子萌发测试。在水中，OsFCA-过度表达和FCA-RNAi的转 基因水稻像野生型那样进行萌发（图4A和4C)。但在ΙμΜ ΑΒΑ中，FCA-过度表达的转基因水稻 的萌发率比野生型的萌发率更慢（图4Α)。运种延缓表示，FCA-过度表达在种子萌发中导致 ΑΒΑ的过度敏感。与此相反，2μΜ ΑΒΑ中FCA-RNAi转基因水稻更快的萌发率(图4C)表明，FCA- RNAi 在种子萌发中导致 ΑΒΑ 敏感性过低。在含有 ΑΒΑ 的介质 中上生长后， FCA-过度表达的转 基因水稻的苗比野生型的更小，而FCA-RNAi转基因水稻的苗比野生型的更大（图4Β和4D)。
[0107] 2.4 FCA的过度表达防止水稻收获前的发芽
[0108] 根据拟南芥FCA的开花时间调节功能，研究了转基因水稻的开花时间。在两个生长 季的调查中，FCA-过度表达和FCA-RNAi似乎没有改变抽穗日期（图5C)。但FCA-过度表达的 转基因水稻的穗显示出对收获前发芽(PHS)的耐受（图5A和5B)。与野生型相比，更少的穗中 FCA-过度表达谷粒在高湿度的条件下发芽（图5B)。野生型穗中发芽的芽比FCA-过度表达的 穗中更长(图5A)。图6和图7中更多的数据显示，FCA-过度表达的转基因水稻中防止PHS。
[0109] 2.5水稻FCA应用于解决世界范围内大麦和小麦生产中收获前发芽(P服)的问题
[0110] 谷物的收获前发芽(PHS)是一个世界范围的问题，可W影响大范围的谷物，包括大 麦、玉米、水稻、黑麦和高梁。当谷粒在接近收获季节的潮湿条件期间仍然在穗中，则发生谷 粒萌发。运种发芽损害会降低作物的价值，并导致巨大的农业经济损失(Gubler等人2005; 化ng和化U，2008)。为解决此问题，在P服防止中发挥作用的水稻FCA可被应用至大麦和小麦 的PHS控制中。氨基酸序列比对（图8)显示出大麦、小麦和水稻FCA之间的高度相似性。大麦 FCA还显示了增强ΑΒΑ诱导（图9)和VP1/ABI5诱导的基因表达（图10)的相似功能。运些结果 表明，谷物FCA可W在种子萌发和PHS的调节中起相似作用，并暗示了水稻FCA用于其它谷类 作物Ρ服控制的可能性。
[0111]序列信息
[0112] 沈Q ID Ν0:1 水稻FCA
[0113] (分别用粗体字母(SEQ ID NO: 7)、粗体字母加上虚线(SEQ ID NO: 8) W及粗体字 母加上点划线(SEQ ID N0:9)从N端到C端表示RRMURRM2和WW结构域）
[0114]
[011引 沈Q ID備:2大麦尸〔八
[0116] (分别用粗体字母(SEQ ID NO: 10)、粗体字母加上虚线（SEQ ID NO: 11) W及粗体 字母加上点划线(SEQ ID ^:12)从鹏^1到(：端表示1??11、1??12和醫结构域）
[0117]
[011 引 SEQ ID N0:3小麦FCA
[0119] (分别用粗体字母(SEQ ID NO: 13)、粗体字母加上虚线（SEQ ID NO: 14) W及粗体 字母加上点划线(SEQ ID ^:15)从鹏^1到(：端表示1??11、1??12和醫结构域）
[0120]
[0121] 沈Q ID N0:4,一致的RRM1序列，其对应着沈Q ID N0:1的位置123至202
[0122] KLFXGSVPRTAX邸DVRPL阳X服DVXEVALIXD服TGEQQGCCFVKYATSEEAERAIRALHNQXTXPGAMGPXQVR YAD
[0123] (X表示任意氨基酸残基）。
[0124] 沈Q ID NO: 5,一致的RRM2序列，其对应着沈Q ID NO: 1的位置214至292
[0125] KLFVASLNKQATAKEKEIFAPXGHVEDVYIMKDGMRQSRGCGFVKFSSXEPALAAMXXLSGXYXMRGCEQPUXRF ΑΧ
[0126] (X表示任意氨基酸残基）。
[0127] SEQ ID NO:6,一致的WW结构域序列，其对应着SEQ ID NO: 1的位置604至646
[0128] XXSPAVXLTCNWTEHTSPEGFKYYYNS口RESKWXKP邸YXLY
[0129] (X表示任意氨基酸残基）。
[0130] SEQIDN0:7，水稻FCA(SEQIDN0:1)中的RRM1序列
[0131] KLFIGSVPRTAT 邸 DVRPL阳 E 服 DVVEVALI 邸服 TGEQQGCCFVKYATSEEAERAIRALHNQYTLPGAMGPIQVR YADo
[0132] 沈QIDN0:8，水稻FCA(SEQIDN0:1)中的RRM2序列
[0133] KLFVA化NKQATA邸IEEIFAPYGHV邸VYIM邸GMRQSRGCGFVKFSSREPALAMSALSGNYVMRGCEQPLIIRF ADo
[0134] 沈9 10^:9，水稻尸〔4(569 10^:1)中的醫结构域序列
[0135] ATSPAVPLTCNWTEHTSPEGFKYYYNS口RESKWDKP邸YVLY。
