菠萝蛋白酶的原料制成;碱性蛋白酶、胰蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶的质量比为5:5:2:3:2:3;碱性蛋白酶的酶活为11000U/g，胰蛋白酶的酶活为10000U/g，枯草杆菌蛋白酶的酶活为100000U/g，中性蛋白酶为50000U/g，木瓜蛋白酶的酶活为2000000U/g，菠萝蛋白酶的酶活为1000000U/g ；
[0052](3)分离
[0053]调节混合液的pH值为7.2，使用高速冷冻离心机进行离心，离心转速4200r/min，时间1min，取上清液，将上清液先后通过10KDa、6KDa、3KDa的超滤膜进行超滤处理，得到滤过液；
[0054](4)将滤过液真空冷冻干燥，得到ACE抑制肽粉末。
[0055]将所述的ACE抑制肽粉末进行ACE抑制率的测定，测定得到ACE抑制肽粉末的抑制率为44%。
[0056]实施例3
[0057]一种酶解豆柏制备ACE抑制肽的方法，包括如下步骤:
[0058](I)豆柏预处理
[0059]将高温豆柏使用粉碎机进行粉碎、过60目筛，所得豆柏粉与水以1:6的质量比混合，搅拌均匀，调节pH值为10，进行超声，超声功率150W，温度50°C，时间20min得到豆柏混合物；
[0060](2)酶解
[0061]调节豆柏混合物的pH值为9，加入豆柏混合物质量的3%的复合酶制剂，混合均匀，在35°C温度下，水解时间8小时，然后将水解液沸水浴煮沸灭酶lOmin，冷却至室温，得到混合液;其中，复合酶制剂包括由碱性蛋白酶、胰蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶的原料制成;碱性蛋白酶、胰蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶的质量比为7:5:3:2:4:3;碱性蛋白酶的酶活为11000U/g，胰蛋白酶的酶活为10000U/g，枯草杆菌蛋白酶的酶活为100000U/g，中性蛋白酶为50000U/g，木瓜蛋白酶的酶活为2000000U/g，菠萝蛋白酶的酶活为1000000U/g ；
[0062](3)分离
[0063]调节混合液的pH值为7.5，使用高速冷冻离心机进行离心，离心转速4500r/min，时间1min，取上清液，将上清液先后通过10KDa、6KDa、3KDa的超滤膜进行超滤处理，得到滤过液；
[0064](4)将滤过液真空冷冻干燥，得到ACE抑制肽粉末。
[0065]将所述的ACE抑制肽粉末进行ACE抑制率的测定，测定得到ACE抑制肽粉末的抑制率为35%。
[0066]实施例4
[0067]—种酶解豆柏制备ACE抑制肽的方法，包括如下步骤:
[0068](I)豆柏预处理
[0069]将高温豆柏使用粉碎机进行粉碎、过60目筛，所得豆柏粉与水以1:5的质量比混合，搅拌均匀，调节pH值为8，进行超声，超声功率200W，温度45°C，时间20min得到豆柏混合物；
[0070](2)酶解
[0071]调节豆柏混合物的pH值为8，加入豆柏混合物质量的5%的复合酶制剂，混合均匀，在40°C温度下，水解时间7小时，然后将水解液沸水浴煮沸灭酶lOmin，冷却至室温，得到混合液;其中，复合酶制剂包括由碱性蛋白酶、胰蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶的原料制成;碱性蛋白酶、胰蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶的质量比为6:3:2:4:3:2;碱性蛋白酶的酶活为11000U/g，胰蛋白酶的酶活为10000U/g，枯草杆菌蛋白酶的酶活为100000U/g，中性蛋白酶为50000U/g，木瓜蛋白酶的酶活为2000000U/g，菠萝蛋白酶的酶活为1000000U/g ；
[0072](3)分离
[0073]调节混合液的pH值为7，使用高速冷冻离心机进行离心，离心转速4200r/min，时间1min，取上清液，将上清液先后通过1KDa、6KDa、3KDa的超滤膜进行超滤处理，得到滤过液；
[0074](4)将滤过液真空冷冻干燥，得到ACE抑制肽粉末。
[0075]将所述的ACE抑制肽粉末进行ACE抑制率的测定，测定得到ACE抑制肽粉末的抑制率为41 %。
[0076]实施例5
[0077]—种酶解豆柏制备ACE抑制肽的方法，包括如下步骤:
[0078](I)豆柏预处理
[0079]将高温豆柏使用粉碎机进行粉碎、过60目筛，所得豆柏粉与水以1:5的质量比混合，搅拌均匀，调节pH值为9，进行超声，超声功率300W，温度40°C，时间15min得到豆柏混合物；
[0080](2)酶解
[0081 ]调节豆柏混合物的pH值为7.2，加入豆柏混合物质量的4%的复合酶制剂，混合均匀，在40°C温度下，水解时间6小时，然后将水解液沸水浴煮沸灭酶lOmin，冷却至室温，得到混合液;其中，复合酶制剂包括由碱性蛋白酶、胰蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶的原料制成;碱性蛋白酶、胰蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶的质量比为6:4:1:3:2:1;碱性蛋白酶的酶活为11000U/g，胰蛋白酶的酶活为10000U/g，枯草杆菌蛋白酶的酶活为100000U/g，中性蛋白酶为50000U/g，木瓜蛋白酶的酶活为2000000U/g，菠萝蛋白酶的酶活为1000000U/g;
[0082](3)分离
[0083]调节混合液的pH值为7，使用高速冷冻离心机进行离心，离心转速4000r/min，时间1min，取上清液，将上清液先后通过1KDa、6KDa、3KDa的超滤膜进行超滤处理，得到滤过液；
[0084](4)将滤过液真空冷冻干燥，得到ACE抑制肽粉末；
[0085](5)所述的ACE抑制肽粉末制成胶囊。
[0086]将所述的ACE抑制肽粉末进行ACE抑制率的测定，测定得到ACE抑制肽粉末的抑制率为39%。
[0087]以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
【主权项】
1.一种酶解豆柏制备ACE抑制肽的方法，其特征在于:包括如下步骤: (1)豆柏预处理 将高温豆柏进行粉碎、过筛，所得豆柏粉与水以质量比为1:(4-6)的配比进行混合，搅拌均匀，调节PH值为8-10，进行超声，得到豆柏混合物； (2)酶解 调节豆柏混合物的PH值为7-9，加入豆柏混合物质量的3%-5%的复合酶制剂，混合均匀，在35-50°C温度下，水解时间5-8小时，然后将水解液沸水浴煮沸灭酶，冷却至室温，得到混合液;其中，复合酶制剂包括由碱性蛋白酶、胰蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶的原料制成;其中，碱性蛋白酶、胰蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶的质量比为(5-7):(3-5):(1-3):(2-4): (2-4): (1_3); (3)分呙 调节混合液的pH值为6.5-7.5，进行离心，取上清液，将上清液进行超滤处理，得到滤过液； (4)将滤过液真空冷冻干燥，得到ACE抑制肽粉末。2.根据权利要求1所述的酶解豆柏制备ACE抑制肽的方法，其特征在于:所述的步骤(I)中过筛步骤的筛子选择60目筛。3.根据权利要求1所述的酶解豆柏制备ACE抑制肽的方法，其特征在于:所述的步骤(I)中超声步骤的条件为:功率150-400W，温度40-50°C，时间10_20min。4.根据权利要求1所述的酶解豆柏制备ACE抑制肽的方法，其特征在于:所述的步骤(I)中粉碎步骤使用粉碎机。5.根据权利要求1所述的酶解豆柏制备ACE抑制肽的方法，其特征在于:所述的步骤(2)中沸水浴步骤的时间为10-20min。6.根据权利要求1所述的酶解豆柏制备ACE抑制肽的方法，其特征在于:所述的步骤(3)中离心步骤使用高速冷冻离心机。7.根据权利要求6所述的酶解豆柏制备ACE抑制肽的方法，其特征在于:所述的步骤(3)中离心步骤的条件为:转速4000-4500r/min，时间10_20min。8.根据权利要求1所述的酶解豆柏制备ACE抑制肽的方法，其特征在于:所述的步骤(3)中超滤步骤将上清液分别通过1KDa、6KDa、3KDa的超滤膜进行超滤处理。9.根据权利要求1-8中任一项所述的酶解豆柏制备ACE抑制肽的方法，其特征在于:所述的步骤(3)中碱性蛋白酶的酶活为11000U/g，胰蛋白酶的酶活为10000U/g，枯草杆菌蛋白酶的酶活为100000U/g，中性蛋白酶为50000U/g，木瓜蛋白酶的酶活为2000000U/g，菠萝蛋白酶的酶活为1000000U/g。
【专利摘要】本发明提供了一种酶解豆粕制备ACE抑制肽的方法，包括如下步骤：(1)将高温豆粕进行粉碎、过筛，所得豆粕粉与水以质量比为1：(4-6)的配比进行混合，调节pH值为8-10，得到豆粕混合物；(2)调节豆粕混合物的pH值为7-9，加入复合酶制剂，混合均匀，在35-50℃温度下，水解时间5-8小时，水解完成后将水解液沸水浴煮沸灭酶，得到混合液；(3)调节混合液的pH值为6.5-7.5，取上清液，通过超滤膜进行超滤处理，得到滤过液；(4)将滤过液真空冷冻干燥，得到ACE抑制肽粉末。本发明所述的酶解豆粕制备ACE抑制肽的方法工艺简单易行，整个过程反应条件温和，使用复配好的复合酶制剂，便于工业化加工操作。
【IPC分类】C12P21/06
【公开号】CN105524966
【申请号】CN201610107494
【发明人】刘皓, 侯婷, 王立晖, 揣玉多, 李达, 刘鹏, 杨庆伟, 吕春晖, 李晓阳, 魏玮, 傅维, 范兆军
【申请人】天津现代职业技术学院
【公开日】2016年4月27日
【申请日】2016年2月26日