯萃取(60ml)。分离出有机层，用水(2x30ml)、继之以盐水(2x30ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥。有机层在减压下浓缩，粗制化合物经快速色谱法纯化，得到2-[6-氯-2-甲酰基-3-(三氟甲基)苯基]硫烷基吡啶-3-甲酸甲基酯(1.3g,37％)，为灰白色固体。lc-ms:375.7(m+h)。

向2-[6-氯-2-甲酰基-3-(三氟甲基)苯基]硫烷基吡啶-3-甲酸甲基酯(1.4g,3.72mmol)在thf(30ml)中的脱气溶液中加入乙醇钛(iv)(8.49g,37.25mmol)、继之以叔丁基亚磺酰胺(4.50g,37.25mmol)，所得反应混合物加热至60℃达2小时。然后反应混合物用水(30ml)稀释，用etoac萃取(70ml)。有机层经无水硫酸钠干燥，在减压下浓缩，得到2-[2-[(e)-叔丁基亚磺酰基亚氨基甲基]-6-氯-3-(三氟甲基)苯基]硫烷基吡啶-3-甲酸甲基酯(1.25g,70％)，为灰白色固体。其为乙基和甲基酯的混合物。ms实测:478.7(m+h)。

向lah(0.297g,7.83mmol)在thf(10ml)中的冰冷溶液中加入在thf(15ml)中的2-[2-[(e)-叔丁基亚磺酰基亚氨基甲基]-6-氯-3-(三氟甲基)苯基]硫烷基吡啶-3-甲酸甲基酯(1.25g,2.61mmol)，反应混合物在相同温度搅拌0.5小时。然后反应混合物通过饱和硫酸钠溶液(2ml)和etoac(80ml)淬灭。反应混合物经硅藻土过滤，滤液在减压下浓缩，得到n-[[3-氯-2-[[3-(羟基甲基)-2-吡啶基]硫烷基]-6-(三氟甲基)苯基]甲基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(1.1g,93％)，为灰白色固体。ms实测:452.8(m+h)。

向n-[[3-氯-2-[[3-(羟基甲基)-2-吡啶基]硫烷基]-6-(三氟甲基)苯基]甲基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(1.1g,2.42mmol)在dcm(30ml)中的冰冷溶液中加入dess-martin过碘烷(2.06g,4.85mmol)，使反应混合物于环境温度搅拌1小时。通过tlc监测反应进程。完成后，反应混合物倒入饱和碳酸氢钠溶液中，用dcm萃取(3x50ml)。合并的有机层用硫代硫酸钠洗涤，经硫酸钠干燥，在减压下浓缩，得到n-[[3-氯-2-[(3-甲酰基-2-吡啶基)硫烷基]-6-(三氟甲基)苯基]甲基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(1.0g,91％)，为灰白色固体。ms实测:450.8(m+h)。

向n-[[3-氯-2-[(3-甲酰基-2-吡啶基)硫烷基]-6-(三氟甲基)苯基]甲基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(1.2g,2.66mmol)在二噁烷(20ml)中的冰冷溶液中加入hcl在二噁烷中的4m溶液(15ml)，使反应混合物于环境温度搅拌1小时。tlc显示起始物质被消耗。挥发物在减压下蒸发，得到2-[2-(氨基甲基)-6-氯-3-(三氟甲基)苯基]硫烷基吡啶-3-甲醛(0.91g,99％)，为灰白色固体。

向2-[2-(氨基甲基)-6-氯-3-(三氟甲基)苯基]硫烷基吡啶-3-甲醛(0.91g,2.62mmol)在乙腈(15ml)中的冰冷混悬液中加入5％nahco3水溶液(12ml)和在ch3cn(15ml)中的fmoc-osu(0.708g,2.09mmol)，反应混合物于环境温度搅拌4小时。然后将其用乙酸乙酯(80ml)和水(30ml)稀释。分离出有机层，用水、盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥。有机层在减压下浓缩，得到粗制化合物，将其经纯化快速色谱法，得到n-[[3-氯-2-[(3-甲酰基-2-吡啶基)硫烷基]-6-(三氟甲基)苯基]甲基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯(0.590g,40％)，为灰白色固体。lc-ms:569.0(m+h)。

¹h-nmr:(400mhz,cdcl3):δ4.21-4.16(3h,m),4.43(2h,brs),7.33-7.29(2h,m),7.43-7.36(3h,m),7.56(1h,brs),7.66(2h,m),7.94-7.84(4h,m),8.38(1h,d,j＝7.4hz),8.43(1h,d,j＝3.8hz),10.19(1h,s)。

中间体13

n-[[3,5-二氯-2-(2-甲酰基苯基)硫烷基-苯基]甲基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯

在氩气气氛下向3,5-二氯-2-氟-苯甲醛(2.78g,16.57mmol)在dmf(20ml,用氩气净化10分钟)中的冰冷溶液中缓慢加入2-巯基-苯甲酸甲基酯(4.0g,20.72mmol)和碳酸钾(8.59g,62.17mmol)，反应混合物于0℃搅拌30分钟。然后反应混合物用水(100ml)稀释，水相用乙酸乙酯(50mlx3)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，在减压下浓缩，得到粗制化合物。由此获得的粗制化合物经快速色谱法纯化(乙酸乙酯在己烷中的5％溶液)，得到2-(2,4-二氯-6-甲酰基-苯基)硫烷基苯甲酸甲基酯(1.6g,23％)，为灰白色固体。lc-ms:339.8(m+h)。

在氩气气氛下向2-(2,4-二氯-6-甲酰基-苯基)硫烷基苯甲酸甲基酯(1.6g,4.69mmol)在干燥thf(50ml)中的搅拌溶液中加入乙醇钛(iv)(2.14g,9.38mmol)、继之以叔丁基亚磺酰胺(1.137g,9.38mmol)。所得反应混合物于室温搅拌1小时，加热至60℃达4小时。然后反应混合物冷却至室温，倒入水(100ml)中，经硅藻土床过滤。硅藻土床用乙酸乙酯洗涤。分离出有机层，水层用乙酸乙酯(50mlx3)萃取。合并的有机层经硫酸钠干燥，在减压下浓缩，得到粗制化合物。由此获得的粗制化合物经combiflash纯化(乙酸乙酯在己烷中的25％溶液)，得到2-[2-[(e)-叔丁基亚磺酰基亚氨基甲基]-4,6-二氯-苯基]硫烷基苯甲酸甲基酯(2.0g,95％)，为粘稠油。lc-ms:443.9(m+h).

在氩气气氛下向2-[2-[(e)-叔丁基亚磺酰基亚氨基甲基]-4,6-二氯-苯基]硫烷基苯甲酸甲基酯(2.0g,4.5mmol)在thf(50ml)中的冰冷溶液中分批加入lah(0.512g,13.50mmol)，反应混合物于0℃搅拌1小时。通过tlc监测反应进程。完成后，反应混合物用乙酸乙酯和饱和硫酸钠溶液淬灭。然后反应混合物经硅藻土过滤，用etoac洗涤。将滤液浓缩，得到n-[[3,5-二氯-2-[2-(羟基甲基)苯基]硫烷基-苯基]甲基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(1.8g,95％)，为灰白色固体。lc-ms:417.7(m+h)。

向n-[[3,5-二氯-2-[2-(羟基甲基)苯基]硫烷基-苯基]甲基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(1.8g,4.30mmol)在dcm(50ml)中的冰冷溶液中分批加入dess-martin过碘烷(2.24g,6.45mmol)，反应混合物在氩气气氛下于室温搅拌2小时。通过tlc监测反应进程。完成后，反应混合物用dcm(50ml)和饱和碳酸氢钠溶液(50ml)稀释。分离出有机层，水层用dcm(50mlx2)萃取。合并的有机层用硫代硫酸钠溶液、然后用盐水洗涤。在减压下除去挥发物，得到n-[[3,5-二氯-2-(2-甲酰基苯基)硫烷基-苯基]甲基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(2.0g,粗制品)，为粘稠油，将其未经进一步纯化原样用于下一步骤。lc-ms:416.0(m+h)。

向n-[[3,5-二氯-2-(2-甲酰基苯基)硫烷基-苯基]甲基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(2.0g,粗制品)在二噁烷(20ml)中的冰冷溶液中加入hcl在二噁烷中的4m溶液(30ml)，反应混合物于室温搅拌2小时的时间。通过lcms监测反应进程。在减压下除去挥发物，得到粗制化合物，将其用二乙醚洗涤(30mlx2)和充分干燥，得到2-[2-(氨基甲基)-4,6-二氯-苯基]硫烷基苯甲醛(1.2g,粗制品)，为黄色固体。lc-ms:312.1(m+h)

向2-[2-(氨基甲基)-4,6-二氯-苯基]硫烷基苯甲醛(1.2g,粗制品)在5％碳酸氢钠溶液和乙腈(30ml,1:1)中的搅拌混悬液中加入fmoc-osu(1.047g,3.10mmol)在乙腈(15ml)中的溶液，反应混合物于室温搅拌3小时。通过tlc监测反应进程。完成后，在减压下除去挥发物，粗制反应混合物用水(50ml)稀释。水相用乙酸乙酯(50mlx3)萃取。合并的有机层用盐水洗涤(50mlx1)，经无水硫酸钠干燥，在减压下蒸发，得到粗制化合物。由此获得的粗制化合物经快速色谱法纯化(乙酸乙酯在己烷中的20％溶液)，得到预期化合物，将其进一步用正戊烷(5ml)洗涤和干燥，得到n-[[3,5-二氯-2-(2-甲酰基苯基)硫烷基-苯基]甲基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯(0.75g,历经3步为33％)，为白色固体。lc-ms:533.7(m+h)。

¹h-nmr:(400mhz,dmso-d6):δ4.22-4.19(2h,m),4.31-4.29(3h,m),6.51(1h,d,j＝7.9hz),7.37-7.31(3h,m),7.47-7.38(4h,m),7.68(2h,d,j＝7.4hz),7.85(1h,d,j＝2.0hz),7.89(2h,d,j＝7.5hz),7.94(1h,t,j＝5.9hz),8.01(1h,d,j＝7.4hz),10.18(1h,s)。

中间体14

n-[[5-氯-2-(2-甲酰基苯基)硫烷基-3-甲基-苯基]甲基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯

在冰冷条件下向5-氯-2-氟-3-甲基苯甲酸(2.0g,10.605mmol)在thf(20ml)中的搅拌溶液中滴加lialh4(21.0ml,21.0mmol)，于25℃搅拌30分钟。然后将其用饱和na2so4溶液淬灭，用乙酸乙酯萃取，用盐水洗涤，经na2so4干燥，在真空下浓缩，得到(5-氯-2-氟-3-甲基-苯基)甲醇(1.8g,粗制品)，为浅黄色液体。向(5-氯-2-氟-3-甲基-苯基)甲醇(1.8g,10.345mmol)在dcm/thf(1:1,40ml)中的搅拌溶液中加入mno2(8.993g,103.448mmol)，反应物于25℃搅拌2小时。反应物经硅藻土垫过滤，滤液在减压下蒸发。如此获得的粗制品经正相二氧化硅柱采用乙酸乙酯在己烷中的2％溶液纯化，得到5-氯-2-氟-3-甲基-苯甲醛(1.2g,64.86％,2步)，为黄色液体。

向5-氯-2-氟-3-甲基-苯甲醛(1.0g,5.814mmol)在dmf(15.0ml)中的溶液中加入cs2co3(4.727g,14.535mmol)和2-硫烷基苯甲酸甲基酯(0.978g,5.814mmol)，于60℃搅拌2.5小时。反应混合物用水稀释，用etoac萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，在真空下浓缩，得到化合物，将其经正相二氧化硅柱采用乙酸乙酯在己烷中的0-2％溶液纯化为2-(4-氯-2-甲酰基-6-甲基-苯基)硫烷基苯甲酸甲基酯(1.5g,80.43％)，为黄色固体。ms实测:321.2(m+h)。

向2-(4-氯-2-甲酰基-6-甲基-苯基)硫烷基苯甲酸甲基酯(1.5g,4.688mmol)在thf(25ml)中的搅拌溶液中加入2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(568mg,4.688mmol)、ti(oet)4(4.914ml,23.438mmol)，反应物加热至70℃达16小时。反应物用饱和氯化钠溶液淬灭，所得固体经硅藻土垫过滤，用乙酸乙酯洗涤。分离的有机层经无水硫酸钠干燥，在减压下蒸发，得到2-[2-[(z)-叔丁基亚磺酰基亚氨基甲基]-4-氯-6-甲基-苯基]硫烷基苯甲酸乙基酯(2.0g,粗制品)，将其未经进一步纯化直接用于下一步骤。ms实测:438.2(m+h)。

于0℃向2-[2-[(z)-叔丁基亚磺酰基亚氨基甲基]-4-氯-6-甲基-苯基]硫烷基苯甲酸乙基酯(2.0g,4.577mmol)在thf(25ml)中的搅拌溶液中加入libh4(0.997g,45.767mmol)，反应物加热至50℃达4小时。溶剂蒸发，反应物用nh4cl淬灭，用乙酸乙酯萃取。分离的有机层用盐水溶液洗涤，经硫酸钠干燥，在减压下蒸发，得到n-[[5-氯-2-[2-(羟基甲基)苯基]硫烷基-3-甲基-苯基]甲基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(1.8g粗制品)，将其未经进一步纯化直接用于下一步骤。ms实测:398.1(m+h)。

于0℃向n-[[5-氯-2-[2-(羟基甲基)苯基]硫烷基-3-甲基-苯基]甲基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(1.8g,4.534mmol)在meoh(40ml)中的搅拌溶液中加入hcl在二噁烷中的4m溶液(20ml)，反应混合物于25℃搅拌1小时。反应完成后，反应混合物在减压下浓缩，得到[2-[2-(氨基甲基)-4-氯-6-甲基-苯基]硫烷基苯基]甲醇(1.6g,粗制品)，将其未经进一步纯化直接用于下一步骤。ms实测:293.8(m+h)。

于25℃向[2-[2-(氨基甲基)-4-氯-6-甲基-苯基]硫烷基苯基]甲醇(1.6g,5.461mmol)在5％nahco3(20ml)中的搅拌混悬液中加入在ch3cn(20ml)中的fmocosu(1.841g,5.461mmol)，反应混合物于25℃搅拌2小时。然后反应物用水稀释，用乙酸乙酯萃取。分离的有机层用盐水溶液洗涤，经无水硫酸钠干燥，在减压下蒸发。如此获得的粗制品经正相二氧化硅柱采用乙酸乙酯在己烷中的5-30％溶液纯化为n-[[5-氯-2-[2-(羟基甲基)苯基]硫烷基-3-甲基-苯基]甲基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯(1.4g,72％,4步)，为灰白色固体。ms实测:516.2(m+h)。

向n-[[5-氯-2-[2-(羟基甲基)苯基]硫烷基-3-甲基-苯基]甲基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯(1.6g,3.107mmol)在dcm/thf(1:1,50ml)中的搅拌溶液中加入mno2(5.401g,62.136mmol)，反应混合物于25℃搅拌2小时。反应物经硅藻土垫过滤，滤液在减压下蒸发。如此获得的粗制品经正相二氧化硅柱采用乙酸乙酯在己烷中的5-20％溶液纯化为n-[[5-氯-2-(2-甲酰基苯基)硫烷基-3-甲基-苯基]甲基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯(1.1g,68％)，为灰白色固体。ms实测:514.4(m+h)。

¹h-nmr:(400mhz,dmso-d6)δ2.32(3h；s)；4.19-4.29(5h；m)；6.47(1h；d；j＝7.8hz)；6.29-6.37(4h；m)；7.37-7.44(3h；m)；7.51(1h；brs)；7.69(2h；d；j＝7.36hz)；7.87(1h；m)；7.96(2h；d；j＝7.4hz)；7.99(1h；d；j＝7.6hz)；10.20(1h；s)

中间体15

n-[[3,5-二氯-2-[(3-甲酰基-2-吡啶基)硫烷基]苯基]甲基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯

向2-巯基-烟酸(2.44g,15.755mmol)在dmf(30ml)中的搅拌溶液中加入kotbu(3.2g,28.645mmol)，反应混合物于25℃搅拌30分钟。然后向反应物中加入2,3,5-三氯-苯甲醛(3g,14.323mmol)，将其加热至80℃达4小时。然后加入k2co3(5.93g,42.968mmol)，继之以添加mei(2.67ml,42.968mmmol)，反应物于25℃搅拌16小时。反应混合物用水淬灭，用乙酸乙酯萃取。分离的有机层用盐水溶液洗涤，经无水硫酸钠干燥，在减压下蒸发。如此获得的粗制品经正相二氧化硅柱采用乙酸乙酯在己烷中的5-15％溶液纯化，得到2-(2,4-二氯-6-甲酰基-苯基)硫烷基吡啶-3-甲酸甲基酯(2.3g,46％)，为黄色固体。ms实测:341.8(m+h)。

向2-(2,4-二氯-6-甲酰基-苯基)硫烷基吡啶-3-甲酸甲基酯(2.3g,6.721mmol)在thf(20ml)中的搅拌溶液中加入2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(815mg,6.721mmol)和ti(oet)4(7.09ml,33.606mmol)，反应物加热至70℃达1小时。反应混合物用盐水溶液淬灭，用乙酸乙酯萃取。分离的有机层经无水硫酸钠干燥，在减压下浓缩，得到2-[2-[(z)-叔丁基亚磺酰基亚氨基甲基]-4,6-二氯-苯基]硫烷基吡啶-3-甲酸乙基酯(2.6g,粗制品)，将其未经进一步纯化直接用于下一步骤。ms实测:458.7(m+h)。

