一种头孢菌素母核酶解反应的催化方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于头抱菌素类药物中间体合成相关领域，设及一种头抱菌素母核酶解反 应的催化方法，尤其是制备头抱克朽母核7-氨基-3-乙締基-4-头抱烧酸下简称7-AVNA) 酶解反应的催化方法。
【背景技术】
[0002] 7-苯乙酷胺-3-氯甲基头抱烧酸对甲氧基节醋（简称GCLE)是重要的抗生素原料， 它是重要的半合成抗生素母核之一，是头抱克朽母核7-AVNA，头抱丙締母核7-APCA，头抱妥 仑醋母核7-ATCA的初始原料，使用GCLE通过Wittig反应制备的7-苯乙酷氨基-3-乙締基-4-头抱烧酸对甲氧基节醋下简称GV肥)是头抱克朽和头抱地尼母核7-AVNA的前一步中 间体，通过与苯酪反应可去除对甲氧节醋保护基，经过酶裂解去除苯乙酸，其中酶裂解步骤 为制备7-AVNA的关键步骤，正常的酶解过程为，在料液中，加入青霉素酷化酶，维持酶解溫 度在28°C-32°C，用10%的碳酸钢水溶液控制体系pH在7.8-8.2之间，整个酶解时间要持续在 3小时，酶解过程溫度偏高，酶解液长时间维持在高抑下，7-AVNA在酶解液中，很容易降解， 杂质增加，产品收率下降。
[0003] 中国专利CN200710114782.1，报道了7-氨基-3-乙締基-4-头抱烧酸的制备方法， 提出可W用化学裂解和酶裂解去除苯乙酸的制备方法，但是并没有描述酶裂解的详细过 程，对酶解溫度，时间，pH没有明确的描述； 中国专利CN201110100039.7,报道了 WG化E为初始原料，经巧1?1邑反应制备6￥肥，在经 过与苯酪和催化剂反应，经过萃取过程，结晶得到7-AVNA，但是并没有明确催化剂的化学名 称和使用方法。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的在于提供一种头抱菌素母核酶解反应的催化方法，此方法具有操作 简单，基本不增加产品原料成本，酶解时间快，溫度低，产品收率高，杂质低等优点。
[000引本发明的设计思想是：WGV肥为初始原料，经与苯酪反应，去除对甲氧节醋保护基 团，通过碱水萃取过程，将中间产品萃至水相，加入青霉素酷化酶，加入适量聚乙二醇做为 酶解过程催化剂，使酶解过程在低抑和低溫度下进行，减少杂质的产生。
[0006] 为解决上述技术问题，本发明采取的技术方案包括如下步骤： |靈勒7-苯乙酷氨基-3-乙締基-4-头抱烧酸对甲氧基节醋为初始原料，加到苯酪中，升 溫反应，反应结束后，将中间产品萃至水相，加入青霉素酷化酶，及青霉素酷化酶重量的5 ± 2%聚乙二醇作为酶解催化剂； 至控制溫度在20-25°C，滴加5%-10%重量比的碳酸钢溶液，控制体系抑7.0-7.5进行 酶解。
[0007] 本发明所述步骤Φ中7-苯乙酷氨基-3-乙締基-4-头抱烧酸对甲氧基节醋与苯酪 在55-60°C反应6-10小时，反应结束后，将反应液加入到乙酸下醋和碳酸氨钢水溶液的混合 液中，将中间产品萃取至水相，向萃取后的水溶液中，加入青霉素酷化酶和聚乙二醇。
[000引本发明所述步骤;.至中的聚乙二醇分子量为200-600。
[0009] 本发明所述步骤;.至中的聚乙二醇分子量600为最优。
[0010]本发明所述步骤憂中控制体系抑7.0-7.5进行酶解，稳定反应1〇- 2〇分钟，取样检 测原料残留，要求原料残留小于0.5%，滤出青霉素酷化酶，回收后继续用于下一批，加入活 性碳，脱色30分钟，过滤除碳后，用纯化水洗涂碳层，用20%的硫酸调节抑为4.0-4.2，至结晶 全部析出，离屯、，洗涂干燥，得产品7-AVNA。
