%，更 优选地至少90 %，更优选地至少95 %，96 %，97 %，98 %，99 %，并且最优选地100 %的序列 一致性。在另一个实施例中，引入进SEQIDNO: 1的氨基酸序列中的氨基酸取代、缺失和/ 或插入的数目多达10个，例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、或10个；或 多达5个，例如1个、2个、3个、4个、或5个。
[010。 脱氣核糖核酸酶化NA酶）：活合的脱氧核糖核酸酶值NA酶）是催化DNA骨架中的 憐酸二醋键的水解切割从而降解DNA的任何酶。根据本发明，可获得自细菌的DNA酶是优 选的；特别地，可获得自芽抱杆菌属的DNA酶是优选的；特别地，可获得自枯草芽抱杆菌或 地衣芽抱杆菌的DNA酶是优选的。此类DNA酶的实例描述于专利申请WO2011/098579或 PCT/EP2013/075922 中。
[0102] 过水解酶：活合的过水解酶能够催化过水解巧麻，该巧麻导致在过氣化物源(例 如，过氧化氨）的存在下从簇酸醋（酷）底物产生过酸。虽然许多酶W低水平进行该反应， 过水解酶展示出高的过水解：水解比率，通常大于1。合适的过水解酶可W是植物、细菌或 真菌来源的。包括化学修饰的或蛋白质工程化的突变体。
[0103] 有用的过水解酶的实例包括天然存在的分枝杆菌属过水解酶或其变体。一种示例 性酶来源于耻垢分枝杆菌。运种酶，其酶特性、其结构及其变体描述于WO2005/056782、W0 2008/063400、US2008/145353W及US2007167344 中。
[0104] 氣化酶/过氣化物酶：活合的氣化酶巧过氣化物酶(或氧化还原酶）包括各种糖 氧化酶、漆酶、过氧化氨酶W及面代过氧化物酶。
[0105] 合适的过氧化物酶包括那些由国际生物化学与分子生物学联合会（IUBMB)命名 委员会陈述的酶分类EC1. 11. 1. 7包括的过氧化物酶，或源自其中的展示出过氧化物酶活 性的任何片段。
[0106] 适合的过氧化物酶包括植物、细菌或真菌来源的那些。包括化学修饰的或蛋白 质工程化的突变体。有用的过氧化物酶的实例包括来自拟鬼伞属，例如来自灰盖拟鬼伞 杞Cinerea)的过氧化物酶巧P179, 486)，及其变体，如在WO93/24618、W0 95/10602W及 WO98/15257中描述的那些。
[0107] 用于在本发明中使用的过氧化物酶还包括面代过氧化物酶，例如氯过氧化物酶、 漠过氧化物酶W及展示出氯过氧化物酶或漠过氧化物酶活性的化合物。根据其对面素离子 的特异性将面代过氧化物酶加W分类。氯过氧化物酶化C. 1. 11. 1. 10)催化从氯根离子形 成次氯酸盐。
[010引在一个实施例中，该面代过氧化物酶是氯过氧化物酶。优选地，该面代过氧化物酶 是饥面代过氧化物酶，即含饥酸盐的面代过氧化物酶。在本发明的一个优选方法中，将含饥 酸盐的面代过氧化物酶与氯根离子来源组合。
[0109] 已经从许多不同真菌，特别是从暗色丝抱菌（dematiaceoushyphomycete) 真菌组中分离出了面代过氧化物酶，比如卡尔黑霉属（化Idariomyces)(例如煤卡尔 黑霉（C.fumago))、链格抱属、弯抱属（例如痛枝弯抱（C.verruculosa)和不等弯抱 (C.inaequalis))、内厮蠕抱属、细基格抱属W及葡萄抱属。
[0110] 还已经从细菌，如假单胞菌属（例如，化咯假单胞菌（P.pyrrocinia))和链霉菌属 (例如，金色链霉菌（S.aureofaciens))中分离出了面代过氧化物酶。