于0℃向2-[2-[(z)-叔丁基亚磺酰基亚氨基甲基]-4,6-二氯-苯基]硫烷基吡啶-3-甲酸甲基酯(2.6g,5.659mmol)在thf(25ml)中的搅拌溶液中加入lah(1m,在thf中,11.31ml,11.31mmol)，反应物于25℃搅拌2小时。反应混合物用饱和硫酸钠溶液淬灭，用乙酸乙酯萃取。分离的有机层用水、盐水溶液洗涤，经无水硫酸钠干燥，在减压下蒸发。如此获得的粗制品经正相二氧化硅柱采用乙酸乙酯在己烷中的10-60％溶液纯化，得到n-[[3,5-二氯-2-[[3-(羟基甲基)-2-吡啶基]硫烷基]苯基]甲基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(1.5g,53％,2步)，为灰白色固体。ms实测:418.8(m+h)。

于0℃向n-[[3,5-二氯-2-[[3-(羟基甲基)-2-吡啶基]硫烷基]苯基]甲基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(1.9g,11.429mmol)在meoh(20ml)中的搅拌溶液中加入hcl在二噁烷中的4m溶液(12ml)，反应混合物于25℃搅拌。反应完成后，混合物在减压下浓缩，得到[2-[2-(氨基甲基)-4,6-二氯-苯基]硫烷基-3-吡啶基]甲醇(1.9g,粗制品)，为灰白色固体，将其直接用于下一步骤。ms实测:315.1(m+h)。

于25℃向[2-[2-(氨基甲基)-4,6-二氯-苯基]硫烷基-3-吡啶基]甲醇(1.9g,6.051mmol)在5％nahco3(25ml)中的搅拌混悬液中加入在ch3cn(25ml)中的fmocosu(2.04g,6.051mmol)，反应物于25℃搅拌3小时。然后反应物用水稀释，用乙酸乙酯萃取。分离的有机层用盐水溶液洗涤，经硫酸钠干燥，在减压下蒸发，得到n-[[3,5-二氯-2-[[3-(羟基甲基)-2-吡啶基]硫烷基]苯基]甲基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯(2.5g,粗制品)，将其直接用于下一步骤。ms实测:537.0(m+h)。

向n-[[3,5-二氯-2-[[3-(羟基甲基)-2-吡啶基]硫烷基]苯基]甲基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯(2.5g,4.664mmol)在dcm/thf(1:1,70ml)中的搅拌溶液中加入mno2(4.055g,46.642mmol)，反应物于25℃搅拌3小时。反应物经硅藻土垫过滤，滤液在减压下蒸发，得到粗制品，将其经二氧化硅色谱法采用乙酸乙酯在己烷中的5-40％溶液纯化，得到n-[[3,5-二氯-2-[(3-甲酰基-2-吡啶基)硫烷基]苯基]甲基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯，为灰白色固体(1.7g,69％，3步骤)。

¹h-nmr:(400mhz,dmso-d6)δ4.21-4.30(5h；m)；7.25-7.43(6h；m)；7.67(2h；d；j＝7.26hz)；7.79(1h；s)；7.90(2h；brd；j＝7.16hz)；8.36(1；brd；j＝7.36hz)；8.40(1h；brs)；10.18(1h；s)

中间体16

n-[[5-乙基-2-(2-甲酰基苯基)硫烷基-苯基]甲基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯

向2-氟-5-碘-苯甲醛(2.0g,8mmol)在二噁烷:水(30ml)中的溶液中依次加入乙烯基硼酸频哪醇酯(1.6ml,9.6mmol)和cs2co3(3.9g,12mmol)。然后反应混合物用氩气脱气，加入pd(pph3)4(0.184g,0.16mmol)。所得反应混合物加热至70℃达2小时。通过tlc监测反应进程。完成后，反应混合物用etoac(3x50ml)萃取。合并的有机层用水、继之以盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥。在减压下蒸发溶剂，得到粗制化合物，将其经快速色谱法进一步纯化(己烷)，得到2-氟-5-乙烯基-苯甲醛(0.83g,69％)，为无色油。

向2-氟-5-乙烯基-苯甲醛(0.83g,5.5mmol)在干燥dmf(4ml)中的脱气溶液中加入k2co3(1.2g,13.8mmol)和硫代水杨酸甲基酯(0.91ml,0.66mmol)。然后反应混合物搅拌1小时。通过tlc监测反应进程。完成后，反应混合物用水(30ml)稀释，用etoac萃取(3x20ml)。合并的有机层用水、继之以盐水洗涤，经na2so4干燥。在减压下蒸发溶剂，得到粗制化合物，将其经combiflash纯化(乙酸乙酯在己烷中的20％溶液)，得到2-(2-甲酰基-4-乙烯基-苯基)硫烷基苯甲酸甲基酯(1.4g,85％)，为黄色油。ms实测:299.2(m+h)。

向2-(2-甲酰基-4-乙烯基-苯基)硫烷基苯甲酸甲基酯(1.4g,4.6mmol)在乙酸乙酯(25ml)中的脱气溶液中加入pto2(0.05g)，反应混合物在氢气氛下搅拌3小时。通过tlc监测反应进程。完成后，反应混合物经硅藻土过滤，滤液在减压下浓缩，得到2-(4-乙基-2-甲酰基-苯基)硫烷基苯甲酸甲基酯(1.4g,99％)，为白色固体。ms实测:301.0(m+h)。

向2-(4-乙基-2-甲酰基-苯基)硫烷基苯甲酸甲基酯(1.4g,4.6mmol)在thf(30ml)中的溶液中加入2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(1.4g,11.66mmol)、继之以乙醇钛(2.4ml,11.66mmol)，反应混合物于55℃加热2小时。通过tlc监测反应进程。完成后，反应混合物用水(30ml)稀释，经硅藻土过滤。分离出有机层，经硫酸钠干燥，在减压下浓缩，得到2-[2-[(z)-叔丁基亚磺酰基亚氨基甲基]-4-乙基-苯基]硫烷基苯甲酸甲基酯(1.6g,85％)，为无色油。ms实测:404.3(m+h)。

向lah(0.471g,12.40mmol)在干燥thf(10ml)中的冰冷溶液中加入2-[2-[(z)-叔丁基亚磺酰基亚氨基甲基]-4-乙基-苯基]硫烷基苯甲酸甲基酯(2.5g,6.20mmol)在thf(20ml)中的溶液，所得反应混合物搅拌0.5小时。通过tlc监测反应进程。完成后，反应物用饱和硫酸钠溶液(5ml)和乙酸乙酯淬灭。然后反应混合物经硅藻土过滤，用乙酸乙酯(50ml)洗涤。滤液在减压下浓缩，得到n-[[5-乙基-2-[2-(羟基甲基)苯基]硫烷基-苯基]甲基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(2.0g,93％)，将其原样用于下一步骤。ms实测:378.1(m+h)。

向n-[[5-乙基-2-[2-(羟基甲基)苯基]硫烷基-苯基]甲基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(1.2g,4.23mmol)在乙腈(20ml)中的冰冷溶液中加入5％碳酸氢钠溶液(12ml)、继之以fmoc-osu(1.4g,4.29mmol)在乙腈(10ml)中的溶液，反应混合物于环境温度搅拌4小时。通过tlc监测反应进程。完成后，反应混合物用水(50ml)和乙酸乙酯(80ml)稀释。分离有机层，在减压下从其中除去挥发物，得到粗制化合物，然后将其经快速色谱法(乙酸乙酯在己烷中的20％溶液)纯化为n-[[5-乙基-2-(2-甲酰基苯基)硫烷基-苯基]甲基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯(0.670g,35％)，为白色固体。lc-ms:494.0(m+h)。

¹h-nmr:(400mhz,dmso-d6):δ1.20(3h,t,j＝7.6hz),2.65(2h,q,j＝7.6hz),4.30-4.23(5h,m),6.66(1h,d,j＝8.0hz),7.36-7.23(5h,m),7.48-7.38(4h,m),7.70(2h,d,j＝7.4hz),7.83(1h,t,j＝5.9hz),7.89(2h,d,j＝7.5hz),7.95(1h,d,j＝7.6hz),10.21(1h,s)。

中间体17

n-[[2-(2-甲酰基苯基)硫烷基-5-苯基-苯基]甲基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯

将4-氟-联苯(2g,11.61mmol)和pmdta(3ml)在thf(50ml)中的溶液冷却至-78℃，滴加1.6mnbuli(10.88ml,17.42mmol)。所得反应混合物于-60℃搅拌40分钟。反应混合物再次冷却至-78℃，加入dmf(2.12ml,29.03mmol)。然后反应混合物于-78℃搅拌30分钟，然后使混合物温热至室温。反应混合物用nh4cl水溶液淬灭，将整个混合物用二乙醚(30ml)萃取。合并的有机层用盐水(30ml)洗涤，在减压下浓缩，得到粗制化合物，将其经快速色谱法纯化(乙酸乙酯在己烷中的10％溶液)，得到2-氟-5-苯基-苯甲醛(1.8g,77％)，为粘稠油。

向2-氟-5-苯基-苯甲醛(2.5g,10mmol)在二噁烷-水(1:1)(30ml)中的溶液中依次加入硼酸苯基酯(1.45g,12mmol)和cs2co3(4.87g,15mmol)。然后将溶液用氩气脱气30分钟。向该溶液中加入pd(pph3)4(0.23g,0.2mmol)，加热至70℃达2小时。然后反应混合物过滤,将滤液浓缩，用水(50ml)稀释。水层用乙酸乙酯(100mlx2)萃取。合并的有机层用盐水(50ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥。有机层浓缩，得到粗制化合物，将其经快速色谱法纯化(乙酸乙酯在己烷中的10％溶液)，得到2-氟-5-苯基-苯甲醛(1.7g,85％)，为粘稠油。

向2-氟-5-苯基-苯甲醛(1.7g,8.5mmol)和硫代水杨酸甲基酯(1.43g,8.5mmol)在dmf(20ml)中的溶液中加入k2co3(2.35g,17mmol)，反应混合物加热至60℃达16小时。然后反应混合物用水稀释，用乙酸乙酯萃取(100mlx2)。合并的有机层用盐水洗涤(40mlx2)，经硫酸钠干燥和浓缩，得到粗制化合物，将其经combiflash(乙酸乙酯在己烷中的30％溶液)进一步纯化，得到2-(2-甲酰基-4-苯基-苯基)硫烷基苯甲酸甲基酯(1.8g,60％)，为灰白色固体。lcms:349.1(m+h)。

向2-(2-甲酰基-4-苯基-苯基)硫烷基苯甲酸甲基酯(1.7g,4.88mmol)在无水thf(50ml)中的搅拌溶液中依次加入2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(1.18g,9.77mmol)和四乙醇钛(2.23g,9.77mmol)，所得反应混合物于60℃加热5小时。然后反应混合物倒入冰水中，经硅藻土短柱过滤。滤液用乙酸乙酯萃取(100mlx2)，用盐水洗涤(100mlx2)，经无水硫酸钠干燥，在减压下浓缩，得到粗制化合物，将其经快速色谱柱纯化(乙酸乙酯在己烷中的10-20％溶液)，得到2-[2-[(z)-叔丁基亚磺酰基亚氨基甲基]-4-苯基-苯基]硫烷基苯甲酸甲基酯(1.8g,粗制品)，为粘性物质。ms实测:452.1(m+h)。

向lah(0.279g,7.54mmol)在thf(50ml)中的冰冷混悬液中加入2-[2-[(z)-叔丁基亚磺酰基亚氨基甲基]-4-苯基-苯基]硫烷基苯甲酸甲基酯(1.7g,粗制品)在thf(50ml)中的溶液，反应混合物于0℃搅拌30分钟。通过tlc监测反应进程。完成后，反应混合物用饱和硫酸钠溶液(5ml)淬灭，用乙酸乙酯(20ml)稀释。反应混合物经硅藻土过滤，将滤液浓缩，得到n-[[2-[2-(羟基甲基)苯基]硫烷基-5-苯基-苯基]甲基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(1.4g,粗制品)，为白色固体。ms实测:426.1(m+h)。

向n-[[2-[2-(羟基甲基)苯基]硫烷基-5-苯基-苯基]甲基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(2g,粗制品)在dcm(50ml)中的冰冷溶液中分批加入dess-martin过碘烷(2.59g,6.12mmol)，反应混合物在氩气气氛下于室温搅拌2小时。通过tlc监测反应进程。完成后，反应混合物用dcm(50ml)和饱和碳酸氢钠溶液(50ml)稀释。分离出有机层，水层用dcm(50mlx2)萃取。合并的有机层用硫代硫酸钠溶液、然后用盐水洗涤。在减压下除去挥发物，得到n-[[2-(2-甲酰基苯基)硫烷基-5-苯基-苯基]甲基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(0.8g,历经4步为40％)，为粘稠油。ms实测:423.9(m+h)。

向n-[[2-(2-甲酰基苯基)硫烷基-5-苯基-苯基]甲基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(1.5g,3.5mmol)在二噁烷(20ml)中的冰冷溶液中加入hcl在二噁烷中的4m溶液，反应混合物在相同温度搅拌1小时。在减压下除去挥发物，得到粗制化合物，将其用二乙醚研磨，得到2-[2-(氨基甲基)-4-苯基-苯基]硫烷基苯甲醛(0.9g,79％)，为白色固体。ms实测:320.0(m+h)。

向2-[2-(氨基甲基)-4-苯基-苯基]硫烷基苯甲醛(0.7g,1.88mmol)在5％碳酸氢钠溶液(12ml)中的搅拌混悬液中加入fmoc-osu(0.443g,1.314mmol)在乙腈(30ml)中的溶液，反应混合物于室温搅拌3小时。在减压下除去挥发物，粗制反应混合物用水(10ml)稀释。然后水相用乙酸乙酯(50mlx3)萃取，用盐水(50ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，在减压下蒸发，得到粗制化合物，将其经快速色谱法纯化(乙酸乙酯在己烷中的10％溶液)为n-[[2-(2-甲酰基苯基)硫烷基-5-苯基-苯基]甲基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯(0.45g,44％)，为白色固体。lc-ms:542.2(m+h)。

¹h-nmr:(400mhz,dmso-d6):δ4.22-4.19(1h,m),4.28(2h,d,j＝7.0hz),4.35(2h,d,j＝5.6hz),6.82(1h,d,j＝7.9hz),7.25(2h,t,j＝7.4hz),7.44-7.36(4h,m),7.55-7.47(4h,m),7.69-7.67(5h,m),7.76(1h,s).,7.87(2h,d,j＝7.4hz),7.99-7.96(2h,m),10.24(1h,s)。

中间体18

n-[[5-叔丁基-2-(2-甲酰基苯基)硫烷基-苯基]甲基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯

于-78℃向1-叔丁基-4-氟苯(2.0g,13.15mmol)在干燥thf(20ml)中的搅拌溶液中加入pmdta(3.4ml,19.73mmol)和n-buli(1.6m,在thf中,12.3ml,26.31mmol)，所得反应混合物在相同温度搅拌1小时。于-78℃向反应混合物中加入dmf(2.6ml,32.89mmol)，在相同温度搅拌另外1小时。然后反应混合物通过添加饱和nh4cl(20ml)进行淬灭，用二乙醚(2x25ml)萃取。合并的有机层用水(20ml)、盐水(20ml)洗涤，经无水na2so4干燥，在减压下浓缩。由此获得的粗制化合物经快速色谱法纯化(乙酸乙酯在己烷中的1％溶液)，得到5-叔丁基-2-氟-苯甲醛(2.1g,88％)，为浅黄色油。

向5-叔丁基-2-氟-苯甲醛(1.3g,7.22mmol)在干燥dmf(20ml)中的搅拌溶液中依次加入硫代水杨酸甲基酯(2.0ml,14.44mmol)和kotbu(1.6g,14.44mmol)，所得反应混合物加热至50℃达16小时。然后反应混合物冷却至室温，用水(30ml)稀释，用乙酸乙酯萃取(2x25ml)。合并的有机层用水(30ml)、盐水(30ml)洗涤，经无水na2so4干燥，在减压下浓缩。由此获得的粗制化合物经快速色谱法纯化(乙酸乙酯在己烷中的1.8％溶液)，得到2-(4-叔丁基-2-甲酰基-苯基)硫烷基苯甲酸甲基酯(0.7g,30％)，为浅黄色油。ms实测:329.3(m+h)。

向2-(4-叔丁基-2-甲酰基-苯基)硫烷基苯甲酸甲基酯(0.7g,2.13mmol)在干燥thf(20ml)中的搅拌溶液中加入2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.6g,5.33mmol)、继之以乙醇钛(iv)(1.1ml,5.33mmol)，所得反应混合物加热至70℃达2小时。然后反应混合物冷却至室温，用水稀释，经硅藻土过滤。滤液用乙酸乙酯(2x20ml)萃取。合并的有机层用水洗涤(10ml)、继之以盐水(10ml)，经无水na2so4干燥。有机层在减压下浓缩，得到粗制化合物，将其经快速色谱法纯化(乙酸乙酯在己烷中的18％溶液)，得到2-[4-叔丁基-2-[(e)-叔丁基亚磺酰基亚氨基甲基]苯基]硫烷基苯甲酸甲基酯(0.9g,97％)，为浅黄色油。

