11位或第12-22位连续核苷酸、 或者SEQ ID NO:2或其互补序列中第1-11位或第12-22位连续核苷酸。
12. 根据权利要求10或11所述检测样品中转基因玉米事件DBN9927的DNA存在的方 法，其特征在于，所述探针包括SEQ ID NO: 1或其互补序列、SEQ ID NO:2或其互补序列、SEQ ID N0:6或其互补序列、或者SEQ ID N0:7或其互补序列。
13. 根据权利要求10-12任一项所述检测样品中转基因玉米事件DBN9927的DNA存在 的方法，其特征在于，至少一个所述探针用至少一种荧光基团标记。
14. 一种检测样品中转基因玉米事件DBN9927的DNA存在的方法，其特征在于，包括： 使待检测样品与标记物核酸分子接触，所述标记物核酸分子包括SEQIDNO:3或其互 补序列中至少11个连续的核苷酸、或者SEQIDN0:4或其互补序列中至少11个连续的核 苷酸； 使所述待检测样品和所述标记物核酸分子在严格杂交条件下杂交； 检测所述待检测样品和所述标记物核酸分子的杂交情况，进而通过标记物辅助育种分 析以确定昆虫抗性和/或除草剂耐受性与标记物核酸分子在遗传学上是连锁的。
15. 根据权利要求14所述检测样品中转基因玉米事件DBN9927的DNA存在的方法，其 特征在于，所述标记物核酸分子包括SEQ ID NO: 1或其互补序列中第1-11位或第12-22位 连续核苷酸、或者SEQ ID NO:2或其互补序列中第1-11位或第12-22位连续核苷酸。
16. 根据权利要求14或15所述检测样品中转基因玉米事件DBN9927的DNA存在的方 法，其特征在于，所述标记物核酸分子包括SEQ ID NO: 1或其互补序列、SEQ ID NO:2或其 互补序列、SEQ ID NO:6或其互补序列、或者SEQ ID NO: 7或其互补序列。
17. -种DNA检测试剂盒，其特征在于，包括至少一个DNA分子，所述DNA分子包括SEQ ID N0:3的同源序列或其互补序列中至少11个连续的核苷酸、或者SEQ ID N0:4的同源序 列或其互补序列中至少11个连续的核苷酸，其可以作为对于转基因玉米事件DBN9927或其 后代具有特异性的DNA引物或探针。
18. 根据权利要求17所述DNA检测试剂盒，其特征在于，所述DNA分子包括SEQ ID NO: 1或其互补序列中第1-11位或第12-22位连续核苷酸、或者SEQ ID NO: 2或其互补序列 中第1-11位或第12-22位连续核苷酸。
19. 根据权利要求17或18所述DNA检测试剂盒，其特征在于，所述DNA分子包括SEQ ID NO: 1的同源序列或其互补序列、SEQ ID N0:2的同源序列或其互补序列、SEQ ID N0:6 的同源序列或其互补序列、或者SEQ ID N0:7的同源序列或其互补序列。
20. -种植物细胞，其特征在于，包含编码昆虫抗性CrylAb蛋白的核酸序列、编码草甘 膦除草剂耐受性EPSPS蛋白的核酸序列和特定区域的核酸序列，所述特定区域的核酸序列 包括 SEQ ID N0:1、SEQ ID N0:2、SEQ ID N0:6 或 SEQ ID N0:7 所示的序列。
21. -种保护玉米植物免于昆虫侵袭的方法，其特征在于，包括在靶昆虫的膳食中提 供至少一种转基因玉米植物细胞，所述转基因玉米植物细胞在其基因组中包含选自SEQ ID N0:1、SEQ ID N0:2、SEQ ID N0:3、SEQ ID N0:4、SEQ ID N0:5、SEQ ID N0:6和 SEQ ID N0:7 所示序列中至少一种核酸序列，摄食所述转基因玉米植物细胞的靶昆虫被抑制进一步摄食 所述玉米植物。
22. -种保护玉米植物免受由除草剂引起的损伤的方法，其特征在于，包括将含有有效 剂量草甘膦除草剂施加到种植至少一种转基因玉米植物的大田中，所述转基因玉米植物在 其基因组中包含选自 SEQ ID N0:1、SEQ ID N0:2、SEQ ID N0:3、SEQ ID N0:4、SEQ ID N0:5、 SEQ ID N0:6和SEQ ID N0:7所示序列中至少一种核酸序列，所述转基因玉米植物具有对草 甘膦除草剂的耐受性。
