专利名称：一种八角枫碱的含量测定方法
技术领域：
本发明涉及一种八角枫碱的含量測定方法，特別是涉及中药材八角枫及制八角枫中八角枫碱的ー种含量測定方法。
背景技术：
八角枫为八角枫科植物八角枫Alangium chinense (Lour. ) Harms的干燥细根及须根。分布于云南、贵州等地，为少数民族使用药。具有祛风通络，散淤镇痛、麻酔及松弛肌肉等作用，用于治疗风湿疼痛、麻木瘫痪、心カ衰竭、劳损腰痛、跌打损伤等。其须根及支根含生物碱、酸类、氨基酸、有机酸、树脂等。八角枫因其疗效可靠、药源广泛、经济方便等优点， 具有着广阔的研究和开发前景。八角枫有毒，须根最毒。《本草纲目》记载“木八角性热、カ猛、有毒，……虽壮实人亦宜少用”。我国西南诸省民间用于治疗风湿痛，常有中毒甚至死亡者。八角枫的主要成分为生物碱，其活性成分为八角枫碱，是松弛肌肉的主要活性成分，也是其毒性成分，为了保证用药的安全性和有效性，因此控制八角枫中八角枫碱的含量很重要。目前，现有技术中，缺乏着真实、有效、准确的測定八角枫中八角枫碱含量的方法。
发明内容
为解决现有技术存在的技术问题，本发明提供ー种操作简便快捷、专属性強、精密度好、回收率高、测量结果准确的的技术方案，用以测定中药材八角枫(生品)及制八角枫 (炮制品)中八角枫碱的含量，旨在完善八角枫及制八角枫的质量标准，为其安全合理用药提供实验依据。本发明的技术方案包含对八角枫中八角枫碱成分进行含量測定的步骤。其中对八角枫碱进行含量测定采用高效液相色谱法。本发明方法包括将八角枫碱对照品，制八角枫供试品分別注入高效液相色谱仪， 进行測定，记录峰面积，按公式计算制八角枫供试品中八角枫碱的含量。本发明为解决现有技术其问题所采用的技术方案，具体步骤如下(1)色谱条件与系统适应性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈缓冲液(缓冲液0.2g庚烷磺酸钠、3. 5g磷酸ニ氢钾定容至IOOOmL) = 9 91 (体积比)为流动相，柱温为30°C，流速 1. OmL · HiirT1 ；检测波长为259nm ；进样量10 μ L ；理论板数按八角枫碱峰计算应不低于 5000 ；对照品、样品色谱图如
图1。(2)检验溶液的制备对照品溶液的制备取八角枫碱对照品适量，精密称定，加含5%醋酸的30%甲醇溶液制成0. lg/L的溶液，即得；供试品溶液的制备取制八角枫于60°C干燥4h，粉碎，取粉末(过65目筛)约 0. 5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入含5%醋酸的30%甲醇溶液25mL，密塞，称定重
3量，超声处理(功率250W，频率40kHz) 50min,放冷，再称定重量，用含5 %醋酸的30%甲醇溶液补足减失的重量，摇勻，滤过，即得。(3)操作分别吸取以上对照品溶液和供试品溶液各10 μ L，注入液相色谱仪，得到对照品溶液色谱图以及供试品溶液色谱图。(4)计算:外标法通过公式计算制八角枫供试品中八角枫碱的含量。本发明所示的技术方案，制八角枫中八角枫碱进行含量测定的计算公式如下
权利要求
1.ー种利用高效液相色谱仪进行八角枫碱含量測定的方法，包括以下步骤(1)色谱条件与系统适应性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈与缓冲液(缓冲液0. 2g庚烷磺酸钠、3. 5g磷酸ニ氢钾定容至IOOOmL)作为流动相，检测波长为 259nm，理论板数按八角枫碱峰计算应不低于5000 ；(2)样品制备精密称定八角枫碱对照品，加含醋酸的甲醇溶液制成，得对照品溶液； 取药材粉碎，过筛，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入含醋酸的甲醇溶液，密塞，称定重量，超声提取，放冷，再称定重量，用含醋酸的甲醇溶液补足减失的重量，摇勻，滤过，得供试品溶液；(3)操作精密吸取以上对照品溶液和供试品溶液，注入液相色谱仪，測定，即得。
2.根据权利要求1所述的含量測定方法，其特征在于所述药材为八角枫(生品)及制八角枫(炮制品)。
3.根据权利要求1所述的含量測定方法，其特征在于流动相中，乙腈与缓冲液的体积比为9 91，且流动相所用缓冲液是将0.2g庚烷磺酸钠、3. 5g磷酸ニ氢钾加纯水定容至 IOOOmL 制的。
4.根据权利要求1所述的含量測定方法，其特征在干，检测柱温为30°C。
5.根据权利要求2所述的含量測定方法，包括以下步骤(1)色谱条件与系统适应性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈缓冲液(缓冲液0. 2g庚烷磺酸钠、3. 5g 磷酸ニ氢钾定容至IOOOmL) =9 91 (体积比)为流动相，柱温为30 °C，流速1. OmL .mirT1 ； 检测波长为259nm ；进样量10 μ L ；理论板数按八角枫碱峰计算应不低于5000 ；(2)检验溶液的制备对照品溶液的制备取八角枫碱对照品适量，精密称定，加含5%醋酸的30%甲醇溶液制成0. lg/L的溶液，即得；供试品溶液的制备取制八角枫于60°C干燥4h，粉碎，取粉末(过65目筛)约0. 5g， 精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入含5%醋酸的30%甲醇溶液25mL，密塞，称定重量，超声处理(功率250W，频率40kHz) 50min,放冷，再称定重量，用含5%醋酸的30%甲醇溶液补足减失的重量，摇勻，滤过，即得；(3)分別吸取以上对照品溶液和供试品溶液各10yL，注入液相色谱仪，得到对照品溶液色谱图以及供试品溶液色谱图；(4)按峰面积计算八角枫碱的含量。
全文摘要
本发明提供了一种八角枫碱的含量测定方法，用以测定中药材八角枫中八角枫碱的含量。包括先超声提取中药材八角枫，得到的供试品溶液再利用高效液相色谱法测定其含量。本发明具有操作简便快速、专属性强、精密度好、回收率高、测量结果正确等优点，旨在完善八角枫的质量标准，为其安全有效合理用药提供实验依据。
文档编号G01N30/36GK102590368SQ20111002017
公开日2012年7月18日 申请日期2011年1月18日 优先权日2011年1月18日
发明者余启荣, 和芳, 李馨宇, 祁春艳, 胡玉霞, 高柏丽 申请人:北京创立科创医药技术开发有限公司