[0136] 沈9 10^:10，大麦尸〔4(569 10^:2)中的3觀1序列
[0137] KLFVGSVPRTANEDDVRPLF 邸服 DVLEVALI 畑服 TGEQQGCCFVKYATSEEAERAIRALHNQCTIPGAMGPVQVR YADo
[013 引 沈QIDN0:11，大麦FCA(SEQIDN0:2)中的RRM2序列
[0139] KLFVASLNKQATAKEIEEIFAPFGHV邸VYIM邸GMRQSRGCGFVKFSSKEPALAAMN化SGTYIMRGCEQPLIVRF AN。
[0140] SEQIDN0:12，大麦FCA(SEQIDN0:2)中的WW结构域序列
[0141] VNSPAVSLTCNWTEHTSPEGFKYYYNS口RESKWEKP邸YVLY。
[0142] SEQIDN0:13，小麦FCA(SEQIDN0:3)中的RRM1序列
[0143] KLFVGSVPRTANEDDVRPLF 邸服 DVLEVALI 畑服 TGEQQGCCFVKYATSEEAERAIRALHNQCTIPGAMGPVQVR YADo
[0144] SEQIDN0:14，小麦FCA(SEQIDN0:3)中的RRM2序列
[0145] KLFVASLNKQATAKEIEEIFAPFGHV邸VYIM邸GMRQSRGCGFVKFSSKEPALAAMN化SGTYIMRGCEQPLIVRF AD。
[0146] SEQIDN0:15，小麦FCA(SEQIDN0:3)中的WW结构域序列
[0147] VNSPAVSLTCNWTEHTSPEGFKYYYNS口RESKWEKP邸YILY。
[0148] 参考文献
[0149] Armshong'F. ,Leung,J. ,Grabov,A.,化earl巧，J. ,Giraudat,J.,和Blatt,M.R. (1995).Sensitivity to abscisic acid of guard-cell K+channels is suppressed by abil-1,a mutant Arabidopsis gene encoding a putative protein phosphatase.Proc Natl Acad Sci U S A 92,9520-9524.
[0150] Baurle, I.,Smith,L.,Baulcombe,D.C.,和Dean,C.(2007).Widespread role for the flowering-time regulators FCA and FPA in RNA-mediated chromatin silencing.Science扣ew York,N.Y 318,109-112.
[0151 ] Casaretto,J.,和Ho ,T.H.(2003). The transcription factors HvABIS and HvVPl are required for the abscisic acid induction of gene expression in barley aleurone cells.Plant CelllS,271-284.
[0152] Chen，P.W.，Lu，C.A.，Yu，T.S.，Tseng，T.H.，Wang，C.S.，和化，S.M.(2002).Rice alpha-amylase transcriptional enhancers direct multiple mode regulation of promoters in transgenic rice.The Journal of biological chemistry 277,13641 - 13649.
[0153] Fang,J.,和Chu,C.(2008).Abscisic acid and the pre-harvest sprouting in cereals.Plant signaling & behavior 3,1046-1048.
[0154] Gampala,S.S.,Finkelstein,R.R.,Sun,S.S.,和Rock,C.0.(2002).ABI5 interacts with abscisic acid signaling effectors in rice protoplasts. The Journal of biological chemistry 277,1689-1694.
[0155] Gomez-Cadenas，A.，Zentella，R.，Walker-Simmons，M.K.，和Ηο,Τ.Η.(2001) .Gibberellin/abscisic acid antagonism in barley aleurone cells:site of action of the protein kinase PKABAl in relation to g