核病菌活 性，化合物的最小抑菌浓度（MIC)低于0. 1 μ g/mL，部分达到0. 01 μ g/mL，对临床分选的 耐多药结核菌（MDR-TB)菌株具有很强的抑制作用。体内实验中，本发明所述的吡唑并 [1，5-a]吡啶类化合物在20mg/kg/d的剂量下，可有效清除小鼠体内H37Ra的感染量，是一 类新型的抗结核化合物。
[0074] (2)本发明所述的吡唑并[1，5-a]吡啶类化合物具有良好的药代动力学性质和很 低的毒副作用，具备很好的成药性，且体内药效明显，具有很好的开发前景。
【附图说明】
[0075] 图1为所述化合物L298实时体内抗结核病菌活性测定结果；
[0076] 图2为所述化合物L385实时体内抗结核病菌活性测定结果；
[0077] 图3为所述化合物L372实时体内抗结核病菌活性测定结果；
[0078] 图4为所述化合物L298脾脏内抗结核活病菌性测定结果。
【具体实施方式】
[0079] 根据标准药学技术，本发明化合物可单独或在药用组合物中与药学上可接受的载 体组合给予哺乳动物，优选人。可口服或皮下、肌注、腹膜内、静脉、直肠、局部给予化合物。
[0080] 所述口服给予，例如片剂、含片、锭剂、水或油混悬液、可分散粉剂或颗粒剂、乳剂、 硬胶囊剂或软胶囊剂、或糖浆剂或酏剂等；所述皮下、肌注、腹膜内、静脉给予，可制成无菌 可注射的水溶液；所述直肠给予，可制成栓剂形式；所述局部给予，可制成乳膏、软膏剂、凝 胶剂、溶液剂或混悬液等。
[0081] 所述药学上可接受的载体可例如：惰性稀释剂例如碳酸钙、碳酸钠、乳糖、磷酸钙 或磷酸钠；制粒剂（granulating)和崩解剂例如微晶纤维素、交联羧甲纤维素钠 （sodium crosscarmellose)、玉米淀粉或海藻酸；粘合剂例如淀粉、明胶、聚乙稀吡略烧酮或阿拉伯 胶；及润滑剂例如硬脂酸镁、硬脂酸或滑石粉。片剂可不包衣或通过已知技术包衣从而掩 盖药物的不良味道或延长在胃肠道中崩解和吸收且因而提供持续更长时间的药物效应。例 如，可采用水溶性掩盖味道的原料例如羟丙基-甲基纤维素或羟丙纤维素，或采用延时原 料例如乙基纤维素、醋酸丁酸纤维素。
[0082] 以下结合附图和具体实施例对本发明所述吡唑并[1，5-a]吡啶类化合物及其应 用作进一步的阐述。
[0083] 实施例1 :5_氯-2-乙基-N-(4-(4-(4-(三氟甲氧基）苯基）哌啶-1-取代）苄 基）吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲酰胺（TJ170298)
[0084]
[0086] 步骤1 :4-(4-(三氟甲氧基）苯基）-5, 6-二氢吡啶-1 (2H)-碳酸叔丁酯（A)
[0088] 在干燥的500mL的圆底烧瓶中加入重蒸THF(lOOmL)和二异丙基胺（5mL，36mmol)， 在Ar保护和_78°C的条件下，滴加2. 4M正丁基锂环己烧溶液（36mmol，15mL)。搅拌lh后， 将溶于25mL无水THF的l-Boc-4-哌啶酮（36mmol，7. 2g)滴加到反应体系中。反应1. 5h 后，将溶于5mL无水THF的N-苯基双（三氟甲烷磺酰）亚胺（39. 6mmol，14. 15g)滴加到烧 瓶中，再将反应升至室温搅拌过夜。减压蒸除溶剂，得粗产品，将粗产品直接投下一步，无需 进一步纯化。
[0089] 将所述粗产品和4-三氟甲氧基苯硼酸（50mmol，10. 3g)、四三苯基磷钯（0· 21g， 0. 5% )、无水LiCl (108mmol，5. lg)、2N碳酸钠溶液（48ml)混合溶于125mlDME中，加热至 85°C反应9小时。反应结束后，经2cm硅胶短柱过滤，滤渣用乙酸乙酯洗三次，减压旋干溶 剂。经柱层析得到Ai，黄色油状物9. 60g(77. 64% )。
