专利名称：：二硬脂酰磷酰乙醇胺及其氨基聚乙二醇化衍生物的制备方法
技术领域：
：本发明涉及一种药用载体材料磷脂---二硬脂酰磷酰乙醇胺(简为DSPE表示)及其氨基聚乙二醇化衍生物(简为NH2-PEG-DSPE表示)的有效制备方法。
背景技术：
：脂质体是一种应用非常广泛的药用载体材料，其能形成独特的磷脂双分子层定向排列结构，既可将亲水性药物包封于内水相，又可将亲脂性药物包封于磷脂双分子层，静脉注射后脂质体能有效延缓药物释放，提高生物利用度。另外，脂质体与生物膜相容性好，毒性低。药用脂质体材料通常由磷脂和附加剂组成，其中磷脂是构成脂质体物理和生物特性的主要成分。二硬脂酰磷酰乙醇胺(DSPE)是制备脂质体的一种常用磷脂，从化学结构上来看，它包括一个亲水性的乙醇胺端基及一个亲脂性的硬脂酸甘油二酯尾基。与卵磷脂、豆磷脂、脑磷脂等天然磷脂不同，二硬脂酰磷酰乙醇胺为人工合成磷脂，具有化学成分确定、质量可控等优点。将二硬脂酰磷酰乙醇胺末端氨基通过共价键与聚乙二醇(PEG)相连可以获得PEG化磷脂，应用PEG化磷脂制备得到的脂质体通常被称为长循环脂质体，因为PEG片段在体内能在分子表面诱导形成一个水膜，能有效减缓血清中调理素及网状内皮系统对脂质体的摄取及清除，从而延长脂质体在体内循环系统中的半衰期。目前国内、国外可见聚乙二醇化磷脂(PEG-DSPE)以及甲氧基聚乙二醇化磷脂(m-PEG-DSPE)的相关文献报道，但还未见氨基聚乙二醇化磷脂(NH2-PEG-DSPE)合成方法的公开报道。虽然DSPE已应用多年，但其合成工艺报道却相对有限。概括而言，文献报道的DSPE合成路线首先是通过选择性保护甘油末端羟基，经酰化脱保护制备得到1，2-二硬脂酰甘油脂(Chem.Phys.Lipids，1980，26，405;Chem.Phys.Lipids，1986，41，53；TetrahedronLett.，1989，30，3585)，然后将1，2-甘油二脂、乙醇胺或带氨基保护基的乙醇胺先后与磷酰化剂反应制得相应的磷脂。在这一路线中，可将乙醇胺、甘油二脂直接与磷酰化剂如三氯氧磷反应(PNAS，1978，75，4074)，但磷酰化剂一般反应活性高、选择性差，造成该反应具有副产物多、分离纯化难和收率低等缺陷。因此，事先对磷酰化剂或乙醇胺进行保护成为较好的选择，这其中保护基团的选择较为关键。目前报道的磷酰化剂主要有1)三氯氧磷。该试剂最为经典，具有原料易得、活性高和反应快等特点，但由于有三个活性氯原子，在第一步酰化过程中易发生双酰化副反应，致使产物收率降低(Arch.Biochem.Biophys.，1958，78，294；HelyChim.Acta,1991,74,1697J.Org.Chem.，1996,61,192)。2)磷酰氯单(二)酯。为了避免三氯氧磷所具有的多酰化副反应，磷酰氯单(二)酯也常被用作磷酰化剂，常见的有二氯氧磷苯基酯、二氯氧磷苄基酯、磷酰氯二苯酯等(J.Org.Chem.，1977，42，2260.J.Med.Chem.，1990，33，641;J.Org.Chem.，2002，67，194)。该类试剂可有效避免多酰化副反应，且反应条件较为温和，然而与三氯氧磷相比，一方面其来源受限，另一方面还需附加一步脱酯反应。3)亚磷酰氯单酯。当甘油二脂及醇胺结构非常庞大时，磷酰氯有时无法与之反应，采用亚磷酰氯单酯可以有效提升反应活性，生成相应的亚磷酰酯，然后经氧化得到目标磷脂(Tetrahedron，1992，48，2223J.Org.Chem.