谱，其谱图如图3所示。
[0047]IR(KBr):3435,2927,1624,1450,1389,1310,1282,1253,1228,1161,1022,890， 755,731cm-1。
[0048] (2)元素分析结果如上述表1所示。
[0049] (3)晶体结构如图4所示。
[0050] 由此，可以确定所得的墨绿色固体产物即为9-苯并噻蒽腙-钌(II)配合物（以下简 称配合物1)，其结构式如下：
[0051]
[0052] 实施例2
[0053] 准确称量物质的量为2.0mmol的配体L与0.8mmol二氯?四（二甲基亚砜）合钌 (II)，将配体L溶解于55mL的ΙΟΟν/ν%乙醇中，将二氯?四（二甲基亚砜)合钌（II)溶解于 10mL的丙酮中，两种溶液混合，在80°C下反应36小时，浓缩蒸发除去大部分溶剂(溶剂加入 量的80%)后，冷却至室温静置，析出墨绿色配合物1(产率80%)。
[0054] 实施例3
[0055] 准确称量物质的量为2.0mmol的配体L与1.5mmol二氯?四（二甲基亚砜）合钌 (II)，将配体L溶解于40mL的80v/v%甲醇和90v/v%乙醇(体积比为20:1)混合溶液中，将二 氯?四（二甲基亚砜)合钌（II)溶解于20mL的丙酮中，两种溶液混合，在50°C下反应6小时， 浓缩蒸发除去大部分溶剂(溶剂加入量的85%)后，冷却至室温静置，析出墨绿色配合物1 (产率83%)。
[0056]实施例4
[0057] 准确称量物质的量为2.0mmol的配体L与二氯?四（二甲基亚砜）合钌 (II)，将配体L溶解于20mL的80v/v%甲醇和75v/v%正丙醇(体积比为1:100)混合溶液中， 将二氯?四（二甲基亚砜)合钌（II)溶解于20mL丙酮溶液中，两种溶液混合，在70°C下反应 24小时，浓缩蒸发除去大部分溶剂(溶剂加入量的78%)后，冷却至室温静置，析出墨绿色配 合物1(产率75%)。
[0058]实施例5
[0059]准确称量物质的量为2.0mmol的配体L与l.Ommol二氯?四（二甲基亚砜）合钌 (II)，将配体L溶解于15mL的85v/v%甲醇溶液中，将二氯?四（二甲基亚砜)合钌（II)溶解 于5mL热丙酮中，两种溶液混合，在65°C下反应28小时，浓缩蒸发除去大部分溶剂(溶剂加入 量的90%)后，冷却至室温静置，析出墨绿色配合物1(产率86%)。
[0060] 实施例6
[0061 ] 准确称量物质的量为2.0mmol的配体L与二氯?四（二甲基亚砜）合钌 (II)，将配体L溶解于30mL的95v/v%甲醇和83v/v%乙醇(体积比为60:1)混合溶液中，将二 氯?四（二甲基亚砜)合钌（II)溶解于1OmL的丙酮中，两种溶液混合，在70°C下反应15小时， 浓缩蒸发除去大部分溶剂(溶剂加入量的86%)后，冷却至室温静置，析出墨绿色配合物1 (产率87%)。
[0062] 实施例7
[0063] 准确称量物质的量为2.0mmol的配体L与l.Ommol二氯?四（二甲基亚砜）合钌 (II)，将配体L和二氯?四（二甲基亚砜)合钌（II)溶解于40mL的丙酮中，于50°C下反应27小 时，浓缩蒸发除去大部分溶剂(溶剂加入量的75%)后，冷却至室温静置，析出墨绿色配合物 1(产率 77%)。
[0064] 实施例8
[0065] 准确称量物质的量为2.0mmol的配体L与二氯?四（二甲基亚砜）合钌 (II)，将配体L和二氯?四（二甲基亚砜)合舒（II)溶解于20mL的极性溶剂（由50v/v%甲醇、 50v/v%异丙醇和丙酮按18:1:1的体积比组成）中，在40°C下反应20小时，浓缩蒸发除去大 部分溶剂(溶剂加入量的85% )后，冷却至室温静置，析出墨绿色配合物1 (产率81 % )。
[0066]为了充分说明本发明所述的配合物1在制药中的用途，申请人对配合物1对多种人 肿瘤细胞株的增殖抑制活性进行了实验：
[0067] 1、细胞株与细胞培养
[0068] 本实验选用人肝癌细胞BEL-7402和Hep-G2、卵巢癌细胞SK-0V-3、人肺癌细胞NCI-H460、人胃癌细胞MGC80-3以及人正常肝细胞HL-7702等6种人类细胞株。
[0069] 所有细胞株均培养在含10wt%小牛血、100U/mL青霉素、100U/mL链霉素的RPMI-1640培养液内，置37°C含体积浓度5 %C02孵箱中培养。
[0070] 2、待测化合物的配制
[0071] 所用的配体L和配合物1的纯度2 95%，将其DMS0储液用生理缓冲液稀释后配制成 20ymol/L的终溶液，其中助溶剂DMS0的终浓度< 1%，测试该浓度下化合物对各种肿瘤细胞 生长的抑制程度。
[0072] 3、细胞生长抑制实验(MTT法）