[0090] 4 匪R(400MHz，CDC13) : δ 7. 38(d，J = 7. 6Hz，2H)，7. 17(d，J = 8. 0Hz，2H)， 6. 03 (s，1H)，4. 08 (s，2H)，3. 64 (t，J = 5. 2Hz，2H)，2. 50 (m，2H)，1. 49 (s，9H)。
[0091] MS (ESI)，m/z: 344 (M++H+)。
[0092] 步骤2 :4- (4-(三氟甲氧基）苯基）哌啶（A2)
[0093]
[0094] 将4-(4-(三氟甲氧基）苯基）-5,6-二氢吡啶_1(2!1)-碳酸叔丁酯％，25.6臟 〇1， 8. 8g)和10% Pd/C(l. 32g)溶于130ml甲醇中，反应体系用氢气球置换三次后，室温下搅拌 24h。经2cm硅胶短柱过滤，滤渣用乙酸乙酯洗三次，减压旋干溶剂，得到黄色油状物。再将 该油状物溶于无水DCM(150mL)中，冰浴条件下缓慢加入TFA(70mL)，室温下搅拌过夜。减压 旋干溶剂，用乙酸乙酯溶解，再加入碳酸氢钠饱和溶液至水相pH = 8. 0,分离有机相后，用 乙酸乙酯萃取水相三次。合并有机相，减压旋干溶剂得到A2，棕色粘稠状固体6. 3g (100 % )。
[0095] MS (ESI)，m/z: 246 (M++H+)。
[0096] 步骤3 :4-(4-(4-(三氟甲氧基）苯基）哌啶-1-取代）苯甲腈（A3)
[0097]
[0098] 4-(4-(三氟甲氧基）苯基）哌啶（A2, 6. 56mmol，1. 61g)、4_ 氯苯甲腈（32. 8mmol， 4. 5g)和无水碳酸钾（13. 12mmol，1. 8g)溶于40mLDMS0中，加热至150°C反应过夜。冷却至 室温加入大量水，将析出的固体用不是漏斗过滤，将滤渣用水洗三次后收集溶于乙酸乙酯， 用无水硫酸钠干燥。经柱层析分离得到A 3，白色固体1. 70g(74. 6% )。
[0099] MS(ESI)，m/z:347(M++H+)。
[0100] 步骤4 :(4-(4-(4-(三氟甲氧基）苯基）哌啶-1-取代）苯基）甲胺盐酸盐A4 [0101]
[0102] 4-(4-(4-(三氟甲氧基）苯基）哌啶-1-取代）苯甲腈（^，4.9臟〇1，1.73溶于 无水THF
[0103] (110mL)，冰浴条件下加入LAH(15. 2mmol，0. 58g)，搅拌半小时后升温回流过夜。 冷却反应，冰浴条件下缓慢加入大量水淬灭反应。经2cm硅胶短柱过滤，滤渣用乙酸乙 酯洗三次，减压旋干溶剂。加入过量的氯化氢乙醇溶液使其成盐，旋干溶剂得到a4，固体 2. 02g(97. 2% ) 〇
[0104] MS(ESI),m/z:351(M+) 〇
[0105] 步骤5 :2_乙基-5_((叔丁氧幾基）胺）-吡唑[1, 5_a]吡啶-3_碳酸乙酯队
[0106]
[0107] 将4_(叔丁氧羰基氨基）吡啶（1. 2g，6. 2mmol)和2, 4-二硝基羟胺 (DNPH，1. 23g，6. 2mmol)溶于28mL乙腈中升温至40°C，反应18h后，旋干溶剂。再向反应体 系中加入无水DMF
[0108] (15mL)、2_戊炔酸乙酯（0· 78g，6. 2mmol)和无水K2C03(1. 71g, 12. 4mmol)。室温下 搅拌过夜，TLC检测反应完全。加入大量水，用乙酸乙酯萃取三次，收集有机相用盐水洗三 次后经柱层析分离得到产物队，0. 71g(34. 2% )。
[0109] MS (ESI)，m/z: 334 (M++H+)。
[0110] 步骤6 :2-乙基5-胺基-吡唑[1，5-a]吡啶-3-碳酸乙酯B2
