检测有机磷类农药中茶叶的前处理方法及其应用以及检测茶叶中有机磷类农药的方法
【专利摘要】本发明公开了一种用于检测茶叶中有机磷类农药的茶叶的前处理方法，所述方法包括如下步骤：（1）将粉碎后的茶叶粉末浸于提取溶剂中，涡旋振荡4-8min，振荡后在4000-6000rpm下离心4-6min，所述提取溶剂能够溶解茶叶中有机磷类农药但不溶解茶叶；（2）取步骤（1）离心后的上清液，加入固体吸附剂，涡旋振荡3-5min，振荡后在11000-13000rpm下离心5-7min；（3）将步骤（2）离心后的上清液过孔径为0.22-0.45μm的滤膜，得到待测溶液。还公开上述方法在检测茶叶中有机磷类农药中的应用及检测茶叶中有机磷类农药的方法。本发明方法处理时间短，消耗溶剂少，成本低。
【专利说明】检测有机磷类农药中茶叶的前处理方法及其应用以及检测茶叶中有机磷类农药的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及农药检测【技术领域】，具体地，涉及检测茶叶中有机磷类农药的茶叶的前处理方法，及该方法在检测茶叶中有机磷类农药中的应用，以及通过该方法进行的检测茶叶中有机磷类农药的方法。
【背景技术】
[0002]有机磷类农药是用于防治植物病、虫、害的含有机磷农药的有机化合物。这一类农药品种多、药效高，用途广，易分解，在人、畜体内一般不积累，在农药中是极为重要的一类化合物。但有不少品种对人、畜的急性毒性很强。有机磷类农药是我国使用范围最广、用量最大的一类广谱、高效的农药。
[0003]为了提高产量和改善茶叶外形，农民在茶树种植过程中往往喷洒了大量的化学农药。据统计，约有98%的茶叶在栽培过程中要使用农药和化肥。茶叶的需求和产量的矛盾导致必须使用农药和化肥。我国是世界第一产茶大国，茶叶的进出口贸易带来了大量外汇储备。同时茶叶中农药残留超限量已成为我国茶叶出口欧盟、北美和日本等发达地区和国家的主要技术性贸易壁垒。确保这些茶叶的质量安全，大量的茶叶生产商需要农药残留检测技术对茶叶原料和成品进行农药残留的监控。
[0004]茶叶较多的保留了鲜叶中的嘌呤类生物碱、糖类、色素、维生素和矿物质，基质复杂，对痕量的农药残留检测有严重干扰。采用色谱法分离检测有机磷类农药时大多需要前处理方法对茶叶样品进行处理。目前，国内外研究茶叶中农药残留的前处理方法主要有索氏提取、振荡提取、超声提取、加速溶剂萃取、分散液液微萃取、固相萃取、凝胶渗透色谱等方法。这些方法有些步骤较多，有些耗时较长，有些需操作人员与大量的有机溶剂接触，污染环境，成本较高。
【发明内容】
[0005]本发明的目的在于克服现有技术中处理时间长、消耗溶剂多、成本高的缺点，为茶叶中有机磷类农药检测提供一种快速、有效和低成本的前处理方法。
[0006]为了实现上述目的，一方面，本发明提供了一种用于检测茶叶中有机磷类农药的茶叶的前处理方法，所述方法包括如下步骤:
[0007](I)将粉碎后的茶叶粉末浸于提取溶剂中，涡旋振荡4-8min，振荡后在4000-6000rpm下离心4_6min,所述提取溶剂能够溶解茶叶中有机磷类农药但不溶解茶叶；
[0008](2)取步骤(I)离心后的上清液，加入固体吸附剂，涡旋振荡3_5min，振荡后在11000-13000rpm 下离心 5_7min ；
[0009](3)将步骤(2)离心后的上清液过孔径为0.22-0.45 μ m的滤膜，得到待测溶液。
[0010]优选地,步骤(I)中，茶叶粉末的粒径< 2mm。
[0011]优选地，步骤(I)中，相对于Ig茶叶粉末，提取溶剂的用量为l_3mL。[0012]优选地，所述提取溶剂选自乙腈、丙酮、乙酸乙酯和正己烷中的一种或多种；更优选地，所述提取溶剂为乙酸乙酯与正己烷的混合溶液，乙酸乙酯与正己烷的体积比为1:0.5-1.5ο
[0013]优选地，步骤(2)中，相对于Ig茶叶粉末，固体吸附剂的用量为50_150mg。
