心，收集上清液备用。
[0018] 将步骤（3)变更为：将经过预处理的猪苓水提液在0. 15MPa操作压力下，先经孔 径为50000的超滤膜浓缩，得到浓缩液为相对分子量大于50000的水溶液和透过该超滤膜 的渗透液；再将操作压力从〇. 13MPa逐渐升高至0. 15MPa，用孔径为5000的超滤膜，将透过 50000超滤膜的渗透液进行浓缩处理，得到浓缩液为相对分子量大于5000物质的水溶液和 透过该超滤膜的渗透液； 步骤（5)变更为：将相对分子量为5000-50000的浓缩液预冷至-40°C，在升华温度 为30°C、解析干燥温度为60°C的冷冻干燥条件下进行干燥，得到外观呈淡褐色的分子量为 5000-50000 的猪苓多糖 9. 90g。
[0019] 、一种猪苓多糖的制备方法，包括以下步骤： (1) 猪苓水提液的制备：称取300g猪苓药材粉碎，依次用石油醚、乙酸乙酯、乙醇各 500g室温条件下浸提脂溶性成分，滤过，沉淀在35°C挥去残余有机溶剂，加入60000g水， 35°C加热提取，提取2次，每次lh，过滤，合并滤液，备用； (2) 猪苓水提液过膜前预处理：向猪苓水提液中加入微晶纤维素200g，沉淀12小时，离 心，收集上清液备用。
[0020] 将步骤（4)变更为：经过孔径为5000超滤膜纯化的渗透液，先将操作压力从 0. 25MPa逐渐升高至0. 35MPa，经过孔径为800的纳滤膜进行浓缩，得到浓缩液为相对分子 量大于800的水溶液和透过该纳滤膜的渗透液；； 步骤（5)变更为：将相对分子量为800-5000的浓缩液预冷至-40°C，在升华温度为 20°C、解析干燥温度为60°C的冷冻干燥条件下进行干燥，得到外观呈淡褐色的分子量为 800-5000的猪苓多糖6. 30g。
[0021] 、一种猪苓多糖的制备方法，包括以下步骤： (1)猪苓水提液的制备：称取300g猪苓药材粉碎，依次用石油醚、乙酸乙酯、乙醇各 500g室温条件下浸提脂溶性成分，滤过，沉淀在35°C挥去残余有机溶剂，加入60000g水， 35°C加热提取，提取2次，每次lh，过滤，合并滤液，备用； (2)猪苓水提液过膜前预处理：向猪苓水提液中加入微晶纤维素200g，沉淀12小时，离 心，收集上清液备用。
[0022] 将步骤（4)变更为：经过孔径为5000超滤膜纯化的渗透液，在0. 35MPa的操作压 力下，先经孔径为800的纳滤膜进行浓缩，得到浓缩液为相对分子量大于800的水溶液和透 过该纳滤膜的渗透液；再将操作压力从〇. 25MPa逐渐升高至0. 35MPa，用孔径为400的纳滤 膜，将透过800纳滤膜的渗透液进行浓缩处理，得到浓缩液为相对分子量大于400的水溶液 和透过该超滤膜的渗透液； 步骤（5)变更为：将相对分子量为400-800的浓缩液预冷至-40°C，在升华温度为 15°C、解析干燥温度为70°C的冷冻干燥条件下进行干燥，得到外观呈淡褐色的分子量为 400-800的猪苓多糖17. 25g。
[0023] 、一种猪苓多糖的制备方法，包括以下步骤： (1) 猪苓水提液的制备：称取300g猪苓药材粉碎，依次用石油醚、乙酸乙酯、乙醇各 500g室温条件下浸提脂溶性成分，滤过，沉淀在35°C挥去残余有机溶剂，加入60000g水， 35°C加热提取，提取2次，每次lh，过滤，合并滤液，备用； (2) 猪苓水提液过膜前预处理：向猪苓水提液中加入微晶纤维素200g，沉淀12小时，离 心，收集上清液备用。