[0111]
[0112] 将2-乙基-5-((叔丁氧羰基）胺）-吡唑[1，5-a]吡啶-3-碳酸乙酯汍，0.698， 2. 07mmol)溶于28mL无水DCM中，滴加1. 8mLTFA。室温搅拌过夜。旋干，加入NaHCOjt 和溶液至pH = 7-8,乙酸乙酯萃取三次，有机相用无水硫酸钠干燥，收集旋干得到产物B2， 0. 36g(75% ) 〇
[0113] MS (ESI)，m/z: 234 (Μ++Η+)。
[0114] 步骤7 :2-乙基-5-氯-吡唑[1，5-a]吡啶-3-碳酸乙酯B3
[0115]
[0116] 将2-乙基-5-胺基-吡唑[l，5-a]吡啶-3-碳酸乙酯（B2,0. lg，0. 43mmol)和 CuCl (0. llg，1. lmmol)溶于浓盐酸（1. 5mL)中，冰浴条件下缓慢滴加0. 4M的似勵2溶液 (0. 038g，0. 56mmol)。半小时后，将反应体系加热至80°C，反应15min后，TLC检测反应完全。 冷却反应，加入1M NaOH溶液调pH至10,经2cm硅胶短柱过滤，滤渣用乙酸乙酯洗三次，减 压旋干溶剂，经柱层析分离得到产物B3,0. 08g(73. 8% )。
[0117] MS(ESI)，m/z:253(M++H+)。
[0118] 步骤8 :2-乙基-5-氯-吡唑[1，5-a]吡啶-3-羧酸B4
[0119]
[0120] 将2-乙基-5-氯-吡唑[1，5-a]吡啶-3-碳酸乙酯（B3,0. 27g，1. 07mmol)溶解 于9mL乙醇和3mL水的混合溶剂中，加入Na0H(0. 13g，3. 2mmol)，加热至回流过夜。冷却反 应，旋干溶剂，加入IN HC1使体系pH = 4. 0,将析出的固体抽滤再真空干燥得到B4，固体 0. 29g(100% ) 〇
[0121] MS(ESI)，m/z:225(M++H+)。
[0122] 步骤9 :5-氯-2-乙基-N-(4-(4-(4-(三氟甲氧基）苯基）哌啶-1-取代）苄基） 吡唑[l，5-a]吡啶-3-甲酰胺（TJ170298)
[0123]
[0124] 将 2-乙基-5-氯-吡唑[l，5_a]吡啶-3-羧酸（B4,0. 25g，l. lmmol)、 EDCI ·Ηα(0·328，1·65πιπιο1)、Η0ΒΤ(0·0748,0·55πιπιο1)溶于 DMF(20mL)中，再加入三乙胺 (0. 66g，6. 6mmol)和化合物A4(0. 55g，1. 3mmol)。将反应升温至80°C过夜。冷却反应后加 入大量水用乙酸乙酯萃取三次，收集有机相用盐水洗三次后经柱层析分离得到TJ170298， 固体 0· 46g(74. 7% )。
[0125] 4 NMR(400MHz，DMS0-d6) δ 8. 72(d，J = 7. 6Hz，1H)，8. 17(t，J = 6. 0Hz，1H)， 7. 90 (s, 1H) , 7. 41 (d, J = 8. 8Hz, 1H) , 7. 28 (d, J = 8. 0Hz, 2H) , 7. 22 (d, J = 8. 8Hz, 2H) , 7. 02 (dd, J = 7. 2, 2. 4Hz, 1H), 6. 95 (d, J = 8. 8Hz, 2H), 4. 39 (d, J = 6. 0Hz, 2H), 3. 78 (m, 2H, 3. 00 (q, J = 7. 6Hz, 2H), 2. 73 (m, 3H), 1. 86 (m, 2H), 1. 74 (m, 2H), 1. 2 4(t, J = 7. 6Hz, 2H) 〇
[0126] MS(ESI)，m/z:557(M++H+)。
