一种以磷脂酰乙醇胺为主成分的磷脂的制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种以磷脂酰乙醇胺为主成分的磷脂的制备方法，属于制药工程技术 领域。 技术背景
[0002] 磷脂酰乙醇胺(简称PE)又称乙醇胺磷酸甘油酯、脑磷脂，是一种良好的营养补充 剂、乳化剂、抗氧化剂，临床上可用做止血药和肝功能检查的试剂。近期研宄显示，口服磷脂 酰乙醇胺能直接为人脑利用，令神经细胞膜修复，恢复神经元的正常代谢。磷脂酰乙醇胺还 是一种天然乳化剂，在食品业和化妆品业中应用广泛，不同磷脂酰乙醇胺含量的磷脂，其乳 化性能也不同，另外也是其他重要的脂质体辅料如合成磷脂（DOPE、DEPE等）的关键起始原 料。因此磷脂酰乙醇胺在医药领域等方面拥有巨大的潜力。
[0003] 磷脂酰乙醇胺在鸡蛋及大豆中的含量较低，其中来源于鸡蛋的脱油蛋黄粉中磷脂 酰乙醇胺含量约为4~10%，来源于大豆的粉末磷脂中的磷脂酰乙醇胺含量约为8~20%。目前 富集磷脂酰乙醇胺的方法有超临界CO2萃取法、溶剂萃取法、吸附法、柱层析法等。超临界 〇)2萃取法适合于混合磷脂的脱油，对磷脂的富集纯化无选择性。磷脂酰乙醇胺与其他磷脂 的分子量较接近，膜分离法要得到单一磷脂酰乙醇胺仍存在困难。溶剂提取法是通过磷脂 酰乙醇胺在两相溶剂中的溶解度的差异达到富集纯化的目的，对理化性质非常相似的各类 磷脂杂质的选择性较差。
[0004] 硅胶柱层析法是另一种较常用的分离纯化方法，该方法虽然能分离得到磷脂酰乙 醇胺，但是其载样量有限，对分离前磷脂酰乙醇胺含量有较高要求，起始原料含量不高分离 效率低下，不利用工业化生产。
[0005] 吸附法是一种较常用的纯化方法，通过选择不同理化特性的吸附剂对待吸附原料 液进行搅拌吸附，达到纯化的效果，常见的吸附剂有：三氧化二铝等，因为氧化铝对磷脂酰 乙醇胺吸附力强，该方法对磷脂酰乙醇胺有很好的富集效果，但因存在死吸附，如何将磷脂 酰乙醇胺从氧化铝中解吸附一直是行业内的技术难题。
[0006] 从氧化铝中解吸附得到磷脂酰乙醇胺的专利及文献较少，其中有一篇日本专利JP 10265485A公开了以混合磷脂为原料，以含有氨的乙醇作萃取剂，得到磷脂酰乙醇胺含量为 64. 5%的磷脂，该方法选择溶剂为乙醇、氨水，解吸附过程中，磷脂酰乙醇胺容易发生水解使 得产品不稳定。同时，柳叶发表的《氧化铝柱层析分离纯化磷脂的工艺优化》（浙江大学硕 士论文2006)也报道了类似以三氯甲烷-甲醇-氨水与三氯甲烷-甲醇-三乙胺进行洗 脱氧化铝中磷脂酰乙醇胺的方法，研宄结果显示在洗脱溶剂中添加胺类有利于磷脂酰乙醇 胺在氧化铝中的洗脱，但是其研宄也表明磷脂酰乙醇胺在三氯甲烷-甲醇-氨水或三氯甲 烷-甲醇-三乙胺体系下分解导致PE含量明显下降，不利于工业化生产。
[0007] 中国专利授权号CN100336818C公开了以已钝化的氧化铝为填充剂，甲醇为洗脱 剂进行色谱分离得到70%以上的磷脂酰乙醇胺，该方法虽然会有利于解吸附获得产品，但 由于氧化铝经过钝化，对磷脂酰乙醇胺的吸附能力较弱，同时钝化的氧化铝对磷脂酰乙醇 胺与磷脂酰胆碱的区分能力差，采用该方法不利用大规模富集纯化磷脂酰乙醇胺。
