一种复式微囊及其制备方法

专利名称：一种复式微囊及其制备方法
技术领域：
本发明涉及医药技术领域，确切地说它是一种复式微囊及其制备方法。该发明的复式微囊可用于包裹化学药物、中药、生物制品药物、细胞、组织块等，能控制药物口服或注射后在体内释药部位药物释放的速度，而且可用于细胞、组织的体内外培养，酶的固定，生物药物的血管内移植。
背景技术：
微囊剂是近20多年兴起的技术，在国外已得到了广泛的应用。除了香料、化妆品、纺织等产业，微囊剂也在药品、保健品上被广泛使用，比如用于加工口腔速崩剂和易氧化、易分解、口味不佳的药物。
微囊系利用天然的或合成的高分子材料(统称为囊材)作为囊膜壁壳，将固态或液态药物包裹成为药库型微型胶囊。微囊的优点包括可制成多种药物制剂；液态药物可改制成固体剂型；延缓药物释放，制备缓释长效制剂；掩盖药物的不良嗅味，可易于吞服；减少复方药物的配伍变化；改善口服药物消化道副反应；提高药物的稳定性，减少复方制剂的配伍禁忌；使药物在靶部位起作用；半透性微囊对酶制剂还有特殊的效应，如门冬酰胺酶对人体具免疫反应，如将其制成不溶化半透性微囊，可使血液能通过半透膜与门冬酰胺酶作用以治疗白血病；微囊还可改善某些药物的物理特性，如可压性与流动性。应用最多的微囊优点是通过微囊化方法形成缓控释制剂和靶向制剂；一些微囊还可以将活细胞或者生物活性物质包裹在囊内。微囊的囊材要无毒无刺激、化学性质稳定、具有适宜的释药性、有一定的强度、有合格的粘度等特性，常用的囊材主要有天然高分子囊材，如明胶、阿拉伯胶、琼脂、海藻酸及其盐、壳聚糖等；半合成高分子囊材，如羧甲基纤维素钠、醋酸纤维素碳酸酯、乙基纤维素、甲基纤维素、羟丙基纤维素；合成高分子囊材包括生物降解的聚碳酯、聚氨基酸、聚乳糖、丙交酯乙交酯共聚物、聚乳酸-聚乙二醇嵌段共聚物，非生物降解的聚酰胺、硅橡胶等。微囊的外形可取决于囊心物质的性质和囊材的凝聚方式及操作熟练程度，囊形可呈球状实体或呈平滑的球状膜壳形、串珠形以及表面平滑、折叠的不规则结构等。各种形状微囊的直径，常用者为几微米 几十微米。制成的微囊可供散剂、胶囊剂、颗粒剂、冲剂、片剂、丸剂、注射剂、植入剂及软膏剂等各种剂型制备的基础原料。将酶、蛋白质和激素等生物活性物质包封在选择性透过膜中，形成球状微胶囊，称之为“生物微胶囊”。通过微胶囊膜的选择透过作用，使囊外大于某一分子量的物质不能扩散进入，而生物环境中的营养成分和囊内生物活性物质或细胞分泌的小分子产物可以自由出入微胶囊，从而达到免疫隔离目的。微囊可扩展油类原料在工业和日常生活中的应用。如胡萝卜素、维生素Α、维生素Ε、鱼油、月见草油、葡萄子油、苏子油等油类物质利用常规工艺难以加工成固体剂，而利用微囊剂可将油类加工成固体剂，从而进一步加工成片剂、胶囊剂甚至粉状物等固体产品O
另外，利用微囊剂技术还可将其它各种保健油类原料加工成无味粉状物并加入到牛奶、咖啡、等食品里，从而大大扩展了鱼油等油类保健品的应用范围。随着材料工艺学日新月异的发展，一些价廉物美的新材料被陆续开发成为适合加工成微囊外壳的新原料，微囊剂的生产成本开始大幅下降。按其性质的不同，目前国外已开发使用的囊壳材料主要有以下6类I、多糖/水凝胶类物质，如淀粉、褐藻胶、琼脂、果胶、卡拉胶(角叉菜胶)及其它胶类。2、蛋白质及白蛋白，如明胶、酪胺、玉米蛋白、大豆蛋白与白蛋白等。3、脂肪与脂肪酸类，如甘油单酯、甘油双酯和甘油三酯、月桂酸、辛酸、棕榈酸、硬脂酸及其盐。
