酒石酸双氢可待因的药物组合物及其在生物医药中的应用

酒石酸双氢可待因的药物组合物及其在生物医药中的应用
【专利摘要】本发明公开了酒石酸双氢可待因的药物组合物及其在生物医药中的应用，本发明提供的酒石酸双氢可待因的药物组合物中含有酒石酸双氢可待因和一种结构新颖的天然产物化合物(Ⅰ)，酒石酸双氢可待因、化合物(Ⅰ)单独作用时，对急性痛风性关节炎具有治疗作用；酒石酸双氢可待因和化合物(Ⅰ)联合作用时，对急性痛风性关节炎的治疗效果进一步提高，可以开发成治疗急性痛风性关节炎的药物，与现有技术相比具有突出的实质性特点和显著的进步。
【专利说明】
酒石酸双氨可待因的药物组合物及其在生物医药中的应用
技术领域
[0001] 本发明属于生物医药领域，设及酒石酸双氨可待因的新用途，具体设及酒石酸双 氨可待因的药物组合物及其在生物医药中的应用。
【背景技术】
[0002] 酒石酸双氨可待因药理作用同可待因，临床应用与可待因类似。
[0003] 迄今为止，尚未见酒石酸双氨可待因及其药物组合物与急性痛风性关节炎的相关 性报道。

【发明内容】

[0004] 本发明的目的在于提供一种酒石酸双氨可待因的药物组合物，该药物组合物中含 有酒石酸双氨可待因和一种结构新颖的天然产物，酒石酸双氨可待因和该天然产物可W协 同治疗急性痛风性关节炎。
[0005] 本发明的上述目的是通过下面的技术方案得W实现的：
[0006] -种具有下述结构式的化合物(I)，
[0007]
[0008] -种酒石酸双氨可待因的药物组合物，包括酒石酸双氨可待因、如权利要求1所述 的化合物(I)和药学上可W接受的载体，制备成需要的剂型。
[0009] 进一步地，药学上可W接受的载体包括稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、 崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体或润滑剂。
[0010] 进一步地，所述剂型包括片剂、胶囊剂、口服液、口含剂、颗粒剂、冲剂、丸剂、散剂、 膏剂、丹剂、混悬剂、粉剂、溶液剂、注射剂、栓剂、喷雾剂、滴剂或贴剂。
[0011] 上述化合物（I)的制备方法，包含W下操作步骤：（a)将木棉花粉碎，用65~85%乙 醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味，依次用石油酸、乙酸乙醋和水饱和的正下醇萃 取，分别得到石油酸萃取物、乙酸乙醋萃取物和正下醇萃取物；（b)步骤(a)中正下醇萃取物 用大孔树脂除杂，先用6%乙醇洗脱8个柱体积，再用70%乙醇洗脱8个柱体积，收集70%洗 脱液，减压浓缩得70%乙醇洗脱浓缩物；（C)步骤(b)中70%乙醇洗脱浓缩物用正相硅胶分 离，依次用体积比为50:1、25:1、15:1和5:1的二氯甲烧-甲醇梯度洗脱得到4个组分；（d)步 骤山）中组分4用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为10:1、5:1和2:1的二氯甲烧-甲醇梯 度洗脱得到3个组分；（e)步骤(d)中组分2用十八烷基硅烷键合的反相硅胶分离，用体积百 分浓度为75 %的甲醇水溶液等度洗脱，收集8~14个柱体积洗脱液，洗脱液减压浓缩得到化 合物(I)。
[0012] 进一步地，化合物(I)的制备方法中，所述大孔树脂为AB-8型大孔吸附树脂。
[0013] 上述化合物(I)在制备治疗急性痛风性关节炎的药物中的应用。
[0014] 上述酒石酸双氨可待因的药物组合物在制备治疗急性痛风性关节炎的药物中的 应用。
[001引本发明的优点：
[0016] 本发明提供的酒石酸双氨可待因的药物组合物中含有酒石酸双氨可待因和一种 结构新颖的天然产物，酒石酸双氨可待因、化合物（I)单独作用时，对急性痛风性关节炎具 有治疗作用;酒石酸双氨可待因和化合物（I)联合作用时，对急性痛风性关节炎的治疗效果 进一步提高，可W开发成治疗急性痛风性关节炎的药物。
【具体实施方式】
[0017] 下面结合实施例进一步说明本发明的实质性内容，但并不W此限定本发明保护范 围。
[0018] 实施例1:化合物(I)分离制备及结构确证
