用于检测全自动化学发光免疫测定仪性能的试剂盒的制作方法
【专利摘要】本发明提供一种用于检测全自动化学发光免疫测定仪性能的试剂盒，包括稀释液、酶-1、酶-2、免疫磁珠、免疫磁珠-酶和发光底物，其中，酶-1为交联有生物素的碱性磷酸酶溶液，其浓度为0.1～3.0μg/ml；酶-2为交联有生物素的碱性磷酸酶溶液，其浓度为0.01～1.0ng/ml；免疫磁珠为交联有链霉亲和素的纳米磁珠溶液，其浓度为0.2～0.8mg/ml；免疫磁珠-酶为等体积的酶-1和免疫磁珠的混合液。与现有技术相比，本发明的用于检测全自动化学发光免疫测定仪性能的试剂盒组分简单，性能稳定，利用本发明的试剂盒对型号为卓越C1800/C1820的全自动化学发光免疫测定仪进行8个项目的测试能全面系统地反应全自动化学发光免疫测定仪的整体及各部件的性能。
【专利说明】用于检测全自动化学发光免疫测定仪性能的试剂盒
【技术领域】
[0001]本发明属于诊断试剂领域，特别涉及一种用于检测全自动化学发光免疫测定仪性能的试剂盒。
【背景技术】
[0002]免疫诊断(Immunodiagnosis)技术是现代临床检验和生命科学研究的重要手段之一，主要包括放射免疫检验、荧光免疫检验、酶标免疫检验及化学发光免疫检验等技术，其中，化学发光免疫检验技术因其灵敏度高、特异性强、线性范围宽、测试效率高等优点越来越受到青睐，目前已在肝炎类、甲功类、肿瘤类、性激素类等多种疾病检测中广泛应用。
[0003]全自动化学发光免疫测定仪是基于化学发光免疫分析技术而开发的新型临床检测仪器。在化学发光免疫分析中包含两个部分，即免疫反应技术和化学发光技术。其基本原理是免疫反应中的酶作用于发光底物，使之发生化学反应并释放出大量的能量，产生激发态的中间体。这种激发态中间体回到稳定的基态时，可同时发射出光子。利用发光信号测量仪器即可测量出光量子产额，该光量子产额与样品中的待测物质的量成正比，由此可以建立标准曲线并计算样品中待测物质的含量。化学发光免疫分析技术常采用双抗体夹心法、竞争法及间接法等反应模式。测试过程如下:待测抗原同固相抗体及酶标抗体结合形成“三明治”结构的复合物；在外加磁场中直接沉淀，将免疫反应形成的复合物与未结合的其它物质分离；去上清后清洗沉淀的复合物，加入酶促化学发光底物；底物在酶作用下被催化裂解，形成不稳定的激发态中间体，当激发态中间体回到基态时便发出光子，形成发光反应，通过光量子阅读系统记录光子能量，并通过计算机处理系统将光能量强度在标准曲线上转换为待测抗原的浓度，并报告结果。
[0004]其操作简单，容易掌握和使用，且精密度高，稳定性好。全自动化学发光免疫测定仪的使用为体外临床诊断开辟了新的道路。目前国内使用的全自动化学发光免疫测定仪80%以上都是国外进口仪器，其中以罗氏、雅培、西门子及贝克曼生产的为主，但价格都较为昂贵。与之相比，国内的全自动化学发光免疫测定仪开发则要晚许多，且只占有很少一部分市场份额。不管对于国内还是国外全自动化学发光免疫测定仪而言，其初次投入使用以及使用过程中的性能和质量检测都是至关重要的。而不同仪器之间的检测试剂是很难通用的，目前还没有能全面检测型号为卓越C1800/C1820的全自动化学发光免疫测定仪性能的试剂盒，因此，针对该型号仪器的特点开发一套适合该仪器性能测试的试剂盒是十分有必要的。
【发明内容】
[0005]本发明目的在于提供一种用于检测全自动化学发光免疫测定仪性能的试剂盒，以解决现有技术中不同仪器之间的检测试剂是很难通用的，目前还没有能全面检测型号为卓越C1800/C1820的全自动化学发光免疫测定仪性能的试剂盒的技术性问题。