4、纤维素酯类，如甲基纤维素、乙基纤维素、CMC、HPMC等等。5、亲水性与亲油性蜡，如虫胶、蜂蜡、巴西棕榈蜡和大分子聚乙二醇等。6、蔗糖衍生物，如蔗糖脂肪酸酯等，这类物质具有良好的水溶性以及很好的成膜坚牢度，故非常适合鱼油、月见草油和VE、VA及其它油状原料加工成微囊剂。制备微囊的过程称为微囊化，常用的微囊化方法有物理化学方法、物理机械方法、化学法。传统的微囊加工技术采用水法加工，即利用双喷嘴将喷出液滴状微囊经自由落体落入事先装有冷却水的盛盘里。柔软的热微囊在冷却水中迅速冷却，由于水的张力作用而自动成为圆珠状囊体，最后经干燥即成为成品。这一技术目前在世界各地的不少企业仍在使用；因其工艺简单，无需复杂的干燥设备，故非常适合中小型制药公司采用。由于微囊剂的应用范围逐渐扩大，所以对其技术的开发也随之不断加深，比如将微囊剂加工成直径仅I微米左右的超微微囊，可用于进一步开发成口腔快溶片、速崩片或肠溶片等全新剂型，这为新药的顺利开发奠定了基础。微囊剂加工技术在药品、保健品生产或其它各行各业中有着巨大发展空间，某些原料在加工成微囊剂后可大大提高其实用性。在可以预见的将来，微囊剂将成为国际医药市场上最常见的产品之一，其市场前景极其光明。国内对微囊的研究，有用桃胶、CAP、CMC等多聚物与明胶等作为囊材，用复凝聚法包囊及用明胶或CAP单凝聚微囊工艺也取得一定的进展，并开展了水溶性药物如硫酸软骨素，以及聚乙二醇6000为囊材进行包囊的研究，初步探索了驱绦虫药鹤草酚微囊的体外释放试验；在中药制剂方面也采用了复凝聚法，将牡荆油制成了牡荆油微囊片。另外有的单位对黄荆叶油、线叶菊油等也进行了研究；有的单位对大蒜中所含O. 2%挥发油进行了研究，油中大蒜辣素与大蒜新素在光线、温度影响下易氧化及对消化道粘膜有刺激性，经将大蒜挥发油制成大蒜素微囊后，不但使液态药物变成了固态剂型，并提高了稳定性，掩盖了强烈的刺激嗅辣味，并经临床观察155例急慢性菌痢，有效率达94. 2%。自从1980年加拿大多伦多大学生理研究室Lim和孙绵方(A. M. Sun)教授发明了海藻酸钠-聚赖氨酸-海藻酸钠(alginate-polylysine_alginate,APA)微囊以来,生物活性细胞或组织的APA微囊化移植已经成为了临床上进行生物细胞或组织移植治疗体内相关脏器或组织功能缺失病症的最有前景的实验方法。但微囊的大小、强度、通透性及移植细胞的活性直接关系到细胞或组织在体内的移植部位、存活的时间、副作用等一系列根本性问题。如果微囊太小，则细胞可能包裹不佳，微囊的缺陷率也随着微囊囊形变小而增加，移植部位选择困难，小微囊强度不够，微囊破裂造成细胞外泄，必然会引起排斥反应；大微囊的囊形缺陷率较小，而且强度较高，但营养物质的交换和细胞的生长困难，体积较大也会导致易引起机体的排斥反应；大微囊液化囊心较差，也易导致通透性不好，直接影响微囊的免疫隔离和对内源性物质的应答效果。壳聚糖是一种多功能材料，无毒、化学稳定性好，制备海藻酸钙-壳聚糖微胶囊通常是将制得的海藻酸钙芯粒子悬浮在配制好的壳聚糖钙盐胶体溶液中形成膜，制备条件温和，不需要有机溶剂，适合于有生物活性的蛋白质类药物，在化工、食品科学等也有很好的应用。但其囊膜的通透性和机械强度依然是困扰其广泛应用的两大因素。文献报道Ca2+和Ba2+也均可与壳聚糖成膜，用来制备微囊。