[0019] 分离方法：（a)将木棉花(3kg)粉碎，用75%乙醇热回流提取(2化X3次），合并提取 液，浓缩至无醇味（化），依次用石油酸(化X3次）、乙酸乙醋（化X3次）和水饱和的正下醇 (化X3次）萃取，分别得到石油酸萃取物、乙酸乙醋萃取物和正下醇萃取物；（b)步骤(a)中 正下醇萃取物用AB-8型大孔树脂除杂，先用6%乙醇洗脱8个柱体积，再用70%乙醇洗脱8个 柱体积，收集70 %洗脱液，减压浓缩得70 %乙醇洗脱浓缩物；（C)步骤(b)中70 %乙醇洗脱浓 缩物用正相硅胶分离，依次用体积比为50:1(8个柱体积）、25:1(8个柱体积）、15:1(8个柱体 积)和5:1(10个柱体积）的二氯甲烧-甲醇梯度洗脱得到4个组分；（d)步骤(C)中组分4用正 相硅胶进一步分离，依次用体积比为10:1(8个柱体积）、5:1(10个柱体积)和2:1(5个柱体 积)的二氯甲烧-甲醇梯度洗脱得到3个组分；（e)步骤(d)中组分2用十八烷基硅烷键合的反 相硅胶分离，用体积百分浓度为75 %的甲醇水溶液等度洗脱，收集8~14个柱体积洗脱液， 洗脱液减压浓缩得到化合物(I)(纯度大于98 % )。
[0020] 结构确证:册斗51-15显示[1+山+为111八423.2498，结合核磁特征可得分子式为 C2讯3404，不饱和度为11。核磁共振氨谱数据SH(ppm，CD30D，500MHz):H-1 (6.76，br，S)，H-4 (5.96，s)，H-5(5.78，s)，H-9(2.12，s)，H-10(2.67，d，J=11.4Hz)，H-ll(1.99，m)，H-12 (1.72，dd，J=12.7,3.6Hz)，H-12(2.09，dd，J=12.7,8.3Hz)，H-13(6.69，dd，J=12.7， 5.4Hz)，H-14(6.17，d，J=12.7Hz)，H-16a.02，d，J = 6.7Hz)，H-18(2.81，m)，H-18(3.27， dd，J=17.1，1.9Hz)，H-20(2.64，m)，H-21(1.34，m)，H-21(1.67，m)，H-22(1.20，m)，H-22 (1.26，m)，H-23(1.24，m，2H)，H-24(1.24，m，2H)，H-25(1.25，m，2H)，H-26(0.88，t，J= 7.2Hz)，H-27 (1.21，d，J = 7.2Hz);核磁共振碳谱数据Sc(ppm，CD3OD，125MHz): 146.5 (CH，l- C)，169.6(C，3-C)，115.8(CH，4-C)，147.2(C，4a-C)，108.1(CH，5-C)，189.8(C，6-C)，122.4 (C，7-C)，153.5(C，8-C)，112.3(C，8a-C)，16.2(CH3,9-C)，62.1(CH，10-C)，21.1(CH，ll-C)， 33.2(CH2，12-C)，143.5(CH，13-C)，132.3(CH，14-C)，197.5(C，15-C)，19.5(Ol3，16-C)，41.1 (CH2，18-C)，209.3(C，19-C)，46.3(CH，20-C)，32.7(CH2,21-C)，27.6(CH2,22-C)，29.0(C 出， 23-C)，31.3(CH2,24-C)，22.2(CH2,25-C)，14.2(CH3,26-C)，16.6(CH3,27-C)。红外波谱中的 1710cm-i吸收带与UV谱中的224nm吸收带表明该化合物含有α，β-不饱和幾基结构。Uc-NMR、 DEPT和HSQC谱中显示有27个碳信号，包括四个甲基，屯个亚甲基，八个次甲基（五个締控 碳），W及八个季碳(Ξ个幾基碳和五个締控碳），W上功能结构再结合不饱和数表明该化合 物为Ξ环结构。iH-NMR谱结合HSQC谱显示四个甲基质子信号δκ 2.12(3H，s)、1.02(3H，d，J = 6.7Hz)、0.88(3H，t，J = 7.2Hz)、1.21 (3H，d，J = 7.2Hz)，屯组亚甲基质子信号δκ 1.72(IH， dd，J= 12.7,3.6Ηζ)与2.09(lH，dd，J= 12.7，8.3Ηζ)、2.81(lH，m)与3.27(lH，dd，J= 17.1， 1.9Hz)、1.34(lH，m)与1.67(lH，m)、1.20(lH，m)与1.26(lH，m)、1.24(2H，m)、1.24(2H，m)、 I. 25(2H，m)，五个締控次甲基质子信号δH6.76(lH，br，s)、5.96αH，s)、5.78αH，s)、6.69 (lH，dd，J= 12.7，5.4Hz)、6.17(lH，d，J= 12.7Hz)，S个次甲基质子信号δκ 2.67(lH，d，J = II. 4Hz)、1.99(lH，m)2.64(lH，m)</H-iH COSY谱中存在H-lO/H-11/此-12/Η-13/Η-14、曲- 27/护20/此-21/此-22/此-23/此-24/此-25/曲-26相关信号，结合HMBC谱中显示的H-1与C- 4a、C-8a 和 C-8，H-4 与 C-3、C-4a 和 C-8a，H-5 与 C-4、C-4a 和 C-6，H-10 与 03、011、(：-15和(：- 16，出-12与011、(：-13、(：-14和(：-16，护14与(：-12、(：-13和(：-15，出-18与(：-8和(：-19，护20与(：- 19相关信号，通过上述NMR谱中的相关信息可W构建该化合物的连接方式，并且根据上述波 谱数据确认该化合为Cohaerin衍生物。综合氨谱、碳谱、HMB幻普和R0ESY谱，W及文献关于相 关类型核磁数据，可基本确定该化合物如下所示，立体构型进一步通过ECD试验确定，理论 值与实验值基本一致。该化合物化学式及碳原子编号如下：
[0021]
[0022] 实施例2:药理作用
[0023] 本实例使用尿酸钢制备急性痛风性关节炎大鼠模型，观察药物治疗前后受试关节 周径、关节腔组织中前列腺素 E2(PGE)、肿瘤坏死因子-a(TNF-a)含量及关节腔积液白细胞 数。
[0024] 1、材料与方法
[0025] 1.1 动物
[00%] SD大鼠，雄性，清洁级，体重200~250g，由广东医学院实验动物中屯、提供（。在实验 室正常饲养3d后供试。
[0027] 1.2试剂与样品
[002引酒石酸双氨可待因购自中国药品生物制品检定所。化合物（I)自制，制备方法见实 施例1。尿酸钢(Sigma公司提供），前列腺素 E2(PGE2)放射免疫试剂盒(北京东亚免疫技术研 究所提供），肿瘤坏死因子-a(TNF-a)试剂盒(军事医学科学院研究所提供）。
[0029] 1.3大鼠分组及模型制备
[0030] 大鼠随机分为5组，每组12只，分别为正常对照组（不造模）、模型对照组和酒石酸 双氨可待因组(80mg · kg-i)、化合物（I)组(80mg · kg-i)、酒石酸双氨可待因与化合物（I)组 合物组【40mg · kg-i酒石酸双氨可待因+40mg · kg-i化合物（I)】。造模方法：用6号注射针在 受试大鼠右侧踩关节背侧W45°角插入腔骨肌腫内侧，将10%尿酸钢溶液按0.2mL/只注入 踩关节腔内。
[0031] 造模第二天，给药组按照上述剂量灌胃给药，每日一次，连续3天;正常对照组和模 型对照组灌胃等量的生理盐水。
[0032] 1.4大鼠关节肿胀度测定实验
[0033] 各组大鼠在造模前、造模后化(给药前）及最后一次给药后3d，分别在受试踩关节 相同部位用无弹性软尺测量其周长，观察造模前及治疗前后大鼠踩关节周长的变化。
[0034] 1.5关节腔中PGE2、TNF-a、白细胞的测定实验
[0035] 各组大鼠在最后一次给药治疗72h后断头处死，打开受试关节腔取关节积液，涂 片，进行白细胞计数；取下关节腔周围软组织，匀浆后采用放射免疫测定法测定组织中 PGE2、TNF-a，按试剂盒说明书操作。
[0036] 1.6统计学方法
[0037] 应用SPSS 18.0版统计软件进行单因素方差分析和t检验，WP<0.05为差异有统 计意义。
[0038] 2、实验结果
[0039] 2.1对痛风性关节炎大鼠踩关节肿胀的影响
[0040] 与正常对照组比较，模型对照组大鼠踩关节肿胀度明显增加(P<0.01)。与模型对 照组比较，酒石酸双氨可待因组、化合物（I)组大鼠关节肿胀程度明显减小(P<〇.05)，酒石 酸双氨可待因与化合物(I)组合物组关节肿胀程度减小(P0.01)。结果见表1。
[0041] 2.2对痛风性关节炎大鼠关节腔组织中PGE2、TNF-a水平及白细胞计数的影响
[0042] 与正常对照组比，模型组大鼠关节腔组织中PGE2、TNF-a含量显著升高(P<0.01); 与模型对照组比较，酒石酸双氨可待因组、化合物（I)组大鼠关节腔组织中PGE2、TNF-a含量 降低(P<〇.05);与模型对照组比较，酒石酸双氨可待因与化合物（I)组合物组关节腔组织 中PGE2、TNF-a含量显著降低(P<0.01)。与正常对照组相比，模型对照组大鼠关节腔积液中 白细胞数量明显升高(P<〇.01);与模型对照组比，酒石酸双氨可待因组、化合物（I)组大鼠 关节腔积液中白细胞数量降低(P<〇.05)，酒石酸双氨可待因与化合物（I)组合物组显著降 低(P<0.01)。结果见表2。