[0111] 在一个优选实施方案中，该面代过氧化物酶可源自弯抱属，特别是痛枝弯抱 (Qirvulariaverru州Iosa)和不等弯抱，例如如描述于WO95/27046中的不等弯抱CBS 102. 42或描述于WO97/04102中的痛枝弯抱CBS147. 63或痛枝弯抱CBS444. 70;或可 源自如描述于WO01/79459中的Drechslerahartlebii，如描述于WO01/79458中的盐 沼小树状霉值en化yphiellasalina)、如描述于WO01/79461中的化aeotrichoconis crotalarie或如描述于WO01/79460 中的Geni州Iosporiumsp.。
[0112] 根据本发明的氧化酶具体包括由酶分类EC1. 10.3.2囊括的任何漆酶或源 自其中的展示出漆酶活性的片段、或展示出类似活性的化合物，例如儿茶酪氧化酶巧C 1. 10. 3. 1)、邻氨基苯酪氧化酶巧C1. 10. 3. 4)或胆红素氧化酶巧C1. 3. 3. 5)。
[0113] 优选的漆酶是微生物来源的酶。运些酶可W源自植物、细菌或真菌（包括丝状真 菌和酵母）。
[0114] 来自真菌的适合实例包括可源自W下项的菌株的漆酶：曲霉属，脉抱菌属（例如， 粗糖脉抱菌），柄抱壳菌属，葡萄抱属，金钱菌属（Collybia),层孔菌属（Fomes),香茹属，侧 耳属，栓菌属（例如，长绒毛栓菌和变色栓菌），丝核菌属（例如，立枯丝核菌巧.SOlani))， 拟鬼伞属（例如，灰盖拟鬼伞、毛头拟鬼伞杞coma化s)、弗瑞氏拟鬼伞（C.化iesii)及C.plicatilis)，小脆柄茹属（Psathyrella)(例如，白黄小脆柄茹化condelleana))， 斑權茹属（例如，蝶形斑權茹（P.papilionaceus))，毁丝霉属（例如，嗜热毁丝霉）， Schytalidium(例如，S.thermo地ilum)，多孔菌属（例如，P.pinsitus)，射脉菌属（例如， 射脉侧菌（P.radiata))(WO92/01046)或革盖菌属（例如，毛革盖菌（C.hirsuUis))(JP 223888 巧。
[0115] 来自细菌的适合实例包括可源自芽抱杆菌属的菌株的漆酶。
[0116] 优选的是源自拟鬼伞属或毁丝霉属的漆酶；特别是源自灰盖拟鬼伞的漆酶，如披 露于WO97/08325中；或源自嗜热毁丝霉，如披露于W095/33836中。
[0117] 其他氧化酶的实例包括但不限于氨基酸氧化酶、葡萄糖氧化酶、乳酸盐氧化酶、半 乳糖氧化酶、多元醇氧化酶（例如，WO2008/051491)、W及醒糖氧化酶。氧化酶及其相应的 底物可W被用作过氧化氨生成酶系统，由此作为过氧化氨的一个来源。若干种酶，例如过氧 化物酶、面代过氧化物酶W及过水解酶需要一个过氧化氨的来源。通过研究EC1.1.3. _、 EC1.2. 3._、EC1.4. 3. _、化及EC1.5. 3. _或类似类别（在国际生物化学协会下），本领域 的普通技术人员容易识别氧化酶和底物的运类组合的其他实例。
[om]SEQIDN0:l、2、或3(如上提及）中的运些氨基酸变化可W具有微小性质，即，不 会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保守氨基酸取代或插入；典型地1-30个氨基酸的 小缺失；小的氨基-或簇基-末端延伸，如氨基末端的甲硫氨酸残基；多达20-25个残基的 小接头肤；或便于通过改变净电荷或另一种功能来纯化的小延伸，如聚组氨酸段（tract)、 抗原表位或结合结构域。