本发明结合了小微囊和大微囊的优势，制备了一种复式微囊，复式微囊外囊直径可以为I 5mm,而小囊直径可为50 800 μ m,两种微囊材料均为微囊制备的常用材料,夕卜囊的优点是强度高、完整性好、隔离效果好，而内囊的优点是死体积小、比表面积大、药物包封率高，但内囊因为体积较小而存在破损率大，免疫隔离效果差，强度稍差等缺点，可被外 囊弥补；外囊也可以延缓内囊中药物的释放，避免内囊中药物的快速释放，增加了内囊的免疫隔离效果，也可以使药物的包封率、载药量、稳定性进一步提高，包裹细胞或生物组织的复囊还可进一步减少一些小分子物质对内囊中细胞的破坏。以此制备的复式微囊，具有如下优点1、可以实现内囊中较小的死体积和较大的比较面积，使组织细胞在内囊中存活时，保持较好的活性；2、外囊体积增大，使其在体内外应用时途径增加，可制成口服缓控释制剂；3、一旦外囊破裂或表面有变形，导致通透性增力口，免疫系统也不会马上对内囊中的移植细胞产生排异反应；4、由于外囊的阻隔，因此外囊即使皱缩内囊也不会流出到大囊外，可以防止内囊中物质的外流；5、包裹细胞或生物组织进行体外培养或体内移植的复囊，由于外囊和内囊的阻隔，培养液中和体内的营养物质能够进入内囊中营养囊内细胞，而宿主的免疫隔离系统则更难进入内囊中，使免疫隔离效果更好，内囊中的细胞核组织分泌的活性物质可以产生治疗效果；6、外囊和内囊中可分别包裹化学药物、中药、生物细胞或组织，抗凝剂、生长因子等物质，可帮助移植物存活和增加防凝抗凝效果。而单囊药物释放速度较快，小微囊的缺陷率也较大。对于复式乳剂的制备，国内已有稳定的复乳剂(200880021575. 4)，该专利对复乳的制备进行了研究；其余(I)由复乳法制造缓释性微球的方法(00128884.9)，(2)复乳法制备磁性高分子微球(200310113439. 7)等，也均是用复乳的制备方法，来制备相关的缓控释微球；其他相关微囊的专利也有(I)利用海藻酸钠-壳聚糖-海藻酸钠微囊包埋细胞或组织的方法(02116987. X)，(2)注射用莪术油毫微囊冻干粉针及其制备工艺(01131732. 9)等多项专利申请，但均为制备成单囊，制备工艺简单，但药物的包封率、稳定性、释放等依然变动较大，处方、工艺复杂，甚至无缓控释效果。本复式微囊制备的给药系统与单囊制剂及复乳制剂相比，具有药物选择范围大、释放更可控、处方简单、稳定性好、制备工艺简单、重复率高、成本低、效率高等优点，本复式微囊系统在人工胃液中不溶，药物释放较慢，在人工肠液中药物缓慢溶解，在水中药物释放也较慢，使药物能在胃肠道和机体其他部位内缓慢释放
发明内容
本发明的目的是为了提供一种制备简单、药物选择范围广，并能使药物缓慢释放的复式微囊给药系统及其制备方法。与单囊相比，本发明在药物缓控释和体内外应用上优势明显，其免疫隔离效果得到了大大提高。本发明的目的是这样来实现的本发明的一种复式微囊及其制备方法，其复式微囊由1-100个内囊再外包I层外囊构成，内囊包裹化学药物、中药、生物细胞和组织样品中的一种或几种组合，外囊为包裹内囊、化学药物、中药、生物细胞和组织样品中的一种或几种组合。所述的一种复式微囊及其制备方法，其在内囊完成的基础上，进一步混悬至外囊成囊溶液中，进行二次成囊，在几个内囊外形成一层外囊，添加冻干保护剂进行冷冻干燥或添加细胞培养液进行体外培养。所述的一种复式微囊及其制备方法，其内囊的成囊材料为以海藻酸钠、氯化钙、 氯化钡、壳聚糖、聚左赖氨酸等为成囊材料，海藻酸钠为符合美国和中国药典的可食用和药用辅料，用作纺织品的上浆剂和印花浆，同时作为增稠剂、稳定剂、乳化剂大量应用于食品工业中；我国规定可用于各类食品，按生产需要适量使用。