一种新的烯胺类化合物及其制备方法和医药用图
【技术领域】
[0001] 本发明属于药物技术领域，具体涉及从淫羊藿的干燥地上部分中分离得到的一种 具有治疗肾癌作用的烯胺类化合物及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 淫羊藿（EpimediiFolium)为小檗科（Berbridaceae)淫羊藿属（Epimedium)植 物，始载于《神农本草经》，干燥地上部分入药。2010年版《中华人民共和国药典》收载的 品种有淫羊藿EpimediumbrevicornuMaxim.，箭叶淫羊藿Epimediumsagittatum(Sieb. etZucc.)Maxim.，柔毛淫羊藿EpimediumpubescensMaxim.、巫山淫羊藿Epimedium wushanense和朝鲜淫羊藿EpimediumkoreanumNakai。此外，还有粗毛淫羊藿、宝兴淫羊 藿、茂汶淫羊藿等品种。淫羊藿主要是分布在中国的江西、陕西、湖南、四川、浙江、广西、安 徽、湖北、福建、甘肃、广东等地以及朝鲜、日本、南非、意大利北部至黑海。淫羊藿是一种中 国常用中药，具有很高的药用价值，滋阴补阳，壮阳强身。味苦涩，适宜失眠者使用。
[0003] 淫羊藿含有黄酮、挥发油、木脂素、黄酮木脂素、黄酮糖苷、留体、生物碱等化合物。 黄酮类化合物为主要的生物活性成分。木脂素类化合物具有抗肿瘤等多种生物活性。黄酮 木脂素类化合物是近几年新发现的一类化合物，研究表明该化合物具有保肝、抗氧化等生 物活性。
[0004] 现代药理学研究证明，淫羊藿具有抗衰老作用、降血压、降血糖、降血脂、增强机体 免疫力、抗心律失常、抗炎、抗病毒、抗肿瘤、抗病原微生物作用。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是提供一种从淫羊藿的干燥地上部分中分离得到的一种具有治疗 肾癌作用的烯胺类化合物及其制备方法。
[0006] 本发明的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的：
[0007] 具有下述结构式的化合物（I)，
[0008]
[0009] 所述的化合物（I)的制备方法，包含以下操作步骤：(a)将淫羊藿的干燥地上部 分粉碎，用80~90 %乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味，依次用石油醚、乙酸乙 酯和水饱和的正丁醇萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；(b) 步骤（a)中乙酸乙酯萃取物用大孔树脂除杂，先用10%乙醇洗脱6个柱体积，再用75%乙 醇洗脱10个柱体积，收集75 %乙醇洗脱液，减压浓缩得75 %乙醇洗脱物浸膏；（c)步骤（b) 中75%乙醇洗脱浸膏用正相硅胶分离，依次用体积比为80:1、55:1、30 :1、15:1和1:1的二 氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到5个组分；（d)步骤（c)中组分4用正相硅胶进一步分离，依次 用体积比为20:1、15:1和10:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；（e)步骤（d)中 组分2用十八烷基硅烷键合的反相硅胶分离，用体积百分浓度为75%的甲醇水溶液等度洗 脱，收集8~10个柱体积洗脱液，洗脱液减压浓缩得到纯的化合物（I)。
[0010] 进一步地，所述大孔树脂为AB-8型大孔吸附树脂。
[0011] 进一步地，所述用乙醇热回流提取采用的乙醇浓度为85 %。
[0012] -种药物组合物，其中含有治疗有效量的所述的化合物（I)和药学上可接受的 载体。
[0013] 所述的化合物（I)在制备治疗肾癌的药物中的应用。
[0014] 所述的药物组合物在制备治疗肾癌的药物中的应用。
[0015] 本发明化合物用作药物时，可以直接使用，或者以药物组合物的形式使用。
[0016] 该药物组合物含有治疗有效量的本发明化合物（I)，其余为药物学上可接受的、 对人和动物无毒和惰性的可药用载体和/或赋形剂。
[0017] 所述的可药用载体或赋形剂是一种或多种选自固体、半固体和液体稀释剂、填料 以及药物制品辅剂。将本发明的药物组合物以单位体重服用量的形式使用。本发明药物可 通过口服或注射的形式施用于需要治疗的患者。用于口服时，可将其制成片剂、缓释片、控 释片、胶囊、滴丸、微丸、混悬剂、乳剂、散剂或颗粒剂、口服液等；用于注射时，可制成灭菌的 水性或油性溶液、无菌粉针、脂质体或乳剂等。
【附图说明】
[0018] 图1为化合物（I)结构式；
[0019] 图2为化合物（I)理论E⑶值与实验E⑶值比较。
【具体实施方式】