，1994，59，4805)。该类试剂可有效避免多酰化副反应，但反应涉及氧化，不利于制备含有对氧化敏感的化合物，另还需增加一步脱酯反应。4)磷酰氯环乙二酯。该试剂与甘油二脂反应后经氨解可直接得到甘油_乙醇胺磷脂(J.Org.Chem.，1999，64，7727)，其反应条件较为温和，然而来源受限，且成本较高。对乙醇胺氨基保护基团的选择目前也有不同报道1)叔丁氧羰基(Boc)。该保护基是目前报道最多的保护基，其反应简单，条件温和，缺点是成本相对较高，且.脱保护需酸性条件也会对某些特殊基团产生影响。2)三氯乙氧羰基。作为氨基保护基，其反应同样快速高效，并且在Zn/乙酸处理下即可脱去保护(J.Med.Chem.，1975，18，1184)。此外，也有报道在制备甘油-乙醇胺磷脂时使用2-溴乙醇作为原料，经磷酰化得到磷脂后再用氨水取代溴即可得到目标产物(Chem.Phy.Lipids,1978，22，1)。但上述保护基有一共同的缺点，就是反应过程难以跟踪。在已报道的DSPE制备工艺中，大多对低温要求甚高，产物产率较低，且成本也较高，难以应用于工业化生产。在综合比较现有多种方法优缺点的基础上，本发明者研发了一种简便高效地制备DSPE的合成工艺，并且将其与聚乙二醇相连，经过进一步衍生得到nh2-peg-dspe。
发明内容技术问题本发明的目的是提供一种二硬脂酰磷酰乙醇胺(DSPE)及其氨基聚乙二醇化衍生物(nh2-peg-dspe)的制备方法。技术方案本发明所涉及的DSPE的合成路线按照反应式1所示，经a、b、c三步反应进行；首先将三氯氧磷和1，2_二硬脂酰甘油脂反应得到磷酰二氯单酯(简为I表示)，其次将I与2-羟乙基氨基甲酸苄酯作用得到含氨基保护基的DSPE(简为II表示)，然后将II催化氢化脱去保护基得到DSPE。<image>imageseeoriginaldocumentpage6</image>反应式1在a步反应中，氮气保护下，将一定量的碱溶于无水非质子溶剂中，于0°C下分别滴加一定量的三氯氧磷和1，2-二硬脂酰甘油脂的上述溶剂的溶液，然后在0°C反应，所得I反应液不经分离，直接用于b步反应；其中，碱为叔胺，可以是三乙胺、三丁胺、批啶或N，N-二甲基苯胺，优选三乙胺；非质子溶剂为氯仿、二氯甲烷、N，N-二甲基甲酰胺或四氢呋喃，优选四氢呋喃；一定量的三氯氧磷、1，2_二硬脂酰甘油脂和碱的摩尔比例为0.9-1.311，优选比例为1.211，过高或过低量的三氯氧磷会导致反应副产物增加或反应不完全；由于反应放热，滴加三氯氧磷和1，2-二硬脂酰甘油脂的溶液时应在0°C以下进行，过高的温度会造成副反应的增加，而过低的温度则造成不必要的能耗。在b步反应中，氮气保护下，将a步反应所得I的反应液，在10°c以下，滴加一定量的2-羟乙基氨基甲酸苄酯和碱的无水非质子溶剂的溶液，于室温反应，然后加水终止，经后处理和柱层析分离得到II；其中，碱为叔胺，可以是三乙胺、三丁胺、吡啶或N，N-二甲基苯胺，优选三乙胺；非质子溶剂为氯仿、二氯甲烷、N，N-二甲基甲酰胺或四氢呋喃，优选四氢呋喃；一定量的2-羟乙基氨基甲酸苄酯、碱与1(计算量)的摩尔比例为111，过高或过低的投料比例将导致副产物的增加和分离的困难；由于反应放热，滴加苄氧羰基保护的乙醇胺和碱的溶液时应在10°C以下进行，过高的温度会造成副反应的增加，而过低的温度则造成不必要的能耗；柱层析分离所用的洗脱剂为由氯代甲烷、石油醚和烷基醇组成的混合溶剂，其中氯代甲烷为二氯甲烷或氯仿，优选二氯甲烷；烷基醇为甲醇、乙醇或异丙醇，优选甲醇。