[0127] 实施例2 :5-氯-2-乙基-N-(4_(三氟甲氧基）苯基）吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲 酰胺（TJ170322)
[0128]
[0129] 合成方法如实施例1中的步骤5-9。
[0130] 4 MMR(400MHz，DMS0-d6) : δ 8. 74 (d，J = 7. 2Hz，1H)，8. 32 (t，J = 6. 0Hz，1H)， 7.96(s，lH)，7.71(d，J = 8.4Hz，2H)，7.57(d，J = 8.0Hz，2H)，7.04(d，J = 7·2Ηζ，1Η)， 4. 57 (d，J = 5. 6Hz，2H)，3. 02 (q，J = 7. 4Hz，2H)，1. 25 (t，J = 7. 4Hz，2H)。
[0131] MS(ESI)，m/z:382(M++H+)。
[0132] 实施例3 :5-氯-N-(4-(4-(4-(三氟甲氧基）苯基）哌啶-1-取代）苄基）吡唑 [1，5-a]吡啶-3-甲酰胺（TJ170371)
[0133]
[0134] 合成方法如实施例1。
[0135] 4 匪R(400MHz，DMS0-d6) : δ 8. 82(d，J = 7. 2Hz，1H)，8. 72(slH)，8. 63(s， lH)，8.24(s，lH)，7.40(d，J = 8.4Hz，2H)，7.28(d，J = 8.0Hz，2H)，7.20(d，J = 8.0Hz， 2H), 7. 13 (d, J = 7. 2Hz, 2H), 6. 94 (d, J = 8. 0Hz, 2H), 4. 38 (d, J = 5. 2Hz, 2H), 3. 77 (m, 2H), 2. 72 (m, 3H), 1. 86 (m, 2H), 1. 74 (m, 2H)。
[0136] MS (ESI)，m/z: 529 (M++H+)。
[0137] 实施例4 :5-氯-2-甲基-N-(4-(4-(4_(三氟甲氧基）苯基）哌啶-1-取代）苄 基）吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲酰胺（TJ170372)
[0138]
[0139] 合成方法如实施例1。
[0140] 4 MMR(400MHz，DMS0-d6) : δ 8. 70 (d，J = 6· 0Hz，1H)，8. 08 (t，J = 4. 4Hz，1H)， 7. 94(s, 1H), 7. 40(d, J = 6. 8Hz, 2H), 7. 29 (d, J = 6. 8Hz, 2H), 7. 22 (d, J = 6. 8Hz, 2H), 7. 03(d, J = 6. 0Hz, 1H), 6. 95(d, J = 6. 8Hz, 2H), 4. 39 (d, J = 4. 4Hz, 2H), 3. 78 (m, 2H), 2. 73 (m, 3H)，2. 56 (s, 3H), 1. 86 (m, 2H), 1. 74 (m, 2H)。
[0141] MS(ESI)，m/z:543(M++H+)。
[0142] 实施例5 :5-氯-2-环丙基-N-(4-(4-(4-(三氟甲氧基）苯基）哌啶-1-取代） 苄基）吡唑[l，5-a]吡啶-3-甲酰胺（TJ170375)
[0143]
[0144] 合成方法如实施例1。
[0145] 4 MlR(500MHz，DMS0-d6) : δ 8. 66(d，J = 7· 0Hz，1H)，8. 17(s，1H)，7. 90(s， 1H), 7. 40 (d, J = 8. 0Hz, 2H), 7. 28 (d, J = 8. OHz, 2H), 7. 23 (d, J = 8. OHz, 2H), 7. 00 (d, J =6. 5Hz, 1H), 6. 96 (d, J = 8. OHz, 2H), 4. 14 (d, J = 5. 5Hz, 2H), 3. 78 (m, 2H), 2. 73 (m, 3H), 2. 54 (m, 3H)，1. 86 (m, 2H)，1. 74 (m, 2H)，1. 02 (m, 2H)，= 0· 96 (s, 2H)。
[0146] MS (ESI)，m/z: 569 (M++H+)。
[0147] 实施例6 :2-甲基-N-(4-(4-(4-(三氟甲氧基）苯基）哌啶-1-取代）苄基）吡 唑[l，5-a]吡啶-3-甲酰胺（TJ170381)
[0149] 步骤1 :2-甲基吡唑[1，5-a]吡啶-3-碳酸乙酯
[0151] 将吡啶（0· 36g，4. 5mmol)和 2, 4-二硝基羟胺（DNPH，1. 0g，5mmol)溶于 25mL 乙 腈中升温至40°C，反应18h后，旋干溶剂。再向反应体系中加入无水DMF(25mL)、2_ 丁炔 酸乙酯（0. 75g，6. 75mmol)和无水K2C03(1. 24g，9mmol)。室温下搅拌过夜，TLC检测反应完 全。加入大量水，用乙酸乙酯萃取三次，收集有机相用盐水洗三次后经柱层析分离得到固体 0. 53g(57. 27% ) 〇
[0152] 4 匪R(400MHz，CDC13) : δ 8. 46(d，J = 6. 8Hz，1H)，8· 10(d，J = 8. 8Hz，1H)， 7. 38 (t, J = 7. 8Hz, 1H) , 6. 90 (t, J = 6. 6Hz, 2H), 4. 39 (q, J = 6. 8Hz, 2H), 2. 69 (s, 3H), 1. 43(t, J = 7. 0Hz, 3H) 〇
[0153] MS (ESI)，m/z: 205 (M++H+)。
[0154] 步骤2 :2-甲基-N-(4-(4-(4_(三氟甲氧基）苯基）哌啶-1-取代）苄基）吡唑 [1，5-a]吡啶-3-甲酰胺（TJ170381)
[0155]
[0156] 合成方法如实施例1中的步骤8和9。
[0157] 4 MMR (400MHz, DMS0-d6) : δ 8.64 (d，J = 6.8Hz, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.90 (d，J =8·8Ηζ，1Η) ,7.40 (m，3H) ,7.28 (d，J = 8·0Ηζ，2Η) ,7.23 (d，J = 8·0Ηζ，2Η) ,6.95 (m， 3H), 4. 40 (d, J = 5. 2Hz, 2H), 3. 78 (d, J = 11. 6Hz, 2H), 2. 73 (m, 3H), 2. 56 (s, 3H), L 86 (m, 2H )，1. 74(m, 2H) 〇
[0158] MS (ESI)，m/z: 509 (M++H+)。
[0159] 实施例7 :2, 5-二甲基-N-(4-(4-(4-(三氟甲氧基）苯基）哌啶-1-取代）苄基） 吡唑[l，5-a]吡啶-3-甲酰胺（TJ170385)
[0160]
[0161] 合成方法如实施例6。
[0162] NMR (400MHz, DMS〇-d6) ： δ 8. 52 (d, J = 7. 2Hz, 1H), 7. 90 (t, J = 6. 0Hz, 1H), 7. 71(s, 1H),7. 40(d, J = 8. 4Hz, 2H), 7. 28 (d, J = 8. 0Hz, 2H), 7. 22 (d, J = 8. 4Hz,2H), 6. 95 (d, J = 8. 4Hz, 2H), 6. 80 (d, J = 6. 8Hz, 1H), 4. 39 (d, J = 5. 6Hz, 2H), 3. 78 (m, 2H), 2. 73 (m, 3H)，2. 53 (s, 3H)，2. 37 (s, 3H), 1. 86 (m, 2H), 1. 75 (m, 2H)。