[0119] 保守取代的实例是在下组的范围内：碱性氨基酸（精氨酸、赖氨酸及组氨酸）、酸 性氨基酸（谷氨酸和天冬氨酸）、极性氨基酸（谷氨酷胺和天冬酷胺）、疏水性氨基酸（亮 氨酸、异亮氨酸及鄉氨酸）、芳香族氨基酸（苯丙氨酸、色氨酸及酪氨酸）及小氨基酸（甘 氨酸、丙氨酸、丝氨酸、苏氨酸及甲硫氨酸）。一般不会改变特异性活性的氨基酸取代是本 领域已知的并且例如由H.诺伊拉特化化urath)和R.L希尔巧.L.Hill) ,1979,在蛋白 质（TheProteins),学术出版社，纽约中描述。常见的取代是Ala/Se;r、Val/Ile、Asp/Glu、 Thr/Ser、Ala/Gly、Ala/Thr、Ser/Asn、Ala/Val、Ser/Gly、Tyr/Phe、Ala/Pro、Lys/Arg、Asp/ Asn、Leu/Ile、Leu/Val、Ala/GluW及Asp/Gly。
[0120] 可W根据本领域中已知的程序，如定点诱变或丙氨酸扫描诱变（坎宁汉 (Cunnin曲am)和威尔斯（Wells) ,1989,科学（Science) 244:1081-1085)来鉴定多肤中的必 需氨基酸。在后一项技术中，在该分子中的每个残基处引入单个丙氨酸突变，并且对所得突 变体分子的酶活性进行测试W鉴定对于该分子的活性至关重要的氨基酸残基。还参见，希 尔顿化ilton)等人，1996,生物化学杂志（J.Biol.Chem.) 271:4699-4708。也可结合假定接 触位点氨基酸的突变，如通过W下技术例如核磁共振、结晶学、电子衍射、或光亲和标记进 行确定的对结构进行物理学分析，从而确定酶的活性位点或其他生物学相互作用。参见，例 如，德弗斯（deVos)等人，1992,科学（Science) 255:306-312 ;史密斯（Smith)等人，1992， 分子生物学杂志（J.Mol.Biol. )224:899-904;乌乐达维尔（Wlodaver)等人，1992,欧洲生 化学会联合会快报（FEBSLett. )309:59-64。还可W从与相关多肤的比对来推断鉴定必需 氨基酸。
[0121] 可W做出单个或多个氨基酸取代、缺失和/或插入并且使用诱变、重组和/或改组 的已知方法进行测试，随后进行相关筛选程序，如由里德哈尔-奥尔森巧ei化aar-Olson) 和萨奥尔（Sauer) ,1988,科学（Science) 241:53-57 ;博维度owie)和萨奥尔，1989,美国国 家科学院院刊（Proc.化tl.Acad.Sci.USA)86:2152-2156 ;W0 95/17413;或WO95/22625所 披露的那些。可W使用的其他方法包括易错PCR、隧菌体展示（例如，洛曼化owman)等人， 1991，生物化学度iochemistry) 30:10832-10837 ;美国专利号 5, 223, 409 ;W0 92/06204)W 及区域定向诱变（德比什尔值erbyshire)等人，1986,基因（Gene)46:145;内尔（Ner)等 人，1988,DNA7:127)。
[0122] 两个氨基酸序列之间的关联度通过参数"序列一致性"来描述。出于本发明 的目的，使用如在EMBOSS包（EMBOSS:欧洲分子生物学开放软件套件灯he化ropean MolecularBiologyOpenSoftwareSuite),赖斯巧ice)等人，2000,遗传学趋势（Trends Genet.) 16:276-277)(优选5. 0. 0版或更新版本）的尼德尔（Needle)程序中所实施的尼德 尔曼-翁施（Needleman-Wunsch)算法（Needleman(尼德尔曼）和Wunsch(翁施），1970,分 子生物学杂志（J.Mol.Biol. )48:443-453)来确定两个氨基酸序列之间的序列一致性。所 使用的参数是空位开放罚分10,空位延伸罚分0. 5,W及邸L0SUM62度L0SUM62的EMBOSS版 本）取代矩阵。尼德尔标注的"最长的一致性"的输出（使用-非简化选项获得）被用作 百分比一致性，并且如下计算：