具有使胆固醇排出体外，抑制Pb、Cd、Sr被人体吸收以及保护胃肠道、整肠、减肥、降血糖的作用。在药剂上主要用作助悬剂、稳定剂、乳化剂、增稠剂、黏稠剂、分散剂、胶凝剂、被膜剂、悬浮剂、微囊的囊材等；内囊的制备为先用蒸馏水配制浓度为O. 5% -3. O %的海藻酸钠溶液，将药物或生物组织与其混匀，通过高压静电发生器和微泵，调整电压、平头针和针头离液面高度，滴至带磁力搅拌的25-200mmol/l的氯化钙、氯化钡两种溶液中的一种，得到粒径大小为50-800 μ m的胶珠，反应IOmin后除去上清液，用生理盐水洗涤2次；将胶珠投至O. 01% -O. 5%聚左赖氨酸溶液、O. 05% -I. O %的壳聚糖两溶液中之一者继续搅拌5min，除去上清并用生理盐水洗涤2次，然后再投入至O. 05% -O. 5%的海藻酸钠溶液中搅拌5min，除去上清液并用生理盐水洗涤2次后得到内囊。所述的一种复式微囊及其制备方法，其内囊的另一种制备方法为将上述经过O. 05% -O. 5%的海藻酸钠包裹和生理盐水洗涤后的内囊，再投至20-100mM的柠檬酸钠溶液中搅拌，3 lOmin，用生理盐水洗涤2次，来得到内囊。所述的一种复式微囊及其制备方法，其外囊的成囊材料为以海藻酸钠、氯化钙、氯化钡、壳聚糖、聚左赖氨酸等为成囊材料；外囊的制备为先用蒸馏水将海藻酸钠配成浓度为O. 5 % -3. O %的溶液，将内囊、化学药物、中药、生物细胞和组织样品中的一种或几种组合与该海藻酸钠溶液混匀；采用滴管，将混有内囊的海藻酸钠溶液滴至带磁力搅拌的25-200mmol/l的氯化I丐、氯化钡两种溶液中的一种，反应IOmin后除去上清液,得到粒径大小为l-5imm的胶珠，用生理盐水洗涤2次；将胶珠投至O. 01% -O. 5%聚左赖氨酸溶液、O. 05% -I. O %的壳聚糖两溶液中之一者继续搅拌5min，除去上清液并用生理盐水洗涤2次；然后再投入至O. 05% -O. 5%的海藻酸钠溶液中搅拌5min，除去上清液并用生理盐水洗涤2次后得到复式微囊；将复式微囊置于冻干保护剂乳糖、氯化钠，甘露醇溶液中的一种或几种组合，进行冷冻干燥；或添加细胞培养溶液，在37±0. 5°C培养箱中培养。所述的一种复式微囊及其制备方法，其外囊的另一种制备方法为按上述投入至
O.05% -O. 5%的海藻酸钠溶液并用生理盐水洗涤后得到复式微囊，再投至20-100mM的柠檬酸钠溶液中搅拌3 20min，用生理盐水洗涤2次，得到复式微囊；将复式微囊置于冻干保护剂乳糖、氯化钠，甘露醇溶液中的一种或几种组合，进行冷冻干燥；或添加细胞培养溶液，在37±0. 5°C培养箱中培养。


图I是本发明的复式微囊示意2是根据实施例I制备的吲哚美辛复式微囊的药物释放曲线3是根据实施例3制备的吲哚美辛复式微囊的药物释放曲线图
具体实施例方式见图1，该复式微囊由外囊I和内囊2组成，该复式微囊可用于包裹化学药物、中药、生物细胞和组织等，能控制药物释放速率，提高药物的稳定性，提高生物细胞和组织的免疫隔离效果。 实施例I :卩引噪美羊-ACA-Ca-Ca复式微囊的制备(I)内囊的制备A、将吲哚美辛过100目筛，与1-1. 5mll. 8%的海藻酸钠溶液混匀后吸至20ml注射器。B、用高压静电法，调整电压、采用6#平头针头和针头离液面高度2cm，将含药的海藻酸钠液滴入带磁力搅拌的80mlIOOmM的CaCl2溶液中，形成粒径500-700 μ m的不溶性海藻酸钙微球，IOmin后除去上清液，用生理盐水洗涤2次，得到胶珠。