同型半胱氨酸的测定试剂及其制备方法与流程

文档序号:12746590阅读:来源:国知局

技术特征:

1.同型半胱氨酸的测定试剂,其特征在于:由R1a试剂、R1b试剂、R2试剂和标准样构成,所述的R1a试剂是由Triton X-100溶解于添加有缓冲液、二硫苏糖醇的纯化水中所形成的溶液;所述的R1b试剂是由基因重组蛋氨酸裂解酶溶解于添加有缓冲液、山梨醇、蔗糖、海藻糖、4-氨基-N,N-二甲基苯胺盐酸盐的纯化水中所形成的溶液;所述的R2试剂是添加有盐酸、三氯化铁的纯化水中所形成的溶液;所述的同型半胱氨酸标准样是由同型半胱氨酸、牛血清蛋白、缓冲液和叠氮钠溶解于纯化水中形成的溶液。

2.如权利要求1所述的同型半胱氨酸的测定试剂,其特征在于:所述的R1a试剂中,缓冲液为三羟甲基氨基甲烷。

3.如权利要求1所述的同型半胱氨酸的测定试剂,其特征在于:所述的R1b试剂中,山梨醇的浓度3%,蔗糖的浓度为2%,海藻糖的浓度为2%,4-氨基-N,N-二甲基苯胺盐酸盐浓度为20mmol/L,基因重组蛋氨酸裂解酶浓度为0.75KU/L。

4.如权利要求1所述的同型半胱氨酸的测定试剂,其特征在于:所述的R2试剂中,盐酸浓度为10%,三氯化铁浓度为15mmol/L。

5.如权利要求1所述的同型半胱氨酸的测定试剂,其特征在于:所述的标准样中,缓冲液为磷酸盐缓冲液。

6.如权利要求1-5任一项所述同型半胱氨酸测定试剂的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:

(1)R1a试剂配制:向纯化水中加入缓冲液,搅拌至完全溶解;加入二硫苏糖醇(DTT)搅拌至溶解,加入Triton X-100,搅拌至溶解,继续搅拌后定容;

(2)R1b试剂配制:向纯化水中加入缓冲液,搅拌至完全溶解;加入山梨醇搅拌至溶解,加入蔗糖,搅拌至溶解;加入海藻糖,搅拌至溶解;加入4-氨基-N,N-二甲基苯胺盐酸盐,搅拌至溶解;加入基因重组蛋氨酸裂解酶搅拌至完全溶解,继续搅拌后定容;

(3)R2试剂配制:向纯化水中加入盐酸,搅拌至完全溶解;加入三氯化铁,搅拌至溶解,继续搅拌后定容;

(4)同型半胱氨酸标准样配制:向纯化水中加入同型半胱氨酸,搅拌至完全溶解;加入缓冲液搅拌至溶解,加入牛血清蛋白搅拌至溶解;加入叠氮钠搅拌至完全溶解;继续搅拌后定容;

(5)对上述制备的R1a试剂、R1b试剂和R2试剂及同型半胱氨酸标准样进行灵敏度、线性范围、精密度和准确度进行测定。

7.如权利要求6所述的同型半胱氨酸测定试剂的制备方法,其特征在于:步骤(1)中,所述的纯化水初始体积为400ml,定容体积为500ml。

8.如权利要求6所述的同型半胱氨酸测定试剂的制备方法,其特征在于:步骤(2)中,所述的纯化水初始体积为2ml,定容体积为3ml。

9.如权利要求6所述的同型半胱氨酸测定试剂的制备方法,其特征在于:步骤(3)中,所述的纯化水初始体积为80ml,定容体积为100ml。

10.如权利要求6所述的同型半胱氨酸测定试剂的制备方法,其特征在于:步骤(4)中,所述的纯化水初始体积为80ml,定容体积为100ml。

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