氯化钠2份，葡萄糖30份，硫酸镁1.5份，蔗糖20份，琼脂15份，去离子水700份。
[0046](4)实消
[0047]按空消方式三路进蒸汽，开排气门，当罐压升至0.02mpa，调节蒸汽门，保持恒温打开所有罐顶通向外面的阀门，排气20分钟，关闭蒸汽，打开空气过滤器出口通入罐内，用牛皮纸包扎接种关口，关闭小排气阀，开启冷却水，使罐温降至36°C，关闭冷却水；
[0048](5)接菌种悬浮液
[0049]将种子罐的压降至0，除去接种口上的盖帽，在火焰下将摇瓶种子倒入种子罐，拧紧种子罐接种口的盖帽，调整罐压至0.lOmpa ;
[0050](6)移种
[0051]将种子罐底阀至分配站、发酵罐的管道灭菌，管道从发酵罐方通入0.15mpa无菌蒸汽，灭菌20分钟，打开所有管道上的小排气阀；灭菌完毕，打开发酵罐接种阀，通入无菌空气，关闭小排气阀，待管路冷却至接种温度32°C，种子罐底阀，升高种子罐压力至0.15mpa，切换分配站阀门，降低发酵罐压至0.03mpa，将种子液压入发酵罐；接种完毕，调罐压至0.lOmpa，温度32°C，发酵周期160h，移种完毕，用蒸汽冲洗移种管线中的残料，关闭阀门；所述发酵罐中装填发酵料，所述发酵料为处理加工过的黄豆，处理加工过程为:选取黄豆清洗干净，浸泡24小时，磨碎，121°C高温灭菌60min，降温至常温备用。
[0052](7)放罐清洗
[0053]当PH达到7.2，终止发酵，停空气，停搅拌，打开出料阀，发酵液贮罐入料阀，利用压缩空气将料压至发酵液贮罐；料压净后，关闭出料阀，开排污阀，停压缩空气，当罐压为零时，打开人孔，用水清洗罐内所有装置，冲洗完毕通入空气，吹出co2;
[0054](8)过滤
[0055]利用板框压缩，除去菌丝体，至过滤液透明无菌丝，残渣中杂质质量分数小于1% ;
[0056]具体操作步骤为:
[0057]1)检查板框液压系统及装置，将合格滤布平整地铺在板框间；
[0058]2)启动液压栗，顶紧，压力控制在8Mpa ；
[0059]3)将发酵液用栗输入板框，起栗时，掀开板框入料阀、回流阀，开贮罐口、栗入口，
起栗；
[0060]4)过滤时，料液要始终保证温度恒定，搅拌不能停止，滤液要保证清晰透明，出料减慢时，证明滤渣已满，停止进料，罐渣吹干后将接收槽内料液排净，堵好出口，启动液压系统，退回板框，清理框内滤饼，洗好滤布，重新装好顶紧。
[0061](9)低温冷冻干燥:
[0062]操作温度在-28°C，操作时间为80小时；
[0063](10)粉碎，分装，包装，储存。
[0064]采用平板法测定酶活，以尿激酶单位计IU，纳豆激酶含量达到4800IU/g。
[0065]实施例2
[0066]一种采用深层液体发酵提取纳豆激酶的方法，按照如下步骤进行:
[0067](1)菌种培养
[0068]将保存的纳豆菌菌种进行活化，斜面培养的步骤，收集斜面培养的菌种加入到含有菌悬液的摇瓶中，镜检孢子数达到lX10s/ml ;所述纳豆菌菌种为枯草芽孢杆菌菌株QR，其保藏号为 CGMCC N0.11274。
[0069](2)空消
[0070]种子罐经消洗，检查后关闭所有与罐体连通的阀门，盖紧人孔，开三路蒸汽，打开蒸汽阀，排净空气，关闭排气阀，使罐压升至0.lOmpa，打开所有与种子罐有关的小排气阀，排气20分钟，再关闭小排气阀，使罐压升至0.lOmpa，然后全开排气阀，待罐压降至0时，打开人孔，排尽管内的冷凝水，关种子罐底阀门，准备进料；
[0071]⑶投料
[0072]关闭种子罐底出料阀，开启罐顶入料阀，关闭取样过滤器，冷却水进口 ；打开配料罐出口阀，输送栗入口，起栗，开启栗出口门上料；上料完毕停栗反吹料液管道，扫净料液管中残料；所述种子罐中装填培养基，所述培养基由以下重量份数的组分组成:蛋白胨50份，磷酸二氢钾1份，硫酸铵1份，氯化钠1份，葡萄糖20份，硫酸镁1份，蔗糖10份，琼脂10份，去尚子水500份。
[0073]⑷实消