[0123](-致的残基X100)/(比对长度-比对中的空位总数）。 阳124]酶稳定剂巧/或流巧放忡剂
[0125] 运些微囊还可W含有如本领域中已知的酶稳定剂，例如，多元醇、聚合物、可逆性 酶抑制剂、二价阳离子、酶底物、抗氧化剂等。水溶性稳定剂是优选的。
[0126] 添加缓慢溶解的稳定剂可W用于在该囊内部产生一个局部环境，该局部环境对该 囊化的酶/化合物更"友好"，由此在储存期间提高稳定性。
[0127] 可逆性蛋白酶抑制剂的实例是棚酸、肤醒及其衍生物W及高分子的蛋白型抑制 剂（像BASI/RASI抑制剂，见WO2009/095425)。金属蛋白酶抑制剂的一个实例描述于WO 2008/134343中。下面在"蛋白酶抑制剂"的标题下更加详细地描述了蛋白酶抑制剂。
[012引稳定化聚合物可W基于，例如聚乙締化咯烧酬、聚乙酸乙締醋、聚乙締醇及其共聚 物。稳定化多元醇可W是像甘油、山梨糖醇、丙二醇等的更小分子，但也可W是像聚乙二醇、 多糖等的更大分子。
[0129] 稳定化二价阳离子化2+、Mg化和化化在本领域中是熟知的。因此，在一个实施 例中，本发明的运些微囊包括化化、％化或化化离子的来源。优选地，Ca2+、Mg化或化化 离子的来源是化化、Mg化或化化的一种难溶性（缓慢溶解）盐。难溶性意味着在20°C下 在纯水中的溶解度低于 5g/l、2g/l、lg/l、0. 5g/l、0. 2g/l、0.lg/1、或 0. 05g/l。Ca2+、Mg2+ 或化化的优选的盐是碳酸巧、碳酸儀、碳酸锋、硫酸巧、亚硫酸巧、亚硫酸儀、亚硫酸锋、憐 酸巧、憐酸氨巧、憐酸儀、憐酸锋、巧樣酸巧、巧樣酸儀、巧樣酸锋、草酸巧、草酸儀、草酸锋、 酒石酸巧、酒石酸儀、或酒石酸锋。
[0130] 缓慢溶解的酸或碱还W用于在该微囊内部产生一个局部抑，该局部抑对该囊化 的酶/化合物更"友好"。
[0131] 在大多情况下，通过添加它们的底物（例如，对于蛋白酶是蛋白，对于淀粉酶是淀 粉）来稳定化运些酶。抗氧化剂或还原剂可W用于减少酶的氧化，例如硫代硫酸盐、抗坏血 酸盐等。每克洗涂剂所需的运些稳定剂的净剂量相比于将运些稳定剂添加至该连续的洗涂 剂相要低得多，因为他们在该内囊相中是浓缩的，并且在许多情况下在储存期间将不会扩 散出去，或者取决于该稳定剂的结构和分子量仅仅缓慢扩散出去。特别地，高分子量稳定剂 (例如，高于IkDa,或高于2kDa更优选高于5kDa)将给出改进的净效率。因此优选的是高 分子量抑制剂、聚合物、多元醇、阳离子、酶底物和抗氧化剂。
[0132] 可W通过添加一种"牺牲剂"蛋白来保护该酶。使酶不稳定的组分通过反应到蛋 白上的氨基酸基团（例如，氨基）上由此可W与所添加的牺牲剂或牺牲蛋白反应。优选的 是具有足够大分子量W停留在运些囊内部的牺牲剂蛋白。
[0133] 一种在某种程度上有所不同的用W改进酶稳定性的方式是添加流变修饰组分，运 些组分增加该内囊相的黏性。增加的内部黏性将减慢酶去稳定剂扩散进入运些囊（和/或 减慢酶稳定剂扩散出该囊）中并且因此延长该酶的生命期。运类黏度调节剂的实例是聚合 物，比如聚乙二醇（PEG)、聚环氧乙烧（PEO)、亲水性聚氨醋、聚乙締化咯烧酬（PV巧和PVP 醋酸乙締共聚物、淀粉、透明质酸、水溶性纤维素衍生物（像簇甲基纤维素）、水溶性树胶 (像阿拉伯树胶、槐树豆胶、瓜尔胶或黄胞胶等）及其组合或共聚物。最优选的是非离子型 高分子量聚合物，具有高于IkDa,或高于2kDa，更优选高于5kDa的分子量。优选非离子型 聚合物是因为它们在大多情况下比离子型聚合物与该反应性膜聚合物更为相容。