在c步反应中，将b步反应所得II溶入一定比例的烷基醇和氯代甲烷混合溶剂中，加入催化剂，在一定压力的氢气和反应温度下氢化脱去苄氧羰基，然后经后处理得到产物DSPE；其中，混合溶剂里的烷基醇为甲醇或乙醇，氯代甲烷为二氯甲烷或氯仿，优选乙醇和二氯甲烷组成的混合溶剂；混合溶剂中烷基醇和氯代甲烷的比例在1-31之间，优选比例为11；催化剂为钯碳或Raney镍，优选10%的钯碳。本发明所涉及的NH2-PEG-DSPE的合成路线按照反应式2所示，经d和e两步反应进行；首先将DSPE与叠氮取代的PEG氯甲酸酯(简为VI表示)反应得到叠氮基聚乙二醇化的DSPE衍生物(简为III表示)，然后通过催化氢化将叠氮基还原为氨基得到NH2-PEG-DSPE。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>反应式2在d步反应中，在碱存在下，将VI溶于无水氯代甲烷中，与等摩尔的DSPE反应，经后处理和柱层析分离得到III；其中，碱为叔胺，可以是三乙胺、三丁胺、吡啶或N，N-二甲基苯胺，优选N，N-二甲基苯胺；氯代甲烷溶剂为氯仿或二氯甲烷，优选二氯甲烷；柱层析分离所用的洗脱剂为由氯代甲烷、石油醚和烷基醇组成的混合溶剂，其中氯代甲烷为二氯甲烷或氯仿，优选二氯甲烷；烷基醇为甲醇、乙醇或异丙醇，优选甲醇。在e步反应中，将d步反应所得III溶入一定比例的烷基醇和氯代甲烷混合溶剂中，加入催化剂，在一定压力的氢气和反应温度下氢化，经后处理得到产物NH2-PEG-DSPE；其中，混合溶剂里的烷基醇为甲醇或乙醇，氯代甲烷为二氯甲烷或氯仿，优选乙醇和二氯甲烷组成的混合溶剂；混合溶剂中烷基醇和氯代甲烷的比例在1-31之间，优选比例为11;催化剂为钯碳或Raney镍，优选10%的钯碳。反应式2中d步反应所使用的叠氮取代的PEG氯甲酸酯，可按照反应式3所示，经f和g两步反应制备；首先将PEG-对甲苯磺酸单酯(简为IV表示)与叠氮化钠进行取代反应得到单叠氮基取代的PEG(简为V表示)，然后将之与三光气反应得到相应的氯甲酸酯(简为VI表示)。<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>在f步反应中，将一定量的IV和叠氮化钠溶于N，N-二甲基甲酰胺中反应，经后处理和柱层析分离得到V;其中，一定量的IV和叠氮化钠的摩尔比例为11-3，优选比例为12，过低或过高量的叠氮化钠会导致反应不完全或反应物的浪费；柱层析分离所用的洗脱剂为由氯代甲烷、石油醚和烷基醇组成的混合溶剂，其中氯代甲烷为二氯甲烷或氯仿，优选二氯甲烷；烷基醇为甲醇、乙醇或异丙醇，优选甲醇。在g步反应中，在碱存在下，将一定量的V溶于无水氯代甲烷和无水烷基苯的混合溶剂中，与三光气作用，经后处理得到VI；其中，碱为叔胺，可以是三乙胺、三丁胺、吡啶或N，N-二甲基苯胺，优选N，N-二甲基苯胺；一定量的V、碱和三光气的摩尔比例为1:1:1-3，优选比例为113;氯代甲烷溶剂为二氯甲烷或氯仿，优选二氯甲烷；烷基苯溶剂为甲苯、乙苯或二甲苯，优选甲苯。本发明所述的DSPE合成工艺中所用的原料价廉易得，反应条件温和，且易于操作。由于苄氧羰基相对于文献报道的保护基而言，有显著的紫外吸收，可使用薄层色谱跟踪反应，控制反应进程。更为重要的是，由于采用了苄氧羰基保护乙醇胺的氨基，可有效地提高反应的选择性。此外还有意义的是，原料1，2-二硬脂酰甘油脂可在反应后可部分回收再用，降低了原料成本。