PEG)O. 5g、对醛基苯甲酸100mg、l-(3-二甲氨基丙基）_3_乙基碳 二亚胺盐酸盐120mg、4-二甲氨基吡啶50mg，分别溶于N,N-二甲基甲酰胺6ml中，室温搅拌 反应36h，用冰乙醚沉淀过滤，真空干燥得醛基化的PEG。
[0074] 3)将肼基化的PLGA400mg、醛基化的PEG540mg分别溶于二甲基亚砜10ml中，在 氩气保护下100°c下回流24h，反应结束后，将反应体系迅速冷却至室温，通入空气，终止聚 合反应；反应液在N，N-二甲基甲酰胺中透析24小时后用冰乙醚沉淀，11000转离心5分钟， 取离心后的沉淀干燥得到双亲性高分子结合体。
[0075] 实施例6 :
[0076] 乳化-溶剂蒸发法。采用乳化-溶剂蒸发法制备双亲性高分子胶束的过程如下：
[0077] 精确称取20mg结合体溶解在4ml去离子水中，将溶液置于冰浴中。在探头式超声 波发生器作用下，用注射器匀速注入lml二氯甲烷，超声时间为10分钟，超声功率为150W。 超声结束，将得到的乳液在30°C下通过旋转蒸发仪进行旋蒸13分钟，除去有机相，转速为 80转/分钟。待二氯甲烷完全挥发，得到pH响应性双亲性高分子结合体的组装体溶液。
[0078] 如图2粒度分析测试结果所示，所制备的自组装体有效粒径为80nm;如图3、图4 体外模拟粘液酸性环境，pH变化前后电位分析测试结果所示，所制备的自组装体在pH降低 时，Zeta电位值由中性转为正电，即pH响应性腙键在较低pH值时断裂，使得自组装体具有 优越的pH响应性；如图5透射照片所示，所制备的自组装体粒径均匀，分散性好。
[0079] 实施例7:
[0080] 乳化-溶剂蒸发法。采用乳化-溶剂蒸发法制备双亲性高分子胶束的过程如下：
[0081] 精确称取12mg结合体溶解在4ml去离子水中，将溶液置于冰浴中。在探头式超声 波发生器作用下，用注射器匀速注入0. 8ml三氯甲烷，超声时间为8分钟，超声功率为145W。 超声结束，将得到的乳液在25°C下通过旋转蒸发仪进行旋蒸15分钟，除去有机相，转速为 85转/分钟。待三氯甲烷完全挥发，得到pH响应性双亲性高分子结合体的组装体溶液。所 制备的的组装体有效粒径为72nm。
[0082] 实施例8 :
[0083] 乳化-溶剂蒸发法。采用乳化-溶剂蒸发法制备双亲性高分子胶束的过程如下：
[0084] 精确称取8mg结合体溶解在4ml去离子水中，将溶液置于冰浴中。在探头式超声 波发生器作用下，用注射器匀速注入0.5ml二氯甲烷，超声时间为9分钟，超声功率为130W。 超声结束，将得到的乳液在27°C下通过旋转蒸发仪进行旋蒸14分钟，除去有机相，转速为 90转/分钟。待二氯甲烷完全挥发，得到pH响应性双亲性高分子结合体的组装体溶液。所 制备的的组装体有效粒径为98nm。
[0085] 实施例9 :
[0086] 乳化-溶剂蒸发法。采用乳化-溶剂蒸发法制备双亲性高分子胶束的过程如下：
[0087] 精确称取6mg结合体溶解在4ml去离子水中，将溶液置于冰浴中。在探头式超声波 发生器作用下，用注射器匀速注入0. 4ml三氯甲烷，超声时间为10分钟，超声功率为135W。 超声结束，将得到的乳液在26°C下通过旋转蒸发仪进行旋蒸11分钟，除去有机相，转速为 85转/分钟。待三氯甲烷完全挥发，得到pH响应性双亲性高分子结合体的组装体溶液。所 制备的的组装体有效粒径为9lnm。
[0088] 实施例10 :
[0089] 乳化-溶剂蒸发法。采用乳化-溶剂蒸发法制备双亲性高分子胶束的过程如下：
[0090] 精确称取4mg结合体溶解在4ml去离子水中，将溶液置于冰浴中。在探头式超声 波发生器作用下，用注射器匀速注入0.2ml二氯甲烷，超声时间为8分钟，超声功率为150W。 超声结束，将得到的乳液在29°C下通过旋转蒸发仪进行旋蒸12分钟，除去有机相，转速为 88转/分钟。待二氯甲烷完全挥发，得到pH响应性双亲性高分子结合体的组装体溶液。所 制备的的组装体有效粒径为75nm。
