1.一种维生素B12的适配体亲和柱,其特征在于包含有载体和维生素B12适配体。
2.根据权利要求1中所述的亲和柱,其特征在于适配体通过化学键偶联在载体上。
3.根据权利要求1中所述的亲和柱,其特征在于所述的适配体是核酸适配体,更具体的是寡聚核苷酸适配体。
4.根据权利要求3中所述的核酸适配体,其特征在于所述的适配体序列为序列1所描述的核酸序列。
5.根据权利要求1中所描述的适配体,其特征在于适配体是经过化学修饰的适配体。
6.根据权利要求5中所描述的适配体,其特征在于修饰方式包括但不限于氨基修饰、羧基修饰、巯基修饰及生物素修饰。
7.根据权利要求1中所述的适配体亲和柱,其特征在于所述的载体是琼脂糖凝胶或者化学合成的固相载体。
8.根据权利要求5中所述的亲和柱,其特征在于所述的琼脂糖凝胶包含但不限于N-羟基琥珀酰亚胺活化的琼脂糖凝胶、溴化氰活化的琼脂糖凝胶、交联的琼脂糖凝胶、聚丙烯酸琼脂糖凝胶。
9.根据权利要求5中所描述的化学合成的固相载体载体,包括但不限于聚苯乙烯,多孔聚苯乙烯及交联多孔聚苯乙烯填料。
10.一种纯化维生素B12适配体亲和柱制备方法,其特征在于
选择N-羟基琥珀酰亚胺活化后的载体,将载体干粉用1mmol/L的盐酸浸泡过夜进行活化
每克活化的载体加入30-200nmol的适配体,在0.1M NaHCO3,0.5M NaCl PH8.3的缓冲液中,室温偶联2小时,或者4℃偶联过夜
偶联产物用1M Tris.HCl PH 8.0 室温反应2小时
偶联好的载体-适配体,用20mM PH7.4的PBS洗涤
用含有0.01%硫柳汞的10mM PBS PH7.4 洗涤维生素B12适配体-载体偶联产物,装柱,放于4℃保存。
11.一种维生素B12的亲和柱,其用途在于对待检物中的维生素B12的富集和纯化。
12.根据权利要求11所述的待检物,其特征在于待检物包含但不限于奶粉、营养品、原奶及功能饮料等。