本发明涉及化学检测技术领域，具体是一种穿心莲片中有效成分含量的检测方法。
背景技术：
穿心莲片主要成分为穿心莲，辅料是淀粉、硬脂酸镁。在穿心莲中有四种内酯成分：去氧穿心莲内酯、穿心莲内酯、新穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯。穿心莲内酯和总内酯是临床普遍使用的成分，其主要药理学活性为抗过敏，抗HIV病毒，抗炎症和抗感染作用。穿心莲通常以其内含穿心莲内酯为标准，一般是4～6%。因此，准确测定穿心莲片有效成分——穿心莲内酯的含量，是正确评价穿心莲片质量的重要指标。
目前，缺少一种操作简便、精密、稳定性好的穿心莲片中穿心莲内酯有关物质的测定方法，能够快速、准确地测定及评价穿心莲片的质量。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种精密度高、稳定性好的穿心莲片中有效成分含量的检测方法。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
一种穿心莲片中有效成分含量的检测方法，包括以下步骤：
（1）取穿心莲片10片，除去包衣，研细，得穿心莲粉末；精确称取穿心莲粉末0.02～0.5g得样品，将样品放入热解杯中；
（2）对样品进行快速热解，热解温度为85～95℃，热解时间为3～5min，得到热解后的样品；
（3）往热解后的样品中加入10ml甲醇，称定重量，经超声脱气处理后放凉，用甲醇补足至原重量，摇匀后过滤，得供试品溶液；
（4）采用高效液相色谱法对供试品溶液进行测定；
（5）根据测定的色谱数据，定性样品中有效成分的色谱峰，并获得样品中有效成分的相对含量。
作为本发明进一步的方案：所述的步骤（3）中，超声脱气处理功率为280～300W，频率为35kHz，时间为30～35min。
作为本发明进一步的方案：所述的步骤（4）中，高效液相色谱的工作条件为：色谱柱选用十八烷基硅烷键合硅胶柱，尺寸为4.60×250mm，填料粒径为5μm；流动相由流动相A、流动相B和流动相C按照一定的体积百分比组成，其中流动相A为0.1%甲酸，流动相B为乙腈，流动相C为水，采用梯度洗脱程序：0～3min，A、30～60%，B、30～60%，C、10～30%；3～8min，A、25%，B、65%，C、10%；8～12min，A、65%，B、25%，C、10%；流速0.5～1.0ml/min；柱温40～45℃；进样量10μL。
作为本发明进一步的方案：所述的水为双蒸水。
作为本发明进一步的方案：所述的步骤（5）中，有效成分的色谱峰的定性采用NIST软件的自动匹配计算。
作为本发明进一步的方案：所述的步骤（5）中，有效成分的相对含量采用面积归一化方法进行计算。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明先对样品进行热裂解，再利用高效液相色谱法得到色谱数据，通过对该色谱数据进行分析、计算，测定得到的穿心莲片中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量结果准确、可靠，且试验时间短，精密度高、所需样品量少，实现了穿心莲片中有效成分含量的快速和准确检测，适用于穿心莲片的质量控制。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
本发明实施例中，一种穿心莲片中有效成分含量的检测方法，包括以下步骤：
（1）取穿心莲片10片，除去包衣，研细，得穿心莲粉末；用十万分之一分析天平精确称取穿心莲粉末0.1g得样品，将样品放入热解杯中；
（2）对样品进行快速热解，热解温度为90℃，热解时间为4min，得到热解后的样品；
（3）往热解后的样品中加入10ml甲醇，称定重量，经DD80型超声脱气机超声脱气处理后放凉，用甲醇补足至原重量，摇匀后过滤，得供试品溶液；甲醇为一级色谱纯（产地：天津四友精细化学品有限公司出品），超声脱气处理功率为285W，频率为35kHz，时间为32min；
（4）采用高效液相色谱法对供试品溶液进行测定；LC-10ATvp日本岛津高效液相色谱仪，SPD-10Avp紫外检测器，美国制造P/N（7725i）手动进样器，浙江大学N-2000数据工作站，柱温箱；高效液相色谱的工作条件为：色谱柱选用十八烷基硅烷键合硅胶柱，尺寸为4.60×250mm，填料粒径为5μm；流动相由流动相A、流动相B和流动相C按照一定的体积百分比组成，其中流动相A为0.1%甲酸，流动相B为乙腈，流动相C为双蒸水，采用梯度洗脱程序：0～3min，A、40%，B、40%，C、20%；3～8min，A、25%，B、65%，C、10%；8～12min，A、65%，B、25%，C、10%；流速0.65ml/min；柱温42℃；进样量10μL；甲酸、乙腈均为分析纯试剂；
（5）根据测定的色谱数据，采用NIST软件的自动匹配计算定性样品中有效成分的色谱峰，并采用面积归一化方法进行计算获得样品中有效成分的相对含量。
1、精密度试验
取同一份样品溶液，连续进样6次，计算穿心莲内酯峰面积的RSD＝0.48%，脱水穿心莲内酯的峰面积RSD＝0.29%，表明该方法精密度良好。
2、稳定性试验
取供试品溶液，于0、2、4、8、l2、24h测定。结果24h内穿心莲内酯的峰面积RSD＝0.47%（n＝6），脱水穿心莲内酯的峰面积RSD＝0.29%（n＝6），表明本品稳定性良好。
3、重现性试验
取同一批样品粉末6份，按上述方法测定，测得穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯的平均含量分别为23.5mg/g、49.9mg/g，RSD分别为1.12%、1.14%。
4、回收率试验
对照品溶液：各取穿心莲内酯对照品、脱水穿心莲内酯对照品（穿心莲内酯对照品、脱水穿心莲内酯对照品均从中国药物生物制品检定所购买）适量，加甲醇制成含穿心莲内酯16.7g/ml和脱水穿心莲内酯10.1g/ml的对照品混合溶液，即得。
取上述已知含量的样品粉末0.05g，精密称定，精密加入穿心莲内酯对照品溶液（0.84mg/ml）1ml，脱水穿心莲内酯对照品溶液（1.03mg/ml）2ml，同法处理，按上述色谱条件进样，分别于272nm、288nm处测定吸收度，穿心莲内酯平均回收率为99.93%，RSD为1.02%，脱水穿心莲内酯平均回收率为99.63%，RSD为1.13%。
对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。
此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。