C、将胶珠投至O. 3%壳聚糖溶液中继续搅拌5min，除去上清液并用生理盐水洗涤2次。D、将包裹壳聚糖后的胶珠投入至O. 15%的海藻酸钠溶液中搅拌5min，除去上清液并用生理盐水洗涤2次，尽量去除生理盐水，即得含药内囊。(2)外囊的制备A、将上述制备得到的含药内囊再次与2倍体积的I. 8%的海藻酸钠均匀混合。B、采用一次性塑料滴管，将混有吲哚美辛内囊的海藻酸钠溶液滴加至带磁力搅拌的IOOmM CaCl2溶液中，反应lOmin，形成含APA微囊的海藻酸钙微珠；用生理盐水洗涤2次。C、尽量弃去上清液，将微囊加至O. 3%壳聚糖溶液IOml中，反应5min，用生理盐水洗涤2次，弃去上清液。D、将微胶珠混悬于O. 15%的海藻酸钠溶液15ml中，反应5min，用生理盐水洗2次,除去多余的海藻酸钠,弃去上清液,得到含吲哚美辛的复式ACA-Ca-Ca微囊。(3)药物释放试验取含吲哚美辛的复囊10颗，投至药物溶出仪的转篮中。按照《中华人民共和国药典》2010年版二部释放度测定方法第一法，以250ml新沸防冷的蒸馏水，加I %的十二烷基硫酸钠为释放介质，转速IOOr介质温度(37. 04±0. 5) °C,分别于不同时间取样5mL,同时补充等体积同温释放介质，过O. 45 μ m微孔滤膜过滤后于265nm处测吸光度，以释放介质为空白，计算药物的累积释放百分率，并画出药物释放曲线。药物的释放曲线见图2，其中I为吲哚美辛-ACA-Ca-Ca复式微囊的药物释放，2为吲哚美辛-ACA-Ca单囊的药物释放，由图可见，药物包裹至ACA-Ca-Ca复式微囊后，释放时间较包裹至单囊中的吲哚美辛有延长。实施例2:大鼠膜岛-APA-Ca-Ca复式微囊的制备(I)内囊的制备A、将纯化后 的大鼠胰岛与1-1. 5mll. 8%的海藻酸钠溶液混匀后吸至20ml注射器。B、用高压静电法(或称锐孔-凝固浴法)，调整电压、采用9#平头针和针头离液面高度2cm，将含胰岛的海藻酸钠液滴入带磁力搅拌的80mlIOOmM的CaCl2溶液中，形成粒径400-600 μ m的不溶性海藻酸钙微球，IOmin后除去上清液，用生理盐水洗涤2次。C、将胶珠投入至O. 05%聚左赖氨酸溶液(PLL)中继续搅拌5min，除去上清液并用生理盐水洗涤2次。D、将包裹PLL后的胶珠投至O. 15%的海藻酸钠溶液中搅拌5min，除去上清液并用生理盐水洗涤2次。尽量除尽生理盐水，即得含大鼠胰岛的APA-Ca内囊。(2)外囊的制备A、l. 8%的海藻酸钠经O. 45μπι,0. 22 μ m的微孔滤膜过滤，将上述制备得到的内囊与2倍体积的I. 8%的海藻酸钠均匀混合。B、采用玻璃滴管，将混有大鼠胰岛-APA微囊的海藻酸钠溶液滴加至IOOmM CaCl2溶液中，用磁力搅拌器搅拌分散)，反应lOmin，形成含APA内囊的海藻酸钙微珠；用生理盐水洗漆2次。C、尽量弃去上清液，将微囊加至O. 05%聚左赖氨酸溶液IOml中，反应5min。用生理盐水洗涤2次，弃去上清液。D、将微胶珠混悬于O. 15%的海藻酸钠溶液15ml中，反应5min，用生理盐水洗2次,除去多余的海藻酸钠,弃去上清液。E、将微球混悬于55mM的枸橼酸溶液中，反应lOmin，液化囊心，用生理盐水洗涤2次，沉淀后弃去上清液，除去过量枸橼酸和液态海藻酸钠，得到含大鼠胰岛-APA-Ca内囊的复式APA-Ca-Ca微囊。