[0024] 将步骤（4)变更为：经过孔径为5000超滤膜的渗透液，在0? 35MPa的操作压力下， 先经过孔径为800的纳滤膜进行浓缩，得到浓缩液为相对分子量大于800的水溶液和透过 该纳滤膜的渗透液；再用孔径为400的纳滤膜，将透过800纳滤膜的渗透液进行浓缩处理， 得到浓缩液为相对分子量大于400的水溶液和透过该超滤膜的渗透液；最后将操作压力从 0. 25MPa逐渐升高至0. 35MPa，用孔径为200的纳滤膜，将透过400纳滤膜的渗透液进行浓 缩处理，得到浓缩液； 步骤（5)变更为：将相对分子量为200-400的浓缩液预冷至-40°C，在升华温度为 15°C、解析干燥温度为70°C的冷冻干燥条件下进行干燥，得到外观呈淡褐色的分子量为 200-400的猪苓多糖15. 90g。
[0025] 、一种猪苓多糖的制备方法，包括以下步骤： 将6中通过孔径为200的纳滤膜的渗透液预冷至_40°C，在升华温度为15°C、解析干燥 温度为70°C的冷冻干燥条件下进行干燥，得到外观呈淡褐色的分子量小于200的猪苓多糖 6. 60g〇
[0026] 通过测定2-7各段浓缩液中不同分子量猪苓多糖含量，结果如下：
【主权项】
1. 一种猪苓多糖的制备方法，包括以下步骤： (1) 猪苓水提液的制备：取猪苓药材粉末1份，依次用I. 3-2. O份石油醚、I. 3-2. O乙酸 乙酯、I. 3-2. O乙醇，室温条件下浸提脂溶性成分，滤过，沉淀在30-40°C温度条件下挥去残 余溶剂后，加入150-250份水，30-45°C加热提取，提取2次，每次lh，过滤，合并滤液； (2) 猪苓水提液过膜前预处理：向猪苓水提液中加入0. 3-1份微晶纤维素，沉淀12小 时，离心，收集上清液； (3) 超滤膜浓缩猪苓水提液：经过预处理后的猪苓水提液，在操作压力0. 13-0. 15MP 下，用孔径为50000的超滤膜进行浓缩，得到相对分子量大于50000的水溶液和透过该超滤 膜的渗透液；再用孔径为5000的超滤膜，将透过50000超滤膜的渗透液进行浓缩处理，得到 浓缩液为相对分子量大于5000的水溶液和透过该超滤膜的渗透液； (4) 纳滤膜浓缩猪苓水提液：在操作压力0. 25-0. 35MPa下，经过孔径为5000超滤膜的 渗透液通过孔径为800的纳滤膜进行浓缩，得到浓缩液为相对分子量大于的800水溶液和 透过该纳滤膜的渗透液；再用孔径为400的纳滤膜，将透过800纳滤膜的渗透液进行浓缩处 理，得到浓缩液为相对分子量大于400的水溶液和透过该超滤膜的渗透液； (5) 浓缩液冷冻干燥成猪苓多糖制品：将经过孔径800未经过孔径400的浓缩液进行 预冷处理，通过冷冻干燥的方法进行干燥，除去水分，即得猪苓多糖分子量为400-800。
2. 根据权利要求1所述的猪苓多糖的制备方法，其中：所述冷冻干燥采用预冷温度 为-40°C，升华温度为15-30°C，解析干燥温度为60-70°C。
【专利摘要】本发明公开了一种猪苓多糖的制备方法，该方法提供了一种膜分离技术与冷冻干燥技术相结制备猪苓多糖的方法，该多糖是由分子量为400-800的猪苓多糖组成，包括以下步骤：猪苓水提液的制备；猪苓水提液过膜前处理；超滤膜浓缩猪苓水提液；浓缩液冷冻干燥成猪苓多糖制品。实验结果表明，本发明所提供的制备方法得到的分子量为400-800的猪苓多糖含量较高，可达91.12%，且具有较高的生物活性。具有操作简单、步骤少、成本低、适合工业化生产的特点。
【IPC分类】C08B37-00
【公开号】CN104558230
【申请号】CN201410847152
【发明人】陆宽, 刘建华, 汪凯沙, 高玉琼, 霍昕, 杨迺嘉
【申请人】贵州省科晖制药厂
【公开日】2015年4月29日
【申请日】2014年12月31日