0032](2)将底物、纤维素水解酶和水按比例为8g:6FPU:70g混合，调节pH至4.5，进行酶解，酶解12h ；
[0033](3)无菌操作，向步骤(2)获得的混合液接种酿酒酵母，使浓度为2g/L，进行同步糖化共发酵，在30°C，150rpm条件下，发酵144h，从发酵开始，间隔24h补加I次底物、纤维素水解酶和酿酒酵母，底物和纤维素水解酶补加5次，从发酵开始48h开始补加酿酒酵母，酿酒酵母补加2次，底物每次补加量为4g，纤维素水解酶每次补加量为2FPU，酿酒酵母每次补加使浓度为2g/L，固液分离，得到富含乙醇的发酵液体；发酵液体最终乙醇浓度为30.2g/Lo
[0034]实施例3:
[0035]—种发酵生产乙醇的方法，包括如下步骤:
[0036](I)将高粱秸杆按质量比为1:10的比例浸于质量分数为1.0%稀硫酸中，在200 0C，进行浸泡预处理6min，得到固液混合物，分离，得到预处理后的底物；
[0037](2)将底物、纤维素水解酶和水按比例为4g:2FPU:50g混合，调节pH至5.5，进行酶解，酶解48h ；
[0038](3)无菌操作，向步骤(2)获得的混合液接种酿酒酵母，使浓度为4g/L，进行同步糖化共发酵，在34°C，150rpm条件下，发酵72h，从发酵开始，间隔12h补加5次底物、纤维素水解酶和酿酒酵母，底物和纤维素水解酶共补加5次，从发酵开始48h开始补加酿酒酵母，酿酒酵母补加I次，底物每次补加量为8g，纤维素水解酶每次补加量为6FPU，酿酒酵母每次补加使浓度为4g/L，固液分离，得到富含乙醇的发酵液体；发酵液体最终乙醇浓度为40.3g/Lo
[0039]实施例4:
[0040]一种发酵生产乙醇的方法，包括如下步骤:
[0041](I)将玉米秸杆按质量比为1:5的比例浸于质量分数为2.0%稀硫酸中，在185°C，进行浸泡预处理4min，得到固液混合物，分离，得到预处理后的底物；
[0042](2)将底物、纤维素水解酶和水按比例为8g: 2FPU: 70g混合，调节pH至4.5，进行酶解，酶解48h ;从酶解开始，每间隔24h补加I次底物和纤维素水解酶，补加3次，每次补加4g底物和2FPU纤维素水解酶；
[0043](3)无菌操作，向步骤(2)获得的混合液接种酿酒酵母，使浓度为3g/L，进行同步糖化共发酵，在33°C，150rpm条件下，发酵120h，从发酵开始，间隔12h补加I次底物、纤维素水解酶和酿酒酵母，底物和纤维素水解酶共补加2次，从发酵开始48h开始补加酿酒酵母，酿酒酵母补加2次，底物每次补加量为4g，纤维素水解酶每次补加量为4FPU，酿酒酵母每次补加使浓度为3g/L，固液分离，得到富含乙醇的发酵液体；发酵液体最终乙醇浓度为28.5g/Lo
[0044]实施例5:
[0045]—种发酵生产乙醇的方法，包括如下步骤:
[0046](I)将水稻秸杆按质量比为1:7的比例浸于质量分数为1.5%稀硫酸中，在190°C，进行浸泡预处理5min，得到固液混合物，分离，得到预处理后的底物；
[0047](2)将底物、纤维素水解酶和水按比例为6g:4FPU:80g混合，调节pH至4.8，进行酶解，酶解48h ;从酶解开始，每间隔6h补加I次底物和纤维素水解酶，共补加3次，每次补加4g底物和2FPU纤维素水解酶；
[0048](3)无菌操作，向步骤(2)获得的混合液接种酿酒酵母，使浓度为4g/L，进行同步糖化共发酵，在30°C，150rpm条件下，发酵96h，从发酵开始，间隔12h补加I次底物、纤维素水解酶和酿酒酵母，底物和纤维素水解酶共补加4次，酿酒酵母补加2次，底物每次补加量为6g，纤维素水解酶每次补加量为4FPU，从发酵开始48h开始补加酿酒酵母，酿酒酵母每次补加使浓度为3g/L，固液分离，得到富含乙醇的发酵液体；发酵液体最终乙醇浓度为36.2g/Lo
【主权项】
1.一种发酵生产乙醇的方法，包括如下步骤: (1)将秸杆进行预处理，得到固液混合物，分离，得到预处理后的底物； (2)向底物中加入纤维素酶和水，调节pH酶解； (3)向步骤(2)获得的混合液接种酿酒酵母使酿酒酵母浓度为2g/L-4g/L，发酵72h-144h，发酵期间补加底物、纤维素水解酶和酿酒酵母，发酵完成后进行固液分离，得到富含乙醇的发酵液体；其中所述酿酒酵母的保藏编号为CGMCC N0.6634。
2.根据权利要求1所述的方法，步骤(I)所述预处理为将秸杆浸于稀硫酸。
3.根据权利要求1或2所述的方法，步骤(2)所述底物、纤维素水解酶和水的比例为4g-8g:2FPU-6FPU:50g-70go
4.根据权利要求1-3任意一项所述的方法，步骤(2)所述酶解的pH值为4.5-5.5，酶解时间为12h-48h。
5.根据权利要求1-4任意一项所述的方法，步骤(2)所述酶解在酶解期间补加底物和纤维素水解酶。
6.根据权利要求5所述的方法，步骤(2)所述在酶解期间补加底物和纤维素水解酶具体为从酶解开始，每间隔6h-24h补加I次底物和纤维素水解酶，共补加I次-3次；每次补加4g-8g底物和2FPU-6FPU纤维素水解酶。
7.根据权利要求1-6任意一项所述的方法，步骤(3)所述发酵期间补加底物、纤维素水解酶和酿酒酵母具体为从发酵开始，间隔12h-24h补加I次底物、纤维素水解酶，底物和纤维素水解酶共补加2次-5次；从发酵开始48h开始补加酿酒酵母，补加I次-2次。
8.根据权利要求7所述的方法，步骤(3)所述底物每次补加量为4-8g，纤维素水解酶每次补加量为2-6FPU，酿酒酵母每次补加使浓度为2-4g/L。
9.根据权利要求1-8任意一项所述的方法，所述发酵的温度为30°C-34°C。
10.根据权利要求1-9任意一项所述的方法，所述秸杆为玉米秸杆、小麦秸杆、高粱秸杆或水稻秸杆。
【专利摘要】本发明涉及生物质新能源技术领域，公开了一种在抑制剂存在的条件下发酵生产乙醇的方法，包括如下步骤：(1)将秸秆进行预处理，得到预处理后的底物；(2)将预处理底物、纤维素水解酶和水混合，调节pH，酶解；(3)向步骤(2)获得的混合液接种酿酒酵母，发酵，从发酵开始，补加底物、纤维素水解酶和酿酒酵母，得到富含乙醇的发酵液体；所述酿酒酵母的保藏编号为CGMCC No.6634。本发明的方法可以在抑制剂存在的条件下进行发酵生产乙醇，菌株的流加可以降低高固含量发酵时抑制物的浓度，改善菌株的活性，使乙醇产量提高。
【IPC分类】C12R1-865, C12P7-10
【公开号】CN104789605
【申请号】CN201510067617
【发明人】元英进, 朱家庆, 李炳志, 秦磊, 李文超
【申请人】天津大学
【公开日】2015年7月22日
【申请日】2015年2月10日