DK001株系的致病性的鉴定 棉铃虫微孢子虫FDK001株系用血球计数板确定浓度。棉铃虫微孢子虫FDK001株系对 棉铃虫、小菜蛾、甜菜夜蛾、菜青虫、甘蓝夜蛾、二化螟、稻纵卷叶螟的感染试验采用微孢子 FDKOO1株系悬浮液（IO6孢子/ml)直接喷雾在卵粒上的方法。对棉铃虫、小菜蛾、甜菜夜蛾、 菜青虫、甘蓝夜蛾、二化螟、稻纵卷叶螟2龄幼虫的感染试验，将微孢子FDK001株系悬浮液 (IO 6孢子/ml) 50微升喷洒在1立方厘米的人工饲料上，于26°C，相对湿度60%，每日光照 时间16小时/天。感染饲养。记录幼虫死亡率。每个处理3次重复，每次重复360头虫。
[0023] 同时设置空白对照组，空白对照组幼虫的死亡率在1%以下为有效试验。
[0024] 致病性感染试验的结果见表1。
[0025] 致病性感染结果表明棉铃虫微孢子虫FDK001株系对棉铃虫、小菜蛾、甜菜夜蛾、 菜青虫、甘蓝夜蛾、二化螟、稻纵卷叶螟都具有强的致病感染性。
[0026] 表1棉铃虫微孢子虫FDK001株系IO6孢子/ml对几种昆虫的感染试验
实施例子3 棉铃虫微孢子虫FDKOOl株系孢子的制备 棉铃虫微孢子虫FDK001株系孢子的制备，包括如下步骤： (1) 将棉铃虫微孢子虫FDK001株系的孢子液浓度I X IO6孢子/ml喷洒在棉铃虫饲料 上（50微升孢子液喷洒于1立方厘米的饲料上)，喂食棉铃虫； (2) 棉铃虫食入带有棉铃虫微孢子虫FDK001株系的饲料后，棉铃虫被棉铃虫微孢子 虫FDK001株系感染而死亡，所述的棉铃虫的饲养条件为25-30°C，相对湿度60-70%，每日光 照时间16小时； (3) 将步骤（2)中所述死亡的棉铃虫研磨、再用120目的网筛过滤。将所有过滤得到的 组织液用等体积的水(最好为蒸馏水）稀释后，进行如下差速离心：500-1000转/分钟离心 15分钟取上清，将上清液3000转/分钟离心30分钟取沉淀，即为所述的FDK001棉铃虫微 孢子虫株系的孢子。分离获取得的死亡的棉铃虫虫体中的棉铃虫微孢子虫FDK001株系的 孢子，即为防治农业害虫的活性成分。
[0027] 实施例子4 棉铃虫微孢子虫FDK001株系孢子制剂的制备和应用 将实施例子3中获得的棉铃虫微孢子虫FDK001株系孢子，加入5%润湿剂吐温80, 5% 分散剂木质素磺酸钠，5%防冻剂蔗糖，1%紫外线保护剂色氨酸制备为悬浮剂。其中棉铃虫 微孢子虫FDK001株系孢子的含量为2X IO9孢子/ml。
[0028] 将上述悬浮剂在棉铃虫于2龄盛发期兑水500倍进行大田喷雾，每亩使用100毫 升制剂。设置3个重复和空白对照组。喷雾后7天统计进行喷雾的实验大田的棉铃虫数量， 计算防效。微孢子虫FDK001株系孢子制剂防效为81%。
[0029] 上面对本专利的较佳实施方式作了详细说明，但是本专利并不限于上述实施方 式，在本领域的普通技术人员所具备的知识范围内，还可以在不脱离本专利宗旨的前提下 做出各种变化。
【主权项】
1. 一种棉铃虫微孢子虫株系，其特征在于，棉铃虫微孢子虫FDK001株系，保藏于中国 微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNo. 11289。2. -种如权利要求1所述的棉铃虫微孢子虫株系的制备方法，其特征在于，包括以下 步骤： (1) 将棉铃虫微孢子虫FDK001株系的孢子液喷洒在棉铃虫饲料上，喂食棉铃虫； (2) 棉铃虫食入带有棉铃虫微孢子虫FDK001株系的饲料后，被棉铃虫微孢子虫感染而 死亡； (3) 取死亡的棉铃虫虫体中的棉铃虫微孢子虫FDK001株系的孢子，即为防治农业害虫 的活性成分。3. 