F、将复式微囊置于RPMI1640溶液中，在37±0· 5°C培养过夜。(3)糖刺激胰岛素释放实验将复式微囊化的胰岛按50IEQ的量置24孔培养板中37°C培养箱培养24h，弃去培养液后，加满低葡萄糖(2. 22mmol/L)的RPMI1640培养液，37°C静止培养Ih后，吸尽培养液，每管lml，-2(TC保存；再加满高葡萄糖(22. 2mmol/L) RPMI1640培养液，37°C静止培养Ih后吸尽培养液，每管1ml，-20°C保存，用大鼠胰岛素酶免试剂盒测定胰岛素浓度，同时按以下公式计算刺激指数(SI)
高糖环境下胰岛素的分泌浓度 刺激 曰数(奶=丽. ■下病通的芬泌浓度-结果胰岛在低糖下的胰岛素分泌浓度为15. 51±2. 68mIU/L,高糖下胰岛素分泌浓度为27. 85±3. 64mIU/L，高糖刺激下胰岛素释放量为低糖刺激的I. 8倍，SI值为
I.80±0. 49。说明大鼠胰岛复式微囊化后依然有活性，并能在葡萄糖的刺激下有胰岛素的释放。实施例3 Π引噪美羊-ACA-Ba-Ba复式微囊的制备I、内囊的制备A、将吲哚美辛过100目筛后与1-1. 5mll. 8%的海藻酸钠溶液混匀后吸至20ml注射器。B、用高压静电法，调整电压、采用4#平头针头和针头离液面高度1cm，将海藻酸钠液滴入带磁力搅拌的80ml25mM的BaCl2溶液中，形成不溶性海藻酸钙微球，IOmin后除去上清液，用生理盐水洗涤2次，得到胶珠。 C、将胶珠投至O. 5%壳聚糖溶液中继续搅拌8min，除去上清液并用生理盐水洗涤2次。D、将包裹壳聚糖后的胶珠投入至O. 15%的海藻酸钠溶液中搅拌5min，除去上清液并用生理盐水洗涤2次，尽量除尽生理盐水，即得吲哚美辛-ACA-Ba内囊。2、外囊的制备A、将上述制备得到的内囊与2倍体积的I. 8%的海藻酸钠均匀混合。B、采用一次性塑料滴管，将混有吲哚美辛-ACA-Ba微囊的海藻酸钠溶液滴加至IOOmMBaCl2溶液中，用磁力搅拌器搅拌分散，反应lOmin，形成含ACA-Ba-Ba的海藻酸钡复式微珠；用生理盐水洗涤2次。C、尽量弃去上清液，将微囊加至O. 8%壳聚糖溶液IOml中，反应5min。用生理盐水洗涤2次，弃去上清液。D、将微胶珠混悬于O. 15%的海藻酸钠溶液15ml中，反应5min，用生理盐水洗2
次,弃去上清液。E、将复式微球混悬于55mM的枸橼酸溶液中，反应lOmin，液化囊心，用生理盐水洗漆2次，沉淀后弃去上清液，得到Π引哚美辛-ACA-Ba-Ba复式微囊。F、在微囊加入适量甘露醇溶液，置于_20°C冰箱中冻结实，再进行冷冻干燥。取出冻干的含吲哚美辛的复囊，投至药物溶出仪的转篮中。按照《中华人民共和国药典》2010年版二部释放度测定方法第一法，以250ml新沸防冷的蒸馏水，加1%的十二烧基硫酸钠为释放介质，转速IOOr mirT1,介质温度(37. 0±0. 5) °C,分别于不同时间取样5mL,同时补充等体积同温释放介质，过O. 45 4!11微孔滤膜过滤后于26511111处测吸光度，以释放介质为空白，计算药物的累积释放百分率，并画出药物释放曲线图。药物的释放曲线见图3，其中I为吲哚美辛-ACA-Ba单囊的药物释放，2为吲哚美辛-ACA-Ba-Ba复式微囊的药物释放，由图3可见，药物包裹至ACA-Ba-Ba复式微囊后，释放时间较包裹至单囊中的吲哚美辛大大延长。
权利要求