[0008] 上述几篇专利及文献报道显示现有的技术对大规模富集纯化磷脂酰乙醇胺的效 果不理想，难以保证产品的收率及质量，不利用工业化生产。
[0009] 因此，开发一种通过氧化铝吸附富集并解吸附得到PE的方法，有效解决产业化生 产过程中PE在氧化铝中死吸附以及降解等问题将具有重要的意义。不仅可以获得高附加 值的磷脂酰乙醇胺，还能将氧化铝废渣中的PE回收利用，有利于降低企业生产成本，并推 动磷脂酰乙醇胺在医药行业的发展和应用。
【发明内容】
[0010] 本发明的目的在于提供一种以磷脂酰乙醇胺为主成分的磷脂的制备方法。
[0011] 为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案： 一种以磷脂酰乙醇胺为主成分的磷脂的制备方法，包括如下的步骤：以大豆粉末磷脂 或脱油蛋黄粉为原料，经提取、氧化铝处理，得到吸附有磷脂酰乙醇胺的氧化铝，再向吸附 有磷脂酰乙醇胺的氧化铝中加入由有机溶剂-有机碱组成的混合溶剂进行解吸附获得含 有磷脂酰乙醇胺溶液，经浓缩、干燥得到以磷脂酰乙醇胺为主成分的磷脂。
[0012] 在上述制备方法中，有机溶剂包括石油醚、正己烷、三氯甲烷、二氯甲烷。
[0013] 有机碱包括三乙胺、二乙胺、乙二胺。
[0014] 有机溶剂-有机碱比例为1:1~100:1 (v/v)。
[0015] 解吸附温度在10°C ~80°C之间。
[0016] 有机溶剂-有机碱组成的混合溶剂总体积（V)与吸附有磷脂酰乙醇胺的氧化铝重 量（w)比例为 2:1~40:1 (L/Kg)。
[0017] 解吸附的手段包括搅拌提取解吸附、超声提取解吸附以及直接冲洗吸附柱解吸 附。
[0018] 与现有技术相比，本发明具有如下有益效果： (1)本发明使用有机溶剂-有机胺体系，解决了磷脂酰乙醇胺在氧化铝上解吸附问题， 极大地提高了 PE的转移率，获得以磷脂酰乙醇胺为主成分的磷脂，且该方法操作简单，有 利于产品的工业化生产。
[0019] (2)本发明使用有机溶剂进行解吸附，避免了磷脂酰乙醇胺在有机碱-醇或水并 存的溶剂体系中时发生降解的问题。
[0020] (3)本发明将氧化铝废渣中的回收利用，有效避免资源浪费，减少废渣的环境 污染，降低企业生产成本。
【具体实施方式】
[0021] 实施例1 : 取脱油蛋黄粉lkg，通过乙醇提取，过滤后提取液经2kg氧化铝吸附，待吸附完全后，将 氧化铝洗涤、过滤至干。洗涤后的氧化铝置于超声波提取器中，加入4L三氯甲烷-三乙胺 (2:1)混合溶剂室温提取0. 5小时，过滤，滤液浓缩、干燥，得到以磷脂酰乙醇胺为主成分的 磷脂(含量为73. 4%，氧化铝中PE转移率为66. 7%)。
[0022] 实施例2 : 取大豆粉末磷脂lkg，通过乙醇提取，过滤后提取液经2kg氧化铝吸附，待吸附完全 后，将氧化铝洗涤、过滤至干。洗涤后的氧化铝置于超声波提取器中，加入石油醚-三乙胺 (1:1)混合溶剂室温提取2次，每次4L，每次0. 5小时，过滤，滤液浓缩、干燥，得到以磷脂 酰乙醇胺为主成分的磷脂(含量为62. 1%，氧化铝中PE转移率为70. 3%)。
[0023] 实施例3 : 取大豆粉末磷脂2kg，通过乙醇提取，过滤后提取液经4kg氧化铝吸附，待吸附完全 后，将氧化铝洗涤、过滤至干。洗涤后的氧化铝置于超声波提取器中，加入正己烷-三乙胺 (4: