ock、Colton、Scianna、Xga、 I/i、Augustine、Cromer、Ena、Gerbich、Gregory、Holley、jacobs、Joseph、Lngereis、Oka、 Vel、Chido、Rodgers、Cost-Stirling、York、Knops_Helgeson、McCoy、John Milton、Hagen、 Ahonen、Batty、Biles、Bishop、Box、Chra、Dantu、Froese、Good、Griffiths、Heibel、Hey、 Hov、Hunt、Jensen、Jna、Lewis 11、Livesey、Mitchel、Moen、0rriss、Peters、Radin、 Redelberger、Reid、Rosennlund、Swann、Torkiidsen、Traversu、Webb、Wright、Wulfsberg或 Bg相关的至少一种或多种抗原。15. 根据权利要求1所述的基因修饰细胞，其中相比于对应的野生型细胞，来源于所述 基因修饰细胞的血细胞具有响应于输血的降低的免疫原性。16. 根据权利要求15所述的基因修饰细胞，其中所述降低的免疫原性包括相比于对应 的野生型细胞由所述修饰细胞诱导的降低的免疫应答水平。17. 根据权利要求15所述的基因修饰细胞，其中由所述修饰细胞诱导的所述免疫应答 水平为由所述对应的野生型细胞诱导的免疫应答水平的至少约20 %。18. 根据权利要求15所述的基因修饰细胞，其中由所述修饰细胞诱导的所述免疫应答 水平是由所述对应的野生型细胞诱导的免疫应答水平的至少约50 %。19. 根据权利要求15所述的基因修饰细胞，其中由所述修饰干细胞诱导的所述免疫应 答水平基本上小于由所述对应的野生型细胞诱导的免疫应答水平。20. 根据权利要求15所述的基因修饰细胞，其中由所述修饰干细胞诱导的所述免疫应 答水平基本上小于由所述对应的野生型细胞诱导的免疫应答水平的至少1.5、2、3、4、5、6、 7、8、9、10 或 20 倍。21. 根据权利要求15所述的基因修饰细胞，其中由所述修饰干细胞诱导的所述免疫应 答水平在所述修饰细胞注入开始后约第0.5、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13或14天被测 定。22. 根据权利要求15所述的基因修饰细胞，其中由所述修饰干细胞诱导的所述免疫应 答水平在所述修饰细胞注入开始后约第0.5、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13或14小时被 测定。23. 根据权利要求15所述的基因修饰细胞，其中由所述修饰干细胞诱导的所述免疫应 答水平在所述修饰细胞注入开始后约第1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、 18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29 或 30 分钟被测定。24. -种用于产生修饰干细胞的方法，所述方法包括在培养基中培养修饰干细胞，所述 修饰干细胞含有血型抗原(BGA)生物合成或运输路径的一个或多个基因的完全或部分基因 缺失。25. 根据权利要求24所述的方法，进一步包括： 收集干细胞，其含有与血型抗原生物合成或运输路径的一个或多个基因相关的靶多核 苷酸； 将转录激活因子样(TAL)效应物核酸酶引入至所述干细胞以产生所述修饰干细胞；以 及 分离所述修饰干细胞，并且其中多个转录激活因子样效应物重复序列结合至所述靶多 核苷酸。26. 根据权利要求24所述的方法，其中所述基因修饰细胞包括基因修饰的造血干细胞。27. 根据权利要求24所述的方法，其中所述基因修饰细胞包括基因修饰的红系祖细胞。28. 根据权利要求24所述的方法，其中所述基因修饰细胞包括基因修饰的干细胞。29. 根据权利要求24所述的方法，其中所述基因修饰细胞包括基因修饰的胚胎干细胞。30. 根据权利要求24所述的方法，其中所述基因修饰细胞包括基因修饰的诱导多能干 细胞。31. 根据权利要求24所述的方法，其中所述完全的或部分的基因缺失引入所述基因修 饰细胞的基因组中。32. 根据权利要求24所述的方法，其中所述血型抗原包括Rh血型抗原或ABO血型抗原。33. 根据权利要求24所述的方法，其中所述血型抗原包括与MNSsU、Pl、Lutheran、Kell、 Lewis、Duffy、Kidd、Diego、Cartwright、Dombrock、Colton、Scianna、Xga、I/i、Augustine、 Cromer、Ena、Gerbich、Gregory、Holley、jacobs、Joseph、Lngereis、Oka、Vel、Chido、 Rodgers、Cost-Stirling、York、Knops-Helgeson、McCoy、John Milton、Hagen、Ahonen、 Batty、Bi1es、Bishop、Box、Chra、Dantu、Froese、Good、Griffiths、Heibe1、Hey、Hov、Hunt、 Jensen、Jna、Lewis 11、Livesey、Mitchel、Moen、Orriss、Peters、Radin、Redelberger、 Re id、Rosennlund、Swann、Torkiidsen、Traversu、Webb、Wright、Wul fsberg 或 Bg 相关的至少 一种或多种抗原。34. -种用于产生血液替代品的方法，其包括： 在培养基中培养修饰干细胞，所述修饰干细胞含有血型抗原(BGA)生物合成或运输路 径的一个或多个基因的完全或部分基因缺失；以及 使所述修饰干细胞分化，以产生相比于对应的野生型细胞血型抗原的量减少的修饰血 细胞。35. 根据权利要求34所述的方法，其中所述修饰细胞包括基因修饰的造血干细胞。36. 根据权利要求34所述的方法，其中所述修饰细胞包括基因修饰的红系祖细胞。37. 根据权利要求34所述的方法，其中所述修饰细胞包括基因修饰的干细胞。38. 根据权利要求34所述的方法，其中所述修饰细胞包括基因修饰的胚胎干细胞。39. 根据权利要求34所述的方法，其中所述修饰细胞包括基因修饰的诱导多能干细胞。40. 根据权利要求34所述的方法，其中相比于对应的野生型血细胞，所述修饰血细胞具 有量减少的血型抗原。41. 根据权利要求34所述的方法，其中相比于对应的野生型血细胞，所述修饰血细胞具 有血型抗原生物合成或运输路径的一个或多个基因的减少的表达。42. 根据权利要求34所述的方法，其中相比于对应的野生型细胞，所述修饰血细胞在所 述修饰细胞中积聚的血型抗原的量减少。43. 根据权利要求34所述的方法，其中相比于对应的野生型细胞，所述修饰血细胞在所 述修饰细胞上的血型抗原的量减少。44. 根据权利要求34所述的方法，其中相比于对应的野生型细胞，衍生的所述修饰血细 胞具有的与所述修饰细胞的膜相关的血型抗原的量减少。45. 根据权利要求34所述的方法，其中所述完全的或部分的基因缺失被引入所述基因 修饰细胞的基因组中。46. 根据权利要求34所述的方法，其中所述血型抗原包括Rh血型抗原或AB0血型抗原。47. 根据权利要求34所述的方法，其中所述血型抗原包括与MNSsU、Pl、Lutheran、Kell、 Lewis、Duffy、Kidd、Diego、Cartwright、Dombrock、Colton、Scianna、Xga、I/i、Augustine、 Cromer、Ena、Gerbich、Gregory、Holley、jacobs、Joseph、Lngereis、0ka、Vel、Chido、 Rodgers、Cost-Stirling、York、Knops_Helgeson、McCoy、John Mi 1ton、Hagen、Ahonen、 Batty、Biles、Bishop、Box、Chra、Dantu、Froese、Good、Griffiths、Heibel、Hey、Hov、Hunt、 Jensen、Jna、Lewis 11、Livesey、Mitchel、Moen、Orriss、Peters、Radin、Redelberger、 Re id、Rosennlund、Swann、Torkiidsen、Traversu、Webb、Wright、Wul fsberg 或 Bg 相关的至少 一种或多种抗原。48. 根据权利要求34所述的方法，其中相比于对应的野生型细胞，所述修饰血细胞具有 响应于输血的降低的免疫原性。49. 根据权利要求48所述的方法，其中所述降低的免疫原性包括相比于对应的野生型 细胞由所述修饰细胞诱导的降低的免疫应答水平。50. 根据权利要求48所述的方法，其中由所述修饰细胞诱导的所述免疫应答水平为由 所述对应的野生型细胞诱导的免疫应答水平的至少约20 %。51. 根据权利要求48所述的方法，其中由所述修饰细胞诱导的所述免疫应答水平为由 所述对应的野生型细胞诱导的免疫应答水平的至少约50 %。52. 根据权利要求48所述的方法，其中由所述修饰干细胞诱导的所述免疫应答水平基 本上小于由所述对应的野生型细胞诱导的免疫应答水平。53. 根据权利要求48所述的方法，其中由所述修饰干细胞诱导的所述免疫应答水平小 于由所述对应的野生型细胞诱导的免疫应答水平的至少1.5、2、3、4、5、6、7、8、9、10或20倍。54. 根据权利要求48所述的方法，其中由所述修饰干细胞诱导的所述免疫应答水平在 所述修饰细胞注入开始后约第0.5、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13或14天被测定。55. 根据权利要求48所述的方法，其中由所述修饰干细胞诱导的所述免疫应答水平在 所述修饰细胞注入开始后约第0.5、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13或14小时被测定。56. 根据权利要求48所述的方法，其中由所述修饰干细胞诱导的所述免疫应答水平在 所述修饰细胞注入开始后约第1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、 21、22、23、24、25、26、27、28、29 或 30 分钟被测定。
【专利摘要】本发明涉及一种基因修饰细胞(例如干细胞)，其含有血型抗原(BGA)生物合成或运输路径的一个或多个基因的完全或部分基因缺失。本文提供的系统和方法有助于血液替代品(例如血细胞)的产生。
【IPC分类】C12N5/074, C12N5/0735, C12N5/0789, C12N5/16, C12N5/22
【公开号】CN105518127
【申请号】CN201480048644
【发明人】吴昭
【申请人】上海斯丹赛生物技术有限公司
【公开日】2016年4月20日
【申请日】2014年9月4日
【公告号】EP3027739A1, EP3027739A4, WO2015032340A1