[0006]本发明目的通过以下技术方案实现:[0007]—种用于检测全自动化学发光免疫测定仪性能的试剂盒，用于检测型号为卓越C1800/C1820的全自动化学发光免疫测定仪的性能，包括稀释液、酶-1、酶_2、免疫磁珠、免疫磁珠-酶和发光底物，其中，
[0008]所述酶-1为交联有生物素的碱性磷酸酶溶液，其浓度为0.1?3.0 μ g/ml ；
[0009]所述酶-2为交联有生物素的碱性磷酸酶溶液，其浓度为0.01?1.0ng/ml ；
[0010]所述免疫磁珠为交联有链霉亲和素的纳米磁珠溶液，其浓度为0.2?0.8mg/ml ；[0011 ] 所述免疫磁珠-酶为等体积的酶-1和免疫磁珠的混合液。
[0012]优选地，所述稀释液为浓度为1%的NaCl溶液。
[0013]优选地，所述发光底物为3-(2-螺旋金刚烷)-4_甲氧基-4-(3-磷氧酰)_苯基-1，2- 二氧环乙烷二钠盐。
[0014]利用本发明的试剂盒对型号为卓越C1800/C1820的全自动化学发光免疫测定仪进行以下8个项目的测试可检测型号为卓越C1800/C1820的全自动化学发光免疫测定仪的性能。8个项目包括项目1、项目2、项目3、项目4、项目5、项目6、项目7和项目8 ;具体操作如下。
[0015]说明:以下测试过程中，样本由样本针加样，Rl和R2试剂都是由Rl针加样，R3试剂R3针加样，以下的磁珠均为免疫磁珠。
[0016]项目I包括项目1-1和项目1-2。项目1-1:吸取Iml的稀释液于样本管中作为样本，分别装取15ml的稀释液于试剂瓶Rl和R2中作为测试试剂Rl和R2。项目1-2:吸取Iml的稀释液于样本管中作为样本，分别装取15ml的稀释液于试剂瓶Rl和R2中作为测试试剂Rl和R2，装取15ml的稀释液于R3试剂瓶中作为测试试剂R3。检测原理:所有试剂全为稀释液，目的是为了检测启动测试时，各加样针及PMT (光电倍增管，用于读取底物发光值)能否正常工作，项目1-1和项目1-2用于检测两种不同的加样方式。
[0017]项目2包括项目2-1、项目2-2和项目2_3。吸取1.5ml的免疫磁珠-酶作为项目
2-1的样本，分别装取IOml免疫磁珠-酶于Rl和R3试剂瓶中，分别作为项目2_2的反应试剂Rl和项目2-3反应试剂R3。测试原理:项目2-1、项目2_2和项目2_3所加试剂都一样，且分别由不同的加样针完成，比较这3个小项目的RLU值(即相对光单位，该数值可由全自动化学发光免疫测定仪读出，为RelativeLight Unit的缩写)可以知道3个加样针是否都准确，同时将这个值与理论的参考值比较，若值低则说明洗涤过程中磁珠有丢失。另外，每个小项目都有10次的重复加样，通过计算这10次测试结果的CV可以看出这根加样针多次加样的波动情况。
[0018]项目3包括项目3-1和项目3-2。分别吸取5ml的酶-1于R2和R3试剂瓶中，作为项目3-1的反应试剂R2和项目3-2反应试剂R3。测试原理:两个项目所加的都是酶_1，没有和磁珠结合，在测试过程中会被洗涤掉，这样就不会存在酶和底物的反应，所测得RLU值应该会较低，如果值偏高则说明洗涤的不够干净。
[0019]项目4:吸取Iml的酶-2作为样本，装取15ml的免疫磁珠作为反应试剂R1。测试原理:样本为酶，Rl试剂是磁珠，测试过程中酶和磁珠结合不会被洗掉，这样便能和底物反应，从而可以反应出试剂在仪器上反应状况。