根据权利要求2所述的棉铃虫微孢子虫株系的制备方法，其特征在于，步骤（1)中， 所述孢子液与棉铃虫饲料的比例为50微升孢子液喷洒于1立方厘米的饲料上。4. 根据权利要求2所述的棉铃虫微孢子虫株系的制备方法，其特征在于，所述的孢子 液中孢子的浓度为1X1〇4孢子/ml-1X10 8孢子/ml。5. 根据权利要求2所述的棉铃虫微孢子虫株系的制备方法，其特征在于，所述的棉铃 虫的饲养条件为25-30°C，相对湿度60-70%，每日光照时间16小时。6. 根据权利要求2所述的棉铃虫微孢子虫株系的制备方法，其特征在于，步骤（3)中， 具体可以通过如下方法获取死亡虫体中所述的棉铃虫微孢子虫FDK001株系微孢子：将步 骤（2)中所述死亡的棉铃虫研磨、再用120目的网筛过滤，将所有过滤得到的组织液用等体 积的水稀释后，进行如下差速离心：500-1000转/分钟离心15分钟取上清，将上清液3000 转/分钟离心30分钟取沉淀，即为所述的FDK001棉铃虫微孢子虫株系的孢子。7. 权利要求1所述的棉铃虫微孢子虫株系在防治农业害虫中的应用。8. 根据权利要求7所述的棉铃虫微孢子虫株系在防治农业害虫中的应用，其特征在 于，所述害虫为鳞翅目害虫，包括棉铃虫、小菜蛾、甜菜夜蛾、菜青虫、甘蓝夜蛾、二化螟和稻 纵卷叶螟。9. 根据权利要求7所述的棉铃虫微孢子虫株系在防治农业害虫中的应用，其特征在 于，包括含有所述棉铃虫微孢子虫FDK001株系孢子成分的农业害虫防治剂。10. 根据权利要求9所述的棉铃虫微孢子虫株系在防治农业害虫中的应用，其特征在 于，所述防治剂包括润湿剂，为吐温80,十二烷基苯磺酸钠、十二烷基硫酸钠、烷基萘磺酸 钠、脂肪醇聚乙二醇醚硫酸盐、脂肪醇聚氧乙烯醚、壬基酚聚氧乙烯醚、山梨醇脂肪酸酯聚 氧乙烯醚中的一种或几种的混合物；包括分散剂，为NN0、木质素磺酸钠、木质素磺酸钙、聚 丙烯酸钠、亚甲基双萘磺酸盐、烷基氨基牛磺酸盐、亚甲基双萘磺酸钠甲醛缩合物、聚氧乙 烯聚氧丙烯嵌段共聚物、羧甲基纤维素、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、三聚磷酸钠、烷基萘磺 酸盐等中的一种或几种混合物；包括防冻剂，为蔗糖、乙二醇、丙二醇、甘油等中的一种或几 种的混合物；包括紫外防护剂，为苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸、二苯甲酮、二甲氧基二苯甲酮、 甲氧基肉桂酸辛酯、水杨酸辛酯等中的一种或几种的混合物。
【专利摘要】本发明公开了一种棉铃虫微孢子虫株系，棉铃虫微孢子虫FDK001株系，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC？No.？11289。所述的棉铃虫微孢子虫株系的制备方法，包括以下步骤：（1）将棉铃虫微孢子虫FDK001株系的孢子液喷洒在棉铃虫饲料上，喂食棉铃虫；（2）棉铃虫食入带有棉铃虫微孢子虫FDK001株系的饲料后，被棉铃虫微孢子虫感染而死亡；（3）取死亡的棉铃虫虫体中的棉铃虫微孢子虫FDK001株系的孢子，即为防治农业害虫的活性成分。本发明提供的棉铃虫微孢子虫株系可以用于防治棉铃虫、小菜蛾、甜菜夜蛾、菜青虫、甘蓝夜蛾、二化螟、稻纵卷叶螟等多种鳞翅目农业害虫。CGMCC NO.1128920151019
【IPC分类】C12N1/10, C12N3/00, C12R1/90, A01N63/00, A01P7/04
【公开号】CN105385600
【申请号】CN201510717755
【发明人】邓方坤
【申请人】江西新龙生物科技股份有限公司
【公开日】2016年3月9日
【申请日】2015年10月30日