。
[0060] 本发明还提供一种神-IgG馨合物的制备方法，包括W下步骤：
[0061] A)神与IgG的馨合反应；在人源的IgG中加入神离子进行馨合反应；
[0062]B)纯化神-IgG馨合物的提取；采用免疫亲和层析法，去除反应溶液中未反应的 IgGW及多余的神离子，即得神-IgG馨合物，具体步骤如下：
[0063] (1)溶解样品；将上述步骤A)中提取的神-IgG馨合物溶解于生理盐水中；
[0064] (2)平衡层析柱；使用稀释缓冲液冲洗层析柱的管路，在层析柱中装入能与IgG特 异性结合的填料，装柱后，继续使用稀释缓冲液平衡层析柱；
[006引 做上样：待层析柱平衡后，用稀释缓冲液稀释步骤（1)中样品，然后上柱，IgG与 填料特异性结合；
[0066] (4)洗脱；使用稀释缓冲液冲洗层析柱至基线平衡，然后使用0. 05-0.Imol/L的磯 酸盐溶液进行洗脱；
[0067] (5)收集；收集经过步骤（4)洗脱后的洗脱液，收集完毕后立即使蛋白复性；
[0068] (6)透析；将步骤巧）中的收集的洗脱液，装透析袋，用d地2〇透析除盐，换水S次 后，透析过夜，收集样本；
[0069](7)平衡层析柱；采用新的层析柱，用稀释缓冲液冲洗管路，在该层析柱中装入能 与神特异性结合的填料，装柱后再用稀释缓冲液平衡层析柱；
[0070] 做上样；待层析柱平衡后，用稀释缓冲液稀释步骤做中样本，然后上柱；
[0071] (9)洗脱；使用稀释缓冲液冲洗层析柱至基线平衡，然后使用0. 5-1.Omol/L的磯 酸盐溶液进行洗脱；
[0072] (10)收集；收集经过步骤（9)洗脱后的洗脱液，收集完毕后立即使蛋白复性；
[007引 （11)透析；将步骤（10)中的收集的洗脱液，装透析袋，用(1化0透析除盐，换水立 次后，透析过夜，收集样本，即得神-IgG馨合物；
[0074]C)对神-IgG馨合物的鉴定，具体步骤如下；
[0075] (1)制备胶床；W琼脂糖凝胶、聚丙締酷胺凝胶中的一种作为介质制备胶床；
[0076] (2)加样；取步骤B)中提取纯化得到的神-IgG馨合物，加入稀释缓冲液，并混匀， 然后加样于样品槽中；
[0077] 做电泳：连接电泳板，进行电泳；
[007引 （4)检测；在胶床上找出相应蛋白条带，将该蛋白条带取出，将蛋白条带复溶，然 后再采用ICP-MS、AAS检测该液体中是否含有神W及检测神的含量。
[0079] 本发明还提供一种至少包括如上述的神-IgG馨合物作为对照品的试剂盒。
[0080] 优选地，该试剂盒中还包括包被液，该包被液为捕获IgG的蛋白或捕获神的物质。
[0081] 本发明还提供一种神-IgG馨合物的制备方法，包括W下步骤：
[0082]A)神与IgG的馨合反应；在人源的IgG或按照生物学方法重组的IgG中加入神离 子进行馨合反应，得到反应溶液；
[0083]B)纯化神-IgG馨合物的提取；采用免疫亲和层析法，去除反应溶液中未反应的 IgGW及多余的神离子，即得神-IgG馨合物，具体步骤如下：
[0084] (1)溶解样品；向经过步骤A)得到的反应溶液中加入生理盐水，使神-IgG馨合物 复溶
[00财 似平衡层析柱；使用稀释缓冲液冲洗层析柱的管路，在层析柱中装入能与IgG特 异性结合的填料，装柱后，继续使用稀释缓冲液平衡层析柱；
[008引 做上样：待层析柱平衡后，用稀释缓冲液稀释步骤（1)中样品，然后上柱，IgG与 填料特异性结合；