[0163] MS(ESI)，m/z:523(M++H+)。
[0164] 实施例8 :5-氯-2-苯基-N-(4-(4-(4-(三氟甲氧基）苯基）哌啶-1-取代）苄 基）吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲酰胺（TJ170386)
[0165]
[0166] 合成方法如实施例6。
[0167] 4 MlR(400MHz，DMS0-d6) : δ 8. 32(s，1H)，7. 42(m，3H)，7. 41 (m，5H)，7. 29(d， J = 8.0Hz，2H)，7.18(d，J = 8.0Hz，lH)，7.10(d，J = 6.4Hz，lH)，6.96(d，J = 8.4Hz， 2H)，4. 35 (d，J = 5. 2Hz，2H)，3. 80 (m，2H)，2. 75 (m，3H)，1. 87 (m，2H)，1. 76 (m，2H)。
[0168] MS(ESI)，m/z:605(M++H+)。
[0169] 实施例9 :4-((5-氯-2-乙基吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲酰胺）甲基）苯甲酸甲酯 (TJ064814)
[0170]
[0171] 合成方法如实施例1中步骤5-9。
[0172] NMR (400MHz, DMS〇-d6) ：58.75(d,J = 7.6Hz,lH),8.33(t,J = 5. 4Hz, 1H) ,7. 94(m, 3H), 7. 48(d, J = 7. 6Hz, 2H), 7. 03 (d, J = 7. 2Hz, 1H), 4. 56 (d, J = 5. 6Hz, 2H), 3. 84 (s, 3H), 3. 01 (q, J = 7. 6Hz, 2H), 1. 24 (t, J = 7. 2Hz, 2H)。
[0173] MS(ESI)，m/z:372(M++H+)。
[0174] 实施例10 :5-氯-2-乙基-N-(4-(4-(4-(三氟甲氧基）苯基）哌啶-1-取代）苯 基）吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲酰胺（TJ064819)
[0176] 步骤1 :4-(4-(4-(三氟甲氧基）苯基）哌啶-1-取代）苯胺
[0177]
[0178] 将中间体 A2 (0· 5g，2mmol)溶于 DMSO (12mL)中，加入无水 K2C03 (0· 55g，4mmol) 和对氟硝基苯（〇. 56g，4mmol)。升温至130°C，反应过夜。冷却至室温，加入大量水，将析 出的固体用布氏漏斗抽滤，水洗三次后将滤渣溶于乙酸乙酯。水洗三次，有机相用无水硫 酸钠干燥后经柱层析纯化得到中间体1-(4-硝基苯）-4-(4-(三氟甲氧基）苯基）哌啶 0. 68g(92. 0% ) 〇
[0179] 将得到的中间体1-(4-硝基苯）-4-(4-(三氟甲氧基）苯基）哌啶（0.68g， 1.86mm 〇l)溶于Me0H(30mL)，加入催化量的Pd/C。氢气置换三次后，室温搅拌7h。反应 完全后，经2cm硅胶短柱过滤，滤渣用乙酸乙酯洗三次，减压旋干溶剂，经柱层析分离得到 4- (4- (4-(三氟甲氧基）苯基）哌啶-1-取代）苯胺0· 44g (70. 9 % )