[0020]项目5包括项目5-1和项目5-2。项目5-1:吸取500 μ I的稀释液作为样本，2ml的酶-1作为Rl试剂。项目5-2:吸取500 μ I的磁珠作为样本，装取15ml的稀释液于试剂瓶Rl作为Rl试剂。测试原理:项目5-1只有酶-1，在测试过程中会被洗涤掉，而5-2只有磁珠，不能和底物反应，因此正常情况下这两者值都会很低，如果Rl针存在拖带情况，则其在加完项目5-1中的酶-1后会拖带到项目5-2中，从而和磁珠结合，导致RLU值偏高。
[0021]项目6包括项目6-1、项目6-2、项目6_3和项目6_4。分别按顺序吸取500 μ I的酶-1、lml的稀释液、500 μ I的酶-1、Iml的稀释液作为项目6-1、6_2、6-3、6_4的样本，装取15ml的免疫磁珠作为该4个项目的反应试剂Rl。测试原理为:4个小项目的Rl试剂都为磁珠，只是样本不同，样本是酶-1的项目会有较高的RLU值，而样本是稀释液的项目RLU值会很低，加样过程按照表I中所列顺序进行，如果样本针存在拖带情况，则其在加完6-1的酶后会拖带至6-2的稀释液中，从而导致6-2的RLU值偏高。
[0022]项目7包括项目7-1、项目7-2、项目7-3、项目7-4、项目7-5、项目7-6、项目7-7、项目7-8和项目7-9。吸取酶-1 (浓度为1.5 μ g/ml)梯度稀释至表I中项目7的各项指定酶浓度，每个样本500 μ 1，装取15ml的免疫磁珠作为每一项目的反应试剂Rl。测试原理:以9个酶-1浓度梯度为X轴，所测得RLU值为Y轴进行先行拟合，计算其R2值，从而可以反应仪器测试的线性情况。
[0023]项目8包括项目8-1、项目8-2。项目8_1:吸取Iml的稀释液于样本管中作为样本，分别装取15ml的稀释液于试剂瓶Rl和R2中作为测试试剂Rl和R2。项目8_2:吸取Iml的稀释液于样本管中作为样本，分别装取15ml的稀释液于试剂瓶Rl和R2中作为测试试剂Rl和R2，装取15ml的稀释液于R3试剂瓶中作为测试试剂R3。测试原理:测试过程与项目I相同，只用在仪器进行完一轮测试后看仪器是否会有残留，或者仪器是否稳定。若有残留则项目8中的RLU值会比项目I高出许多。
[0024]将上述项目的样本按照表I中的次序放置于样本架上,各试剂的加样量见表I,样本和试剂的加样量以及测试次数都在型号为卓越C1800/C1820的全自动化学发光免疫测定仪中设置完成，启动仪器进行测试，测试结束后从仪器中导出测量数据。
[0025]表I测试项目
[0026]
【权利要求】
1.一种用于检测全自动化学发光免疫测定仪性能的试剂盒，用于检测型号为卓越C1800/C1820的全自动化学发光免疫测定仪的性能，其特征在于，包括稀释液、酶-1、酶_2、免疫磁珠、免疫磁珠-酶和发光底物，其中， 所述酶-1为交联有生物素的碱性磷酸酶溶液，其浓度为0.1?3.0yg/ml ； 所述酶-2为交联有生物素的碱性磷酸酶溶液，其浓度为0.0l?1.0ng/ml ； 所述免疫磁珠为交联有链霉亲和素的纳米磁珠溶液，其浓度为0.2?0.8mg/ml ； 所述免疫磁珠-酶为等体积的酶-1和免疫磁珠的混合液。
2.如权利要求1所述的用于检测全自动化学发光免疫测定仪性能的试剂盒，其特征在于，所述稀释液为浓度为1%的NaCl溶液。
3.如权利要求1所述的用于检测全自动化学发光免疫测定仪性能的试剂盒，其特征在于，所述发光底物为3- (2-螺旋金刚烷)-4-甲氧基-4- (3-磷氧酰)-苯基-1，2- 二氧环乙烷二钠盐。
【文档编号】G01N33/53GK103713119SQ201310754384
【公开日】2014年4月9日 申请日期:2013年12月31日 优先权日:2013年12月31日
【发明者】熊斌, 孙臻懿, 李基 , 彭波 申请人:上海科华生物工程股份有限公司