[0087] (4)洗脱；使用稀释缓冲液冲洗层析柱至基线平衡，然后使用0. 05-0.Imol/L的磯 酸盐溶液进行洗脱；
[0088] (5)收集；收集经过步骤（4)洗脱后的洗脱液，收集完毕后立即使蛋白复性；
[0089](6)透析；将步骤巧）中的收集的洗脱液，装透析袋，用d地2〇透析除盐，换水S次 后，4°C透析过夜，收集样本；
[0090] (7)平衡层析柱；采用新的层析柱，用稀释缓冲液冲洗管路，在该层析柱中装入能 与神特异性结合的填料，装柱后再用稀释缓冲液平衡层析柱；
[00川 做上样；待层析柱平衡后，用稀释缓冲液稀释步骤做中样本，然后上柱；
[0092] (9)洗脱；使用稀释缓冲液冲洗层析柱至基线平衡，然后使用0. 5-1.Omol/L的磯 酸盐溶液进行洗脱；
[0093] (10)收集；收集经过步骤（9)洗脱后的洗脱液，收集完毕后立即使蛋白复性；
[0094] (11)透析；将步骤（10)中的收集的洗脱液，装透析袋，用(1化0透析除盐，换水立 次后，4°C透析过夜，收集样本，即得神-IgG馨合物；
[009引 C)对神-IgG馨合物的鉴定，具体步骤如下；
[0096] (1)制备胶床；W琼脂糖凝胶、聚丙締酷胺凝胶中的一种作为介质制备胶床；
[0097] 似加样；取步骤B)中提取纯化得到的神-IgG馨合物，加入稀释缓冲液，并混匀， 然后加样于样品槽中；
[009引 做电泳：连接电泳板，进行电泳；
[0099] (4)检测；在胶床上找出含神的蛋白条带，将该蛋白条带取出，将蛋白条带复溶， 然后再采用ICP-MS法、AAS法或化ISA法检测是否含有神W及检测神的含量。
[0100] 本发明还提供一种至少包括如上述的神-IgG馨合物作为对照品的试剂盒。
[0101] 优选地，该试剂盒中还包括包被液，该包被液含有可捕获IgG的蛋白或可捕获神 的物质。
[0102] 在本发明中，能实现本发明目的的试剂盒可W列出W下几种，但并不限于此。
[0103] 一种检测血样中神-IgG馨合物的试剂盒，包括：含有可捕获IgG的蛋白的包被液、 封闭液、洗漆液、作为二抗的可捕获神的物质、酶标抗体、底物、终止液、稀释缓冲液、上样缓 冲液、阳性对照、阴性对照等。
[0104] -种检测血样中神-IgG馨合物的试剂盒，包括：含有可捕获IgG的蛋白的包被液、 封闭液、洗漆液、洗脱液、上样缓冲液、阳性对照、阴性对照等。
[0105] -种检测血样中神-IgG馨合物的试剂盒，包括：含有可捕获IgG的蛋白的包被液、 封闭液、洗漆液、洗脱液、上样缓冲液、酸化剂、过氧化氨、标准品、阴性对照等。
[0106] 一种检测血样中神-IgG馨合物的试剂盒，包括：作为提纯全血中IgG所需提取试 剂、复溶液、含有可捕获神的物质的包被液、封闭液、洗漆液、酶标抗体、底物、终止液、稀释 缓冲液、上样缓冲液、阳性对照、阴性对照等。
[0107] 一种检测血样中神-IgG馨合物的试剂盒，包括：作为提纯全血中IgG所需提取试 剂、复溶液、上样缓冲液、阳性对照、阴性对照等。
[010引一种检测血样中神-IgG馨合物的试剂盒，包括：作为提纯全血中IgG所需提取试 剂、上样缓冲液、复溶液、酸化剂、过氧化氨、阳性对照、阴性对照等。
[0109] 一种检测血样中神-IgG馨合物的试剂盒，包括：含有可捕获IgG的蛋白的包被液、 胶床介质、复溶液、上样缓冲液、溶解胶床上含神的蛋白条带所需液体、含有可捕获神的物 质的包被液、封闭液、洗漆液、酶标抗体、底物、终止液、稀释缓冲液、阳性对照、阴性对照等。