本发明所述的NH2-PEG-DSPE合成工艺中所涉及的工艺相对简单，条件温和，所用原料通过对PEG进行单叠氮基取代获得，既提高了三光气酰化反应的选择性，又可方便地通过氢化还原引入目标产物的末端氨基。按本发明方法制备的化合物已经红外光谱、核磁氢谱和质谱确定了化合物的分子结构。具体实施例方式本发明由下述实施例得到进一步的说明，但这些说明并不是限制本发明。实施例1.2-羟乙基氨基甲酸苄酯的制备将12mL乙醇胺混合于300mL二氧六环与水的混合溶剂(11)中，分别加入IOOmgN，N-二甲基苯胺、32mL苄氧羰基氯和28mL三乙胺，混合液室温搅拌12h，然后减压除去溶齐U，得到粘稠溶液。将之用200mL二氯甲烷和IOOmL水稀释，分离有机层，水层再用二氯甲烷提取(50mLX3)。合并有机层，用0.IM的盐酸水溶液、水、饱和食盐水分别洗涤2遍，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得37.Og白色粗品。将所得粗品用65mL石油醚/乙酸乙酯混合溶剂(40mL乙酸乙酯，25mL石油醚)加热溶解，得乳白色溶液，冷却析晶，得34.6g产品，收率91%。实施例2.化合物II的制备在插有温度计的IOOOmL干燥三颈瓶中，于氮气保护下加入250mL干燥无水的四氢呋喃，冷却至0°C后加入3.6g三乙胺，然后缓慢滴加含0.34gPOCl3的50!!^无水四氢呋喃溶液，保持在0°C下继续搅拌0.5h。将18.6g1，2-二硬脂酰甘油脂溶于250mL无水四氢呋喃，然后将之缓慢滴加至上述反应液中，控制反应液温度不高于0°C，约2.5h加毕。在0°C下继续搅拌lh，然后室温搅拌过夜。在10°C以下，向上述反应液缓慢滴加5.Sg2-羟乙基氨基甲酸苄酯和3.6g三乙胺的无水四氢呋喃溶液(IOOmL)，室温搅拌反应24h后，再加入15mL水终止反应，减压蒸去有机溶剂，残余物用盐酸酸化至PH=1，二氯甲烷提取(50mLX3)，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，柱层析(二氯甲烷石油醚甲醇=1011)，先回收得到原料1，2-二硬脂酰甘油脂5.6g，回收率约30%；然后分离得白色蜡状产物10.2g，收率40%。IR(v,cnT1):3360s(-0H),2917vs(Alkyl),1740vs(0=C-0),1690s(0=C-NH)，1537s(Ar),1468vs(Ar),1255vs(COO-C)；ESI-MS(m/z):880[Μ—ΗΓ;1H-NmrGOOMHz,CDCl3)5=7.35-7.26(m，5H，Ar),5.75(br,1H,NH),5.19(s，2H，Ar-CHi),5.11-5.07(m,1H,CH2-CH-CH2)，4.11-4.01(m,4H,O-CHa-CH2-O)，3.73-3.62(m,2H,OP-OCH2CH2)，3.39-3.48(m,2H,OP-OCHa)，2.24(br,4H,(CHiCO)2),1.55(br,4H,(CHiCH2CO)2),1.41-1.12(m,56H,alkyl),0.88(t,J=6Hz，6H，CH3)。实施例3.DSPE的制备将1.9gII加入到600mL乙醇/二氯甲烷(11)混合溶剂中，加热至50°C得无色澄清溶液，然后加入0.5g10%钯碳，在10个大气压氢气下，于50°C反应4h。反应结束后，趁热过滤，滤液浓缩至150mL，有白色固体析出，冷却静置3h，过滤得粗品。用乙醇/二氯甲烷混合溶剂重结晶，得白色固体1.3g(收率82%)。