积相对标准偏差RSD(% )小于3.I %。
[0022]样品的分析，按照前述方法对样品进行处理衍生，并在与标准品相同色谱条件下进行分析测定。
[0023]合成了新的荧光标记试剂2_( 2-噻吩-2-基-菲[9，10_d]并咪唑_1_基)-对甲苯磺酸乙酯(TSTPE)通过对衍生化和色谱分离条件的优化，建立了灵敏度高、重现性好的测定26 种饱和脂肪酸方法。
【附图说明】
[0024]图1:衍生试剂合成概括图和脂肪酸衍生反应概况图；
[0025]图2:脂肪酸标准品衍生物色谱图；
[0026]图3:脂肪酸标准曲线方程、相关系数和检测限；
[0027]图4:样品中脂肪酸衍生物色谱图；
[0028]图5:银杏果和银杏叶中脂肪酸的含量及回收率。
【具体实施方式】
[0029]—种用于标记羧酸类化合物的荧光衍生试剂的合成，包括以下步骤:
[0030]I )2-噻吩-2-1H-菲[9，10-d]并咪唑的合成，在100mL三口烧瓶中，分别加入16g9，10-菲醌、12mL 2-噻吩甲醛、120g醋酸铵和300mL冰醋酸，在机械搅拌的条件下快速加热至Ij80-90°C，保持温度搅拌反应3h。反应物冷却至室温后倒入烧杯中，用氨水调节pH至7-8，过滤，固体用水洗2次后放暗处干燥。干燥后的固体用乙腈/DMF(5:1，v/v)重结晶三次，得棕色晶体，产率88 %。
[0031]2)2-(2-噻吩-2-基-菲[9，ΙΟ-d]并咪唑-1-基)-乙醇的合成，在500mL烧瓶中，分别加入9g 2-噻吩-2-1H-菲[9，10-d]并咪唑，痕量氢氧化钾和lOOmLDMF，在搅拌的条件下加热到沸腾后，把3.2g的碳酸亚乙酯分三次在Ih内加入到烧瓶中，在继续加热5h。反应完毕冷却到室温后，烧瓶中的混合物倒入到300mL水中，过滤并用水和60 %乙醇依次洗涤固体。固体干燥后用乙腈/DMF(4:1，v/v)重结晶三次，得黄色晶体，产率51%。
[0032]3)2-(2-噻吩-2-基-菲[9，ΙΟ-d]并咪唑-1-基)-对甲苯磺酸乙酯(TSTPE)的合成，在10mL烧瓶中，分别加入3g对甲基苯磺酰氯和20mL吡啶，冷却至0°C。把6g 2-(2-噻吩-2-基-菲[9，I Ο-d ]并咪唑-1 -基)_乙醇溶解在1mL吡啶中滴加到烧瓶中的溶液里，保持溶液在0°C搅拌反应4h，继续在室温下搅拌反应1h后，反应物倒入适量冰水中并搅拌0.5h。过滤，固体用水洗涤，干燥后用乙腈重结晶3次，得浅黄色晶体，产率91%。一种荧光衍生试剂的应用，将荧光衍生试剂用于标记脂肪酸类化合物，浓度为1.0X10—4mol.L—1的混合脂肪酸(〇5-030)标准溶液用乙腈/01^(1:1，v/v)溶解;准确称取0.5gTSTPE，用DMF溶解并定容至10mL，得浓度为1.0 X 10—Vol.L—1的荧光衍生试剂溶液；向盛有1mg无水K2CO3的2mL安培瓶中依次加入400yL DMF，10yL混合脂肪酸标准溶液，220yL荧光衍生试剂溶液，封口后于85°C恒温水浴下振荡反应30min，得到稳定的荧光产物。
[0033]本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。
【主权项】
1.一种用于标记羧酸类化合物的荧光衍生试剂的合成，其特征在于，包括以下步骤: 1)2-噻吩-2-1H-菲[9，10-d]并咪唑的合成，在100mL三口烧瓶中，分别加入16g9,10-菲醌、12mL 2-噻吩甲醛、120g醋酸铵和300mL冰醋酸，在机械搅拌的条件下快速加热到80-90°C，保持温度搅拌反应3h。反应物冷却至室温后倒入烧杯中，用氨水调节pH至7-8，过滤，固体用水洗2次后放暗处干燥。干燥后的固体用乙腈/DMF(5:1，v/v)重结晶三次，得棕色晶体，产率88 %。 2)2-(2-噻吩-2-基-菲[9，10-d]并咪唑-1-基)-乙醇的合成，在500mL烧瓶中，分别加入9g 2-噻吩-2-1H-菲[9，10-d]并咪唑，痕量氢氧化钾和lOOmLDMF，在搅拌的条件下加热到沸腾后，把3.2g的碳酸亚乙酯分三次在Ih内加入到烧瓶中，在继续加热5h。反应完毕冷却到室温后，烧瓶中的混合物倒入到300mL水中，过滤并用水和60 %乙醇依次洗涤固体。固体干燥后用乙腈/DMF(4:1，v/v)重结晶三次，得黄色晶体，产率51 %。 3)2-(2-噻吩-2-基-菲[9，ΙΟ-d]并咪唑-1-基)-对甲苯磺酸乙酯(TSTPE)的合成，在10mL烧瓶中，分别加入3g对甲基苯磺酰氯和20mL吡啶，冷却至0°C。把6g 2-(2-噻吩-2-基-菲[9，ΙΟ-d]并咪唑-1-基)-乙醇溶解在1mL吡啶中滴加到烧瓶中的溶液里，保持溶液在0°C搅拌反应4h，继续在室温下搅拌反应1h后，反应物倒入适量冰水中并搅拌0.5h。过滤，固体用水洗涤，干燥后用乙腈重结晶3次，得浅黄色晶体，产率91%。2.—种用于标记羧酸类化合物的荧光衍生试剂的应用，其特征在于，将荧光衍生试剂用于标记脂肪酸类化合物:浓度为1.0X 10—4H1l.L-1的混合脂肪酸(C5-C30)标准溶液用乙腈/DMF( 1:1, v/v)溶解;准确称取0.5gTSTPE，用DMF溶解并定容至1mL，得浓度为1.0X10—Vol.L-1的荧光衍生试剂溶液；向盛有1mg无水K2CO3的2mL安培瓶中依次加入400yL DMF,10yL混合脂肪酸标准溶液，220yL荧光衍生试剂溶液，封口后于85°C恒温水浴下振荡反应30min，得到稳定的焚光产物。
【专利摘要】本发明涉及衍生试剂技术领域，具体涉及一种荧光衍生试剂的合成用于标记羧酸类化合物的荧光衍生试剂的合成及应用。本发明合成了新型高灵敏的荧光试剂2-(2-噻吩-2-基-菲[9,10-d]并咪唑-1-基)-对甲苯磺酸乙酯(TSTPE)，在DMF溶剂中以碳酸钾为催化剂，85℃时反应30min即可获得稳定的荧光产物，衍生产率高、条件温和、操作简便，衍生溶液不必预处理可直接进样分析。
【IPC分类】C07D409/04, C09K11/06
【公开号】CN105566308
【申请号】CN201610008486
【发明人】董秀丽, 陈向明
【申请人】滨州医学院
【公开日】2016年5月11日
【申请日】2016年1月8日