靶向her2阳性肿瘤的化合物和组合物的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及用于靶向免疫疗法的化合物以及含有该化合物的组合物。本发明还涉 及所述化合物在治疗诸如癌症之类的疾病中的应用。
【背景技术】
[0002] 治疗性抗体已用于临床应用二十多年。目前已有十五种抗肿瘤抗体药物用于 临床，这些药物包括：Rituxan (1997)，Herceptin (1998)，Mylotarg (2000)，Campath (20 01), Zeval in(2002), Bexxer(2003), Avastin (2004),Erbitux (2004),Vectibix (2006); Arzerra(2009);Benlysta(2011);Yervoy(2011);Adcetris(2011) ;Perjeta(2012);和 Kadcyla(2013)。这些抗体主要靶定四种分子：EGFR、Her2、CD20和VEGF。
[0003] 总体而言，治疗性抗体通过三种机制（Scott AM, Wolchok JD, Old LJ. Antibody therapy of cancer.Nat Rev Cancer. (2012), 12:278-87)杀伤肿瘤细胞：（1)抗体直接 作用，也就是阻断或激动配体/受体信号转导活性，诱导细胞凋亡并递送药物或细胞毒素 剂。抗体受体活化活性可产生直接杀伤肿瘤细胞的作用。例如，一些抗体可与肿瘤细胞 表面的受体结合，活化受体，导致细胞凋亡(例如，在线粒体中）。抗体还可通过受体拮抗 活性介导肿瘤细胞杀伤。例如，一些抗体可与细胞表面受体结合并阻断二聚化作用、激酶 活化以及下游信号转导，从而抑制增殖并促进细胞凋亡。抗体与酶的结合可导致中和作 用、信号阻断以及细胞死亡。（2)免疫介导的细胞杀伤机制，该机制包括补体依赖性细胞 毒性（CDC)、抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(ADCC)、T细胞功能调节，等等。免疫介导的 肿瘤细胞杀伤可通过如下方式完成：诱导吞噬作用、活化补体、抗体依赖性细胞介导的细 胞毒性、通过单链可变片段（scFv)使基因修饰的T细胞祀定肿瘤，通过树突细胞的抗体介 导的抗原交叉呈递活化T细胞、抑制T细胞抑制性受体(例如，细胞毒性T淋巴细胞相关 抗原4 (CTLA4))。其中，抗体的Fc部分的特性对于CDC和ADCC介导的肿瘤细胞杀伤作 用特别重要。（3)抗体对肿瘤脉管系统和基质的特异性效应，通过捕获血管受体拮抗剂或 配体诱导血管和基质细胞消融，包括：抑制基质细胞、将毒素递送至基质细胞以及将毒素 递送至脉管系统（Scott AM, Wolchok JD, Old LJ. Antibody therapy of cancer.Nat Rev Cancer. 2012, 12(4):278-87)〇
[0004] 治疗性单克隆抗体药物推进了抗癌药物的研宄和开发。然而，仍然存在一些问题 需要进一步研宄解决，例如，抗体的免疫原性、长期使用肿瘤靶标的耐受性以及单纯地单一 阻断信号转导通路的长期作用。简言之，大多数抗体难以实现对肿瘤细胞长期有效的抑制 和杀伤作用。
[0005] 1964年，"自然（Nature)"杂志发表了抗体-药物偶联（ADC)技术这一新观点，该 观点近年来得到突破性发展。ADC使抗体与高毒性药物(毒素)通过化学连接体(连接体)共 价连接。抗体识别癌细胞表面抗原分子，内吞作用将ADC带入细胞质内，具体而言，连接体 水解之后释放的细胞内环境毒素杀伤细胞。
[0006] Seattle Genetics 已研发了 Brentuximab Vedotin (商品名为 Adcetris)这种药 物，其已被FDA批准上市。其为单甲基auristatin E(MMAE)，一种合成的毒性抗癌药物，其 与靶向淋巴瘤细胞特异性CD30分子的抗体连接，具有改进的杀伤肿瘤细胞的效用。
[0007] 目前，已对几十种这样的ADC药物开展了临床试验。其中，Genentech和Immunogen 联合开发了用于治疗乳腺癌的与美登素（maytansine)偶联的曲妥珠单抗，一种名为 ado-曲安珠单抗emtansine的药物（Kadcyla)，其也被称为T-DM1。2013年2月，FDA已批 准T-DMl用于人表皮生长因子受体2 (Her2)-阳性转移性乳腺癌。美登素是一种小分子 毒素，其可与微管蛋白结合并可通过形成非还原性双-马来酰亚胺-丙二醇复合物防止微 管形成。曲妥珠单抗通过靶向人Her2对乳腺癌和胃癌起作用。曲妥珠单抗已被批准用于 Her2-阳性癌症。然而，曲妥珠单抗无法促进所有的Her2-阳性细胞的细胞凋亡。T-DMl使 选择性靶向Her2受体的曲妥珠单抗与有效的细胞毒性剂美登素结合，从而杀伤肿瘤细胞。 T-DMl抗体结合Her2受体，导致从偶联物中释放的美登素产生细胞内在化作用，从而杀伤 肿瘤细胞。T-DMl具有更好的整体疗效、药代动力学性质以及较低的毒性。
