一种提高土贝母中有效成分含量及抗氧化活性的处理方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于药用植物产地加工技术领域，具体涉及一种提高土贝母中有效成分含 量及抗氧化活性的处理方法。
【背景技术】
[0002] 土贝母为萌芦科Cucurbitaceae植物土贝母Bolbostemma paniculatum (Maxim.) Franquet的干燥块茎，含有糖类、皂苷和蒽醌等成分，具有显著的抗病毒、抗肿瘤等活性。土 贝母肉质多汁，目前产区多使用以下4种方法对其进行前处理，一种按照药典所记载的采 挖后"洗净，掰开，煮至无白心，取出，晒干"；第二种为"洗净，掰开，放蒸笼中蒸透，取出，晒 干。"除此之外，将新鲜土贝母鲜品置烘箱内烘烤至干燥或置于通风干燥处自然晾干也是常 用的前处理方法。土贝母鲜品在加工之前，其生理作用依然活跃，块茎中的氧化酶、水解酶 等并未丧失活性，会影响其中有效成分的含量，但经过以上处理后，其相关酶活性丧失，有 效成分含量有所降低，大大影响药材质量。
【发明内容】
[0003] 为了克服上述现有技术的不足，本发明的目的是提供一种提高土贝母中有效成分 含量及抗氧化活性的处理方法，在不改变药用植物原产地、种植方式及炮制加工等方法的 情况下，在传统的蒸、煮、烘干、阴干等产地加工之前对土贝母新鲜块茎增加 UV-B辐射，以 提高其还原糖、土贝母苷甲、大黄素的含量及其抗氧化活性，为土贝母产地加工过程中提高 药材质量提供方法，具有方便易行、效果良好、有效避免产地限制等特点。
[0004] 为了实现上述目的，本发明采用的技术方案是： 一种提高土贝母中有效成分含量及抗氧化活性的处理方法，包括以下步骤： 1) 将土贝母新鲜块茎洗净、分瓣，晾去外表水分； 2) 采用0?100 kj/m2剂量紫外线（UV-B)辐射，依辐射剂量计算公式计算连续照射时 间，照射0?400 min ; 3) 采用0. 13 mm厚度的醋酸纤维素膜滤去紫外灯（UV-B)中的少量短波紫外线（UV-C); 4) 处理结束后放置于室温下（18?25°C)，遮光保存0?20天后取出，依照药典方法 煮至无白心，0?100°c干燥； 5) 进行还原糖含量、土贝母苷甲含量、大黄素含量及其抗氧化活性的抽样测定。
[0005] 所述的紫外线（UV-B)辐射剂量为20 kj/m2或40 kj/m2或80 kj/m2或100 kj/m2。
[0006] 所述的照射时间为72 min或142 min或282 min或353 min。
[0007] 所述的遮光保存时间为0天或5天或10天或15天或20天，保存温度为20°C。
[0008] 所述的干燥温度为80°C。
[0009] 与现有技术相比，本发明的有益效果是： 经本发明的处理方法处理后，采用高剂量（100 kj/m2) UV-B辐射的土贝母与未处理土 贝母相比，土贝母中还原糖含量升高60. 17%，大黄素含量升高209. 60% (p〈0. 001)，土贝母 苷甲含量增加15. 02?40. 04% (ρ〈0· 01)。采用1，6-双（二苯基膦基）己烷（DPPH)法、铁 氰化钾还原法考察了土贝母乙醇提取物经紫外线（UV-B)辐射后其还原能力及清除DPPH自 由基能力，处理过土贝母的抗氧化活性高于未处理土贝母，与传统处理方法相比，有效增加 了还原糖、土贝母苷甲、大黄素的含量及其抗氧化活性，提高了药材质量，为土贝母的产地 加工提供了有效的技术方法，具有可实施性强，方便易行、效果良好、有效避免产地限制的 特点。
【具体实施方式】
[0010] 以下结合具体实施对本发明作进一步的详细说明； 根据实验发现，100 kj/m2的紫外辐射对土贝母块茎中有效成分及其抗氧化活性的影 响最大，因此本【具体实施方式】以100 kj/m2的紫外辐射为实施例作以下描述； 实施例1 一种提高土贝母中有效成分含量及抗氧化活性的处理方法，包括以下步骤： 1) 将土贝母新鲜块茎洗净、分瓣，晾去外表水分； 2) 采用100 kj/m2剂量紫外线（UV-B)辐射；根据辐射剂量计算公式连续照射353 min ; 3) 采用0. 13 mm厚度的醋酸纤维素膜滤去紫外（UV-B)灯中的少量短波紫外线（UV-C); 4) 处理结束后放置于20°C下，不经过储存，依照药典方法煮至无白心，80°C干燥。
[0011] 5)进行还原糖含量、土贝母苷甲含量、大黄素含量及其抗氧化活性的测定。
[0012] ①还原糖含量测定 参照《植物生理学实验指导》（邹奇，2001)中还原糖含量测定方法，对土贝母样品中的 还原糖含量进行测定。以吸光度为纵坐标，葡萄糖质量为横坐标，绘制标准曲线，得到线性 回归方程：y=〇. 2076X-0. 0002, r=0. 9995。
[0013] ②土贝母苷甲含量测定 制备2 mg/mL 土贝母苷甲的甲醇对照品溶液。取土贝母药材粉末(过三号筛）约I g， 75%乙醇水浴回流提取2次，每次60 min，制备供试品溶液。色谱条件：流动相：乙腈-0. 1% 磷酸水（30: 70)，波长：210 nm，流速：0.8 mL/min，进样量：10μ1。
[0014] ③大黄素含量测定 制备0.1 mg/mL大黄素的甲醇对照品溶液。精密称定药材粉末(过三号筛)约I g，95% 乙醇超声提取2次，每次30 min，制备供试品溶液。色谱条件：流动相：甲醇-0.1%磷酸水 (75:25)，波长：254 nm，流速：1 mL/min，进样量：10μ1。
[0015] ④抗氧化活性测定 (1)清除1，6-双（二苯基膦基）己烷（DPPH)自由基能力 取I. 0 ml待测溶液与3. 0 mLl，6-双（二苯基膦基）己烷（DPPH)乙醇溶液（0· I mM， 0.4 mg/mL)依次加入具塞试管中，混合均匀，室温静置20 min，在517 nm波长处测定吸光 值，以维生素 C (VC)为阳性对照。DPPH清除率（%) = [1- (As - Ab)/A0]/100,其中As为样 品吸光值，Ab为样品本底吸光值，AO为未辐射组阴性对照值。
[0016] (2)还原能力的测定 取I mL待测液，分别加入2. 5 mL磷酸盐缓冲液（0. 2 M，pH 6. 6)及2. 5 mLl% (w/v)的 铁氰化钾溶液，混合均匀。混合物在50°C水浴中保持20 min，然后加入2. 5 mL10%(w/v)的 TCA终止反应，3000 r/min离心10 min，取上清液2. O mL，依次加入2. O mL蒸馏水和0. 5 mLO. l%(w/v)的三氯化铁（FeC13)溶液，混匀后于700 nm处测