向lah(0.2g,6.26mmol)在干燥thf(20ml)中的冰冷溶液中加入2-[4-叔丁基-2-[(e)-叔丁基亚磺酰基亚氨基甲基]苯基]硫烷基苯甲酸甲基酯(0.9g,2.08mmol)在干燥thf(20ml)中的溶液，所得反应混合物于室温搅拌2小时。然后反应混合物用乙酸乙酯(30ml)淬灭，经硅藻土过滤，在减压下浓缩，得到n-[[5-叔丁基-2-[2-(羟基甲基)苯基]硫烷基-苯基]甲基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(0.7g,82％)，为白色固体。

向n-[[5-叔丁基-2-[2-(羟基甲基)苯基]硫烷基-苯基]甲基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(0.7g,1.72mmol)在干燥dcm(10ml)中的冰冷溶液中加入dess-martin过碘烷(0.8g,1.90mmol)，所得反应混合物于室温搅拌2小时。反应混合物用饱和nahco3溶液(25ml)淬灭，用dcm萃取(2x25ml)。合并的有机层用水(15ml)洗涤，经无水na2so4干燥，在减压下浓缩。由此获得的粗制化合物经快速色谱法纯化(乙酸乙酯在己烷中的50％溶液)，得到n-[[5-叔丁基-2-(2-甲酰基苯基)硫烷基-苯基]甲基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(0.55g,78％)，为灰白色固体。

向n-[[5-叔丁基-2-(2-甲酰基苯基)硫烷基-苯基]甲基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(0.55g,1.36mmol)在二噁烷(2ml)中的冰冷溶液中加入二噁烷在hcl中的4m溶液(2ml)，所得反应混合物于室温搅拌3小时。挥发物在减压下浓缩，得到2-[2-(氨基甲基)-4-叔丁基-苯基]硫烷基苯甲醛(0.45g,100％)，为黄色固体。粗制品原样用于下一步骤。

向2-[2-(氨基甲基)-4-叔丁基-苯基]硫烷基苯甲醛(0.45g,1.34mmol)在乙腈(10ml)中的冰冷溶液中加入5％nahco3溶液(3ml)、继之以fmoc-osu(0.3g,0.94mmol)，所得反应混合物于室温搅拌5小时。然后反应混合物用水(10ml)稀释，用乙酸乙酯萃取(2x20ml)。合并的有机层用水(10ml)、继之以盐水(10ml)洗涤，经无水na2so4干燥，在减压下浓缩。由此获得的粗制化合物经快速色谱法纯化(乙酸乙酯在己烷中的15％溶液)，得到n-[[5-叔丁基-2-(2-甲酰基苯基)硫烷基-苯基]甲基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯(0.45g,64％)，为黄色固体。lc-ms:522.4(m+h)。

¹h-nmr:(400mhz,cdcl3):δ1.34(9h,s),4.17(1h,t,j＝7.1hz),4.34(2h,d,j＝7.1hz),4.46(2h,d,j＝6.2hz),5.14(1h,br),6.76(1h,d,j＝8.2hz),7.30-7.27(3h,m),7.42-7.32(5h,m),7.55-7.51(3h,m),7.74(2h,d,j＝7.4hz),7.84(1h,d,j＝7.9hz),10.30(1h,s)。

中间体19

n-[[2-(2-甲酰基苯基)硫烷基-5-异丙基-苯基]甲基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯

向5-溴-2-氟-苯甲醛(2g,9.85mmol)在二噁烷:水(1:1)(40ml,1:1)中的溶液中依次加入硼酸异丙烯基酯(1.98g,11.82mmol)和cs2co3(8g,24.63mmol)。然后反应混合物用氩气脱气0.5小时，向其中加入pd(pph3)4(0.22g,0.19mmol)。然后反应混合物于70℃加热2小时。通过tlc监测反应进程。完成后，反应混合物过滤。将滤液浓缩，用乙酸乙酯(100ml)稀释。有机层用水、继之以盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥。有机层浓缩，得到粗制化合物，将其经快速色谱法纯化(乙酸乙酯在己烷中的20％溶液)，得到2-氟-5-异丙烯基-苯甲醛(1.2g,74％)，为粘稠油。

在氩气气氛下向2-氟-5-异丙烯基-苯甲醛(1.3g,7.92mmol)和硫代水杨酸甲基酯(1.59g,9.51mmol)在dmf(30ml)中的冰冷溶液中加入碳酸钾(2.73g,19.81mmol)，反应混合物于60℃加热3小时。然后反应混合物用水(50ml)稀释，用乙酸乙酯萃取(40mlx3)。有机层用盐水洗涤(40mlx3)，经硫酸钠干燥，在减压下浓缩，得到粗制化合物，将其经快速色谱法纯化(乙酸乙酯在己烷中的30％溶液)，得到2-(2-甲酰基-4-异丙烯基-苯基)硫烷基苯甲酸甲基酯(2.2g,89％)，为浅黄色固体。ms实测:313.1(m+h)。

向2-(2-甲酰基-4-异丙烯基-苯基)硫烷基苯甲酸甲基酯(1.6g,5.12mmol)在thf(50ml)中的脱气溶液中加入阮内镍(0.2g)，然后反应混合物在氢气氛下搅拌16小时。然后反应混合物经硅藻土过滤，用thf洗涤，在减压下浓缩，得到粗制化合物，将其经快速色谱法纯化(乙酸乙酯在己烷中的60％溶液)，得到2-[2-(羟基甲基)-4-异丙基-苯基]硫烷基苯甲酸甲基酯(1.4g,87％)，为粘稠油。ms实测:317.1(m+h)。

向2-[2-(羟基甲基)-4-异丙基-苯基]硫烷基苯甲酸甲基酯(1.4g,4.43mmol)在dcm(50ml)中的冰冷溶液中分批加入dess-martin过碘烷(2.25g,5.31mmol)，反应混合物在氩气气氛下于室温搅拌2小时。通过tlc监测反应进程。完成后，反应混合物用dcm(50ml)和饱和碳酸氢钠溶液(50mlx2)稀释。分离出有机层，水层用dcm(50mlx2)萃取。合并的有机层用硫代硫酸钠溶液、然后用盐水洗涤。在减压下除去挥发物，得到粗制化合物，将其经快速色谱法纯化(乙酸乙酯在己烷中的30％溶液)，得到2-(2-甲酰基-4-异丙基-苯基)硫烷基苯甲酸甲基酯(1.2g,86％)，为粘稠油。ms实测:314.9(m+h)。

向2-(2-甲酰基-4-异丙基-苯基)硫烷基苯甲酸甲基酯(1.2g,3.82mmol)在无水thf(50ml)中的搅拌溶液中依次加入2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(1.15g,9.55mmol)和四乙醇钛(2.17g,9.77mmol)。所得反应混合物在氩气气氛下于60℃加热5小时。然后反应混合物倒入冰水中，经硅藻土过滤。滤液用乙酸乙酯萃取(100mlx2)，用盐水洗涤(100mlx2)，经无水硫酸钠干燥，在减压下浓缩，得到粗制化合物，将其经快速柱纯化(乙酸乙酯在己烷中的10-20％溶液)，得到2-[2-[(e)-叔丁基亚磺酰基亚氨基甲基]-4-异丙基-苯基]硫烷基苯甲酸甲基酯(1.45g,91％)，为棕色固体。ms实测:418.2(m+h)。

向lah(0.25g,6.95mmol)在thf(30ml)中的冰冷混悬液中加入所得2-[2-[(e)-叔丁基亚磺酰基亚氨基甲基]-4-异丙基-苯基]硫烷基苯甲酸甲基酯(1.45g,3.47mmol)在thf(20ml)中的溶液，反应混合物于0℃搅拌30分钟。通过tlc监测反应进程。完成后，反应混合物用饱和硫酸钠溶液(5ml)淬灭，用乙酸乙酯(20ml)稀释。反应混合物经硅藻土过滤。将滤液浓缩，得到n-[[2-[2-(羟基甲基)苯基]硫烷基-5-异丙基-苯基]甲基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(1.1g,81％)，为白色固体。ms实测:392.0(m+h)。

向n-[[2-[2-(羟基甲基)苯基]硫烷基-5-异丙基-苯基]甲基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(1g,2.55mmol)在二噁烷(20ml)中的冰冷溶液中加入hcl在二噁烷中的4m溶液，所得反应混合物于室温搅拌1小时。在减压下除去挥发物，得到粗制化合物，将其用二乙醚研磨和干燥，得到[2-[2-(氨基甲基)-4-异丙基-苯基]硫烷基苯基]甲醇(0.735g,87％)，为白色固体。ms实测:287.9(m+h)。

向[2-[2-(氨基甲基)-4-异丙基-苯基]硫烷基苯基]甲醇(0.7g,2.16mmol)在5％碳酸氢钠溶液(12ml)中的搅拌混悬液中加入在乙腈(30ml)中的fmoc-osu(0.51g,1.51mmol)，反应混合物于环境温度搅拌3小时。挥发物在真空下浓缩，然后用水(50ml)稀释，用乙酸乙酯萃取(50mlx3)，用盐水(50ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，在减压下蒸发，得到粗制化合物.粗制化合物经快速色谱法纯化(乙酸乙酯在己烷中的20％溶液)，得到[2-(2-乙基-4-异丙基-苯基)硫烷基苯基]甲醇(0.7g,63％)，为白色固体。ms实测:510.2(m+h)。

向[2-(2-乙基-4-异丙基-苯基)硫烷基苯基]甲醇(0.7g,1.38mmol)在dcm(30ml)中的冰冷溶液中分批加入dess-martin过碘烷(0.75g,1.78mmol)，反应混合物在氩气气氛下于室温搅拌2小时。通过tlc监测反应进程。完成后，反应混合物用dcm(50ml)和饱和碳酸氢钠溶液(50mlx2)稀释。分离出有机层，水层用dcm(50mlx2)萃取。合并的有机层用硫代硫酸钠溶液、然后用盐水洗涤。在减压下除去挥发物，得到粗制化合物，将其经快速色谱法纯化(乙酸乙酯在己烷中的30％溶液)，得到n-[[2-(2-甲酰基苯基)硫烷基-5-异丙基-苯基]甲基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯(0.530g,76％)，为白色固体。lc-ms:508.1(m+h)。

¹h-nmr:(400mhz,dmso-d6):δ1.21(6h,d,j＝6.9hz),2.92(1h,sep,j＝6.9hz),4.28-4.19(5h,m),6.67(1h,d,j＝8.0hz),7.49-7.25(9h,m),7.70(2h,d,j＝7.4hz),7.85(1h,t,j＝5.7hz),7.89(2h,d,j＝7.5hz),7.96(1h,d,j＝7.3hz),10.21(1h,s)。

中间体20

n-({2-[(3-甲酰基吡啶-2-基)硫烷基]-5-苯基-3-(三氟甲基)苯基}甲基)氨基甲酸9h-芴-9-基甲基

酯

向2-巯基烟酸(3.2g,20.3mmol)在dmf(50ml)中的搅拌溶液中加入nah(60％,1.47g,36.9mmol)，反应物于25℃搅拌30分钟。然后加入5-溴-2-氟-3-三氟甲基-苯甲醛(5.0gm,18.5mmol)，反应混合物于80℃搅拌1小时。然后加入k2co3(7.6g,55.3mmol)，继之以添加mei(3.4ml,55.3mmmol)，反应物于25℃搅拌2小时。反应物用水淬灭，用乙酸乙酯萃取。分离的有机层用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，在减压下蒸发。所得粗制物质经正相二氧化硅柱采用乙酸乙酯在己烷中的0-30％溶液纯化，得到2-{[4-溴-2-甲酰基-6-(三氟甲基)苯基]硫烷基}吡啶-3-甲酸甲基酯(5g,64％)，为黄色固体。

向2-{[4-溴-2-甲酰基-6-(三氟甲基)苯基]硫烷基}吡啶-3-甲酸甲基酯(4.5g,10.7mmol)在thf(100ml)中的搅拌溶液中加入2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(2.6g,21.4mmol)、ti(oet)4(6.7ml,32.1mmol)，反应物加热至70℃达1小时。反应物用饱和氯化钠溶液淬灭，所得固体经硅藻土垫过滤，用乙酸乙酯洗涤。分离的有机层经无水硫酸钠干燥，在减压下浓缩，得到2-({4-溴-2-[(1e)-[(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)亚氨基]甲基]-6-(三氟甲基)苯基}硫烷基)吡啶-3-甲酸甲基酯(5.5g,粗制品)，将其未经进一步纯化直接用于下一步骤。lc-ms:523.0[m+h]⁺

于0℃向2-({4-溴-2-[(1e)-[(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)亚氨基]甲基]-6-(三氟甲基)苯基}硫烷基)吡啶-3-甲酸甲基酯(5.5g,10.5mmol)在thf(100ml)中的搅拌溶液中加入lah(2m,在thf中,10.5ml,21mmol)，反应物于0℃搅拌1小时。反应混合物用饱和硫酸钠溶液淬灭，用乙酸乙酯萃取。分离的有机层用水、盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，在减压下蒸发，得到n-[(5-溴-2-{[3-(羟基甲基)吡啶-2-基]硫烷基}-3-(三氟甲基)苯基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(5.0g,粗制品)，将其未经进一步纯化直接用于下一步骤。lc-ms:496.7[m+h]⁺

于0℃向n-[(5-溴-2-{[3-(羟基甲基)吡啶-2-基]硫烷基}-3-(三氟甲基)苯基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(3.6g,7.2mmol)在dcm(50ml)中的搅拌溶液中加入咪唑(1.5g,21.7mmol)和tbdmscl(1.6gm,10.9mmol)，于25℃搅拌2小时。反应物用nahco3水溶液淬灭，用乙酸乙酯萃取。分离的有机层用水、盐水溶液洗涤，经硫酸钠干燥，在减压下蒸发。如此获得的粗制品经combiflash柱色谱法采用乙酸乙酯在己烷中的20％溶液纯化，得到n-({5-溴-2-[(3-{[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]甲基}吡啶-2-基)硫烷基]-3-(三氟甲基)苯基}甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(3.1g,70％,3步)，为灰白色固体。lc-ms:611.1[m+h]⁺

向化合物n-({5-溴-2-[(3-{[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]甲基}吡啶-2-基)硫烷基]-3-(三氟甲基)苯基}甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(250mg,0.4mmol)在甲苯(8ml)中的搅拌溶液中加入苯基硼酸(140.5mg,0.7mmol)、na2co3(129.9mg,1.2mmol)、水(2.0ml)，在氩气气氛中脱气10分钟。然后向其中加入pd(pph3)4(47.23mg,0.04mmol)，再次脱气5分钟。反应物加热至100℃达12小时。然后反应混合物冷却至25℃，经硅藻土垫过滤，用etoac洗涤。分离的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，在真空下浓缩，得到粗制物质，将其经combiflash柱色谱法采用乙酸乙酯在己烷中的0-25％溶液纯化，得到n-({2-[(3-{[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]甲基}吡啶-2-基)硫烷基]-5-苯基-3-(三氟甲基)苯基}甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(200mg,80％)，为无色粘性液体。lc-ms:609.0[m+h]⁺

于0℃向n-({2-[(3-{[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]甲基}吡啶-2-基)硫烷基]-5-苯基-3-(三氟甲基)苯基}甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(2.2g,3.6mmol)在meoh(20ml)中的搅拌溶液中加入hcl在二噁烷中的4m溶液(10ml)，反应混合物于25℃搅拌1小时。反应物在减压下蒸发，得到(2-{[2-(氨基甲基)-4-苯基-6-(三氟甲基)苯基]硫烷基}吡啶-3-基)甲醇hcl盐(1.2g,粗制品)，将其直接用于下一步骤。lc-ms:390.7[m+h]⁺

于25℃向(2-{[2-(氨基甲基)-4-苯基-6-(三氟甲基)苯基]硫烷基}吡啶-3-基)甲醇hcl盐(1.2g,3.1mmol)在5％nahco3(30ml)中的搅拌混悬液中加入在二噁烷(30ml)中的fmoc-osu(1.13g,3.35mmol)，反应物在相同温度搅拌3小时。然后反应物用水稀释，用乙酸乙酯萃取。分离的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，在减压下蒸发。所得粗制物质经柱色谱法纯化(10％-30％乙酸乙酯-己烷)，得到n-[(2-{[3-(羟基甲基)吡啶-2-基]硫烷基}-5-苯基-3-(三氟甲基)苯基)甲基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯(1.5g,79％,2步)，为白色固体。

向n-[(2-{[3-(羟基甲基)吡啶-2-基]硫烷基}-5-苯基-3-(三氟甲基)苯基)甲基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯(1.5g,2.45mmol)在dcm:thf(1:1,50ml)中的搅拌溶液中加入mno2(3.15g,36.7mmol)，反应物于25℃搅拌4小时。反应物经硅藻土垫过滤，滤液在减压下蒸发。所得粗制物质经combiflash色谱法纯化(10％-30％乙酸乙酯-己烷)，得到n-({2-[(3-甲酰基吡啶-2-基)硫烷基]-5-苯基-3-(三氟甲基)苯基}甲基)氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯(1.0g,66％)，为白色固体，纯度为95.56％。lc-ms:611.2[m+h]⁺