[0110] 一种检测血样中神-IgG馨合物的试剂盒，包括：作为提纯全血中IgG所需提取试 剂、胶床介质、复溶液、上样缓冲液、溶解胶床上含神的蛋白条带所需液体、阳性对照、阴性 对照等。
[0111] 一种检测血样中神-IgG馨合物的试剂盒，包括：作为提纯全血中IgG所需提取试 剂、胶床介质、复溶液、上样缓冲液、溶解胶床上含神的蛋白条带所需液体、酸化剂、过氧化 氨、阳性对照、阴性对照等。
[0112] 上述几种试剂盒中，所述阳性对照为标准品，即馨合有重神的IgG馨合物或馨合 有重神的BSA馨合物；所述阴性对照为稀释缓冲液。
[0113] 上述试剂盒用于检测馨合神的IgG,W提高检测的准确性，重复性，并使之在临床 中得到推广。
[0114] 本发明还提供一种定量检测神-IgG馨合物的方法，W已知含量的上述的神-IgG 馨合物作为对照品，采用W下方法之一对样品进行检测；酶联免疫法、酶联免疫与原子吸收 光谱结合法、酶联免疫与电感禪合等离子体质谱结合法、提纯神-IgG馨合物与酶联免疫结 合法、提纯神-IgG馨合物与原子吸收光谱结合法、提纯神-IgG馨合物与电感禪合等离子体 质谱结合法、电泳与酶联免疫或原子吸收光谱或电感禪合等离子体质谱结合法。在本发明 中，用检测神馨合型免疫复合物的方法可W列出的有W下几种，但并不限于W下几种。
[0115] 其中，上述定量检测神-IgG馨合物的方法中采用的试剂如下；
[0116]方法一：酶巧免疫法巧LISA法）检测神-IgG馨合物，按照如下步骤检测：
[0117] 1)将能够捕获IgG的物质，如人IgG抗体包被于固相载体上；用样品稀释液稀释 抗IgGAb至500000-4000000倍，加入化ISA板微孔中，4°C过夜16-18小时，或37°C水浴 1-3小时，储存冰箱；
[0118] 2)从循环系统取全血，作待检样品，lOOOrmp离屯、5-8分钟，离屯、弃去沉淀；
[0119] 3)封闭；移去样品稀释液，并用洗漆液进行洗漆，待洗漆完成后，加入W1% -5% 牛血清白蛋白或脱脂奶粉作为封闭液，37°C放置1小时，移去封闭液，并用洗漆液进行洗 漆，洗漆完成后，ELISA板于36. 5-37. 5°C放置1-2小时；
[0120] 4)加待检样品，并且温育；加入步骤2)中的待检样品、W已知含量的神-IgG馨合 物作标准品；用样品稀释液稀释待检样品稀释至相应倍数，即稀释10-40倍，加入微孔中， 37°C作用1-2小时；
[0121] 5)加入可W捕获神的物质，并且温育；移去待检样品，并用洗漆液进行洗漆，待洗 漆完成后，加入用样品稀释液稀释与可W捕获神的物质或能与神反应形成抗原抗体复合物 的抗AsAb，37°C作用1-2小时，使抗AsAb与IgG上的神反应；
[0122] 6)酶结合物温育；移去抗神抗体，并用洗漆液进行洗漆，待洗漆完成后，加入用样 品稀释液稀释的酶标抗体，使稀释的酶标抗体的浓度为2yg/ml，37°C作用1-2小时，使其 与酶标抗体反应；
[0123] 7)底物温育；移去酶标抗体，并用洗漆液进行洗漆，待洗漆完成后，加入底物， 37°C避光作用30分钟；
[0124] 8)终止反应；待检样品滴加终止液至每一微孔；
[01巧]9)取波长405nm，加完终止液后，将化ISA板置于酶标仪上分别读取待检样品和标 准品的0D值，通过绘制标准曲线，求得待检样品的含量（也可不使用酶标仪，直接通过染色 情况进行定性检测）。
[0126] 该方法利用化ISA原理，