(如麦芽糖、蔗糖等）；和多糖（如糊精，环糊精）等常见的糖，以及诸如木糖醇、山梨糖醇、 赤藓糖醇的糖醇。除了上述物质，香料可以有利地使用天然香料（如索马甜、甜叶菊提取物 (例如，甜菊双糖苷A、甘草甜素等）和合成香料（糖精，阿司帕坦等）。所述天然碳水化合 物的比例为每100本发明的组合物通常约1至20g，优选约5至15g。
[0063] 除了所述物质，本发明的化合物还可以含有各种营养剂、维生素、矿物质（电解 质）、调味剂（诸如合成调味剂和天然调味剂）、着色剂和填充剂（奶酪、巧克力等）、果胶酸 及其盐、海藻酸及其盐、有机酸、保护性胶体增稠剂、PH调节剂、稳定剂、防腐剂、甘油、醇、在 碳酸饮料中使用的碳酸化剂等。此外，本发明的化合物含有用于制造天然果汁及果汁饮料 及蔬菜饮料的果肉。
[0064] 这些成分可以单独或组合使用。这些添加剂的比例不是那么重要，但是一般每100 重量份本发明的化合物在〇重量份至约20重量份的范围内选择。
[0065] 有益效果
[0066] 通过本发明可知，本发明的类黄酮增加 TGF-β分泌，从而调节细胞的信号传递路 径。
【附图说明】
[0067] 图1是本发明的类黄酮的化学结构。
[0068] 图2是针对HaCaT细胞的各种不同浓度的本发明的类黄酮（#45)的移动试验。在 刮伤24小时前以3Χ IO4细胞/ml的密度对细胞进行接种并处理。刮伤的距离在用新型类 黄酮处理48小时后测量。以至少三次反复实验的距离的平均百分比土SD示出数据，（*) P〈0.05。
[0069] 图3是示出新型类黄酮处理对HaCaT增值和细胞周期相关蛋白质没有影响的图。 (A)针对HaCaT细胞的各种不同浓度的本发明的类黄酮（#45)的MTT试验。在处理前对细胞 接种一整夜。利用各种不同浓度的类黄酮培养24小时后，添加 MTT溶液，且在37°C下培养 4小时。在吸光度570nm下计算测量值。（B)在利用类黄酮（2uM)诱导24小时后的HaCaT 细胞中细胞周期相关的蛋白质的表达。在类黄酮处理或未处理的HaCaT中利用与所描述的 相同的特异性抗体根据蛋白质印迹分析来调查蛋白质表达。利用与所描述的相同的特异性 引物根据RT-PCR调查mRNA表达。示出根据ImageJ程序的数据分析的结果的直方图。以 至少三次反复实验的平均值土SD示出值。（*)P〈0. 05与对照组比较。
[0070] 图4是类黄酮处理后的依赖于时间的形式的EMT相关基因的表达。（A)在各种不 同的时间在利用类黄酮（2uM)处理后的HaCaT细胞中利用与所描述的相同的特异性抗体根 据蛋白质印迹分析来调查蛋白质表达。（B)利用与所描述的相同的特异性引物根据RT-PCR 调查mRNA表达。示出根据ImageJ程序的数据分析的结果的直方图。以至少三次反复实验 的平均值土SD示出值。
[0071] 图5是在利用类黄酮诱导的情况下在HaCaT细胞中细胞外基质（ECM)蛋白质的表 达。（A)在培养24小时后利用类黄酮（2uM)处理后的HaCaT细胞中利用与所描述的相同的 特异性引物根据RT-PCR调查mRNA表达。（B)在无血清的培养基中利用2uM的类黄酮处理 细胞后，获得条件化的培养基，使用浓缩器（Amicon)离心分离并浓缩。接着，根据与所描述 的相同的特异性抗体，依据针对胶原蛋白I、胶原蛋白III、纤维粘连蛋白的蛋白质印迹分 析培养基内的蛋白质。示出根据ImageJ程序的数据分析的结果的直方图。以至少三次反 复实验的平均值土SD示出值。（*)P〈0. 05与对照组比较。
[0072] 图6是在利用类黄酮处理后的HaCaT细胞中移动相关基因的表达。（A)在无血清 的培养基中利用2uM的类黄酮处理细胞后，获得条件化的培养基，使用浓缩器（Amicon)离 心分离并浓缩。接着，根据与所描述的相同的特异性抗体，依据针对MMPl的蛋白质印迹分 析培养基内的蛋白质。（B)在培养24小时后利用类黄酮（2uM)处理后的HaCaT细胞中利用 与所描述的相同的特异性引物根据RT-PCR调查mRNA表达。（C)由利用类黄酮（2uM/24h) 处理后的HaCaT细胞引起的条件化的培养基的酶谱法试验。通过浓缩器（Amicon)浓缩后利 用明胶酶谱法分析培养基蛋白质。示出根据ImageJ程序的数据分析的结果的直方图。以 至少三次反复实验的平均值土SD示出值。（*)P〈0. 05