23. -种控制种植玉米植物的大田中杂草的方法，其特征在于，包括将含有有效剂量草 甘膦除草剂施加到种植至少一种转基因玉米植物的大田中，所述转基因玉米植物在其基因 组中包含选自 SEQ ID N0:1、SEQ ID N0:2、SEQ ID N0:3、SEQ ID N0:4、SEQ ID N0:5、SEQ ID NO:6和SEQ ID NO:7所示序列中至少一种核酸序列，所述转基因玉米植物具有对草甘膦 除草剂的耐受性。
24. -种培养对昆虫具有抗性的玉米植物的方法，其特征在于，包括： 种植至少一粒玉米种子，所述玉米种子的基因组中包括编码昆虫抗性CrylAb蛋白的 核酸序列和特定区域的核酸序列； 使所述玉米种子长成玉米植株； 用靶昆虫侵袭所述玉米植株，收获与其他不具有特定区域的核酸序列的植株相比具有 减弱的植物损伤的植株； 所述特定区域的核酸序列选自 SEQ ID N0:1、SEQ ID N0:2、SEQ ID N0:3、SEQ ID N0:4、 SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO:6和SEQ ID NO: 7所示序列中至少一种核酸序列。
25. -种培养对草甘膦除草剂具有耐受性的玉米植物的方法，其特征在于，包括： 种植至少一粒玉米种子，所述玉米种子的基因组中包括编码草甘膦除草剂耐受性 EPSPS蛋白的核酸序列和特定区域的核酸序列； 使所述玉米种子长成玉米植株； 用有效剂量草甘膦除草剂喷洒所述玉米植株，收获与其他不具有特定区域的核酸序列 的植株相比具有减弱的植物损伤的植株； 所述特定区域的核酸序列选自 SEQ ID N0:1、SEQ ID N0:2、SEQ ID N0:3、SEQ ID N0:4、 SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO:6和SEQ ID NO: 7所示序列中至少一种核酸序列。
26. -种培养对昆虫具有抗性的且耐受草甘膦除草剂的玉米植物的方法，其特征在于， 包括： 种植至少一粒玉米种子，所述玉米种子的基因组中包括编码昆虫抗性CrylAb蛋白的 核酸序列、编码草甘膦除草剂耐受性EPSPS蛋白的核酸序列和特定区域的核酸序列； 使所述玉米种子长成玉米植株； 用有效剂量草甘膦除草剂喷洒所述玉米植株，收获与其他不具有特定区域的核酸序列 的植株相比具有减弱的植物损伤的植株，所述具有减弱的植物损伤的植株对昆虫的摄食损 伤也有抗性； 所述特定区域的核酸序列选自 SEQ ID N0:1、SEQ ID N0:2、SEQ ID N0:3、SEQ ID N0:4、 SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO:6和SEQ ID NO: 7所示序列中至少一种核酸序列。
27. -种产生对昆虫具有抗性的玉米植株的方法，其特征在于，包括向所述玉米植株的 基因组中引入编码昆虫抗性CrylAb蛋白的核酸序列和特定区域的核酸序列，所述特定区 域的核酸序列选自 SEQ ID N0:1、SEQ ID N0:2、SEQ ID N0:3、SEQ ID N0:4、SEQ ID N0:5、 SEQ ID NO:6和SEQ ID NO:7所示序列中至少一种核酸序列。
28. 根据权利要求27所述产生对昆虫具有抗性的玉米植株的方法，其特征在于，包括： 将对昆虫具有抗性的转基因玉米事件DBN9927第一亲本玉米植株与缺少昆虫抗性的 第二亲本玉米植株有性杂交，从而产生大量子代植株； 用靶昆虫侵袭所述子代植株； 选择与其他不具有特定区域的核酸序列的植株相比具有减弱的植物损伤的所述子代 植株； 所述转基因玉米事件DBN9927在其基因组中包含选自SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2、SEQ ID N0:3、SEQ ID N0:4、SEQ ID N0:5、SEQ ID N0:6 和 SEQ ID N0:7 所示序列中至少一种核 酸序列。