[0020] 下面结合实施例进一步说明本发明的实质性内容，但并不以此限定本发明保护范 围。尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对 本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
[0021] 实施例1 :化合物（I)分离制备及结构确证
[0022] 试剂来源：乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、二氯甲烷为分析纯，购自上海凌峰化 学试剂有限公司，甲醇，分析纯，购自江苏汉邦化学试剂有限公司。
[0023] 经鉴定所购买的淫羊藿为植物淫羊藿EpimediumbrevicornuMaxim.的干燥地上 部分。
[0024] 制备方法：（a)将淫羊藿的干燥地上部分（8kg)粉碎，用85%乙醇热回流提取 (25LX3次），合并提取液，浓缩至无醇味（3L)，依次用石油醚（3LX3次）、乙酸乙酯（3LX3 次）和水饱和的正丁醇（3LX3次）萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物（355g) 和正丁醇萃取物；(b)步骤（a)中乙酸乙酯萃取物用AB-8型大孔树脂除杂，先用10%乙醇 洗脱6个柱体积，再用75 %乙醇洗脱10个柱体积，收集75 %乙醇洗脱液，减压浓缩得75% 乙醇洗脱物浸膏（136g) ;(c)步骤（b)中75%乙醇洗脱浸膏用正相硅胶分离，依次用体积 比为80:1 (8个柱体积）、55:1 (8个柱体积）、30:1 (6个柱体积）、15:1 (8个柱体积）和1:1 (5 个柱体积）的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到5个组分；（d)步骤（c)中组分4 (31g)用正相 硅胶进一步分离，依次用体积比为20:1 (8个柱体积）、15:1 (10个柱体积）和10:U6个柱 体积）的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；（e)步骤（d)中组分2 (llg)用十八烷基 硅烷键合的反相硅胶分离，用体积百分浓度为75%的甲醇水溶液等度洗脱，收集8-10个柱 体积洗脱液，洗脱液减压浓缩得到纯的化合物（I)(228mg)。
[0025] 结构确证：HR-ES頂S显示[M+Na]+为m/z264. 1008,结合核磁特征可得分子式 为C15H15N02，不饱和度为 9。核磁共振氢谱数据SH(ppm，DMS0-d6,600MHZ) :H-1(3.37,S)， Η-4(5. 74,d，J= 0. 96)，H-7(l. 31，s)，Η-8(2. 18,d，J= 0. 96)，Η-9(7. 95,d，J= 12. 8)， H-10 (12. 04,d，J= 12. 8)，H-2'（7. 42,d，J= 8. 7)，H-3'（7. 34,dd，J= 8. 7, 7. 4)， H-4'（7.10,t，J= 7.4)，H-5'（7.32,dd，J= 8.7,7.4)，H-6'（7.41，d，J= 8.7);核磁 共振碳谱数据δc (ppm，DMS0-d6,150MHz) :55. 6 (CH，1-C)，76. 7 (C，2-C)，197. 6 (C，3-C)， 115. 1 (CH，4-C)，154. 2 (C，5-C)，124. 0 (C，6-C)，17. 1 (CH3, 7-C)，19. 5 (CH3,8-C)，145. 7 (CH， 9-C)，138. 6(C，Γ-C)，117. 2(CH，2' -C)，129. 1 (CH，3' -C)，124. 3(CH，4' -C)，129. 1 (CH， 5'-C)，117. 2(CH，6'-C);碳原子标记参见图1。IR光谱表明该化合物含有羰基（1688cm1) 和胺基（3250cm3基团。虫NMR谱显示两个甲基[(δΗΙ. 31，s，H-7)和（δΗ2. 18,d，J= 0. 96Hz，H-8)]，一个含氧次甲基（δΗ3. 37,s，H-1)，两个烯属次甲基[(δΗ5. 74,d，J= 0· 96Hz，H-4)和（δΗ7· 95,d，J= 12. 8Hz，H-9)]，以及五个芳族质子[(δΗ7· 42,d，J= 8· 7Hz，Η-2'），（7· 34,dd，J= 8· 7, 7· 4Hz，Η-3'），（7· 10,t，J= 7· 4Hz，Η-4'），（7· 32,dd， J= 8.7,7.4Hz，H-5'）和（7.41，d，J= 8.7Hz，H-6，）]。后者质子的低场化学位移及其耦 合常数表明该化合物含有仲烯胺（δH12. 04,d，J= 12. 8Hz，H-10)。13CNMR和HSQC谱显 示15个碳信号，包括两个甲基，八个次甲基（一个含氧次甲基，七个烯属次甲基），五个季碳 (一个含氧季碳，一个酮羰基，三个烯烃季碳）。根据核磁数据分析，再结合不饱和数，表明 该化合物为两环结构。 1H-iCOSY谱显示了三个主要的结构片段：单取代的苯基环，烯胺结 构（=CH-NH-)以及下部结构[C(CH3) =CH]。两个含氧碳