[0074]按空消方式三路进蒸汽，开排气门，当罐压升至0.0lmpa，调节蒸汽门，保持恒温打开所有罐顶通向外面的阀门，排气10分钟，关闭蒸汽，打开空气过滤器出口通入罐内，用牛皮纸包扎接种关口，关闭小排气阀，开启冷却水，使罐温降至35°C，关闭冷却水；
[0075](5)接菌种悬浮液
[0076]将种子罐的压降至0，除去接种口上的盖帽，在火焰下将摇瓶种子倒入种子罐，拧紧种子罐接种口的盖帽，调整罐压至0.05mpa ;
[0077](6)移种
[0078]将种子罐底阀至分配站、发酵罐的管道灭菌，管道从发酵罐方通入0.lmpa无菌蒸汽，灭菌10分钟，打开所有管道上的小排气阀；灭菌完毕，打开发酵罐接种阀，通入无菌空气，关闭小排气阀，待管路冷却至接种温度30°c，种子罐底阀，升高种子罐压力至0.lmpa,切换分配站阀门，降低发酵罐压至0.02mpa，将种子液压入发酵罐；接种完毕，调罐压至0.05mpa，温度30°C，发酵周期150h，移种完毕，用蒸汽冲洗移种管线中的残料，关闭阀门；所述发酵罐中装填发酵料，所述发酵料为处理加工过的红豆，处理加工过程为:选取红豆清洗干净，浸泡36小时，磨碎，121°C高温灭菌60min，降温至常温备用。
[0079](7)放罐清洗
[0080]当PH达到7.0，终止发酵，停空气，停搅拌，打开出料阀，发酵液贮罐入料阀，利用压缩空气将料压至发酵液贮罐；料压净后，关闭出料阀，开排污阀，停压缩空气，当罐压为零时，打开人孔，用水清洗罐内所有装置，冲洗完毕通入空气，吹出co2;
[0081]⑶过滤
[0082]利用板框压缩，除去菌丝体，至过滤液透明无菌丝，残渣中杂质质量分数小于1% ;
[0083]具体操作步骤为:
[0084]1)检查板框液压系统及装置，将合格滤布平整地铺在板框间；
[0085]2)启动液压栗，顶紧，压力控制在7Mpa ；
[0086]3)将发酵液用栗输入板框，起栗时，掀开板框入料阀、回流阀，开贮罐口、栗入口，
起栗；
[0087]4)过滤时，料液要始终保证温度恒定，搅拌不能停止，滤液要保证清晰透明，出料减慢时，证明滤渣已满，停止进料，罐渣吹干后将接收槽内料液排净，堵好出口，启动液压系统，退回板框，清理框内滤饼，洗好滤布，重新装好顶紧。
[0088](8)低温冷冻干燥:
[0089]操作温度在-25°C，操作时间为72小时；
[0090](10)粉碎，分装，包装，储存。
[0091]采用平板法测定酶活，以尿激酶单位计IU，纳豆激酶含量达到4500IU/g。
[0092]实施例3
[0093]一种采用深层液体发酵提取纳豆激酶的方法，按照如下步骤进行:
[0094](1)菌种培养
[0095]将保存的纳豆菌菌种进行活化，斜面培养的步骤，收集斜面培养的菌种加入到含有菌悬液的摇瓶中，镜检孢子数达到lX107ml ;所述纳豆菌菌种为枯草芽孢杆菌菌株QR，其保藏号为 CGMCC N0.11274。
[0096](2)空消
[0097]种子罐经消洗，检查后关闭所有与罐体连通的阀门，盖紧人孔，开三路蒸汽，打开蒸汽阀，排净空气，关闭排气阀，使罐压升至0.20mpa，打开所有与种子罐有关的小排气阀，排气40分钟，再关闭小排气阀，使罐压升至0.20mpa，然后全开排气阀，待罐压降至0时，打开人孔，排尽管内的冷凝水，关种子罐底阀门，准备进料；
[0098](3)投料
[0099]关闭种子罐底出料阀，开启罐顶入料阀，关闭取样过滤器，冷却水进口 ；打开配料罐出口阀，输送栗入口，起栗，开启栗出口门上料；上料完毕停栗反吹料液管道，扫净料液管中残料；所述种子罐中装填培养基，所述培养基由以下重量份数的组分组成:蛋白胨60份，磷酸二氢钾3份，硫酸铵5份，氯化钠5份，葡萄糖45份，硫酸镁2份，蔗糖30份，琼脂20份，去离子水800份。
[0100](4)实消
[0101]按空消方式三路进蒸汽，开排气门，当罐压升至0.03mpa，调节蒸汽门，保持恒温打开所有罐顶