[0014]优选地，所述固体吸附剂选自石墨化炭黑、N-丙基乙二胺键合硅胶和C18键合硅胶中的一种或多种；更优选地，所述固体吸附剂为石墨化炭黑和N-丙基乙二胺键合硅胶的混合物，石墨化炭黑和N-丙基乙二胺键合硅胶的重量比为1:0.125-1。
[0015]另一方面，本发明提供了如上所述的方法在检测茶叶中有机磷类农药中的应用。
[0016]第三方面，本发明提供了一种检测茶叶中有机磷类农药的方法，所述方法包括:
[0017](I)将茶叶进行前处理，得到待测溶液；
[0018](2)将步骤(1)得到的待测溶液进行气相色谱分析，
[0019]其中，步骤(1)中前处理的方法为如上所述的方法。
[0020]本发明的检测茶叶中有机磷类农药的前处理方法处理时间短，消耗溶剂少，成本低。为检测茶叶中有机磷类农药提供了快速、有效、低成本的操作技术。
[0021]本发明的其他特征和优点将在随后的【具体实施方式】部分予以详细说明。
【专利附图】
【附图说明】
[0022]图1:0.010 μ g/mL的混合标准溶液的GC-FPD色谱图。
[0023]附图标记说明
[0024]I敌敌畏；2乐果；3甲基对硫磷；4杀螟硫磷；5对硫磷；6水胺硫磷；7三唑磷；8苯硫憐；9伏杀硫憐。
【具体实施方式】
[0025]以下对本发明的【具体实施方式】进行详细说明。应当理解的是，此处所描述的【具体实施方式】仅用于说明和解释本发明，并不用于限制本发明。
[0026]一方面，本发明提供了一种用于检测茶叶中有机磷类农药的茶叶的前处理方法，所述方法包括如下步骤:
[0027](I)将粉碎后的茶叶粉末浸于提取溶剂中，涡旋振荡4-8min，振荡后在4000-6000rpm下离心4_6min,提取溶剂能够溶解茶叶中有机磷类农药但不溶解茶叶；
[0028](2)取步骤(1)离心后的上清液，加入固体吸附剂，涡旋振荡3_5min，振荡后在11000-13000rpm 下离心 5_7min ；
[0029](3)将步骤(2)离心后的上清液过孔径为0.22-0.45 μ m的滤膜，得到待测溶液。
[0030]本发明中，步骤(1)中，茶叶粉末的粒径优选≤2mm。
[0031 ] 本发明中，步骤(1)中，涡旋振荡4-8min通常为涡旋振荡2_4min，再重复一次，即祸旋振荡4-8min。
[0032]本发明中，步骤(1)中，相对于Ig茶叶粉末，提取溶剂的用量优选为l_3mL。
[0033]本发明中，提取溶剂可以为本领域常用的各种提取茶叶中有机磷类农药的提取溶剂，例如可以为乙腈、丙酮、乙酸乙酯和正己烷中的一种或多种。优选情况下，提取溶剂为乙酸乙酯与正己烷的混合溶液，乙酸乙酯与正己烷的体积比优选为1:0.5-1.5。[0034]本发明中，步骤(2 )中，相对于Ig茶叶粉末，固体吸附剂的用量优选为50-150mg。
[0035]本发明中，固体吸附剂可以为本领域常用的固体吸附剂，例如，可以为石墨化炭黑、N-丙基乙二胺键合硅胶和C18键合硅胶中的一种或多种，优选情况下，固体吸附剂为石墨化炭黑和N-丙基乙二胺键合硅胶的混合物，石墨化炭黑和N-丙基乙二胺键合硅胶的重量比优选为1:0.125-1。
[0036]另一方面，本发明提供了如上所述的方法在检测茶叶中有机磷类农药中的应用。
[0037]第三方面，本发明提供了一种检测茶叶中有机磷类农药的方法，该方法包括:
[0038]( I)将茶叶进行前处理，得到待测溶液；
[0039](2)将步骤(1)得到的待测溶液进行气相色谱分析，
[0040]其中，步骤(1)中前处理的方法为如上所述的检测有机磷类农药中茶叶的前处理方法。
[0041]本发明中，对于气象色谱分析的条件可以采用本领域常用的条件，此为本领域技术人员所公知，在此不再赘述。
[0042]实施例
[0043]以下的实施例将对本发明作进一步的说明，但并不因此限制本发明。
[0044]在以下实施例中:
