具有抑制血管紧张素酶作用的鼠李糖乳杆菌和用图
【技术领域】
[0001] 本发明通过优选所获得一种鼠李糖乳杆菌HLH20120717(Lactobacillus rhamnosusHLH20120717)，用于发酵制备具有抑制血管紧张素酶（ACE)作用的豆浆和相关 食品。
【背景技术】
[0002] 随着世界经济的不断发展，人们的生活水平提高，以高血压为代表的心血管疾病 的危害日益加重。采取一切预防措施、治疗手段，控制高血压的发生、发展，以合理应用降压 药物降低其患病率和死亡率已成为国际针对高血压的共识。目前临床上主要治疗高血压的 药物如利尿剂、0 _受体阻断剂、钙通道阻断剂、血管紧张素转换酶抑制剂、血管紧张素II受 体阻断剂等。但都有一定的副作用或不良反应，易引肝肾功能危害，作为预防用药或长期服 用就更加不合理。
[0003]目前，对应高血压的发病因素，可通过改善不良生活习惯、合理膳食、加强健康教 育等方式最大限度的预防高血压的发生，已成为世界宣传的重点，以功能性的食品来达到 预防、治疗高血压的双重目的，其中益生菌及其产品的开发比较热门。
[0004] 我国对益生菌的研究和应用起步比较晚，政府和地方高度重视，目前已被列入国 家高新技术研究发展计划的重点支持项目。但研究和开发具有血管紧张素转化酶（ACE)抑 制活性的益生菌制品报道还是比较少，随着相关生物技术、保健医学学科等研究的不断深 入，高血压新的生物活性成分、功能基因、功能蛋白等作用新靶点的相继发现，为筛选出高 效降压、安全、高活性的益生菌产品提供了基础条件。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是提供一株发酵具有抑制血管紧张素酶（ACE)作用豆浆的鼠李糖 乳杆菌HLH20120717(LactobacillusrhamnosusHLH20120717)，为进一步研究开发预防 和治疗高血压的益生菌功能性保健食品和药品提供基础。
[0006] 上述目的通过以下技术方案实现： 一种来源于发酵豆浆具有抑制血管紧张素酶（ACE)作用的鼠李糖乳杆菌，由采集 于自然发酵豆制品中，经分离、纯化、物理诱变、优选获得的高活性菌株，菌学分类名称 actobacillusrhamnosusHLH20120717,菌学特性为：置于37°C恒温培养箱的培养基中进 行培养，通过培养发现稀释浓度为10-5时菌生长较良好，菌落分散；在相同条件下菌落生 长有大有小，菌落呈圆形，乳白色，边缘整齐，表面光滑，其中较小的菌落微黄色；保藏号为： CGMCCNo. 7084。
[0007] 所述的来源于发酵豆浆具有抑制血管紧张素酶（ACE)作用的鼠李糖乳杆菌，其菌 学特性还包括：革兰氏染色结果呈阳性；芽孢染色菌体呈绿色；接触酶试验中没有气泡产 生；溶钙圈法培养观察到菌落周围出现透明圈，具备明显乳酸菌的特征。
[0008] 所述的来源于发酵豆浆具有抑制血管紧张素酶（ACE)作用的鼠李糖乳杆菌，经 16SrDNA部分序列在线进行BLAST比对，结果具有Lactobacillus菌属rhamnosus菌种的 主要遗传特性： 16SrDNA测序部分序列如下所示：
【主权项】
1. 一种来源于发酵豆浆具有抑制血管紧张素酶（AC巧作用的鼠李糖乳杆菌，其特征 是：由采集于自然发酵豆制品中，经分离、纯化、物理诱变、优选获得的高活性菌株，菌学分 类名称actobacillus rhamnosus HLH 20120717,菌学特性为；置于37°C恒温培养箱的培养 基中进行培养，通过培养发现稀释浓度为1(^5时菌生长较良好，菌落分散；在相同条件下菌 落生长有大有小，菌落呈圆形，乳白色，边缘整齐，表面光滑，其中较小的菌落微黄色；保藏 号为；CGMCC No. 7084。
2. 根据权利要求1所述的来源于发酵豆浆具有抑制血管紧张素酶（AC巧作用的鼠李糖 乳杆菌，其特征是：其菌学特性还包括：革兰氏染色结果呈阳性；芽抱染色菌体呈绿色；接 触酶试验中没有气泡产生；溶巧圈法培养观察到菌落周围出现透明圈，具备明显乳酸菌的 特征。