IR(v,cnf1):3263s(-NH),2917vs(Alkyl),1737vs(0=C_0)，1627s(-NH)，1265vs(COO-C)；ESI-MS(m/z)746[M-H]748[M+H]+；1H-NMR(300MHz,CDCl3)δ=5.20-5.17(m,1H,CH2-CH-CH2)，4.12-3.99(m,4H,O-CH^-CHa-O)，3.48-3.27(m,2H,OP-OCH2)，3.14-3.08(m,2H,OP-OCH2)，2.30(br,4H,(CHaCO)2)，1·58(br,4H,(CHaCH2CO)2)，1.41-1.12(m，56H，alkyl),0.88(t,J=6Hz，6H，CH3)。实施例4.化合物IV的制备将0.68g对甲苯磺酰氯、5.OOgPEG2000和0.31gN，N-二甲基苯胺加入到25mL无水二氯甲烷中，回流3h，然后冷却至室温，用5%HCl溶液洗涤反应液(25mLX2)，分离有机层，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析(二氯甲烷石油醚甲醇=511)，分离得白色蜡状产物2.80g,收率55%。IR(v,cnf1):3427s(-0H)，2885vs(Alkyl)，1597s(Ar)，1467s(Ar)，1176vs(CH2-O-CH2)，1112vs(CH2-O-CH2)；1H-NMR(500MHz,CDCl3)δ=7.79-7.81(m,2Η,arom),7.33-7.35(m,2H,arom),4.16(t,J=6Hz，2H，PhSO2-OCH2),3.49-3.79(m,PEG氧甲基氢)，2.45(s，3H，PhCH3)。实施例5.化合物V的制备将2.15gIV和0.Ilg叠氮化钠溶入到25mLN，N-二甲基甲酰胺中，回流反应5h。减压蒸去溶剂，残留物用30mL二氯甲烷溶解，用水洗涤(25mLX2)，分离有机层，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析(二氯甲烷石油醚甲醇=511)，分离浅黄色蜡状产物1.30g，收率65%。IR(v，cnT1):3490s(-0H)，2868vs(Alkyl)，2103s(N3)，1112vs(CH2-O-CH2)。实施例6.化合物VI的制备将2.Og化合物V溶于IOmL无水二氯甲烷/50mL无水甲苯混合溶剂中，加入0.9g三光气和0.IgN，N-二甲基苯胺，室温搅拌过夜。反应结束后，反应液浓缩至有大量白色沉淀生成，静置lh，过滤，滤饼用冰冷无水乙醚洗涤两次，得产物粗品1.9g，收率95%。IR(ν,cnT1):2886vs(Alkyl),2102s(N3),1747s(0=C)，1147vs(CH2-O-CH2)，1115vs(CH2-O-CH2)。实施例7.化合物III的制备将1.OOgVI加入到25mL无水二氯甲烷中，溶解得无色澄清溶液，然后加入0.07gN，N-二甲基苯胺和0.38gDSPE，反应液回流过夜。然后冷却至室温，用5%盐酸水溶液洗涤反应液(15mLX2)，有机层用无水硫酸钠干燥，浓缩，柱层析(二氯甲烷石油醚甲醇=1011)，分离得白色蜡状物0.39g，收率30%。IR(v，cnf1):2889vs(Alkyl)，2106s(N3)，1719s(0=C),1280s(COO-C),1148vs(CH2-O-CH2)，1115vs(CH2-O-CH2)。