1hnmr(400mhz,dmso-d6):δ3.98–4.08(1h,m),4.21(1h,d,j＝5.9hz),4.27(3h,d,j＝6.6hz),7.24(2h,t,j＝6.3hz),7.36–7.40(3h,m),7.51(4h,dq,j＝13.3,6.8hz),7.67(2h,d,j＝7.1hz),7.78(3h,d,j＝7.4hz),7.87(2h,d,j＝7.5hz),7.89–7.97(1h,m),8.00(2h,d,j＝17.9hz),8.37–8.47(2h,m),10.20(1h,s)

中间体21

n-({2-[(3-甲酰基吡啶-2-基)硫烷基]-3,5-双(三氟甲基)苯基}甲基)氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯

于-78℃向1-氟-2,4-双(三氟甲基)苯(3g,12.9mmol)、tmeda(2.3ml,15.5mmol)在thf(30ml)中的搅拌溶液中加入nbuli(2.2m,在thf中,6.4ml,14.2mmol)，反应物于-78℃搅拌1小时。然后于-78℃将1-甲酰基哌啶(2.2ml,19.4mmol)加入反应物中，将其于-78℃搅拌1小时，然后于25℃搅拌1小时。反应物用饱和氯化铵溶液淬灭，用戊烷萃取。分离的有机层用盐水溶液洗涤，经无水硫酸钠干燥，在减压下蒸发，得到2-氟-3,5-双(三氟甲基)苯甲醛(2.2g)。

向2-巯基烟酸(3.9g,25.4mmol)在dmf(50ml)中的搅拌溶液中加入nah(60％,1.8g,46.1mmol)，反应物于25℃搅拌30分钟。然后加入2-氟-3,5-双(三氟甲基)苯甲醛(6g,23.1mmol)，反应混合物于70℃搅拌4小时。然后加入k2co3(9.6g,69.2mmol)，继之以添加mei(4.3ml,69.2mmmol)，反应物于25℃搅拌16小时。反应物用水淬灭，用乙酸乙酯萃取。分离的有机层用盐水溶液洗涤，经无水硫酸钠干燥，在减压下蒸发。如此获得的粗制品经正相二氧化硅柱采用乙酸乙酯在己烷中的0-8％溶液纯化，得到2-{[2-甲酰基-4,6-双(三氟甲基)苯基]硫烷基}吡啶-3-甲酸甲基酯(1.4g,11％,2步)，为黄色固体。lc-ms:409.5

向2-{[2-甲酰基-4,6-双(三氟甲基)苯基]硫烷基}吡啶-3-甲酸甲基酯(1.4g,3.4mmol)在thf(10ml)中的搅拌溶液中加入2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(415mg,3.4mol)、ti(oet)4(3.6ml,17.1mmol)，反应物加热至70℃达1小时。反应物用饱和氯化钠溶液淬灭。所得固体经硅藻土垫过滤，用乙酸乙酯洗涤。分离的有机层经无水硫酸钠干燥，在减压下浓缩，得到2-({2-[(1e)-[(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)亚氨基]甲基]-4,6-双(三氟甲基)苯基}硫烷基)吡啶-3-甲酸乙基酯(1.6g,粗制品)，将其未经进一步纯化直接用于下一步骤。lc-ms:527.1[m+h]⁺

于0℃向2-({2-[(1e)-[(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)亚氨基]甲基]-4,6-双(三氟甲基)苯基}硫烷基)吡啶-3-甲酸乙基酯(1.5g,2.8mmol)在thf(15ml)中的搅拌溶液中加入lah(2m,在thf中,2.13ml,4.3mmol)，反应物于0℃搅拌2小时。反应混合物用饱和硫酸钠溶液淬灭，用乙酸乙酯萃取。分离的有机层用水、盐水溶液洗涤，经无水硫酸钠干燥，在减压下蒸发。如此获得的粗制品经正相二氧化硅柱采用乙酸乙酯在己烷中的5-60％溶液纯化，得到n-[(2-{[3-(羟基甲基)吡啶-2-基]硫烷基}-3,5-双(三氟甲基)苯基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(800mg,48％,2步)，为灰白色固体。lc-ms:486.7[m+h]⁺

于0℃向n-[(2-{[3-(羟基甲基)吡啶-2-基]硫烷基}-3,5-双(三氟甲基)苯基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(800mg,1.6mmol)在meoh(8ml)中的搅拌溶液中加入hcl在二噁烷中的4m溶液(4ml)，反应混合物于25℃搅拌1小时。反应物在减压下蒸发，得到(2-{[2-(氨基甲基)-4,6-双(三氟甲基)苯基]硫烷基}吡啶-3-基)甲醇hcl盐(650mg,粗制品)，将其直接用于下一步骤。lc-ms:382.8[m+h]⁺

于25℃向(2-{[2-(氨基甲基)-4,6-双(三氟甲基)苯基]硫烷基}吡啶-3-基)甲醇hcl盐(650mg,1.6mmol)在5％nahco3(100ml)中的搅拌混悬液中加入在乙腈(20ml)中的fmoc-osu(523mg,1.6mmol)，反应物在相同温度搅拌2小时。然后反应物用水稀释，用乙酸乙酯萃取。分离的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，在减压下蒸发，得到n-[(2-{[3-(羟基甲基)吡啶-2-基]硫烷基}-3,5-双(三氟甲基)苯基)甲基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯(950mg)，为灰白色固体。lc-ms:605.2[m+h]⁺

向n-[(2-{[3-(羟基甲基)吡啶-2-基]硫烷基}-3,5-双(三氟甲基)苯基)甲基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯(950mg,1.6mmol)在dcm/thf(1:1,20ml)中的搅拌溶液中加入mno2(2.7g,31.46mmol)，反应物于25℃搅拌2小时。反应物经硅藻土垫过滤。滤液在减压下蒸发。所得粗制物质经正相二氧化硅柱采用乙酸乙酯在己烷中的5-20％溶液纯化，得到n-({2-[(3-甲酰基吡啶-2-基)硫烷基]-3,5-双(三氟甲基)苯基}甲基)氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯(600mg)，为灰白色固体，lcms纯度为95％。lc-ms:602.9[m+h]⁺

1hnmr(400mhz,dmso-d6):δ4.22(1h,d,j＝6.8hz),4.29(4h,d,j＝6.8hz),7.31(2h,t,j＝7.4hz),7.41(3h,t,j＝6.0hz),7.67(2h,d,j＝7.5hz),7.89(2h,d,j＝7.4hz),7.94(1h,s),8.01(1h,s),8.12(1h,s),8.41(2h,d,j＝7.2hz),10.18(1h,s)。

中间体22

3-氯-2-((2-甲酰基吡啶-3-基)硫基)-5-(三氟甲基)苄基氨基甲酸(9h-芴-9-基)甲基酯

类似于中间体63从3-氯-2-氟-5-(三氟甲基)苯甲醛和3-巯基吡啶甲酸起始制备该物质。得到标题化合物，为棕色固体(183mg)。msesi(m/z):569.1[(m+h)⁺]

中间体23

n-[[3-氯-2-[(3-甲酰基-2-吡啶基)硫烷基]-4-苯基-苯基]甲基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯

向1-溴-2-氯-3-氟苯(1.0g,4.79mmol)在甲苯(20ml)中的搅拌溶液中加入苯基硼酸(875mg,7.18mmol)、na2co3(1.52g,14.35mmol)、水(5ml)，在氩气气氛中脱气10分钟。然后向其中加入pd(pph3)4(553mg,0.48mmol)，再次脱气5分钟。反应加热至100℃达16小时。然后反应混合物冷却至25℃，经硅藻土过滤，用乙酸乙酯洗涤。分离的有机层用盐水溶液洗涤，经硫酸钠干燥，在减压下浓缩，得到粗制产物，将其经combiflash柱色谱法采用己烷纯化，得到2-氯-1-氟-3-苯基苯(920mg,93％)，为黄色粘性液体。

于-78℃向2-氯-1-氟-3-苯基苯(4.0g,19.42mmol)在thf(25ml)中的搅拌溶液中加入lda(2m,在thf中,14.4ml)，反应物在相同条件下搅拌1小时。然后于-78℃向反应混合物中加入dmf(5ml)，于室温搅拌2小时。反应物用水淬灭，用乙酸乙酯萃取。分离的有机层用盐水溶液洗涤，经硫酸钠干燥，在减压下蒸发，得到粗制产物，将其经二氧化硅柱色谱法采用乙酸乙酯在己烷中的0-10％溶液纯化，得到3-氯-2-氟-4-苯基苯甲醛，为浅黄色固体(2.5g,54％)。

向2-巯基烟酸(3.6g,23.2mmol)在dmf(30ml)中的搅拌溶液中加入nah(60％,1.11g,46.4mmol)，反应物于25℃搅拌30分钟。然后加入3-氯-2-氟-4-苯基苯甲醛(5.971g,25.519mmol)，反应混合物于90℃搅拌6小时。然后加入k2co3(9.62g,69.6mmol)，继之以添加甲基碘(4.33ml,69.597mmol)，反应物于25℃搅拌16小时。反应物用水淬灭，用乙酸乙酯萃取。分离的有机层用盐水溶液洗涤，经无水硫酸钠干燥，在减压下蒸发。粗制产物经正相二氧化硅柱采用乙酸乙酯在己烷中的0-20％溶液纯化，得到2-[(2-氯-6-甲酰基-3-苯基苯基)硫烷基]吡啶-3-甲酸甲基酯(4.5g,50％)，为粘性固体。

lc-ms:m/z＝383.9(m+h)⁺对于单同位素质量而言383.04

向2-[(2-氯-6-甲酰基-3-苯基苯基)硫烷基]吡啶-3-甲酸甲基酯(4.5g,11.75mmol)在thf(40ml)中的搅拌溶液中加入2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(1.42g,11.75mmol)、ti(oet)4(12.317ml,58.747mmol)，反应加热至70℃达45分钟。反应物用饱和氯化钠溶液淬灭，所得固体经硅藻土过滤，用乙酸乙酯洗涤。分离的有机层经无水硫酸钠干燥，在减压下浓缩，得到2-({2-氯-6-[(1z)-[(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)亚氨基]甲基]-3-苯基苯基}硫烷基)吡啶-3-甲酸甲基酯(4.8g,粗制品)，将其未经进一步纯化直接用于下一步骤。

lc-ms:m/z＝486.8(m+h)⁺对于单同位素质量而言486.08

于0℃向2-({2-氯-6-[(1z)-[(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)亚氨基]甲基]-3-苯基苯基}硫烷基)吡啶-3-甲酸甲基酯(4.8g,9.88mmol)在thf(40ml)中的搅拌溶液中加入lah(2m,在thf中,7.4ml,14.81mmol)，反应物于0℃搅拌1小时。反应混合物用饱和硫酸钠溶液淬灭，用乙酸乙酯萃取。分离的有机层用水、盐水溶液洗涤，经无水硫酸钠干燥，在减压下蒸发。所得粗制产物经正相二氧化硅柱采用乙酸乙酯在己烷中的50-90％溶液纯化，得到n-[(3-氯-2-{[3-(羟基甲基)吡啶-2-基]硫烷基}-4-苯基苯基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(4.0g,74％2步)，为灰白色固体。

lc-ms:m/z＝460.8(m+h)⁺对于单同位素质量而言460.10

于0℃向n-[(3-氯-2-{[3-(羟基甲基)吡啶-2-基]硫烷基}-4-苯基苯基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(4.0g,8.7mmol)在meoh(40ml)中的搅拌溶液中加入hcl在二噁烷中的4m溶液(20ml)，反应混合物于25℃搅拌3小时。溶剂在减压下蒸发，得到(2-{[6-(氨基甲基)-2-氯-3-苯基苯基]硫烷基}吡啶-3-基)甲醇hcl盐(3.5g,粗制品)，将其直接用于下一步骤。

lc-ms:m/z＝356.9(m+h)⁺对于单同位素质量而言356.08

于25℃向(2-{[6-(氨基甲基)-2-氯-3-苯基苯基]硫烷基}吡啶-3-基)甲醇hcl盐(3.5g,9.831mmol)在5％nahco3(25ml)中的搅拌混悬液中加入在ch3cn(25ml)中的fmocosu(3.32g,9.83mmol)，反应物在相同温度搅拌16小时。然后反应物用水稀释，用乙酸乙酯萃取。分离的有机层用盐水溶液洗涤，经硫酸钠干燥，在减压下蒸发，得到n-[(3-氯-2-{[3-(羟基甲基)吡啶-2-基]硫烷基}-4-苯基苯基)甲基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯(3.7g,粗制品)，将其直接用于下一步骤。

lc-ms:m/z＝579.1(m+h)⁺对于单同位素质量而言578.14

向n-[(3-氯-2-{[3-(羟基甲基)吡啶-2-基]硫烷基}-4-苯基苯基)甲基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯(3.7g,6.40mmol)在dcm/thf(1:1,60ml)中的搅拌溶液中加入mno2(5.57g,64.01mmol)，反应物于25℃搅拌1小时。反应物经硅藻土垫过滤；滤液在减压下蒸发。粗制产物经正相二氧化硅柱采用乙酸乙酯在己烷中的10-30％溶液纯化，得到n-({3-氯-2-[(3-甲酰基吡啶-2-基)硫烷基]-4-苯基苯基}甲基)氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯(3.5g,70％)，为灰白色固体。

lc-ms:m/z＝577.0(m+h)⁺对于单同位素质量而言576.13

1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ10.20(s,1h),8.47(d,1h),8.36(d,1h),7.89(d,2h),7.69(d,2h),7.51–7.31(m,12h),4.33–4.29(m,4h),4.22(m,1h)

中间体24

n-[[2-(2-甲酰基苯基)硫烷基-5-苯基-3-(三氟甲基)苯基]甲基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯

向5-溴-2-氟-3-三氟甲基苯甲醛(4.63g,21.4mmol)和2-硫烷基苯甲酸甲基酯(3.0g,17.9mmol)在dmf(30ml)中的搅拌溶液中加入k2co3(4.93g,35.7mmol)，反应物于25℃搅拌1小时。反应混合物用乙酸乙酯稀释，用水洗涤。分离的有机层用饱和nacl溶液洗涤，经无水硫酸钠干燥，在减压下蒸发。所得粗制产物经combiflash柱色谱法采用10％ea/己烷纯化，得到2-{[4-溴-2-甲酰基-6-(三氟甲基)苯基]硫烷基}苯甲酸甲基酯(6g,80％)，为灰白色固体。

向2-{[4-溴-2-甲酰基-6-(三氟甲基)苯基]硫烷基}苯甲酸甲基酯(0.5g,1.19mmol)在thf(5ml)中的搅拌溶液中加入2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(288.6mg,2.38mol)、ti(oet)4(0.75ml,3.57mmol)，反应物加热至70℃达2小时。反应物用饱和氯化钠溶液淬灭，所得固体经硅藻土过滤，用乙酸乙酯洗涤。分离的有机层经无水硫酸钠干燥，在减压下浓缩，得到2-({4-溴-2-[(1z)-[(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)亚氨基]甲基]-6-(三氟甲基)苯基}硫烷基)苯甲酸乙基酯(0.6g,粗制品)，将其未经进一步纯化直接用于下一步骤。

lc-ms:甲基酯和乙基酯的混合物，比例约3:1；对于甲基酯而言m/z＝522.2(m+h)⁺(对于单同位素质量而言mw520.99)和对于乙基酯而言m/z＝536.2(m+h)⁺(对于单同位素质量而言mw535.01)

于0℃向2-({4-溴-2-[(1z)-[(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)亚氨基]甲基]-6-(三氟甲基)苯基}硫烷基)苯甲酸乙基酯(0.9g,1.724mmol)在thf(20ml)中的搅拌溶液中加入lialh4(2m,在thf中,1.7ml,3.44mmol)，反应物于0℃搅拌1小时。反应混合物用饱和硫酸钠溶液淬灭，用乙酸乙酯萃取。分离的有机层用水、盐水溶液洗涤，经无水硫酸钠干燥，在减压下蒸发，得到n-[[5-溴-2-[2-(羟基甲基)苯基]硫烷基-3-(三氟甲基)苯基]甲基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(0.8g,粗制品)，将其未经进一步纯化直接用于下一步骤。

lc-ms:m/z＝495.9(m+h)⁺对于单同位素质量而言495.01

于0℃向n-[[5-溴-2-[2-(羟基甲基)苯基]硫烷基-3-(三氟甲基)苯基]甲基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(1g,2mmol)在dcm(30ml)中的搅拌溶液中加入咪唑(0.41g,6mmol)和tbdmscl(0.455g,3.mmol)，于25℃搅拌1小时。反应物用nahco3水溶液淬灭，用乙酸乙酯萃取。分离的有机层用水、盐水溶液洗涤，经硫酸钠干燥，在减压下蒸发。粗制产物经正相硅胶柱色谱法采用乙酸乙酯在己烷中的10％溶液纯化，得到n-({5-溴-2-[(2-{[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]甲基}苯基)硫烷基]-3-(三氟甲基)苯基}甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.95g,77％)，为无色粘性液体。

lc-ms:m/z＝611.8(m+h)⁺对于单同位素质量而言609.10

向n-({5-溴-2-[(2-{[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]甲基}苯基)硫烷基]-3-(三氟甲基)苯基}甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(5.5g,9.55mmol)在甲苯(88ml)中的搅拌溶液中加入苯基硼酸(1.75g,14.3mmol)、na2co3(3.03g,28.6mmol)、水(22ml)，混合物在氩气气氛下脱气10分钟。然后向其中加入pd(pph3)4(1.1g,0.955mmol)，再次脱气5分钟。反应物加热至110℃达16小时。然后反应混合物冷却至25℃，经硅藻土过滤，用乙酸乙酯洗涤。分离的有机层用盐水溶液洗涤，经硫酸钠干燥，在减压下浓缩。粗制产物经正相硅胶柱色谱法用乙酸乙酯在己烷中的50％溶液洗脱进行纯化，得到n-({2-[(2-{[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]甲基}苯基)硫烷基]-5-苯基-3-(三氟甲基)苯基}甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(4.7g,81％)，为黄色固体。