[0091] 上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的 限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化， 均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。
【主权项】
1. 一种用于粘液渗透的PH响应性高分子胶束；其特征是通过pH响应性腙键将聚乳 酸-羟基乙酸共聚物（PLGA)与聚乙二醇（PEG)相结合形成一种双亲性高分子结合体，后组 装形成pH响应性高分子胶束。2. 权利要求1的高分子胶束，其特征是所述的双亲性高分子结合体结构式如下：PLGA分子量为10~50kDa，PEG分子量为1~5kDa。3. 权利要求2的高分子胶束，其特征是双亲性高分子结合体的制备方法如下：将肼基 化的PLGA、醛基化的PEG按摩尔比1:2~5溶于二甲基亚砜中，在氩气保护下70~100°C 下回流24~72h，反应结束后，将反应体系迅速冷却至室温，通入空气，终止聚合反应；反应 液在N，N-二甲基甲酰胺中透析12~24小时后用冰乙醚沉淀，8000~11000转离心5~ 10分钟，取离心后的沉淀干燥得到pH响应性腙键连接的双亲性结合体。4. 如权利要求3所述的方法，其特征是所述的肼基化的PLGA的制备方法为：将聚乳 酸-羟基乙酸共聚物、1- (3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳二亚胺盐酸盐、N-羟基琥珀酰亚胺、 己二酸二酰肼按摩尔比I: (1. 2~5) : (1. 2~5) : (3~10)溶于二甲基亚砜中，室温搅拌反 应24~36h，纯水透析24~48h后冻干得到肼基化的PLGA高分子固体粉末。5. 如权利要求3所述的方法，其特征是所述的醛基化的PEG的制备方法为：将聚乙二 醇、对醛基苯甲酸、1-(3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳二亚胺盐酸盐、4-二甲氨基吡啶按摩尔 比I: (1. 2~5) : (1. 2~5) : (3~10)溶于N，N-二甲基甲酰胺中，室温搅拌反应24~36h， 用冰乙醚沉淀过滤，真空干燥得醛基化的PEG固体粉末。6. 如权利要求3所述的方法，其特征是所述的肼基化的PLGA溶于二甲基亚砜浓度为 0. 05 ~0. 2g/ml。7. 如权利要求4所述的方法，其特征是所述的PLGA溶于二甲基亚砜浓度为0. 05~ 0.2g/ml〇8. 如权利要求5所述的方法，其特征是所述的PEG溶于N，N-二甲基甲酰胺浓度为 0· 05 ~0· 25g/ml。9. 如权利要求1所述的pH响应性高分子胶束的组装方法，其特征是取pH响应性双亲 性高分子结合体溶解在去离子水中，将溶液置于冰浴中；在超声波发生器作用下，滴入二氯 甲烷或三氯甲烷，超声结束，将得到的乳液在25~30°C下通过旋转蒸发仪进行旋蒸10~ 15分钟，除去有机相，得到pH响应性双亲性高分子结合体的组装体溶液。10. 如权利要求9所述的方法，其特征是所述的双亲性高分子结合体溶于去离子水浓 度为1~5g/L ;所述的有机溶剂：离子水体积比为1:1~20。
【专利摘要】本发明涉及一种用于粘液渗透的pH响应性高分子胶束及其制备方法；通过pH响应性腙键将PLGA与PEG相结合形成一种双亲性高分子结合体，后组装形成pH响应性高分子胶束。肼基化的PLGA、醛基化的PEG溶于二甲基亚砜在氮气下反应；反应液在N,N-二甲基甲酰胺中透析12～24小时后用冰乙醚沉淀，取离心后的沉淀干燥得到pH响应性腙键连接的双亲性结合体。所制得的自组装药物载体保持了均匀较小粒径同时，生物相容性更好，具有pH响应性，可在粘液微环境pH值较低的环境下腙键断裂脱去PEG的保护，裸露出正电基团，与负电的细胞膜静电作用，增加胶束的细胞内吞作用，使得更多载体进入细胞进行缓控释药物，发挥载体作用。
【IPC分类】C08G81/00, A61K9/107, A61K47/34
【公开号】CN105153428
【申请号】CN201510382500
【发明人】常津, 房蕾, 宫晓群, 张健, 杨文涛
【申请人】天津大学
【公开日】2015年12月16日
【申请日】2015年7月2日