[0011]本发明所述步骤望中酶解溫度为20-25°C。
[001引本发明所述步骤惡中酶解抑控制在7.0-7.5即可酶解完全。
[001引本发明所述步骤雪中抑稳定后，即可取样检测原料残留，峰面积归一法小于0.5% 表示酶解完全。
[0014]本发明所述步骤蓮;中酶解过程在30分钟，可W酶解完全， 本发明在酶解反应过程中，加入与青霉素酷化酶一定重量比例的催化剂，来提高酶解 速度和改变酶解条件。本发明在不增加产品原料成本的情况下，提高了酶解反应速度，缩短 了操作时间，并使酶解过程在低抑和低溫度下进行，产品纯度高，杂质小，收率高，很适合大 规模工业化生产。具体有益效果在于： 1) 本发明经过此方案催化酶解，酶解溫度比常规酶解溫度可降低5-10°C; 2) 酶解pH可在7.0-7.5下酶解完全，酶解P扯k常规酶解可降低0.5-1.0; 3) 本发明的工艺方法，制备得到的7-AVNA最大未知单杂可降低到0.20%，重量收率提高 1〇/〇。 具体实施方案 [001引实施例1 将leOkgGV肥加入到400kg苯酪中，在55-56°C反应10小时，反应完毕后，将反应液转入 到预先配置的1000L醋酸下醋与60kg碳酸氨钢和3000L纯化水的混合液中，揽拌分层，分出 下层水相，约3100L，加入青霉素酷化酶160kg，加入4.8kg聚乙二醇400，维持溫度在23-25 °C，滴加10%碳酸钢溶液，维持抑在7.3-7.5，稳定反应15分钟，取样检测原料残留，原料残留 小于0.5%，滤出青霉素酷化酶，回收后继续用于下一批，加入化g活性碳，脱色30分钟，过滤 除碳后，用1000L纯化水洗涂碳层，用20%的硫酸，调节pH为4.15-4.20，至结晶全部析出，离 屯、，洗涂干燥，得产品7-AVNA70kg，液相检测色谱纯度99.1%，最大未知单杂0.31%。
[0016] 实施例2 将leOkgGV肥加入到420kg苯酪中，在56-57°C反应8小时，反应完毕后，将反应液转入到 预先配置的1000L醋酸下醋与65kg碳酸氨钢和3000L纯化水的混合液中，揽拌分层，分出下 层水相，约3100L，加入青霉素酷化酶160kg，加入11.2kg聚乙二醇400，维持溫度在20-25°C， 滴加5%碳酸钢溶液，维持抑在7.0-7.2，稳定反应20分钟，取样检测原料残留，原料残留小于 0.5%，滤出青霉素酷化酶，回收后继续用于下一批，加入8kg活性碳，脱色30分钟，过滤除碳 后，用1000L纯化水洗涂碳层，用20%的硫酸调节抑为4.05-4.10，至结晶全部析出，离屯、，洗 涂干燥，得产品7-AVNA 71.化g，液相检测色谱纯度99.3%，最大未知单杂0.23%。
[0017]实施例3 将leOkgGV肥加入到42化g苯酪中，在58-60°C反应6小时，反应完毕后，将反应液转入到 预先配置的1000L醋酸下醋与70kg碳酸钢和3000L纯化水的混合液中，揽拌分层，分出下层 水相，约3100L，加入青霉素酷化酶160kg，加入8kg聚乙二醇600，维持溫度在20-22°C，滴加 5%碳酸钢溶液，维持pH在7.2-7.3,稳定反应10分钟，取样检测原料残留，原料残留小于 0.5%，滤出青霉素酷化酶，回收后继续用于下一批，加入化g活性碳，脱色30分钟，过滤除碳 后，用1000L纯化水洗涂碳层，用20%的硫酸调pH为4. 〇-4.1,至结晶全部析出，罔·<L·、，洗涂 干燥，得产品7-AVNA 7化g，液相检测色谱纯度99.4%，最大未知单杂0.20%。