3. 根据权利要求1或2所述的来源于发酵豆浆具有抑制血管紧张素酶（AC巧作 用的鼠李糖乳杆菌，其特征是：经16S rDNA部分序列在线进行BLAST比对，结果具有 Lactobacillus菌属rhamnosus菌种的主要遗传特性： 16S rDNA测序部分序列如下所示： <110〉黑龙江大学 <120〉来源于发酵豆浆具有抑制血管紧张素酶（AC巧作用的鼠李糖乳杆菌 <141〉日期 <160>1 <210>Lactobacillus rhamnosus HLH 20120717 <211>1562 <212>RNA <213〉鼠李糖乳杆菌 <223〉n = a 或 g 或 C 或 t <400〉核巧酸序列和/或氨基酸序列
4. 根据权利要求1或2或3所述的来源于发酵豆浆具有抑制血管紧张素酶（AC巧作用 的鼠李糖乳杆菌，其特征是：所述培养基处方为：
所述的比例为重量份数比。
5. -种利用权利要求1或2或3或4所述的鼠李糖乳杆菌制作的豆浆，其特征是；将 权利要求1或2或3或4所述的菌株接种于经大豆浸泡，研磨、匀浆、煮沸，过滤、高温灭菌 制得的豆浆中，37C -42C发酵24小时W上，制得酸豆浆。
6. -种权利要求5所述的豆浆的制作方法，其特征是： 称取lOOg大豆清洗后放于250血自来水中于室温下浸泡12h ;经去皮后，清水洗净， 将浸泡好的大豆W重量比1 : 8的豆水比用组织捣碎机磨浆，加热至沸腾10分钟后用，H 层纱布过滤后。倒入H角烧瓶中于12rC灭菌15min，纱布封口冷却后，无菌条件下用接种 环挑去MRS试管斜面培养的李糖乳杆菌HLH 20120717菌落五环，振摇均匀后，放置在37C 培养12小时，冷却至室温，后放入冰箱4C冷存，作为备用的豆浆； 同上称取2000g大豆清洗后放于50000血自来水中于室温下浸泡12h ;经去皮后，清 水洗净，将浸泡好的大豆: 8重量比的豆水比用豆浆机磨浆，加热至沸腾后，离也过滤 出去豆渣；经己±灭菌器135C灭菌10砂快速灭菌，置于清洗灭菌好的发酵罐中，按5%体
积比例加入上述备用的发酵豆浆，W 30r/min，37-4CTC的发酵2小时，而后分装、密封到酸 奶塑料杯里，室温发酵12小时后，放入冰箱4C冷存； 剩余部分置于清洗灭菌好的大烧杯中，纱布封口后室温发酵24个小时W上，当抑达 到4. 9 W下，酸豆浆呈凝固状，揽拌器将酸豆浆都揽成可流动性状，平铺2cm厚度的法巧盘 中，-4(TC到3(TC冷冻干燥，成松脆黄色固体状，粉碎成100目的粉末，经凯氏定氮法测定蛋 白含量47%。密封低温干燥保存。
7. -种将权利要求1或2或3或4所述的来源于发酵豆浆具有抑制血管紧张素酶 (AC巧作用的鼠李糖乳杆菌，用于制作抑制血管紧张素酶（ACE)、用于制作预防和治疗高血 压的保健食品和药品的用途。
【专利摘要】具有抑制血管紧张素酶作用的鼠李糖乳杆菌和用途，随着相关生物技术、保健医学学科等研究的不断深入，高血压新的生物活性成分、功能基因、功能蛋白等作用新靶点的相继发现，为筛选出高效降压、安全、高活性的益生菌产品提供了基础条件。本发明由采集于自然发酵豆制品中，经分离、纯化、物理诱变、优选获得的高活性菌株，菌学分类名称actobacillus rhamnosus HLH 20120717，菌学特性为：置于37℃恒温培养箱的培养基中进行培养，通过培养发现稀释浓度为10-5时菌生长较良好，菌落分散；在相同条件下菌落生长有大有小，菌落呈圆形，乳白色，边缘整齐，表面光滑，其中较小的菌落微黄色；保藏号为：CGMCC No.7084。本发明为进一步研究开发预防和治疗高血压的益生菌功能性保健食品和药品提供基础。CGMCC No.708420130104
【IPC分类】A61K35-747, C12R1-225, C12N1-20, A23C11-10, A61P9-12
【公开号】CN104593307
【申请号】CN201510088465
【发明人】邹积宏, 刘红梅, 贺龙惠, 袁杰利, 金涛, 姜岸
【申请人】黑龙江大学
【公开日】2015年5月6日
【申请日】2015年2月26日