于0℃向n-({2-[(2-{[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]甲基}苯基)硫烷基]-5-苯基-3-(三氟甲基)苯基}甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(1.5g,2.47mmol)在meoh(20ml)中的搅拌溶液中加入hcl在二噁烷中的4m溶液(6ml)，反应混合物于25℃搅拌2小时。溶剂在减压下蒸发，得到(2-{[2-(氨基甲基)-4-苯基-6-(三氟甲基)苯基]硫烷基}苯基)甲醇盐酸盐(1.1g,粗制品)，将其直接用于下一步骤。

lc-ms:m/z＝390.2(m+h)⁺对于单同位素质量而言389.11

于25℃向(2-{[2-(氨基甲基)-4-苯基-6-(三氟甲基)苯基]硫烷基}苯基)甲醇盐酸盐(3.5g,9mmol)在5％nahco3(250ml)中的搅拌混悬液中加入在ch3cn(70ml)中的fmocn-羟基琥珀酰亚胺酯(3.03g,9mmol)，反应物在相同温度搅拌16小时。然后反应物用水稀释，用乙酸乙酯萃取。分离的有机层用盐水溶液洗涤，经硫酸钠干燥，在减压下蒸发，得到n-[[2-[2-(羟基甲基)苯基]硫烷基-5-苯基-3-(三氟甲基)苯基]甲基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯(3.7g,粗制品)，将其直接用于下一步骤。

lc-ms:m/z＝594.3(m+h-h2o)⁺对于单同位素质量而言611.17

向n-[(2-{[2-(羟基甲基)苯基]硫烷基}-5-苯基-3-(三氟甲基)苯基)甲基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯(3.5g,5.7mmol)在dcm/thf(1:1,160ml)中的搅拌溶液中加入mno2(7.47g,85.9mmol)，反应物于25℃搅拌1小时。反应混合物经硅藻土过滤；滤液在减压下蒸发。粗制产物经正相二氧化硅柱采用乙酸乙酯在己烷中的10％溶液纯化，得到n-({2-[(2-甲酰基苯基)硫烷基]-5-苯基-3-(三氟甲基)苯基}甲基)氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯(3.2g,91％)，为灰白色固体。

lc-ms:m/z＝592.4(m+h-h2o)⁺对于单同位素质量而言609.16

1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ10.19(s,1h),8.11(s,1h),8.03–7.93(m,3h),7.86(d,2h),7.78(d,2h),7.66(d,2h),7.56–7.43(m,4h),7.38(t,3h),7.23(t,2h),6.50(d,1h),4.33–4.26(m,4h),4.20(m,1h)

中间体25

n-({3-氯-2-[(3-甲酰基吡啶-2-基)硫烷基]-6-苯基苯基}甲基)氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯

于0℃向n-[(6-溴-3-氯-2-{[3-(羟基甲基)吡啶-2-基]硫烷基}苯基)甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(8.9g,19.2mmol)在dcm(50ml)中的搅拌溶液中加入咪唑(3.9g,57.6mmol)和tbdmscl(4.33g,28.8mmol)，于25℃搅拌2小时。反应物用nahco3水溶液淬灭，用乙酸乙酯萃取。分离的有机层用水、盐水洗涤，经硫酸钠干燥，在减压下蒸发。如此获得的粗制品经combiflash柱色谱法采用乙酸乙酯在己烷中的0-20％溶液纯化，得到n-({6-溴-2-[(3-{[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]甲基}吡啶-2-基)硫烷基]-3-氯苯基}甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(9g)，为灰白色固体。lc-ms:578.6[m+h]⁺

向化合物n-({6-溴-2-[(3-{[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]甲基}吡啶-2-基)硫烷基]-3-氯苯基}甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(1.5g,2.6mmol)在二噁烷(10ml)中的搅拌溶液中加入苯基硼酸(411mg,3.4mmol)、na2co3(825mg,7.8mmol)、水(5ml)，在氩气气氛中脱气10分钟。然后向其中加入pd(pph3)4(150mg,0.13mmol)，再次脱气5分钟。反应物加热至120℃达16小时。然后反应混合物冷却至25℃，经硅藻土垫过滤，用etoac洗涤。分离的有机层用盐水溶液洗涤，经硫酸钠干燥，在减压下浓缩，得到n-({2-[(3-{[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]甲基}吡啶-2-基)硫烷基]-3-氯-6-苯基苯基}甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(1.3g)，为黄色固体。lc-ms:575.0[m+h]⁺

于0℃向nn-({2-[(3-{[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]甲基}吡啶-2-基)硫烷基]-3-氯-6-苯基苯基}甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(1.3g,2.26mmol)在meoh(20ml)中的搅拌溶液中加入hcl在二噁烷中的4m溶液(10ml)，反应混合物于25℃搅拌2小时。反应物在减压下蒸发，得到(2-{[2-(氨基甲基)-6-氯-3-苯基苯基]硫烷基}吡啶-3-基)甲醇hcl盐(890mg,粗制品)，将其直接用于下一步骤。

于25℃向(2-{[2-(氨基甲基)-6-氯-3-苯基苯基]硫烷基}吡啶-3-基)甲醇hcl盐(890mg,2.3mmol)在5％nahco3(10ml)中的搅拌混悬液中加入在乙腈(20ml)中的fmocosu(762mg,2.3mmol)，反应物在相同温度搅拌2小时。然后反应物用水稀释，用乙酸乙酯萃取。分离的有机层用盐水溶液洗涤，经硫酸钠干燥，在减压下蒸发，得到n-[(3-氯-2-{[3-(羟基甲基)吡啶-2-基]硫烷基}-6-苯基苯基)甲基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯(1.2g)，为灰白色固体。lc-ms:578.8[m+h]⁺

向n-[(3-氯-2-{[3-(羟基甲基)吡啶-2-基]硫烷基}-6-苯基苯基)甲基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯(1.2g,2.1mmol)在dcm/thf(1:1,40ml)中的搅拌溶液中加入mno2(3.6g,41.4mmol)，反应物于25℃搅拌2小时。反应物经硅藻土过滤，滤液在减压下蒸发，得到粗制物质，将其经正相二氧化硅柱采用乙酸乙酯在己烷中的10-40％溶液纯化，得到n-({3-氯-2-[(3-甲酰基吡啶-2-基)硫烷基]-6-苯基苯基}甲基)氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯(710mg)，为灰白色固体，纯度为98％。lc-ms:576.8[m+h]⁺

1hnmr(400mhz,dmso-d6):δ4.08–4.15(5h,m),7.34(4h,q,j＝7.3,6.2hz),7.42(7h,d,j＝8.1hz),7.58(1h,s),7.64–7.71(3h,m),7.89(2h,d,j＝7.5hz),8.33(1h,d,j＝7.7hz),8.48(1h,d,j＝3.2hz),10.21(1h,s)。

中间体26

n-({3-氯-2-[(3-甲酰基吡啶-2-基)硫烷基]-5-苯基苯基}甲基)氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯

向化合物n-({5-溴-2-[(3-{[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]甲基}吡啶-2-基)硫烷基]-3-氯苯基}甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(1.2g,1.9mmol)在甲苯(10ml)中的搅拌溶液中加入苯基硼酸(311mg,2.5mmol)、na2co3(625mg,5.9mmol)、水(5ml)，在氩气气氛中脱气15分钟。然后向其中加入pd(pph3)4(114mg,0.1mmol)，再次脱气5分钟。反应物加热至110℃达16小时。然后反应混合物冷却至25℃，经硅藻土垫过滤，用乙酸乙酯洗涤。分离的有机层用盐水溶液洗涤，经硫酸钠干燥，在减压下浓缩，得到n-({2-[(3-{[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]甲基}吡啶-2-基)硫烷基]-3-氯-5-苯基苯基}甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(1.2g)，为无色粘性液体。lc-ms:575.3[m+h]⁺

于0℃向n-({2-[(3-{[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]甲基}吡啶-2-基)硫烷基]-3-氯-5-苯基苯基}甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(1.2g,2.1mmol)在meoh(10ml)中的搅拌溶液中加入hcl在二噁烷中的4m溶液(5ml)，反应混合物于25℃搅拌2小时。反应物在减压下蒸发，得到(2-{[2-(氨基甲基)-6-氯-4-苯基苯基]硫烷基}吡啶-3-基)甲醇hcl盐(800mg)，将其直接用于下一步骤。lc-ms:356.9[m+h]⁺

于25℃向(2-{[2-(氨基甲基)-6-氯-4-苯基苯基]硫烷基}吡啶-3-基)甲醇hcl盐(800mg,2.0mmol)在5％nahco3(20ml)中的搅拌混悬液中加入在乙腈(40ml)中的fmoc-osu(685mg,2.0mmol)，反应物在相同温度搅拌2小时。然后反应物用水稀释，用乙酸乙酯萃取。分离的有机层用盐水溶液洗涤，经硫酸钠干燥，在减压下蒸发，得到n-[(3-氯-2-{[3-(羟基甲基)吡啶-2-基]硫烷基}-5-苯基苯基)甲基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯(1.1g)，为灰白色固体。lc-ms:579.3[m+h]⁺

向n-[(3-氯-2-{[3-(羟基甲基)吡啶-2-基]硫烷基}-5-苯基苯基)甲基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯(1.1g,1.9mmol)在dcm:thf(1:1,40ml)中的搅拌溶液中加入mno2(3.3g,38mmol)，反应物于25℃搅拌2小时。反应物经硅藻土垫过滤，滤液在减压下蒸发。如此获得的粗制品经正相二氧化硅柱采用乙酸乙酯在己烷中的0-20％溶液纯化，得到n-({3-氯-2-[(3-甲酰基吡啶-2-基)硫烷基]-5-苯基苯基}甲基)氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯(800mg)，为灰白色固体，lcms纯度为96％。lc-ms:577.0[m+h]⁺

1hnmr(400mhz,dmso-d6):δ4.16–4.24(1h,m),4.27(2h,d,j＝7.0hz),4.36(2h,d,j＝5.6hz),7.25(2h,t,j＝7.5hz),7.36–7.42(3h,m),7.49(3h,dt,j＝15.5,7.1hz),7.70(5h,dd,j＝23.8,7.0hz),7.83–7.89(3h,m),7.92(1h,t,j＝6.1hz),8.38(1h,d,j＝6.1hz),8.45(1h,d,j＝4.6hz),10.22(1h,s)。

中间体27

n-{[3-氯-5-(2-氯吡啶-4-基)-2-[(3-甲酰基吡啶-2-基)硫烷基]苯基]甲基}氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯

向n-({5-溴-2-[(3-{[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]甲基}吡啶-2-基)硫烷基]-3-氯苯基}甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(2.5g,4.3mmol)在二噁烷(20ml)中的搅拌溶液中加入(2-氯吡啶-4-基)硼酸(818mg,5.2mmol)、na2co3(1.4g,13mmol)、水(10ml)，在氩气气氛中脱气10分钟。向其中加入pd(pph3)4(501mg,0.43mmol)，再次脱气5分钟。反应物加热至120℃达16小时。反应混合物冷却至25℃，经硅藻土垫过滤，用etoac洗涤。分离的有机层用盐水溶液洗涤，经无水硫酸钠干燥，在减压下浓缩。将如此获得的粗制品经二氧化硅柱色谱法纯化(sio2；100-200目；50-90％etoac/己烷)，得到n-({2-[(3-{[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]甲基}吡啶-2-基)硫烷基]-3-氯-5-(2-氯吡啶-4-基)苯基}甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(2.8g)，为灰白色固体。lc-ms:609.8[m+h]⁺

于0℃向n-({2-[(3-{[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]甲基}吡啶-2-基)硫烷基]-3-氯-5-(2-氯吡啶-4-基)苯基}甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(2.8g,4.6mmol)在meoh(30ml)中的搅拌溶液中加入hcl在二噁烷中的4m溶液(15ml)，反应混合物于25℃搅拌2小时。反应物在减压下蒸发，得到(2-{[2-(氨基甲基)-6-氯-4-(2-氯吡啶-4-基)苯基]硫烷基}吡啶-3-基)甲醇盐酸盐(1.5g)，为灰白色粘性固体，将其未经进一步纯化直接用于下一步骤。lc-ms:392.2[m+h]⁺

于25℃向(2-{[2-(氨基甲基)-6-氯-4-(2-氯吡啶-4-基)苯基]硫烷基}吡啶-3-基)甲醇盐酸盐(1.5g,3.8mmol)在5％nahco3(20ml)中的搅拌混悬液中加入在二噁烷(20ml)中的fmoc-osu(1.3g,3.8mmol)，反应物在相同温度搅拌16小时。然后反应物用水稀释，用etoac萃取。分离的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，在减压下蒸发，得到n-{[3-氯-5-(2-氯吡啶-4-基)-2-{[3-(羟基甲基)吡啶-2-基]硫烷基}苯基]甲基}氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯(2.7g)，为灰白色固体；将其未经进一步纯化用于下一步骤。lc-ms:614.3[m+h]⁺

向n-{[3-氯-5-(2-氯吡啶-4-基)-2-{[3-(羟基甲基)吡啶-2-基]硫烷基}苯基]甲基}氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯在dcm:thf(1:1,40ml)中的搅拌溶液中加入mno2(7.66g,88.1mmol)，反应物于25℃搅拌2小时。反应物经硅藻土垫过滤，滤液在减压下蒸发。将如此获得的粗制品经柱色谱法(sio2；100-200目；40-80％etoac/己烷)纯化为n-{[3-氯-5-(2-氯吡啶-4-基)-2-[(3-甲酰基吡啶-2-基)硫烷基]苯基]甲基}氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯(1.5g)，为灰白色固体，纯度为96.46％。lc-ms:612.2[m+h]⁺

1hnmr(400mhz,dmso-d6):δ4.19–4.37(5h,m),7.27(2h,t,j＝7.36hz),7.36-7.39(3h,m),7.67(2h,d,j＝7.2hz),7.81(3h,m),7.88(2h,d,j＝7.21hz),7.94(1h,m),8.37(1h,d,j＝7.31hz),8.34(1h,m),8.54(1h,d,j＝5.12hz),10.21(1h,s)

中间体28

n-({5-[3-(苄氧基)丙-1-炔-1-基]-3-氯-2-[(3-甲酰基吡啶-2-基)硫烷基]苯基}甲基)氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯

向n-({5-溴-2-[(3-{[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]甲基}吡啶-2-基)硫烷基]-3-氯苯基}甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(2g,3.46mmol)、[(丙-2-炔-1-基氧基)甲基]苯(1ml,6.9mmol)在三乙胺(8ml)中的搅拌脱气混悬液中加入cui(13mg,0.07mmol)、乙酸钯(8mg,0.04mmol)、pph3(18mg,0.07mmol)，反应物加热至80℃达6小时。反应物在减压下蒸发，所得粗制物质经正相二氧化硅柱采用乙酸乙酯在己烷中的0-30％溶液纯化，得到n-({5-[3-(苄氧基)丙-1-炔-1-基]-2-[(3-{[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]甲基}吡啶-2-基)硫烷基]-3-氯苯基}甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(1g,45％)，为无色粘性液体。lc-ms:643.2[m+h]⁺

于0℃向n-({5-[3-(苄氧基)丙-1-炔-1-基]-2-[(3-{[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]甲基}吡啶-2-基)硫烷基]-3-氯苯基}甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(1g,1.5mmol)在meoh(8ml)中的搅拌溶液中加入hcl在二噁烷中的4m溶液(4ml)，反应混合物于25℃搅拌2小时。反应物在减压下蒸发，得到(2-{[2-(氨基甲基)-4-[3-(苄氧基)丙-1-炔-1-基]-6-氯苯基]硫烷基}吡啶-3-基)甲醇hcl盐(700mg)，将其直接用于下一步骤。lc-ms:425.1[m+h]⁺

于25℃向(2-{[2-(氨基甲基)-4-[3-(苄氧基)丙-1-炔-1-基]-6-氯苯基]硫烷基}吡啶-3-基)甲醇hcl盐(700mg,1.5mmol)在5％nahco3(20ml)中的搅拌混悬液中加入在二噁烷(40ml)中的fmoc-osu(511mg,1.5mmol)，反应物在相同温度搅拌2小时。然后反应物用水稀释，用乙酸乙酯萃取。分离的有机层用盐水溶液洗涤，经硫酸钠干燥，在减压下蒸发，得到n-({5-[3-(苄氧基)丙-1-炔-1-基]-3-氯-2-{[3-(羟基甲基)吡啶-2-基]硫烷基}苯基}甲基)氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯(850mg)，为灰白色固体，其未经进一步纯化用于下一步骤。lc-ms:647.0[m+h]⁺