[0043] 表1各组关节肿胀度变化的比较(mm)
[0044]

[004引痛风为遗传性和(或)获得性引起的尿酸排泄减少和(或)嚷岭代谢障碍，急性痛风 性关节炎的根本病因是高尿酸血症及其导致的关节局部尿酸钢晶体的析出。应用尿酸钢局 部关节注射造成痛风性关节炎模型被认为是经典的痛风性关节炎的造模方法，可用于评价 抗痛风性关节炎药物的疗效。
[0049] 尿酸钢沉积到关节腔周围时，诱使单核-巨隧细胞吞隧晶体、肥大细胞、多形核嗜 中性粒细胞聚集到其周围，并释放出致炎、致痛物质，如组胺、前列腺素(PG)、白细胞Ξ締 B4、TNF-a等炎症递质，产生很强的炎症效应及致痛效应。PG作为第Ξ信使是炎症反应的重 要递质，炎症的发生发展与局部PG含量有密切关系。一般认为，在关节炎的发病过程中， PGE2的作用最为强烈。TNF-a作为炎症趋化因子和激活因子在痛风性关节炎的发生、发展过 程中亦起重要作用。分析受试关节腔组织中PGE2、TNF-a含量及关节积液中白细胞数量有利 于指导痛风的临床诊断和治疗。
[0050] 上述结果表明，酒石酸双氨可待因、化合物（I)单独作用时，对急性痛风性关节炎 具有治疗作用;酒石酸双氨可待因和化合物（I)联合作用时，对急性痛风性关节炎的治疗效 果进一步提高，可W开发成治疗急性痛风性关节炎的药物。
[0051] 上述实施例的作用在于说明本发明的实质性内容，但并不W此限定本发明的保护 范围。本领域的普通技术人员应当理解，可W对本发明的技术方案进行修改或者等同替换， 而不脱离本发明技术方案的实质和保护范围。
【主权项】
1. 一种具有下述结构式的化合物（I)，2. -种酒石酸双氨可待因的药物组合物，其特征在于:包括酒石酸双氨可待因、如权利 要求1所述的化合物(I)和药学上可W接受的载体，制备成需要的剂型。3. 根据权利要求2所述的酒石酸双氨可待因的药物组合物，其特征在于:药学上可W接 受的载体包括稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、 吸附载体或润滑剂。4. 根据权利要求2所述的酒石酸双氨可待因的药物组合物，其特征在于:所述剂型包括 片剂、胶囊剂、口服液、口含剂、颗粒剂、冲剂、丸剂、散剂、膏剂、丹剂、混悬剂、粉剂、溶液剂、 注射剂、栓剂、喷雾剂、滴剂或贴剂。5. 权利要求1所述的化合物（I)的制备方法，其特征在于，包含W下操作步骤：（a)将木 棉花粉碎，用65~85%乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味，依次用石油酸、乙酸乙 醋和水饱和的正下醇萃取，分别得到石油酸萃取物、乙酸乙醋萃取物和正下醇萃取物；（b) 步骤(a)中正下醇萃取物用大孔树脂除杂，先用6%乙醇洗脱8个柱体积，再用70%乙醇洗脱 8个柱体积，收集70%洗脱液，减压浓缩得70%乙醇洗脱浓缩物；（C)步骤(b)中70 %乙醇洗 脱浓缩物用正相硅胶分离，依次用体积比为50:1、25:1、15:1和5:1的二氯甲烧-甲醇梯度洗 脱得到4个组分；（d)步骤(C)中组分4用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为10:1、5:1和 2:1的二氯甲烧-甲醇梯度洗脱得到3个组分；（e)步骤(d)中组分2用十八烷基硅烷键合的反 相硅胶分离，用体积百分浓度为75 %的甲醇水溶液等度洗脱，收集8~14个柱体积洗脱液， 洗脱液减压浓缩得到化合物(I)。6. 根据权利要求5所述的化合物（I)的制备方法，其特征在于:所述大孔树脂为AB-8型 大孔吸附树脂。7. 权利要求1所述的化合物（I)在制备治疗急性痛风性关节炎的药物中的应用。8. 权利要求2~4任一所述的酒石酸双氨可待因的药物组合物在制备治疗急性痛风性 关节炎的药物中的应用。
【文档编号】C07D311/76GK106083802SQ201610489322
【公开日】2016年11月9日
【申请日】2016年6月24日
【发明人】周飞燕
【申请人】周飞燕