[0045]将购买的茶叶用粉碎机粉碎，用圆孔筛筛出< 2.0mm茶叶粉末。
[0046]GC-2010Plus气相色谱仪(配FPD检测器，日本岛津公司)。
[0047]乙酸乙酯、正己烧(色谱纯，J.T.Baker公司)。
[0048]石墨化碳黑(GCB)、N-丙基乙二胺键合硅胶(PSA) (BESEP公司)
[0049]有机磷农药标准品包括:敌敌畏、乐果、甲基对硫磷、杀螟硫磷、对硫磷、水胺硫磷、三唑磷、苯硫磷、伏杀硫磷，购于美国J.T.Baker公司。
[0050]将有机磷农药标准品用乙酸乙酯-正己烷(V:V=1:1)稀释并配制成各自浓度为10 μ g/mL的混合标准溶液。用乙酸乙酯-正己烷(V:V=1:1)将10 μ g/mL的混合标准溶液逐级稀释为浓度为0.250,0.100,0.050,0.020,0.010,0.005 μ g/mL的混合标准溶液，用GC-2010Plus气相色谱仪进行色谱分析，色谱柱条件如下，以浓度对峰面积绘制标准曲线(0.010 μ g/mL的混合标准溶液的GC-FPD色谱图见图1)，线性方程及相关系数见表1。
[0051]色谱柱:DB_5ms毛细管柱，30mX0.25mmX0.25 μ m,恒线速度模式，初始流速0.8mL/min ;进样口:不分流模式，温度250 °C，进样量2 μ L ;升温程序:50°C保持Imin, 50 °C /min 升至 10CTC,保持 lmin, 8 °C /min 升至 280 °C,保持 5min ;载气:N2,纯度≥ 99.999% ；FPD 检测器:磷模式，温度 300°C，H262.5mL/min, Air90mL/min。
[0052]表1
[0053]
【权利要求】
1.一种用于检测茶叶中有机磷类农药的茶叶的前处理方法，所述方法包括如下步骤: (1)将粉碎后的茶叶粉末浸于提取溶剂中，涡旋振荡4-8min，振荡后在4000-6000rpm下离心4-6min，所述提取溶剂能够溶解茶叶中有机磷类农药但不溶解茶叶； (2)取步骤(1)离心后的上清液，加入固体吸附剂，涡旋振荡3-5min，振荡后在11000-13000rpm 下离心 5_7min ； (3)将步骤(2)离心后的上清液过孔径为0.22-0.45 μ m的滤膜，得到待测溶液。
2.根据权利要求1所述的方法，其中，步骤(1)中，茶叶粉末的粒径<2mm。
3.根据权利要求1所述的方法，其中，步骤(1)中，相对于Ig茶叶粉末，提取溶剂的用量为l_3mL。
4.根据权利要求1或3所述的方法，其中，所述提取溶剂选自乙腈、丙酮、乙酸乙酯和正己烷中的一种或多种。
5.根据权利要求4所述的方法，其中，所述提取溶剂为乙酸乙酯与正己烷的混合溶液，乙酸乙酯与正己烷的体积比为1:0.5-1.5。
6.根据权利要求1所述的方法，其中，步骤(2)中，相对于Ig茶叶粉末，固体吸附剂的用量为50-150mg。
7.根据权利要求1或6所述的方法，其中，所述固体吸附剂选自石墨化炭黑、N-丙基乙二胺键合硅胶和C18键合硅胶中的一种或多种。
8.根据权利要求7所述的方法，其中，所述固体吸附剂为石墨化炭黑和N-丙基乙二胺键合硅胶的混合物，石墨化炭黑和N-丙基乙二胺键合硅胶的重量比为1:0.125-1。
9.权利要求1-8中任意一项所述的方法在检测茶叶中有机磷类农药中的应用。
10.一种检测茶叶中有机磷类农药的方法，所述方法包括: (1)将茶叶进行前处理，得到待测溶液； (2)将步骤(1)得到的待测 溶液进行气相色谱分析， 其中，步骤(1)中前处理的方法为权利要求1-8中任意一项所述的方法。
【文档编号】G01N30/06GK103901137SQ201210587434
【公开日】2014年7月2日 申请日期:2012年12月28日 优先权日:2012年12月28日
【发明者】陈世恒, 章晴, 杨永坛 申请人:中粮营养健康研究院有限公司, 中粮集团有限公司