实施例8.NH2-PEG-DSPE的制备将0.84gIII加入到200mL乙醇/二氯甲烷(11)混合溶剂中，加热至50°C得无色澄清溶液，然后加入0.30g10%钯碳，在10个大气压氢气下，于50°C反应4h。反应结束后，趁热过滤，滤饼用热乙醇洗涤两次。蒸去溶剂，得浅黄色固体0.31g，收率36%。IR(ν，cnf1):3403s(-NH2),2917vs(Alkyl),1738vs(0=C-0),1641s(-NH2),1250vs(COO-C),IllOvs(CH2-O-CH2),557s(-NH2)；MALDI-T0F质谱数据分子量区间1715-2244；1H_WR(300MHz，CDCl3)δ=4.00-3.40(br,O-CH2)，2.30-2.50(m,2H,CH2CO)，1.62-0.89(m,alkyl)。权利要求一种二硬脂酰磷酰乙醇胺的制备方法，其特征是该制备方法按照以下反应式1所示，经步骤a、b、c三步反应进行；首先将三氯氧磷和1，2-二硬脂酰甘油脂反应得到磷酰二氯单酯，简称为I，再将I与2-羟乙基氨基甲酸苄酯作用得到含氨基保护基的DSPE，简为为II，然后将II催化氢化脱去保护基得到二硬脂酰磷酰乙醇胺，简称为DSPE，反应式1。FSA00000065951300011.tif2.根据权利要求1所述的二硬脂酰磷酰乙醇胺的制备方法，其特征是反应式1中的a步反应是在氮气保护下，将碱溶于无水非质子溶剂中，于0°C下分别滴加三氯氧磷和1，2-二硬脂酰甘油脂的上述溶剂的溶液，然后在0°C反应，所得I反应液不经分离，直接用于b步反应；其中，碱为叔胺、三乙胺、三丁胺、吡啶或N，N-二甲基苯胺，优选三乙胺；非质子溶剂为氯仿、二氯甲烷、N，N-二甲基甲酰胺或四氢呋喃，优选四氢呋喃；三氯氧磷、1，2_二硬脂酰甘油脂和碱的摩尔比例为0.9-1.311，优选比例为1.211。3.根据权利要求1所述的二硬脂酰磷酰乙醇胺的制备方法，其特征是反应式1中的b步反应中，将a步反应中所得I的反应液，在氮气保护下，在10°C以下，滴加2-羟乙基氨基甲酸苄酯和碱的无水非质子溶剂的溶液，于室温反应，然后加水终止，经柱层析分离得到II；其中，碱为叔胺、三乙胺、三丁胺、吡啶或N，N-二甲基苯胺，优选三乙胺；非质子溶剂为氯仿、二氯甲烷、N，N-二甲基甲酰胺或四氢呋喃，优选四氢呋喃；2-羟乙基氨基甲酸苄酯、碱与I的摩尔比例为111；柱层析分离所用的洗脱剂为由氯代甲烷、石油醚和烷基醇组成的混合溶剂，氯代甲烷为二氯甲烷或氯仿，优选二氯甲烷，烷基醇为甲醇、乙醇或异丙醇，优选甲醇。4.根据权利要求1所述的二硬脂酰磷酰乙醇胺的制备方法，其特征是所述的反应式1中的c步反应中，将所述b步反应中所得II溶入烷基醇和氯代甲烷混合溶剂中，加入催化剂，氢化脱去苄氧羰基，得到产物DSPE；其中，烷基醇为甲醇或乙醇，氯代甲烷为二氯甲烷或氯仿，优选乙醇和二氯甲烷组成的混合溶剂，混合溶剂中烷基醇和氯代甲烷的比例在1-31之间，优选比例为11；催化剂为钯碳或Raney镍，优选10%的钯碳。5.一种二硬脂酰磷酰乙醇胺的氨基聚乙二醇化衍生物的制备方法，其特征是该制备方法按照以下反应式2所示，经步骤d和e两步反应进行；首先将DSPE与叠氮取代的PEG氯甲酸酯，简称为VI，反应得到叠氮基聚乙二醇化的DSPE衍生物，简称为III，然后通过催化氢化将叠氮基还原为氨基，得到二硬脂酰磷酰乙醇胺的氨基聚乙二醇化衍生物，简称为<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>反应式2。