一种食品中赭曲霉毒素A的检测试剂盒的制作方法

文档序号:11110017阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种食品中赭曲霉毒素A的检测试剂盒,其特征在于,包括:多孔包被板、缓冲液、赭曲霉毒素A标准品、抗赭曲霉毒素A抗体、铕标记的兔抗鼠抗体、洗涤液、发光液;所述的发光液为含有2~2.4g/L聚乙二醇600、0.16~0.18wt.%吐温-20、0.9~1.2g/L 4-碘苯硼酸、0.18~0.2g/L对碘苯酚、22~24ml/L二甲基甲酰胺、12~14g/L聚乙烯吡咯烷酮、3~5g/L乙二胺四乙酸、100~120万单位/L硫酸庆大霉素、0.5~0.55g/L过氧化氢脲、pH值9.2~9.4的0.12~0.15mol/L的三羟甲基氨基甲烷缓冲液。

2.根据权利要求1所述的食品中赭曲霉毒素A的检测试剂盒,其特征在于,所述的发光液为含有2.2g/L聚乙二醇600、0.18wt.%吐温-20、1g/L 4-碘苯硼酸、0.185g/L对碘苯酚、23ml/L二甲基甲酰胺、13g/L聚乙烯吡咯烷酮、4g/L乙二胺四乙酸、110万单位/L硫酸庆大霉素、0.52g/L过氧化氢脲、pH值9.3的0.14mol/L的三羟甲基氨基甲烷缓冲液。

3.根据权利要求1所述的食品中赭曲霉毒素A的检测试剂盒,其特征在于,所述的多孔包被板上包被有赭曲霉毒素A-甲状腺蛋白,所述的赭曲霉毒素A-甲状腺蛋白的合成步骤为:准确称取赭曲霉毒素A 324mg溶解在2mL的N,N-二甲基甲酰胺中,搅拌下逐滴加入γ-氨基丁酸溶液,搅拌反应3小时,调节反应液pH值在9.8~10.2;离心除掉沉淀物。

4.将上述反应逐滴加入甲状腺蛋白溶液中,再加入N-羟基琥珀酰亚胺23mg,N,N-二环己基碳二亚胺45.4mg,4℃反应过夜,离心除去沉淀,取上清液用磷酸缓冲液透析3天,每天更换3次透析液,将所得产物低压冻干,于-20℃保存备用。

5.根据权利要求3所述的食品中赭曲霉毒素A的检测试剂盒,其特征在于,所述的甲状腺蛋白溶液是由320mg甲状腺蛋白溶解于5mL生理盐水而得。

6.根据权利要求1所述的食品中赭曲霉毒素A的检测试剂盒,其特征在于,所述的多孔包被板为96孔包被板。

7.根据权利要求1所述的食品中赭曲霉毒素A的检测试剂盒,其特征在于,所述的赭曲霉毒素A标准品的浓度为0ng/mL、0.01ng/mL、0.025ng/mL、0.05ng/mL、0.1ng/mL、0.5ng/mL、1ng/mL、2.5ng/mL、5ng/mL、10ng/mL。

8.根据权利要求1所述的食品中赭曲霉毒素A的检测试剂盒,其特征在于,所述的缓冲液为含10mmol/L的NaCl、0.25wt.%甲状腺蛋白、20μmol/L二乙烯三胺五乙酸、0.05mL/L的吐温-80、0.08wt.%盐酸大庆霉素、pH值7.8的60mmol/L的三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液。

9.根据权利要求1所述的食品中赭曲霉毒素A的检测试剂盒,其特征在于,所述的洗涤液为含15.6mmol/L的NaCl、0.25mL/L的吐温-80、0.16wt.%盐酸大庆霉素、pH值7.8的60mmol/L的三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液。

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