[0134] 可通过使用一个高黏度水相生成运些囊、或-更复杂的-当在生成该乳剂/运些 囊后黏度增加首次发生时生成囊来实现高黏度。运一"触发的"黏度增加是优选的，因为制 备具有高黏度水相的乳剂可能很困难。当通过具有高于添加至其中的洗涂剂的水活度的内 囊相添加至该洗涂剂时，触发的黏度增加可W原位完成，因此水将从运些囊（但不是流变 改性剂）中扩散出去由此在添加至洗涂剂后增加该内相的黏度。运还可W使用盐或其他低 分子组分的扩散而运用，例如，通过具有一种当盐浓度通过添加至洗涂剂而降低时使黏性 增加的组分（例如，一种聚合物，其在初始盐含量高的情况下沉淀，但当盐浓度由于添加至 洗涂剂时盐的扩散而降低时是可溶的）。触发黏度的另一种方式是使用其黏性取决于抑 的组分。对于一些界面聚合方法（例如，胺-酸面反应），在胶囊化过程中该内相的抑将 改变，在胺-酸面的情况下，在该界面聚合过程中抑将降低。运可W用于触发黏度的增加。 许多流变改性剂（像聚丙締酸醋）在特别pH或pH范围下表现出黏性极大值。流变改性剂 的实例是来自路博润（Lubrizol)的Carbopol934和来自斯高特己德（Scott-Bader)的 Texipol63-258,其中当将抑从11降低至8或将抑从4升高至8时，黏性显著增高。在 低抑下和在高抑下具有不同黏性的另一聚合物类型是部分水解的聚丙締酷胺。又另一种 可能是使用溫度依赖性的流变改性剂，由此在一个溫度下达成乳化/胶囊化，并且随后改 变溫度W增加黏性。还可W使用光诱导或超声诱导的黏性。又另一种方法是使用剪切稀化 流变改性剂，如此当形成该乳剂时该黏度在高剪切下是低的而当剪切降低时黏度是高的。
[0135] 另一稳定技术是保证在储存期间该酶在运些囊中沉淀，例如通过添加沉淀剂（像 盐或聚乙二醇（PEG))。可W使用与如上所述相同的"触发稳定"，例如，通过添加PEG,其在 添加至洗涂剂后通过水扩散至该酶将沉淀的程度而浓缩。W运种方式，该酶在运些囊加工 的过程中可W在溶液中，但当添加至洗涂剂时沉淀。
[0136] 在制备运些微囊时，还可W沉淀的形式或晶体形式使用酶。
[0137] 液体洗涂剂组合物
[0138] 本发明的微囊可W被添加至处于任何形式的任何洗涂剂组合物，并且由此形成其 一部分，例如液体或粉状洗涂剂、W及皂和洗涂剂条（例如，合成洗涂剂条）。
[0139] 在一个实施例中，本发明针对液体洗涂剂组合物，运些组合物包含微囊（如上所 述）与一种或多种另外的清洁组合物组分组合。
[0140]该微囊（如上所述）可W按对应于从0.OOOl%至5% (w/w)活性酶蛋白（AE巧的 量被添加至该液体洗涂剂组合物；优选地从0. 001 %至5 %，更优选地从0. 005 %至5 %，更 优选地从0. 005 %至4 %，更优选地从0. 005 %至3 %，更优选地从0. 005 %至2 %，甚至更优 选地从0.Ol%至2%，并且最优选地从0.Ol%至1 % (w/w)活性酶蛋白。
[0141] 该液体洗涂剂组合物具有一种物理形式，它不是固体（或气体）。它可W是可倾流 的液体，糊剂，可倾流的凝胶或不可倾流的凝胶。它可W是各向同性的或结构性的，优选各 向同性的。它可W是一种配制品，用于在自动洗衣机中洗涂或用于手洗、或用于（自动）餐 具洗涂。它还可W是个人护理产品，例如个人护理产品洗发水、牙膏、或洗手皂。
[0142] 该液体洗涂剂组合物可W是水性的，典型地包含按重量计至少20 %并且高达 95 %的水，例如高达70 %的水、高达50 %的水、高达40 %的水、高达30 %的水、或高达20 % 的水。包括但不限于链烧醇、胺、二醇、酸W及多元醇的其他类型的液体可W被包括在水性 液体洗涂剂中。水性液体洗涂剂