[0073] 图7是在各种不同的时间在利用类黄酮处理后的HaCaT中NADPH氧化酶、ROS生 成及信号传递路径。（A)通过蛋白质印迹和RT-PCR调查NADPH氧化酶4的表达。（B)在处 理后的HaCaT细胞中利用DCF-DA试验以依赖于时间的形式检测ROS生成水平。在各种不 同的时间利用2uM的类黄酮处理细胞后利用DCF-DA染色，从而检测ROS生成。使用H 2O2作 为阳性对照组。（C)利用与所描述的相同的特异性抗体进行蛋白质印迹来调查信号传递路 径。示出根据ImageJ程序的数据分析的结果的直方图。
[0074] 图8是示出DPI或NAC预处理抑制ERK及JNK路径的活性化及NADPH氧化酶4的 图。在本发明的类黄酮培养24小时前将DPI (IOuM)或NAC (20uM)预处理2小时后，利用与 所描述的相同的特异性抗体进行蛋白质印迹来调查其信号传递路径。示出根据ImageJ程 序的数据分析的结果的直方图。
[0075] 图9是示出本发明的类黄酮处理或未处理的皮肤成纤维细胞的增值的图。在处理 24小时前利用3X10 4细胞/ml的密度对人类的皮肤成纤维细胞进行接种。进行MTT试验。
[0076] 图10是示出利用本发明的类黄酮培养24小时后皮肤成纤维细胞中细胞周期相关 基因的表达。通过蛋白质印迹和RT-PCR调查诸如p21、p53、p27、细胞周期蛋白E、细胞周 期蛋白D的细胞周期相关基因的表达。示出根据ImageJ程序的数据分析的结果的直方图。 以至少三次反复实验的平均值土SD示出值。与对照组比较（*)P〈0. 05。
[0077] 图11是不出细胞外基质蛋白质和基质金属蛋白酶基因的表达的图。（A)在无血 清的培养基中利用2uM的本发明的类黄酮处理皮肤成纤维细胞后，获得条件化的培养基， 使用浓缩器（amicon)离心分离并浓缩。根据与所描述的相同的特异性抗体，针对胶原蛋白 I、胶原蛋白III、纤维粘连蛋白、MMP1、波形蛋白，依据蛋白质印迹调查培养基内的蛋白质。 (B)来自利用本发明的类黄酮（2uM/24h)处理后的皮肤成纤维细胞的条件化的培养液的酶 谱法试验。根据明胶酶谱法分析通过浓缩器浓缩后培养基内的蛋白质。示出根据ImageJ 程序的数据分析的结果的直方图。以至少三次反复实验的距离的平均百分比土SD示出数 据。与对照组比较（*)P〈〇. 05。
[0078] 图12是示出诱导本发明的类黄酮的情况下皮肤成纤维细胞的TGF-β分泌的图。 在无血清的培养基中利用2uM的本发明的类黄酮处理皮肤成纤维细胞后，获得条件化的培 养基，使用浓缩器（amicon)离心分离并浓缩。根据与所描述的相同的特异性抗体，针对 TGF-β，依据蛋白质印迹分析培养基内的蛋白质。在培养48小时后利用2uM的本发明的类 黄酮处理后的成纤维细胞中利用TGF-β的特异性引物根据RT-PCR调查mRNA表达。示出根 据ImageJ程序的数据分析的结果的直方图。以至少三次反复实验的平均值土SD示出值。 与对照组比较（*)P〈〇. 05。
[0079] 图13是示出在各种不同的时间在利用本发明的类黄酮处理后的皮肤成纤维细胞 中的信号传递路径的图。利用与所描述的相同的特异性抗体调查信号传递路径。示出根据 ImageJ程序的数据分析的结果的直方图。
[0080] 图14是示出利用TGF- β受体抑制剂预处理2小时，且利用本发明的类黄酮处理 6小时后的皮肤成纤维细胞中的信号传递路径。在利用本发明的类黄酮培养6小时前，利 用IOmM的TGF-β受体抑制剂（TGFRI)预处理成纤维细胞后，利用与所描述的相同的特异 性抗体调查信号传递路径。示出根据ImageJ程序的数据分析的结果的直方图。
[0081] 图15是本发明的类黄酮合成的示意图。
[0082] 图16是本发明的类黄酮IH-NMR结果。
[0083] 图17是本发明的类黄酮13C-NMR结果。
【具体实施方式】
[0084] 以下描述本发明。
[0085] 本发明人证实本发明的化合物不仅能够诱导角质细胞移动、成纤维细胞的增值， 而且能够诱导抗老化基因表达及相比最终形成疤痕诱导皮肤再生。
[0086] 本发明人首先针对人角质形成细胞HaCaT细胞株诱导新型类黄酮，且调查mRNA及 蛋白质水平中移动相关基因的表达。