29. -种产生对草甘膦除草剂具有耐受性的玉米植株的方法，其特征在于，包括向所述 玉米植株的基因组中引入编码草甘膦耐受性EPSPS蛋白的核酸序列和特定区域的核酸序 列，所述特定区域的核酸序列选自SEQ ID N0:1、SEQ ID N0:2、SEQ ID N0:3、SEQ ID N0:4、 SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO:6和SEQ ID NO: 7所示序列中至少一种核酸序列。
30. 根据权利要求29所述产生对草甘膦除草剂具有耐受性的玉米植株的方法，其特征 在于，包括： 将对草甘膦除草剂具有耐受性的转基因玉米事件DBN9927第一亲本玉米植株与缺少 草甘膦耐受性的第二亲本玉米植株有性杂交，从而产生大量子代植株； 用草甘膦除草剂处理所述子代植株； 选择耐受草甘膦的所述子代植株； 所述转基因玉米事件DBN9927在其基因组中包含选自SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2、SEQ ID N0:3、SEQ ID N0:4、SEQ ID N0:5、SEQ ID N0:6 和 SEQ ID N0:7 所示序列中至少一种核 酸序列。
31. -种产生对昆虫具有抗性且耐受草甘膦除草剂施用的玉米植株的方法，其特征在 于，包括： 将草甘膦耐受和昆虫抗性的转基因玉米事件DBN9927第一亲本玉米植株与缺少草甘 膦耐受性和/或昆虫抗性的第二亲本玉米植株有性杂交，从而产生大量子代植株； 用草甘膦处理所述子代植株； 选择耐受草甘膦的所述子代植株，耐受草甘膦的所述子代植株对昆虫的摄食损伤也有 抗性； 所述转基因玉米事件DBN9927在其基因组中包含选自SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2、SEQ ID N0:3、SEQ ID N0:4、SEQ ID N0:5、SEQ ID N0:6 和 SEQ ID N0:7 所示序列中至少一种核 酸序列。
32. -种包含SEQ ID NO: 1或SEQ ID NO:2的多核苷酸的组合物，其特征在于，所述组 合物为玉米粉、玉米面、玉米油、玉米穗丝或玉米淀粉。
33. -种包含SEQ ID NO: 1或SEQ ID NO:2的多核苷酸的农产品或商品，其特征在于， 所述农产品或商品为玉米粉、玉米面、玉米油、玉米淀粉、玉米面筋、玉米饼、化妆品或填充 剂。
【专利摘要】本发明涉及一种用于检测玉米植物DBN9927的核酸序列及其检测方法，所述玉米植物的核酸序列包括SEQ ID NO:1或其互补序列、或者SEQ ID NO:2或其互补序列。本发明玉米植物DBN9927对鳞翅目昆虫具有较好的抗性并对草甘膦除草剂具有较好的耐受性，对产量无影响，且检测方法可以准确快速的鉴定生物样品中是否包含转基因玉米事件DBN9927的DNA分子。CGMCC No.1021820141224
【IPC分类】A01N47-44, C12N15-82, A01H1-02, A01G7-06, C12N5-10, A01H5-00, C12N15-54, C12Q1-68, A01P7-04, C12N15-32, C12N15-11
【公开号】CN104846084
【申请号】CN201510218098
【发明人】丁德荣, 康越景, 张云珠, 刘海利, 庞洁, 王利君, 贾志伟, 黄金存, 郭函子, 王磊, 傅学乾, 周毅, 李风, 鲍晓明, 吕玉平, 张世平
【申请人】北京大北农科技集团股份有限公司, 北京大北农科技集团股份有限公司生物技术中心
【公开日】2015年8月19日
【申请日】2015年4月30日