向n-({5-[3-(苄氧基)丙-1-炔-1-基]-3-氯-2-{[3-(羟基甲基)吡啶-2-基]硫烷基}苯基}甲基)氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯(850mg,1.31mmol)在dcm:thf(1:1,40ml)中的搅拌溶液中加入mno2(2.28g,26.3mmol)，反应物于25℃搅拌2小时。反应物经硅藻土垫过滤，滤液在减压下蒸发。所得粗制物质经正相二氧化硅柱采用乙酸乙酯在己烷中的10％-50％溶液纯化，得到n-({5-[3-(苄氧基)丙-1-炔-1-基]-3-氯-2-[(3-甲酰基吡啶-2-基)硫烷基]苯基}甲基)氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯(500mg)，为灰白色固体，纯度为91％。lc-ms:645.3[m+h]⁺

1hnmr(400mhz,dmso-d6):δ4.26–4.30(5h,m),4.49(2h,s),4.62(2h,s),7.30–7.42(11h,m),7.68(3h,d,j＝7.0hz),7.88(3h,d,j＝7.1hz),8.38(1h,d,j＝7.6hz),8.42(1h,d,j＝4.6hz),10.19(1h,s)。

中间体29

n-({3-氯-2-[(3-甲酰基吡啶-2-基)硫烷基]-6-(吡啶-4-基)苯基}甲基)氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯

向化合物n-({6-溴-2-[(3-{[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]甲基}吡啶-2-基)硫烷基]-3-氯苯基}甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(4g,6.93mmol)在二噁烷(30ml)中的搅拌溶液中加入吡啶-4-硼酸(1.1g,9.01mmol)、na2co3(2.2g,20.79mmol)、水(15ml)，在氩气气氛中脱气10分钟。然后向其中加入pd(pph3)4(0.8g,0.69mmol)，再次脱气5分钟。反应物加热至120℃达16小时。然后反应混合物冷却至25℃，经硅藻土垫过滤，用etoac洗涤。分离的有机层用盐水溶液洗涤，经硫酸钠干燥，在真空下浓缩，得到粗制品，将其经正相二氧化硅柱采用乙酸乙酯在己烷中的5-80％溶液纯化，得到n-({2-[(3-{[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]甲基}吡啶-2-基)硫烷基]-3-氯-6-(吡啶-4-基)苯基}甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(2.2g,55％)，为灰白色固体。lc-ms:575.8[m+h]⁺

于0℃向n-({2-[(3-{[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]甲基}吡啶-2-基)硫烷基]-3-氯-6-(吡啶-4-基)苯基}甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(2.2g,3.82mmol)在meoh(20ml)中的搅拌溶液中加入hcl在二噁烷中的4m溶液(10ml)，反应混合物于25℃搅拌2小时。反应物在减压下蒸发，得到(2-{[2-(氨基甲基)-6-氯-3-(吡啶-4-基)苯基]硫烷基}吡啶-3-基)甲醇hcl盐(1.3g)，将其直接用于下一步骤。lc-ms:358.2[m+h]⁺

于25℃向(2-{[2-(氨基甲基)-6-氯-3-(吡啶-4-基)苯基]硫烷基}吡啶-3-基)甲醇hcl盐(1.3g,3.64mmol)在5％nahco3(20ml)中的搅拌混悬液中加入在二噁烷(20ml)中的fmoc-osu(1.22g,3.64mmol)，反应物在相同温度搅拌16小时。然后反应物用水稀释，用乙酸乙酯萃取。分离的有机层用盐水溶液洗涤，经硫酸钠干燥，在减压下蒸发，得到n-[(3-氯-2-{[3-(羟基甲基)吡啶-2-基]硫烷基}-6-(吡啶-4-基)苯基)甲基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯(2g)，将其直接用于下一步骤。lc-ms:580.2[m+h]⁺

向n-[(3-氯-2-{[3-(羟基甲基)吡啶-2-基]硫烷基}-6-(吡啶-4-基)苯基)甲基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯(2.0g,3.45mmol)在dcm:thf(1:1,40ml)中的搅拌溶液中加入mno2(6.0g,69mmol)，反应物于25℃搅拌2小时。反应物经硅藻土垫过滤；滤液在减压下蒸发。将如此获得的粗制品经正相二氧化硅柱采用乙酸乙酯在己烷中的40-80％溶液纯化，得到n-({3-氯-2-[(3-甲酰基吡啶-2-基)硫烷基]-6-(吡啶-4-基)苯基}甲基)氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯(650mg)，为灰白色固体，lcms纯度为90％。lc-ms:577.9[m+h]⁺

1hnmr(400mhz,dmso-d6):δ4.10–4.14(5h,m),7.33–7.46(8h,m),7.58(1h,s),7.65(2h,d,j＝7.3hz),7.73(1h,d,j＝8.3hz),7.89(2h,d,j＝7.4hz),8.35(1h,d,j＝7.7hz),8.48(1h,d,j＝3.1hz),8.59(2h,d,j＝5.5hz),10.21(1h,s)。

中间体30

n-({3-氯-2-[(3-甲酰基吡啶-2-基)硫烷基]-5-(4-氨磺酰基苯基)苯基}甲基)氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯

向化合物n-({5-溴-2-[(3-{[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]甲基}吡啶-2-基)硫烷基]-3-氯苯基}甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(3g,5.19mmol)在二噁烷(30ml)中的搅拌溶液中加入(4-氨磺酰基苯基)硼酸(1.35g,6.7mmol)、na2co3(1.65g,15.5mmol)、水(15ml)，在氩气气氛中脱气10分钟。然后向其中加入pd(pph3)4(300mg,0.26mmol)，再次脱气5分钟。反应物加热至120℃达16小时。然后反应混合物冷却至25℃，经硅藻土垫过滤，用etoac洗涤。分离的有机层用盐水溶液洗涤，经硫酸钠干燥，在减压下浓缩，得到4-{4-[(3-{[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]甲基}吡啶-2-基)硫烷基]-3-氯-5-{[(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基}苯基}苯-1-磺酰胺(3g)，为无色粘性液体。lc-ms:654.0[m+h]⁺

于0℃向4-{4-[(3-{[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]甲基}吡啶-2-基)硫烷基]-3-氯-5-{[(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]甲基}苯基}苯-1-磺酰胺(3g,4.58mmol)在meoh(12ml)中的搅拌溶液中加入hcl在二噁烷中的4m溶液(6ml)，反应混合物于25℃搅拌2小时。反应物在减压下蒸发，得到4-[3-(氨基甲基)-5-氯-4-{[3-(羟基甲基)吡啶-2-基]硫烷基}苯基]苯-1-磺酰胺盐酸盐(2.2g)，将其直接用于下一步骤。lc-ms:435.7[m+h]⁺

于25℃向4-[3-(氨基甲基)-5-氯-4-{[3-(羟基甲基)吡啶-2-基]硫烷基}苯基]苯-1-磺酰胺盐酸盐(2g,4.23mmol)在5％nahco3(20ml)中的搅拌混悬液中在二噁烷(40ml)中的加入fmoc-osu(1.43g,4.23mmol)，反应物在相同温度搅拌2小时。然后反应物用水稀释，用甲醇在二氯甲烷中的10％溶液萃取。分离的有机层用盐水溶液洗涤，经硫酸钠干燥，在减压下蒸发，得到n-[(3-氯-2-{[3-(羟基甲基)吡啶-2-基]硫烷基}-5-(4-氨磺酰基苯基)苯基)甲基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯(2.5g)，为灰白色固体。lc-ms:657.9[m+h]⁺

向n-[(3-氯-2-{[3-(羟基甲基)吡啶-2-基]硫烷基}-5-(4-氨磺酰基苯基)苯基)甲基]氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯(2.5g,3.8mmol)在dcm/thf(1:1,60ml)中的搅拌溶液中加入mno2(6.6g,75.9mmol)，反应物于25℃搅拌2小时。反应物经硅藻土垫过滤，滤液在减压下蒸发。所得粗制物质经二氧化硅柱(sio2；100-200目；乙酸乙酯在己烷中的10-50％溶液)纯化，得到n-({3-氯-2-[(3-甲酰基吡啶-2-基)硫烷基]-5-(4-氨磺酰基苯基)苯基}甲基)氨基甲酸9h-芴-9-基甲基酯(520mg)，为灰白色固体，lcms纯度为95％。lc-ms:654.2[m+h]⁺

1hnmr(400mhz,dmso-d6):δ4.21(1h,d,j＝6.5hz),4.28(2h,d,j＝6.8hz),4.37(2h,d,j＝5.7hz),7.25(2h,t,j＝7.4hz),7.39(4h,q,j＝7.4hz),7.48(2h,s),7.67(2h,d,j＝7.5hz),7.72(1h,s),7.89(4h,dd,j＝12.8,7.0hz),7.93–8.02(1h,m),8.38(1h,d,j＝6.3hz),8.45(1h,d,j＝3.4hz),10.22(1h,s)。

中间体31

3-[(12s,15s,18s)-15-(4-叔丁氧基羰基氨基-丁基)-18-(3-叔丁氧基羰基氨基-丙基)-6-溴-4-氯-13-甲基-11,14,17-三氧代-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3(8),4,6,21,23-六烯-12-基甲基]-吲哚-1-甲酸叔丁基酯

按照用于肽大环合成的通用方法，但是boc-保护基保持不改变(无tfa脱保护)，采用如下起始原料制备中间体135:

氨基酸:

1.fmoc-l-trp(boc)-oh，

2.fmoc-l-lys(boc)-oh，

3.fmoc-l-orn(boc)-oh。

系链:中间体89

ms(m+h)⁺:预测1082.37；实测1082.5

中间体32

3-[(12s,15s,18s)-15-(4-叔丁氧基羰基氨基-丁基)-18-(3-叔丁氧基羰基氨基-丙基)-5-溴-4-氯-13-甲基-11,14,17-三氧代-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3(8),4,6,21,23-六烯-12-基甲基]-吲哚-1-甲酸叔丁基酯

按照用于肽大环合成的通用方法，但是boc-保护基保持不改变(无tfa脱保护)，采用如下起始原料制备中间体136:

氨基酸:

1.fmoc-l-trp(boc)-oh，

2.fmoc-l-lys(boc)-oh，

3.fmoc-l-orn(boc)-oh。

系链:中间体100

ms(m+h)⁺:预测1082.37；实测1082.5

中间体33

3-[(12s,15s,18s)-15-(4-叔丁氧基羰基氨基-丁基)-18-(3-叔丁氧基羰基氨基-丙基)-23-溴-4-氯-13-甲基-11,14,17-三氧代-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3(8),4,6,21,23-六烯-12-基甲基]-吲哚-1-甲酸叔丁基酯

按照用于肽大环合成的通用方法，但是boc-保护基保持不改变(无tfa脱保护)，采用如下起始原料制备中间体137:

氨基酸:

1.fmoc-l-trp(boc)-oh，

2.fmoc-l-lys(boc)-oh，

3.fmoc-l-orn(boc)-oh。

系链:中间体115

ms(m+h)⁺:预测1082.37；实测1082.5

中间体34

3-[(12s,15s,18s)-15-(4-叔丁氧基羰基氨基-丁基)-18-(3-叔丁氧基羰基氨基-丙基)-24-溴-4-氯-13-甲基-11,14,17-三氧代-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3(8),4,6,21,23-六烯-12-基甲基]-吲哚-1-甲酸叔丁基酯

按照用于肽大环合成的通用方法，但是boc-保护基保持不改变(无tfa脱保护)，采用如下起始原料制备中间体138:

氨基酸:

1.fmoc-l-trp(boc)-oh，

2.fmoc-l-lys(boc)-oh，

3.fmoc-l-orn(boc)-oh。

系链:中间体120

ms(m+h)⁺:预测1082.37；实测1082.6

中间体35

1h-吲哚-1-甲酸,3-[[(7s,10s,13s)-17-溴-20-氯-10-[4-[[(1,1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]丁基]-7-[3-[[(1,1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]丙基]-5,6,7,8,9,10,11,12,13,14,15,16-十二氢-12-甲基-8,11,14-三氧代吡啶并[2,3-b][1,5,8,11,14]苯并硫杂四氮杂环十七碳因-13-基]甲基]-,1,1-二甲基乙基酯

按照用于肽大环合成的通用方法，但是boc-保护基保持不改变(无tfa脱保护)，采用如下起始原料制备中间体140:

氨基酸:

1.fmoc-l-trp(boc)-oh，

2.fmoc-l-lys(boc)-oh，

3.fmoc-l-orn(boc)-oh。

系链:中间体59

ms(m+h)⁺:预测1083.3；实测1084.5

按照以下流程制备标题化合物:

步骤1：(2s)-2-(9h-芴-9-基甲氧羰基氨基)-5-羟基-戊酸苄基酯(化合物i141b)的制备

于-10℃向(4s)-5-苄氧基-4-(9h-芴-9-基甲氧羰基氨基)-5-氧代-戊酸(i141a,1.84g,4mmol)和4-甲基吗啉(607mg,0.66ml,6mmol)在干燥thf(20ml)中的混合物中滴加氯甲酸异丁基酯(660mg,4.8mmol)。所得反应混合物于-10℃搅拌2小时，然后倒入nabh4(460mg,12mmol)和冰(10g)的混合物中，搅拌另外30分钟。反应混合物用冰冷的水稀释，用ea萃取两次。合并的有机相进行干燥和浓缩。残余物经硅胶柱纯化，得到化合物i141b(1.34g)。ms(m+h⁺):446。

步骤2：(2s)-5-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基-2-(9h-芴-9-基甲氧羰基氨基)戊酸苄基酯(化合物i141c)的制备

向(2s)-2-(9h-芴-9-基甲氧羰基氨基)-5-羟基-戊酸苄基酯(化合物i141b,1.34g,3mmol)和咪唑(610mg,9mmol)在dcm(15ml)中的混合物中加入叔丁基氯代二甲基硅烷(540mg,3.6mmol)在dcm(5ml)中的溶液。反应混合物于室温搅拌3小时，然后浓缩。残余物溶于pe/ea＝5/1中，用水洗涤。有机相分离和浓缩。残余物经硅胶柱纯化，得到化合物i141c(1.3g)。ms(m+h⁺):560。

步骤3：(2s)-5-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基-2-(9h-芴-9-基甲氧羰基氨基)戊酸(中间体i141)的制备

向(2s)-5-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基-2-(9h-芴-9-基甲氧羰基氨基)戊酸苄基酯(化合物i141c,1.3g,2.3mmol)在etoh/i-proh/h2o＝89/5/6(15ml)中的溶液中加入lindlar催化剂(aldrich,390mg)。反应混合物于40℃在h2气囊下加热5小时。冷却至室温后，将反应混合物过滤。滤液用hcl水溶液(1n)处理至ph＝6，进行浓缩。残余物溶于ea中，用盐水洗涤，干燥和浓缩，得到粗制化合物i141(1.0g)。ms(m+h⁺):470。

用于肽大环合成的通用方法

1.固相肽合成

经由现有技术的固相肽合成方案(fmoc-化学)人工合成了三肽序列，如参考例如kates和albericio编辑,“solidphasesynthesis:apracticalguide”,marceldecker,纽约,巴塞尔,2000。

使用2-氯-三苯甲基氯树脂(1.6meq/g,100-200目)作为固体载体。该树脂在室温装载有在无水dcm中的0.6eq氨基酸和8eqdipea。在用dmf和dcm充分洗涤后，在室温用在dmf中的在dcm/dmf(1:1)中的50％哌啶(新鲜制备)裂解fmoc-基团30分钟。在用dmf、dcm和meoh洗涤后，将树脂在室温真空干燥过夜。经由重量增加确定树脂载量。

第二个氨基酸用作为偶联试剂的4eqmukaiyama-试剂、6eqdipea在dmf/dcm(1:1)中在室温进行偶联过夜。将树脂用dmf和dcm充分洗涤，通过测试-裂解控制偶联速率。

用50％哌啶(25％)/dcm(25％)在dmf中的混合物从二肽裂解fmoc-基团最多5分钟，然后用dmf和dcm洗涤。再次通过测试-裂解控制裂解速率。

第三个氨基酸采用过量的4eq采用4eqhatu作为偶联试剂和6eqdipea进行偶联。在室温进行完全偶联2-4小时，偶联速率再次通过测试-裂解进行控制。

在室温用20％哌啶在dmf中的混合物从三肽裂解fmoc-基团2x15-20分钟，然后用dmf和dcm洗涤(测试-裂解)。

on-beadn-甲基化：

当n-甲基化氨基酸不可购买获得时，将它们在固体载体上如下进行烷基化：

·树脂在thf中溶胀(约10ml/g树脂)。加入12eqdipea，反应混合物在室温振摇15分钟。加入3eq2-硝基苯-1-1磺酰氯，树脂在室温振摇过夜。然后将树脂排干，用dcm和dmf洗涤。偶联速率通过测试-裂解进行控制。

·对于第二个步骤，将树脂混悬于dmf中，加入12eqmtbd(7-甲基-1,5,7-三氮杂双环[4.4.0]癸-5-烯)，反应混合物在室温振摇10分钟。然后加入3eq4-硝基苯磺酸甲基酯，将浆液rt振摇。30分钟后。将树脂排干，用dmf和dcm洗涤。偶联速率通过测试-裂解进行控制。

·对于除去2-硝基苯-1-1磺酰胺保护基，将树脂混悬于dmf中，加入12eqdbu，将浆液振摇5分钟，然后加入12eq巯基乙醇，将反应混合物在室温振摇1小时。将树脂排干，用dmf和dcm洗涤。脱保护速率通过测试-裂解进行控制。

2.还原性胺化：

将具有三肽的树脂用dcm洗涤，相应的中间体溶于nmp/tmof/acoh(49.7/49.7/0.6)的混合物中，溶液加入树脂中。将混合物在室温振摇30min直至3小时，然后加入10eqnacnbh3，反应混合物在室温振摇过夜。最后，将树脂用dmf、dcm、meoh/dcm(1:1)和dmf洗涤。