[0008] 传统的小分子化疗药物具有很强的毒性和药代动力学优势，但是在治疗肿瘤的 过程中传统的小分子化疗药物可影响其他生理靶标，产生严重的副作用。抗体-药物偶联 物使靶向作用和具有特定的药代动力学的小分子药物结合。抗体-药物偶联物的结构为具 有靶向功能的单克隆抗体与具有特定的药理学性质的化合物的连接。这种技术需要治疗性 抗体与靶标特异性结合，与诸如细胞毒素之类的具有治疗作用或其他功能的分子偶联。诸 如偶联的抗体的内吞作用、偶联的稳定性以及毒素的释放和杀伤活性之类的许多因素影响 这种类型的抗体的作用。
[0009] 目前正在使用的毒素分子包括微管蛋白抑制剂Auristatin类似物单甲基 auristatin E、单甲基auristatin F和美登素。单甲基auristatin E为合成的微管聚 合物抑制剂，其可抑制微管聚集，干扰肿瘤细胞有丝分裂并且可诱导细胞凋亡（Naumovski L and Junutula JR. Glembatumumab vedotin, a conjugate of an anti-glycoprotein non-metastatic melanoma protein B mAb and monomethyl auristatin E for treatment of melanoma and breast cancer. Curr Opin Mol Ther2003;12(2):248-57. Francisco JA, Cerveny CG 等人，cAClO-vcMMAE, an anti-CD30_monomethyl auristatin E conjugate with potent and selective antitumor activity. Bloodl02 (4):1458-65)。单甲基 auristatin F为抗有丝分裂Auristatin衍生物，在C末端具有带电荷的苯丙氨酸残基。 与不带电荷的MMAE相比，单甲基auristatin F最小化对细胞信号通路的破坏并且最小化 细胞毒性。大量CD30细胞测试发现mAb-马来酰亚胺己酰基-缬氨酸-瓜氨酸-P-氨基 苄氧基羰基-MMAF (mAb-Ll-MMAF)的毒性比单独的MMAF的毒性强2, 200倍（Doronina SO 等人，Enhanced activity of monomethyl auristatin F through monoclonal antibody delivery: effects of I inker technology on efficacy and toxicity. Bioconjug Chem，2006; 17(1) :pll4-24)。美登素是一种抗有丝分裂剂，其充当微管蛋白聚合的抑制剂， 干扰细胞核内的微管的形成。美登素还抑制DNA、RNA和蛋白质合成，已经发现美登素对于 DNA合成的影响最大。
[0010] 抗体-药物偶联物具有直接和间接抗癌作用。抗体阻断或活化配体/受体信号转 导，诱导细胞凋亡，并且同时抗体可直接或间接地向肿瘤细胞呈递或递送有效载荷药物(例 如，药物、毒素、小干扰RNA或放射性同位素)。治疗性抗体药物偶联物使用抗体和偶联的药 物的双重特性，第一为与靶标分子特异性结合的结合功能，第二为抗体自身的肿瘤细胞杀 伤功能，以及第三为偶联的药物的特定作用。目前使用的抗体-药物偶联药物限于如何直 接杀伤肿瘤细胞。然而，由于在抗体、连接体分子、毒素分子、偶联方面的严格的技术要求以 及能够将毒素带入肿瘤微环境内的分子有限，在实际的临床研宄中仍然存在一些难题。
【发明内容】
[0011] -方面，本发明提供一种具有通式（Ia)的结构的化合物或其药学上可接受的盐或 其溶剂化物：
[0012] TM-L-AM (Ia)，
[0013] 其中，TM是与Her2/Neu特异性结合的抗体或其功能片段(例如，抗-Her2的抗体)， AM为由下述通式（I)的结构表示的活化部分：
[0014]
【主权项】
1. 一种具有下述通式（Ia)的结构的化合物或其药学上可接受的盐或其溶剂化物： TM-L-AM (Ia)， 其中，TM是与Her2/Neu特异性结合的抗体或其功能片段，AM为由下述通式（I)的结构 表示的活化部分：
其中，虚线表示存在化学键或不存在化学键，~为待与连接体连接的点； X 是 S 或-NR1, 1^是-W。一 W1 一W2一W3一W4; Wtl是化学键，烷基，烯基，炔基，烷氧基或-烷基-S-烷基--， W1是化学键，一O -，或-NR 2-，其中，R2是氛，烷基或條基， W2是化学键，一〇-，一C (O) ―，一C (S)-或-S (O) 2-， W3是化学键，一NR3--,其中，R3是氢，烷基或烯基， W4是氣，烷基，條基，炔基，烷氧基，环烷基，芳基，芳氧基，杂芳基或杂环基，它们中的 每一个被一个或一个以上选自下列基团的取代基任选地取代：羟基，烷氧基，烷基，烯基， 炔基，环烷基，芳基，杂芳基，杂环基，一NH 2，硝基，一烷基-羟基，一烷基-芳基，一烧 基-杂芳基，一烷基 -杂环基，一O-R4^ 一〇_烷基-I，一烷基-O-R4，一C(