1.一种复式微囊，由内囊和外囊组成，其特征在于由1-100个内囊再外包I层外囊构成，内囊包裹化学药物、中药、生物细胞和组织样品中的一种或几种组合，外囊为包裹内囊、化学药物、中药、生物细胞和组织样品中的一种或几种组合。
2.根据权利要求I所述的一种复式微囊及其制备方法，其特征在于内囊以海藻酸钠、氯化钙、氯化钡、壳聚糖、聚左赖氨酸中的一种或几种组合为成囊材料；内囊的制备方法为先用蒸馏水配制浓度为0.5% -3.0%的海藻酸钠溶液，将药物或生物组织与其混匀，通过高压静电发生器和微泵，调整电压、平头针和针头离液面高度，滴至带磁力搅拌的25-200mmol/l的氯化钙、氯化钡两种溶液中的一种,得到粒径大小为50-800 u m的胶珠,反应IOmin后除去上清液，用生理盐水洗涤2次；将胶珠投至0. 01%-0. 5%聚左赖氨酸溶液、0.05% -I. 0%的壳聚糖两溶液中之一者继续搅拌5min，除去上清并用生理盐水洗涤2次，然后再投入至0. 05% -0. 5%的海藻酸钠溶液中搅拌5min，除去上清液并用生理盐水洗涤2次后得到内囊；
3.根据权利要求2所述的一种复式微囊及其制备方法，其特征在于内囊的另一种制备方法为按权利要求2得到的内囊再投至20-100mM的柠檬酸钠溶液中搅拌3 lOmin，用生理盐水洗涤2次，来得到内囊。
4.根据权利要求I所述的一种复式微囊及其制备方法，其特征在于外囊的成囊材料为以海藻酸钠、氯化钙、氯化钡、壳聚糖、聚左赖氨酸中的一种或几种组合为成囊材料；夕卜囊的制备方法为先用蒸馏水将海藻酸钠配成浓度为0. 5% -3. 0%的溶液，将内囊、化学药物、中药、生物细胞和组织样品中的一种或几种组合与该海藻酸钠溶液混匀；采用滴管，将混有内囊的海藻酸钠溶液滴至带磁力搅拌的25-200mmol/l的氯化钙、氯化钡两种溶液中的一种，反应IOmin后除去上清液，得到粒径大小为l_5mm的胶珠，用生理盐水洗涤2次；将胶珠投至0. 01% -0. 5%聚左赖氨酸溶液、0. 05% -I. 0%的壳聚糖两溶液中之一者继续搅拌5min，除去上清液并用生理盐水洗涤2次；然后再投入至0. 05% -0. 5%的海藻酸钠溶液中搅拌5min，除去上清液并用生理盐水洗涤2次后得到复式微囊；将复式微囊置于冻干保护剂乳糖、氯化钠，甘露醇溶液中的一种或几种组合，进行冷冻干燥；或添加细胞培养溶液，在37±0. 5°C培养箱中培养。
5.根据权利要求4所述的一种复式微囊及其制备方法，其特征在于外囊的另一种制备方法为按权利要求4得到的复式微囊再投至20-100mM的柠檬酸钠溶液中搅拌3 20min，用生理盐水洗涤2次，得到复式微囊；将复式微囊置于冻干保护剂乳糖、氯化钠，甘露醇溶液中的一种或几种组合，进行冷冻干燥；或添加细胞培养溶液，在37±0. 5°C培养箱中培养。
全文摘要
本发明涉及一种复式微囊及其制备方法，该复式微囊由内囊和外囊组成，主要成分为海藻酸钠、氯化钙、氯化钡、壳聚糖、聚左赖氨酸、柠檬酸钠中的几种成分组合而成，可包裹化学药物、中药、生物药物、生物细胞或组织。本发明的复式微囊采用高压静电法制备内囊，用滴制方法在多个内囊的外面再包一层外囊，制备方法简单，并能使药物达到缓慢释放效果，也可用于生物组织和细胞的体外培养和体内移植。
文档编号B01J13/02GK102805741SQ20121027344
公开日2012年12月5日 申请日期2012年8月2日 优先权日2012年8月2日
发明者傅红兴, 李慧, 潘仁彪, 朱雁林, 赵应征 申请人:温州医学院