在室温用20％哌啶在dmf中的混合物裂解系链上的fmoc-基团2x15-20分钟，然后用dmf和dcm洗涤(测试-裂解)。

3.裂解：

将20％hfip在dcm中的裂解混合物加入树脂中，将混合物在室温搅拌2小时。滤出树脂，将溶液蒸发至干。残余物溶于水/乙腈中，冷冻干燥。

4.环化：

将所得粗制线性化合物通过将粉末溶于dmf中进行环化。加入1.2eqhatu和5eqdipea，反应混合物在室温搅拌。反应进程通过hplc监测。完成后，蒸发溶剂，所得残余物溶于水/乙腈(1:1)和冷冻干燥。

5.纯化：

肽大环如下进行纯化：采用反相高效液相色谱法(rp-hplc)，采用reprospher100c18-tde柱(250x20mm,5um粒度)作为固定相，采用水/乙腈作为洗脱剂(梯度40-100％mecn,历经60分钟)。收集级分，通过lc/ms进行分析。合并纯产物样品，进行冷冻干燥。通过质谱法获得产物鉴别。

6.全面脱保护：

最后的boc-脱保护通过在室温用50％tfa(dcm)处理2小时来完成。将反应溶液浓缩，将残余物冷冻干燥，得到脱保护的产物，为tfa盐。所有肽以白色粉末形式获得，纯度>90％。

用于硼酸衍生物至肽大环中间体的铃木(suzuki)偶联的通用方法

在反应试管中，于22℃向被保护的溴化物大环中间体(46.1μmol,eq:1)在二噁烷(1.2ml)中的溶液中加入水(400μl)、继之以碳酸钠(115μmol,eq:2.5)和硼酸衍生物(92.3μmol,eq:2)。通过向反应混合物中充入氩气5分钟使混合物脱气。然后加入四(三苯膦)钯(0)(2.31μmol,eq:0.05)，将试管惰化，密封，反应混合物于80℃搅拌2小时或直至完全转化。

将混合物蒸发，用水(2ml)处理，用dcm萃取(2x2ml)。有机层干燥，蒸发至干，通过制备型hplc纯化，冷冻干燥，得到纯产物，为冷冻干燥固体。

boc-脱保护

于22℃向冷冻干燥固体(15μmol)在dcm(1.6ml)中的溶液中加入tfa(0.4ml)(5.22mmol＝约350eq)，搅拌2小时，得到完全转化。

总共2小时后，将混合物蒸发，残余物溶于acn和h2o(含0.1％tfa)中，使之于22℃静置4小时，冷冻干燥/冻干，得到肽大环，作为白色冻干固体。

实施例1

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-6-氯-12-(1h-吲哚-3-基甲基)-13-甲基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(21),3,5,7,22,24-六烯-11,14,17-三酮

实施例1按照用于肽大环合成的通用方法使用以下起始原料来制备:

氨基酸:

1.fmoc-nme-l-trp(boc)-oh，

2.fmoc-l-lys(boc)-oh，

3.fmoc-l-orn(boc)-oh。

系链:中间体3

ms(m+h)⁺:预测703.3；实测704.3

实施例2

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-5-氯-12-(1h-吲哚-3-基甲基)-13-甲基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(21),3,5,7,22,24-六烯-11,14,17-三酮

实施例2按照用于肽大环合成的通用方法使用以下起始原料来制备:

氨基酸:

1.fmoc-nme-l-trp(boc)-oh，

2.fmoc-l-lys(boc)-oh，

3.fmoc-l-orn(boc)-oh。

系链:中间体2

ms(m+h)⁺:预测703.3；实测704.3

实施例3

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-4-氯-12-(1h-吲哚-3-基甲基)-13-甲基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(21),3,5,7,22,24-六烯-11,14,17-三酮

实施例3按照用于肽大环合成的通用方法使用以下起始原料来制备:

氨基酸:

1.fmoc-nme-l-trp(boc)-oh，

2.fmoc-l-lys(boc)-oh，

3.fmoc-l-orn(boc)-oh。

系链:中间体1

ms(m+h)+:预测703.3；实测705.2

实施例4

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-12-(1h-吲哚-3-基甲基)-13-甲基-5-三氟甲基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(21),3,5,7,22,24-六烯-11,14,17-三酮

实施例4按照用于肽大环合成的通用方法使用以下起始原料来制备:

氨基酸:

1.fmoc-nme-l-trp(boc)-oh，

2.fmoc-l-lys(boc)-oh，

3.fmoc-l-orn(boc)-oh。

系链:中间体6

ms(m+h)+:预测737.3；实测738.4

实施例5

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-12-(6-氯-1h-吲哚-3-基甲基)-13-甲基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(21),3,5,7,22,24-六烯-11,14,17-三酮

实施例5按照用于肽大环合成的通用方法使用以下起始原料来制备:

氨基酸:

1.fmoc-l-6-cl-trp-oh，继之以trpα-n的on-beadn-甲基化，

2.fmoc-l-lys(boc)-oh，

3.fmoc-l-orn(boc)-oh。

系链:中间体4

ms(m+h)⁺:预测703.3；实测704.3

实施例6

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-6-氯-13-甲基-12-(1-甲基-1h-吲哚-3-基甲基)-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(21),3,5,7,22,24-六烯-11,14,17-三酮

实施例6按照用于肽大环合成的通用方法使用以下起始原料来制备:

氨基酸:

1.fmoc-l-trp(nme)-oh，继之以trpα-n的on-beadn-甲基化，

2.fmoc-l-lys(boc)-oh，

3.fmoc-l-orn(boc)-oh。

系链:中间体3

ms(m+h)⁺:预测717.3；实测718.3

实施例7

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-6-氯-12-(6-氯-1h-吲哚-3-基甲基)-13-甲基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(21),3,5,7,22,24-六烯-11,14,17-三酮

实施例7按照用于肽大环合成的通用方法使用以下起始原料来制备:

氨基酸:

1.fmoc-l-6-cl-trp-oh，继之以trpα-n的on-beadn-甲基化，

2.fmoc-l-lys(boc)-oh，

3.fmoc-l-orn(boc)-oh。

系链:中间体3

ms(m+h)+:预测737.3；实测738.3

实施例8

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-6-氯-12-(6-氯-1-甲基-1h-吲哚-3-基甲基)-13-甲基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(21),3,5,7,22,24-六烯-11,14,17-三酮

吲哚氮的n-甲基化经由活化的trpα-n的n-烷基化进行。采用标准hplc纯化条件从实施例18的粗制混合物分离出实施例8。

ms(m+h)+:预测751.3；实测752.3

实施例9

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-6,7-二氯-12-(1h-吲哚-3-基甲基)-13-甲基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-11,14,17-三酮

实施例9按照用于肽大环合成的通用方法使用以下起始原料来制备:

氨基酸:

1.fmoc-nme-l-trp(boc)-oh，

2.fmoc-l-lys(boc)-oh，

3.fmoc-l-orn(boc)-oh。

系链:中间体7

ms(m+h)+:预测737.3；实测738.3

实施例10

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-4-氯-12-(1h-吲哚-3-基甲基)-13-甲基-7-三氟甲基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-11,14,17-三酮

实施例10按照用于肽大环合成的通用方法使用以下起始原料来制备:

氨基酸:

1.fmoc-nme-l-trp(boc)-oh，

2.fmoc-l-lys(boc)-oh，

3.fmoc-l-orn(boc)-oh。

系链:中间体8

ms(m+h)⁺:预测771.3；实测772.2

实施例11

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-4-氯-12-(1h-吲哚-3-基甲基)-13-甲基-6-三氟甲基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-11,14,17-三酮

实施例11按照用于肽大环合成的通用方法使用以下起始原料来制备:

氨基酸:

1.fmoc-nme-l-trp(boc)-oh，

2.fmoc-l-lys(boc)-oh，

3.fmoc-l-orn(boc)-oh。

系链:中间体10

ms(m+h)⁺:预测771.2；实测772.3

实施例12

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-4,6-二氯-23-氟-12-(1h-吲哚-3-基甲基)-13-甲基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-11,14,17-三酮

实施例12按照用于肽大环合成的通用方法使用以下起始原料来制备:

氨基酸:

1.fmoc-nme-l-trp(boc)-oh，

2.fmoc-l-lys(boc)-oh，

3.fmoc-l-orn(boc)-oh。

系链:中间体11

ms(m+h)+:预测755.3；实测756.3

实施例13

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-6-氯-12-(1h-吲哚-3-基甲基)-13-甲基-4-三氟甲基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-11,14,17-三酮

实施例13按照用于肽大环合成的通用方法使用以下起始原料来制备:

氨基酸:

1.fmoc-nme-l-trp(boc)-oh，

2.fmoc-l-lys(boc)-oh，

3.fmoc-l-orn(boc)-oh。

系链:中间体9

ms(m+h)⁺:预测771.3；实测772.3

实施例14

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-6-氯-12-(1h-吲哚-3-基甲基)-4,13-二甲基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-11,14,17-三酮

实施例14按照用于肽大环合成的通用方法使用以下起始原料来制备:

氨基酸:

1.fmoc-nme-l-trp(boc)-oh，

2.fmoc-l-lys(boc)-oh，

3.fmoc-l-orn(boc)-oh。

系链:中间体14

ms(m+h)⁺:预测717.3；实测718.3

实施例15

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-6-氯-13-甲基-12-(2-甲基-1h-吲哚-3-基甲基)-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(21),3,5,7,22,24-六烯-11,14,17-三酮

实施例15按照用于肽大环合成的通用方法使用以下起始原料来制备:

氨基酸:

1.fmoc-2-甲基-l-trp-oh，继之以trpα-n的on-beadn-甲基化，

2.fmoc-l-lys(boc)-oh，

3.fmoc-l-orn(boc)-oh。

系链:中间体3

ms(m+h)+:预测717.3；实测718.3

实施例16

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-4,13-二甲基-12-(2-甲基-1h-吲哚-3-基甲基)-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(21),3,5,7,22,24-六烯-11,14,17-三酮

实施例16按照用于肽大环合成的通用方法使用以下起始原料来制备:

氨基酸:

1.fmoc-2-甲基-l-trp-oh，继之以trpα-n的on-beadn-甲基化，

2.fmoc-l-lys(boc)-oh，

3.fmoc-l-orn(boc)-oh。

系链:中间体5

ms(m+h)⁺:预测697.7；实测698.4

实施例17

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-4,6-二氯-13-甲基-12-(2-甲基-1h-吲哚-3-基甲基)-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(21),3,5,7,22,24-六烯-11,14,17-三酮

实施例17按照用于肽大环合成的通用方法使用以下起始原料来制备:

氨基酸:

1.fmoc-2-甲基-l-trp-oh，继之以trpα-n的on-beadn-甲基化，

2.fmoc-l-lys(boc)-oh，

3.fmoc-l-orn(boc)-oh。

系链:中间体13

ms(m+h)⁺:预测751.3；实测752.3

实施例18

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-6-乙基-12-(1h-吲哚-3-基甲基)-13-甲基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-11,14,17-三酮

实施例18按照用于肽大环合成的通用方法使用以下起始原料来制备:

氨基酸:

1.fmoc-nme-l-trp(boc)-oh，

2.fmoc-l-lys(boc)-oh，

3.fmoc-l-orn(boc)-oh。

系链:中间体16

ms(m+h)⁺:预测997.4；实测998.4

实施例19

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-12-(1h-吲哚-3-基甲基)-13-甲基-6-苯基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-11,14,17-三酮

实施例19按照用于肽大环合成的通用方法使用以下起始原料来制备:

氨基酸:

1.fmoc-nme-l-trp(boc)-oh，

2.fmoc-l-lys(boc)-oh，

3.fmoc-l-orn(boc)-oh。

系链:中间体17

ms(m+h)+:预测745.4；实测746.4

实施例20

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-6-叔丁基-12-(1h-吲哚-3-基甲基)-13-甲基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-11,14,17-三酮

实施例20按照用于肽大环合成的通用方法使用以下起始原料来制备:

氨基酸:

1.fmoc-nme-l-trp(boc)-oh，

2.fmoc-l-lys(boc)-oh，

3.fmoc-l-orn(boc)-oh。

系链:中间体18

ms(m+h)⁺:预测725.4；实测726.4

实施例21

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-12-(1h-吲哚-3-基甲基)-6-异丙基-13-甲基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-11,14,17-三酮

实施例21按照用于肽大环合成的通用方法使用以下起始原料来制备:

氨基酸:

1.fmoc-nme-l-trp(boc)-oh，

2.fmoc-l-lys(boc)-oh，

3.fmoc-l-orn(boc)-oh。

系链:中间体19

ms(m+h)+:预测711.4；实测712.4

实施例22

(11s,14s,17s)-14-(4-氨基-丁基)-11-(3-氨基-丙基)-17-(1h-吲哚-3-基甲基)-16-甲基-23-苯基-25-三氟甲基-2-硫杂-4,10,13,16,19-五氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-12,15,18-三酮

实施例22按照用于肽大环合成的通用方法使用以下起始原料来制备:

氨基酸:

1.fmoc-nme-l-trp(boc)-oh，

2.fmoc-l-lys(boc)-oh，

3.fmoc-l-orn(boc)-oh。

系链:中间体20

ms(m+h⁺):预测806.3；实测807.3

实施例23

(11s,14s,17s)-14-(4-氨基-丁基)-11-(3-氨基-丙基)-17-(1h-吲哚-3-基甲基)-16-甲基-23,25-双-三氟甲基-2-硫杂-4,10,13,16,19-五氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-12,15,18-三酮

实施例23按照用于肽大环合成的通用方法使用以下起始原料来制备:

氨基酸:

1.fmoc-nme-l-trp(boc)-oh，

2.fmoc-l-lys(boc)-oh，

3.fmoc-l-orn(boc)-oh。

系链:中间体21

ms(m+h⁺):预测805.9；实测807.3

实施例24

(11s,14s,17s)-14-(4-氨基-丁基)-11-(3-氨基-丙基)-25-氯-17-(1h-吲哚-3-基甲基)-16-甲基-23-三氟甲基-2-硫杂-7,10,13,16,19-五氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-12,15,18-三酮

实施例24按照用于肽大环合成的通用方法使用以下起始原料来制备:

氨基酸:

1.fmoc-nme-l-trp(boc)-oh，

2.fmoc-l-lys(boc)-oh，

3.fmoc-l-orn(boc)-oh。

系链:中间体22

ms(m+h⁺):预测772.3；实测773.3[(m+h)⁺]

实施例25

(11r,14s,17s)-14-(4-氨基-丁基)-11-(3-氨基-丙基)-25-氯-17-(1h-吲哚-3-基甲基)-24-苯基-2-硫杂-4,10,13,16,19-五氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-12,15,18-三酮

实施例25按照用于肽大环合成的通用方法使用以下起始原料来制备:

氨基酸:

1.fmoc-l-trp(boc)-oh，

2.fmoc-l-lys(boc)-oh，

3.fmoc-d-orn(boc)-oh。

系链:中间体23

ms(m+h)⁺:预测767.32；实测767.33

实施例26

(11s,14s,17s)-14-(4-氨基-丁基)-11-(3-氨基-丙基)-25-氯-17-(1h-吲哚-3-基甲基)-24-苯基-2-硫杂-4,10,13,16,19-五氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-12,15,18-三酮

实施例26按照用于肽大环合成的通用方法使用以下起始原料来制备:

氨基酸:

1.fmoc-l-trp(boc)-oh，

2.fmoc-l-lys(boc)-oh，

3.fmoc-l-orn(boc)-oh。

系链:中间体23

ms(m+h)⁺:预测767.32；实测767.32

实施例27

(11r,14s,17s)-14-(4-氨基-丁基)-11-(3-氨基-丙基)-25-氯-17-(1h-吲哚-3-基甲基)-16-甲基-24-苯基-2-硫杂-4,10,13,16,19-五氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-12,15,18-三酮

实施例27按照用于肽大环合成的通用方法使用以下起始原料来制备:

氨基酸:

1.fmoc-l-nme-trp(boc)-oh，

2.fmoc-l-lys(boc)-oh，

3.fmoc-d-orn(boc)-oh。

系链:中间体23

ms(m+h)⁺:预测781.33；实测781.34

实施例28

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-12-(1h-吲哚-3-基甲基)-13-甲基-6-苯基-4-三氟甲基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-11,14,17-三酮

实施例28按照用于肽大环合成的通用方法使用以下起始原料来制备:

氨基酸:

1.fmoc-l-nme-trp(boc)-oh，

2.fmoc-l-lys(boc)-oh，

3.fmoc-l-orn(boc)-oh。

系链:中间体24

ms(m+h)⁺:预测814.36；实测814.37

实施例29

(11s,14s,17s)-14-(4-氨基-丁基)-11-(3-氨基-丙基)-25-氯-17-(1h-吲哚-3-基甲基)-16-甲基-22-苯基-2-硫杂-4,10,13,16,19-五氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3(8),4,6,21,23-六烯-12,15,18-三酮

实施例29按照用于肽大环合成的通用方法使用以下起始原料来制备:

氨基酸:

1.fmoc-nme-l-trp(boc)-oh，

2.fmoc-l-lys(boc)-oh，

3.fmoc-l-orn(boc)-oh。

系链:中间体25

ms(m+h⁺):预测780.4；实测781.3

实施例30

(12s,15s,18s)-15,18-双-(3-氨基-丙基)-4,6-二氯-12-(1h-吲哚-3-基甲基)-13-甲基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-11,14,17-三酮