6.根据权利要求5所述的二硬脂酰磷酰乙醇胺的氨基聚乙二醇化衍生物的制备方法，其特征是所述反应式2中的d步反应中，在碱存在下，将VI溶于无水氯代甲烷中，与等摩尔的DSPE反应，经柱层析分离得到III；其中，碱为叔胺、三乙胺、三丁胺、吡啶或N，N-二甲基苯胺，优选N，N-二甲基苯胺；氯代甲烷溶剂为氯仿或二氯甲烷，优选二氯甲烷；柱层析分离所用的洗脱剂为由氯代甲烷、石油醚和烷基醇组成的混合溶剂，氯代甲烷为二氯甲烷或氯仿，优选二氯甲烷，烷基醇为甲醇、乙醇或异丙醇，优选甲醇。7.根据权利要求5所述的二硬脂酰磷酰乙醇胺的氨基聚乙二醇化衍生物的制备方法，其特征是所述反应式2中的e步反应中，将d步反应中所得III溶入烷基醇和氯代甲烷混合溶剂中，加入催化剂氢化，得到NH2-PEG-DSPE；其中，烷基醇为甲醇或乙醇，氯代甲烷为二氯甲烷或氯仿，优选乙醇和二氯甲烷组成的混合溶剂，混合溶剂中烷基醇和氯代甲烷的比例在1-31之间，优选比例为11；催化剂为钯碳或Raney镍，优选10%的钯碳。8.根据权利要求5所述的二硬脂酰磷酰乙醇胺的氨基聚乙二醇化衍生物的制备方法，其特征是所述叠氮取代的PEG氯甲酸酯按照以下反应式3所示，经步骤f和g两步反应进行；首先将PEG-对甲苯磺酸单酯，简称为IV，与叠氮化钠进行取代反应得到单叠氮基取代的PEG，简称为V，然后将之与三光气反应得到叠氮取代的PEG氯甲酸酯，简称为VI，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>(f)(g)IVVVI反应式3。9.根据权利要求8所述的二硬脂酰磷酰乙醇胺的氨基聚乙二醇化衍生物的制备方法，其特征是所述反应式3中的f步反应中，将IV和叠氮化钠溶于N，N-二甲基甲酰胺中反应，经柱层析分离得到V;其中，IV和叠氮化钠的摩尔比例为11-3，优选比例为12;柱层析分离所用的洗脱剂为由氯代甲烷、石油醚和烷基醇组成的混合溶剂，氯代甲烷为二氯甲烷或氯仿，优选二氯甲烷，烷基醇为甲醇、乙醇或异丙醇，优选甲醇。10.根据权利要求8所述的二硬脂酰磷酰乙醇胺的氨基聚乙二醇化衍生物的制备方法，其特征是所述反应式3中的g步反应中，在碱存在下，将V溶于无水氯代甲烷和无水烷基苯的混合溶剂中，与三光气作用，得到VI；其中，碱为叔胺、三乙胺、三丁胺、吡啶或N，N-二甲基苯胺，优选N，N-二甲基苯胺；V、碱和三光气的摩尔比例为111-3，优选比例为113;氯代甲烷溶剂为二氯甲烷或氯仿，优选二氯甲烷，烷基苯溶剂为甲苯、乙苯或二甲苯，优选甲苯。全文摘要二硬脂酰磷酰乙醇胺及其氨基聚乙二醇化衍生物的制备方法涉及一种药用载体材料磷脂——二硬脂酰磷酰乙醇胺(简为DSPE表示)及其氨基聚乙二醇化衍生物(简为NH2-PEG-DSPE表示)的有效制备方法。二硬脂酰磷酰乙醇胺制备方法为首先将三氯氧磷和1，2-二硬脂酰甘油脂反应得到磷酰二氯单酯，简称为I，再将I与2-羟乙基氨基甲酸苄酯作用得到含氨基保护基的DSPE，简为为II，然后将II催化氢化脱去保护基得到二硬脂酰磷酰乙醇胺；氨基聚乙二醇化衍生物的制备方法为首先将DSPE与叠氮取代的PEG氯甲酸酯，简称为VI，反应得到叠氮基聚乙二醇化的DSPE衍生物，简称为III，然后通过催化氢化将叠氮基还原为氨基，得到二硬脂酰磷酰乙醇胺的氨基聚乙二醇化衍生物。文档编号C08G65/48GK101805369SQ20101013598公开日2010年8月18日申请日期2010年3月30日优先权日2010年3月30日发明者房雷,苟少华申请人:东南大学