抗体功能化的负载吡咯喹啉醌的中孔二氧化硅纳米颗粒的制备方法及应用与流程

文档序号:18733743发布日期:2019-09-21 00:53阅读:来源:国知局

技术特征:

1.抗体功能化的负载吡咯喹啉醌的中孔二氧化硅纳米颗粒的制备方法,其特征在于所述的制备方法为:将聚乙烯亚胺包裹的中孔二氧化硅纳米颗粒加入到将含有吡咯喹啉醌的磷酸缓冲溶液,震荡12小时左右;然后加入含有检测抗体的磷酸缓冲溶液,继续震荡反应1小时左右,离心洗涤,下层沉淀分散于磷酸缓冲溶液,于4 ℃下保存备用;使用前,用含有牛血清白蛋白的磷酸缓冲溶液稀释。

2.根据权利要求1所述的抗体功能化的负载吡咯喹啉醌的中孔二氧化硅纳米颗粒的制备方法,其特征在于:所述的聚乙烯亚胺包裹的中孔二氧化硅纳米颗粒采用以下方法制备:

A:中孔二氧化硅纳米颗粒的制备:将十六烷基三甲基溴化铵溶解于超纯水中,然后加入氢氧化钠溶液,于80 ℃下搅拌反应15 min,再缓慢加入四乙氧基硅烷溶液,剧烈搅拌20 min,将得到的白色沉淀抽滤,用水和甲醇依次洗涤,再于80 ℃下干燥;干燥后的固体分散于盐酸和甲醇的混合溶液中,回流反应12小时左右,再次用水和甲醇洗涤,真空条件下60 ℃干燥,即得到中孔结构的二氧化硅纳米颗粒;

B:聚乙烯亚胺包裹的中孔二氧化硅纳米颗粒的制备:即将步骤(1)中制备得到的中孔二氧化硅纳米颗粒加入到聚乙烯亚胺水溶液中,搅拌反应12小时左右,离心洗涤,真空条件下60 ℃干燥。

3.抗体功能化的负载吡咯喹啉醌的中孔二氧化硅纳米颗粒的应用,其特征在于:所述的抗体功能化的负载吡咯喹啉醌的中孔二氧化硅纳米颗粒用于抗原检测。

4.根据权利要求3所述的抗体功能化的负载吡咯喹啉醌的中孔二氧化硅纳米颗粒的应用,其特征在于:用于抗原检测的具体方法步骤为:向链霉亲和素功能化的磁球中加入含生物素功能化的抗原的捕获抗体的磷酸缓冲溶液,反应30~60分钟,采用磁铁进行分离,用磷酸缓冲溶液洗涤,弃掉上层清液,下层沉淀分散于磷酸缓冲溶液;然后加入含抗原的磷酸缓冲溶液,混合震荡,孵育;磁力分离和洗涤,下层沉淀分散于磷酸缓冲溶液,再加入检测抗体功能化的负载吡咯喹啉醌的中孔二氧化硅纳米颗粒和牛血清白蛋白混合溶液,震荡反应;磁力分离和洗涤,下层沉淀分散于含三(2-羧乙基)膦和三价铁离子-菲嗪络合物的磷酸缓冲溶液,用肉眼观察溶液颜色变化或者用紫外可见分光光度计测定溶液在562 nm处的吸收值。

5.根据权利要求3所述的抗体功能化的负载吡咯喹啉醌的中孔二氧化硅纳米颗粒的应用,其特征在于:所述的抗体功能化的负载吡咯喹啉醌的中孔二氧化硅纳米颗粒用于前列腺特异抗原的检测,具体检测方法为:向链霉亲和素功能化的磁球中加入含生物素功能化的前列腺特异性抗原的捕获抗体的磷酸缓冲溶液,反应30~60分钟,采用磁铁进行分离,用磷酸缓冲溶液洗涤,弃掉上层清液,下层沉淀分散于磷酸缓冲溶液;取制备的捕获抗体修饰的磁球,加入含前列腺特异性抗原的磷酸缓冲溶液,混合震荡,孵育30分钟;磁力分离和洗涤,加入检测抗体功能化的负载吡咯喹啉醌的中孔二氧化硅纳米颗粒和牛血清白蛋白混合溶液,所述的检测抗体功能化的负载吡咯喹啉醌的中孔二氧化硅纳米颗粒中的抗体为前列腺特异性抗原的抗体,震荡反应30分钟;磁力分离和洗涤两次,下层沉淀分散于含三(2-羧乙基)膦和三价铁离子-菲嗪络合物的磷酸缓冲溶液,用肉眼观察溶液颜色变化,或者用分光光度计测定溶液在562 nm处的吸收值。

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