[0073] (1)取对数生长期的肿瘤细胞，经胰蛋白酶消化后，用含10%小牛血清的培养液配 制成浓度为5000个/mL的细胞悬液，以每孔190yL接种于96孔培养板中，使待测细胞密度至 1000~10000孔(边缘孔用无菌PBS填充）；
[0074] (2)5%⑶2,37°C孵育24h，至细胞单层铺满孔底，每孔加入一定浓度梯度的药物10 yL，每个浓度梯度设4个复孔；
[0075] (3) 5 %C02，37°C孵育48小时，倒置显微镜下观察；
[0076] (4)每孔加入 10yL的MTT溶液(5mg/mLPBS，S卩0·5%ΜΤΤ)，继续培养4h;
[0077] (5)终止培养，小心吸去孔内培养液，每孔加入150yL的DMS0充分溶解甲瓒沉淀，振 荡器混匀后，在酶标仪用波长为570nm，参比波长为450nm测定各孔的光密度值；
[0078] (6)同时设置调零孔(培养基、MTT、DMSO)，对照孔（细胞、相同浓度的药物溶解介 质、培养液、MTT、DMS0)。
[0079] (7)根据测得的光密度值(0D值），来判断活细胞数量，0D值越大，细胞活性越强。利 用公式：
[0080]肿瘤细胞生长抑制率
[0081]计算化合物对各细胞株生长的抑制率，其结果如以下表2所示。
[0082]表2:配体L和配合物1对不同细胞株的增殖抑制率（％ )
[0083]
[0084]从抗肿瘤活性测试结果来看，配合物1对多种人肿瘤细胞株均显示出较强的增殖 抑制活性，显著高于配体L。其中，配合物1对人肝癌细胞Hep-G2和BEL-7402、卵巢癌细胞SK-0V-3的抑制作用最强，其抑制率分别为73.34 ± 0.97 %、58.80 ± 0.64%和65.23 ± 1.37 %， 活性与配体L相比提高了23%~70%以上;而其对肺癌细胞NCI-H460的抑制率则较L提高了 2倍以上。配合物1肝癌细胞HepG2的抑制率也显著高于顺铂，相对于顺铂，配合物1提高了约 75%。另一方面，配合物1对人正常肝脏细胞HL-7702的细胞毒性仍然较小（增殖抑制率为 40.02±1.48%)，略高于配体以36.59±0.61%)，而显著低于顺铂（55.66±3.46%)，显示 出对肿瘤细胞良好的毒性选择性。
[0085] 综上所述，本发明所述的9-苯并噻蒽腙-钌（II)配合物表现出优异的体外抗肿瘤 活性和选择性，对肿瘤细胞的细胞毒性优于L配体，具有良好的潜在药用价值，有望用于各 种抗肿瘤药物的制备。
【主权项】
1. 下式(I)所示化合物或其药学上可接受的盐：2. 权利要求1所述化合物的合成方法，其特征在于:取9-苯并噻蒽腙和二氯?四（二甲 基亚砜)合钌(II)在极性溶剂中进行配位反应，即得到目标产物。3. 根据权利要求2所述的合成方法，其特征在于包括以下步骤： 1) 取9-苯并噻蒽腙和二氯?四（二甲基亚砜)合钌（II)，溶解于极性溶剂中，得到混合 溶液； 2) 所得混合溶液于常温至极性溶剂的回流温度范围内进行配位反应； 3) 将反应后溶液浓过滤，分离出固体，即得到目标产物。4. 根据权利要求2或3所述的合成方法，其特征在于:所述的极性溶剂为丙酮，或者是丙 酮与选自含1~3个碳原子的低碳醇中的一种或两种的组合，所述低碳醇的浓度为50~ ΙΟΟv/v%;在极性溶剂的组成中，所述丙酮在极性溶剂中所占的比例为大于或等于5v/v%。5. 根据权利要求4所述的合成方法，其特征在于：在极性溶剂的组成中，所述丙酮在极 性溶剂中所占的比例为1 〇~60v/v%。6. 根据权利要求2或3所述的合成方法，其特征在于:配位反应在50°C至极性溶剂的回 流温度范围内进行。7. 权利要求1所述化合物或其药学上可接受的盐在制备抗肿瘤药物中的应用。8. 以权利要求1所述化合物或其药学上可接受的盐为有效成分制备的抗肿瘤药物。
【专利摘要】本发明公开了一种9-苯并噻蒽腙-钌(II)配合物及其合成方法和应用。所述的配合物是以取9-苯并噻蒽腙和二氯·四(二甲基亚砜)合钌(II)为原料，在极性溶剂中进行配位反应，制得到目标产物。申请人的研究表明，该配合物具有较好的选择性，对多种人肿瘤细胞株(包括Hep-G2、MGC80-3、SK-OV-3、BEL-7402和NCI-H460肿瘤细胞)具有显著的体外抗肿瘤活性，具有较好的潜在药用价值，有望用于各种抗肿瘤药物的制备。本发明所述配合物的结构式如下式(I)所示。
【IPC分类】C07F15/00, A61P35/00, A61K31/555
【公开号】CN105440085
【申请号】CN201511025168
【发明人】刘延成, 黄克斌, 陈振锋, 覃其品, 王海璐, 黄秋香, 唐上峰
【申请人】广西师范大学
【公开日】2016年3月30日
【申请日】2015年12月30日