[0〇1引 实施例4 将leOkgGV肥加入到4巧kg苯酪中，在58-59°C反应6小时，反应完毕后，将反应液转入到 预先配置的1000L醋酸下醋与70kg碳酸氨钢和3000L纯化水的混合液中，揽拌分层，分出下 层水相，约3100L，加入青霉素酷化酶160kg，加入11kg聚乙二醇600，维持溫度在23-25°C，滴 加 10%碳酸钢溶液，维持抑在7.3-7.5,稳定反应10分钟，取样检测原料残留，原料残留小于 0.5%，滤出青霉素酷化酶，回收后继续用于下一批，加入化g活性碳，脱色30分钟，过滤除碳 后，用1000L纯化水洗涂碳层，用20%的硫酸调pH为4.1-4.2,至结晶全部析出，罔·<L·、，洗涂 干燥，得产品7-AVNA 71.化g，液相检测色谱纯度99.25%，最大未知单杂0.25%。
【主权项】
1. 一种头抱菌素母核酶解反应的催化方法，其特征在于包括如下步骤： ?W7-苯乙酷氨基-3-乙締基-4-头抱烧酸对甲氧基节醋为初始原料，加到苯酪中，升 溫反应，反应结束后，将中间产品萃取至水相，加入青霉素酷化酶，及青霉素酷化酶重量的5 ± 2%聚乙二醇作为酶解催化剂； 忌控制溫度在20-30°C，滴加5%-10%重量比的碳酸钢溶液，控制体系pH 7.0-8进行酶 解。2. 根据权利要求1所述的一种头抱菌素母核酶解反应的催化方法，其特征在于:所述步 骤龜中7-苯乙酷氨基-3-乙締基-4-头抱烧酸对甲氧基节醋与苯酪在55-60T：反应6-10小 时，反应结束后，将反应液加入到乙酸下醋和碳酸氨钢水溶液的混合液中，将中间产品萃取 至水相，向萃取后的水溶液中，加入青霉素酷化酶和聚乙二醇。3. 根据权利要求1所述的一种头抱菌素母核酶解反应的催化方法，其特征在于:所述步 骤達g中的聚乙二醇分子量范围为200-600。4. 根据权利要求1所述的一种头抱菌素母核酶解反应的催化方法，其特征在于:所述步 骤寞蠢中的聚乙二醇分子量为600。5. 根据权利要求1所述的一种头抱菌素母核酶解反应的催化方法，其特征在于:所述步 骤2中控制体系抑7.0-7.5进行酶解，稳定反应10-20分钟，取样检测原料残留，要求原料 残留小于0.5%，滤出青霉素酷化酶，回收后继续用于下一批，加入活性碳，脱色30分钟，过滤 除碳后，用纯化水洗涂碳层，用20%的硫酸调节抑为4.0-4.2，至结晶全部析出，离屯、，洗涂干 燥，得产品7-AVNA。6. 根据权利要求1所述的一种头抱菌素母核酶解反应的催化方法，其特征在于:所述步 骤等'中酶解溫度为20-25°C。7. 根据权利要求1所述的一种头抱菌素母核酶解反应的催化方法，其特征在于:所述步 骤弯中酶解pH控制在7.0-7.5。8. 根据权利要求1所述的一种头抱菌素母核酶解反应的催化方法，其特征在于:所述步 骤屋，中pH稳定后，即可取样检测原料残留，峰面积归一法小于0.5%即认为酶解完全。
【专利摘要】本发明属于头孢菌素类药物中间体合成相关领域，提供一种头孢菌素母核酶解反应的催化方法，包括以7-苯乙酰氨基-3-乙烯基-4-头孢烷酸对甲氧基苄酯为初始原料，加入苯酚中，升温反应，反应结束后,将中间产品萃至水相,加入青霉素酰化酶，及青霉素酰化酶重量的5±2%聚乙二醇作为酶解催化剂；控制温度在20-25℃，滴加5%-10%重量比的碳酸钠溶液，控制体系pH7.0-7.5进行酶解。本发明改变酶解速度和改变酶解条件。在不增加7-AVNA原料成本的情况下，提高了酶解反应速度，缩短了操作时间，并使酶解过程在低pH和低温度下进行，产品纯度高，杂质小，收率高,很适合大规模工业化生产。
【IPC分类】C12P35/02
【公开号】CN105506050
【申请号】CN201610038134
【发明人】门万辉, 金联明
【申请人】湖北凌晟药业有限公司
【公开日】2016年4月20日
【申请日】2016年1月21日