实施例30按照用于肽大环合成的通用方法使用以下起始原料来制备:

氨基酸:

1.fmoc-nme-l-trp(boc)-oh，

2.fmoc-l-orn(boc)-oh。

3.fmoc-l-orn(boc)-oh。

系链:中间体15

ms(m+h)⁺:预测724.25；实测724.20

实施例31

(11s,14s,17s)-14-(4-氨基-丁基)-11-(3-氨基-丙基)-25-氯-17-(5-氯-1h-吲哚-3-基甲基)-16-甲基-22-三氟甲基-2-硫杂-4,10,13,16,19-五氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-12,15,18-三酮

实施例31按照用于肽大环合成的通用方法使用以下起始原料来制备:

氨基酸:

1.fmoc-l-nme-5-cl-trp-oh，

2.fmoc-l-lys(boc)-oh，

3.fmoc-l-orn(boc)-oh。

系链:中间体12

ms(m+h)⁺:预测807.25；实测807.39

实施例32

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-4-氯-12-(1h-吲哚-3-基甲基)-13-甲基-6-苯基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-11,14,17-三酮

按照用于硼酸衍生物至肽大环中间体的铃木偶联的通用方法，采用如下起始原料，制备实施例32:

·大环中间体:中间体31

·硼酸衍生物:苯基硼酸

ms(m+h)⁺:预测780.34；实测780.5

实施例33

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-4-氯-6-(2-氯-苯基)-12-(1h-吲哚-3-基甲基)-13-甲基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-11,14,17-三酮

实施例33按照用于硼酸衍生物至肽大环中间体的铃木偶联的通用方法采用如下起始原料来制备:

·大环中间体:中间体31

·硼酸衍生物:(2-氯苯基)硼酸

ms(m+h)⁺:预测814.30；实测814.5

实施例34

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-4-氯-12-(1h-吲哚-3-基甲基)-13-甲基-6-吡啶-3-基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-11,14,17-三酮

实施例34按照用于硼酸衍生物至肽大环中间体的铃木偶联的通用方法采用如下起始原料来制备:

·大环中间体:中间体31

·硼酸衍生物:吡啶-3-基硼酸

ms(m+h)⁺:预测781.33；实测781.6

实施例35

11-(3-氨基-丙基)-25-氯-17-(1h-吲哚-3-基甲基)-16-甲基-23-苯基-2-硫杂-4,10,13,16,19-五氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3(8),4,6,21,23-六烯-12,15,18-三酮

实施例35按照用于肽大环合成的通用方法使用以下起始原料来制备:

1.fmoc-nme-l-trp(boc)-oh，

2.fmoc-l-lys(boc)-oh，

3.fmoc-l-orn(boc)-oh。

系链:中间体26

ms(m+h⁺):预测780.4；实测781.5

实施例36

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-6-溴-4-氯-12-(1h-吲哚-3-基甲基)-13-甲基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-11,14,17-三酮

通过中间体135的boc-脱保护制备实施例36。

ms(m+h)⁺:预测782.22；实测782.3

实施例37

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-4-氯-12-(1h-吲哚-3-基甲基)-13-甲基-6-(1-甲基-1h-咪唑-4-基)-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-11,14,17-三酮

实施例37按照用于硼酸衍生物至肽大环中间体的铃木偶联的通用方法采用如下起始原料来制备:

·大环中间体:中间体31

·硼酸衍生物:1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷2-基)-1h-咪唑

ms(m+h)⁺:预测784.34；实测784.4

实施例38

3-[(11s,14s,17s)-14-(4-氨基-丁基)-17-(1h-吲哚-3-基甲基)-16-甲基-12,15,18-三氧代-23-苯基-25-三氟甲基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-11-基]-丙酰胺

实施例38按照用于肽大环合成的通用方法使用以下起始原料来制备:

氨基酸:

1.fmoc-l-nme-trp(boc)-oh，

2.fmoc-l-lys(boc)-oh，

3.fmoc-l-gln(trt)-oh。

系链:中间体24

ms(m+h)⁺:预测828.34；实测828.6

实施例39

3-[(11s,14s,17s)-11-(3-氨基-丙基)-17-(1h-吲哚-3-基甲基)-16-甲基-12,15,18-三氧代-23-苯基-25-三氟甲基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-14-基]-丙酰胺

实施例39按照用于肽大环合成的通用方法使用以下起始原料来制备:

氨基酸:

1.fmoc-l-nme-trp(boc)-oh，

2.fmoc-l-gln(trt)-oh，

3.fmoc-l-orn(boc)-oh。

系链:中间体24

ms(m+h)⁺:预测814.33；实测814.4

实施例40

(11s,14s,17s)-14-(4-氨基-丁基)-11-(3-氨基-丙基)-25-氯-23-(2-氯-吡啶-4-基)-17-(1h-吲哚-3-基甲基)-16-甲基-2-硫杂-4,10,13,16,19-五氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(21),3,5,7,22,24-六烯-12,15,18-三酮

实施例40按照用于肽大环合成的通用方法使用以下起始原料来制备:

1.fmoc-nme-l-trp(boc)-oh，

2.fmoc-l-lys(boc)-oh，

3.fmoc-l-orn(boc)-oh。

系链:中间体27

ms(m+h⁺):预测815.8；实测816.6

实施例41

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-5-溴-4-氯-12-(1h-吲哚-3-基甲基)-13-甲基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-11,14,17-三酮

通过中间体32的boc-脱保护制备实施例41。

ms(m+h)⁺:预测782.22；实测782.5

实施例42

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-4-氯-12-(1h-吲哚-3-基甲基)-13-甲基-5-苯基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-11,14,17-三酮

实施例42按照用于硼酸衍生物至肽大环中间体的铃木偶联的通用方法采用如下起始原料来制备:

·大环中间体:中间体32

·硼酸衍生物:苯基硼酸

ms(m+h)⁺:预测780.34；实测780.5

实施例43

(8s,11s,14s)-8-((1h-吲哚-3-基)甲基)-11-(4-氨基丁基)-14-(3-氨基丙基)-3-氯-9-甲基-5,6,8,9,11,12,15,16-八氢苯并[b]吡啶并[3,2-p][1,5,8,11,14]硫杂四氮杂环十七碳因-7,10,13(14h)-三酮

类似于用于肽大环合成的通用方法，采用如下试剂/条件，制得该物质：氨基酸：fmoc-nme-l-trp(boc)-oh、fmoc-l-lys(boc)-oh、fmoc-l-orn(boc)-oh。还原性胺化：1.2当量中间体106，在作为溶剂混合物的nmp/meoh/acoh1:1:0.012中。大环化：1.2当量hatu，4当量dipea,在dcm中,在室温，1小时。脱保护：dcm/tfa1:1,然后真空浓缩和在乙腈/水1:1中搅拌。获得标题化合物，为浅黄色泡沫(46mg)。msesi(m/z):705.5[(m+h)⁺]

实施例44

(11s,14s,17s)-14-(4-氨基-丁基)-11-(3-氨基-丙基)-25-氯-23-(2-氯-吡啶-4-基)-16-甲基-17-(2-甲基-1h-吲哚-3-基甲基)-2-硫杂-4,10,13,16,19-五氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3(8),4,6,21,23-六烯-12,15,18-三酮

实施例44按照用于肽大环合成的通用方法使用以下起始原料来制备:

1.(s)-2-(9h-芴-9-基甲氧基羰基氨基)-3-(2-甲基-1h-吲哚-3-基)-丙酸，

2.fmoc-l-lys(boc)-oh，

3.fmoc-l-orn(boc)-oh。

系链:中间体27

ms(m+h⁺):预测829.9；实测830.3

实施例45

(11s,14s,17s)-14-(4-氨基-丁基)-11-(3-氨基-丙基)-23-(3-苄氧基-丙-1-炔基)-25-氯-17-(1h-吲哚-3-基甲基)-16-甲基-2-硫杂-4,10,13,16,19-五氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3(8),4,6,21,23-六烯-12,15,18-三酮

实施例45按照用于肽大环合成的通用方法使用以下起始原料来制备:

1.fmoc-nme-l-trp(boc)-oh，

2.fmoc-l-lys(boc)-oh，

3.fmoc-l-orn(boc)-oh。

系链:中间体28

ms(m+h⁺):预测848.5；实测849.4

实施例46

(8s,11s,14s)-8-((1h-吲哚-3-基)甲基)-11-(4-氨基丁基)-14-(3-氨基丙基)-9-甲基-2-吗啉代-5,6,8,9,11,12,15,16-八氢苯并[b]吡啶并[3,2-p][1,5,8,11,14]硫杂四氮杂环十七碳因-7,10,13(14h)-三酮

类似于用于肽大环合成的通用方法，采用如下试剂/条件，制得该物质：氨基酸：fmoc-nme-l-trp(boc)-oh、fmoc-l-lys(boc)-oh、fmoc-l-orn(boc)-oh。还原性胺化:0.9当量中间体112，在nmp/meoh/acoh1:1:0.012作为溶剂混合物中。大环化：1.2当量hatu，4当量dipea，在dcm中，在室温，1小时。脱保护：dcm/tfa1:1。获得标题化合物，为白色粉末(16mg)。msesi(m/z):756.6[(m+h)⁺]

实施例47

(11s,14s,17s)-14-(4-氨基-丁基)-11-(3-氨基-丙基)-25-氯-16-甲基-17-(2-甲基-1h-吲哚-3-基甲基)-22-吡啶-4-基-2-硫杂-4,10,13,16,19-五氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3(8),4,6,21,23-六烯-12,15,18-三酮

实施例47按照用于肽大环合成的通用方法使用以下起始原料来制备:

1.(s)-2-(9h-芴-9-基甲氧基羰基氨基)-3-(2-甲基-1h-吲哚-3-基)-丙酸，

2.fmoc-l-lys(boc)-oh，

3.fmoc-l-orn(boc)-oh。

系链:中间体29

ms(m+h⁺):预测795.4；实测796.4

实施例48

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-23-溴-4-氯-12-(1h-吲哚-3-基甲基)-13-甲基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-11,14,17-三酮

实施例48通过中间体33的boc-脱保护来制备。

ms(m+h)⁺:预测782.22；实测782.2

实施例49

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-4-氯-12-(1h-吲哚-3-基甲基)-13-甲基-23-苯基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-11,14,17-三酮

实施例49按照用于硼酸衍生物至肽大环中间体的铃木偶联的通用方法采用如下起始原料来制备:

·大环中间体:中间体33

·硼酸衍生物:苯基硼酸

ms(m+h)⁺:预测780.34；实测780.5

实施例50

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-23-(4-氨基甲基-苯基)-18-(3-氨基-丙基)-4-氯-12-(1h-吲哚-3-基甲基)-13-甲基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-11,14,17-三酮

实施例50按照用于硼酸衍生物至肽大环中间体的铃木偶联的通用方法采用如下起始原料来制备:

·大环中间体:中间体33

·硼酸衍生物:(4-(((叔丁氧基羰基)氨基)甲基)苯基)硼酸

ms(m+h)⁺:预测809.36；实测809.7

实施例51

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-24-溴-4-氯-12-(1h-吲哚-3-基甲基)-13-甲基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-11,14,17-三酮

实施例51通过中间体34的boc-脱保护来制备。

ms(m+h)⁺:预测782.22；实测782.3

实施例52

(12s,15s,18s)-15-(4-氨基-丁基)-18-(3-氨基-丙基)-4-氯-12-(1h-吲哚-3-基甲基)-13-甲基-24-苯基-2-硫杂-10,13,16,19-四氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3,5,7,21,23-六烯-11,14,17-三酮

实施例52按照用于硼酸衍生物至肽大环中间体的铃木偶联的通用方法采用如下起始原料来制备:

·大环中间体:中间体34

·硼酸衍生物:苯基硼酸

ms(m+h)⁺:预测780.34；实测780.5

实施例53

4-[(11s,14s,17s)-14-(4-氨基-丁基)-11-(3-氨基-丙基)-25-氯-16-甲基-17-(2-甲基-1h-吲哚-3-基甲基)-12,15,18-三氧代-2-硫杂-4,10,13,16,19-五氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3(8),4,6,21,23-六烯-23-基]-苯磺酰胺

实施例53按照用于肽大环合成的通用方法使用以下起始原料来制备:

1.(s)-2-(9h-芴-9-基甲氧基羰基氨基)-3-(2-甲基-1h-吲哚-3-基)-丙酸，

2.fmoc-l-lys(boc)-oh，

3.fmoc-l-orn(boc)-oh。

系链:中间体30

ms(m+h⁺):预测873.5；实测874.3

实施例54

(11s,14s,17s)-14-(4-氨基-丁基)-22-[3-(2-氨基-乙基)-苯基]-11-(3-氨基-丙基)-25-氯-17-(1h-吲哚-3-基甲基)-16-甲基-2-硫杂-4,10,13,16,19-五氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3(8),4,6,21,23-六烯-12,15,18-三酮

实施例54按照用于硼酸衍生物至肽大环中间体的铃木偶联的通用方法采用如下起始原料来制备:

·大环中间体:中间体35

·硼酸衍生物:(3-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)乙基)苯基)硼酸

ms(m+h⁺):预测823.4；实测824.3

实施例55

(11s,14s,17s)-14-(4-氨基-丁基)-11-(3-氨基-丙基)-25-氯-17-(1h-吲哚-3-基甲基)-16-甲基-22-(4-哌嗪-1-基-苯基)-2-硫杂-4,10,13,16,19-五氮杂-三环[19.4.0.0*3,8*]二十五碳-1(25),3(8),4,6,21,2-六烯-12,15,18-三酮

实施例55按照用于硼酸衍生物至肽大环中间体的铃木偶联的通用方法采用如下起始原料来制备:

·大环中间体:中间体35

·硼酸衍生物:[4-(4-叔丁氧基羰基哌嗪-1-基)苯基]硼酸

ms(m+h⁺):预测864.4；实测865.4

实施例56

抗微生物敏感性测试：

最小抑制浓度(mic)测定

通过按照“临床和实验室标准协会指导”(clinicalandlaboratorystandardinstituteguidelines,clsi-m07-a92012年1月.methodsfordilutionantimicrobialsusceptibilitytestsforbacteriathatgrowaerobically；approvedstandard–第9版,clinicalandlaboratorystandardsinstitue,wayne/pa,us和clsi-m100-s242014年1月.performancestandardsforantimicrobialsusceptibilitytesting；approvedstandard–fourthinformationalsupplement,clinicalandlaboratorystandardsinstitue,wayne/pa,us)进行的微量肉汤最小抑菌浓度(mic)方法测定了化合物的体外抗微生物活性。

对于mic测定，通过将干燥化合物在50:50水:dmso中重构，以10x所需最高浓度(即以1280mg/l)新鲜制备了化合物储备溶液。

聚苯乙烯未处理的96孔微量滴定板用于制备含有化合物的组，所述化合物在阳离子调节的muellerhinton肉汤培养基(camhb)中以最终测试浓度的两倍进行两倍系列稀释(例如从64至0.06μg/ml)。

接种物通过“直接集落混悬方法”制备。将绿脓杆菌atcc27853或临床分离物的集落混悬于盐水溶液中，调节至0.5mcfarland，在camhb肉汤中稀释100倍，向各孔加入50μl(各孔最终浓度～5x10⁽⁵⁾cfu/ml和最终体积/孔为100μl)。将微量滴定板密封，于35±2℃孵育。

孵育2小时后读取mic值，将其记录为抑制多于或等于80％微生物生长(如通过裸眼或采用微量滴定板光密度读数器(od600nm)所检测)的抗微生物的最低浓度。

表1提供了对抗绿脓杆菌atcc27853所获得的最小抑菌浓度(mic)，以本发明的化合物的微克/毫升表示(表1)。

实施例57

抗微生物敏感性测试：

50％生长抑制浓度(ic50)测定

按照如下方法供选地测定了化合物的体外抗微生物活性：

分析采用10-点iso-sensitest肉汤培养基来定量测定化合物对抗绿脓杆菌nctc11454的体外活性。

将在dmso中的储备化合物在384孔微量滴定板中两倍系列稀释(例如从50至0.097μm最终浓度)，在iso-sensitest培养基中用49μl细菌混悬液进行接种以具有～5x10⁽⁵⁾cfu/ml的最终孔浓度，最终体积/孔为50ul/孔。将微量滴定板于35±2℃孵育。

历经16小时的时间段，每20分钟测定λ＝600nm处的光密度以确定细菌孔生长。

确定50％(ic50)和90％(ic90)生长抑制浓度来计算细菌孔的对数生长期间的生长抑制。

表2提供了对抗绿脓杆菌nctc11454所获得的50％生长抑制浓度(ic50)，以本发明的化合物的微摩尔/升表示。

特别地，本发明的化合物呈现出ic50(绿脓杆菌nctc11454)≤25μmol/l。

更特别地，本发明的化合物呈现出ic50(绿脓杆菌nctc11454)≤10μmol/l。

最特别地，本发明的化合物呈现出ic50(绿脓杆菌nctc11454)≤5μmol/l。

表1.对抗绿脓杆菌atcc27853所获得的最小抑菌浓度(mic)，以本发明的化合物的微克/毫升表示。

表2.对抗绿脓杆菌nctc11454获得的以本发明的化合物的微摩尔/升表示的50％生长抑制浓度(ic50)。