量的试剂条，包括基板和滤纸片，通过如下步骤制备得到：
[0049] 步骤1)配置A液：每1000血的A液中分别加入200g的目-甘油磯酸二轴、2. 5g 的巧樣酸轴、1. 2g的硫酸铜和0. Ig的聚己帰化咯焼丽，用去离子水定容，在定容时，可通过 滴加盐酸来控制A液的抑=6?7 ;
[0050] 步骤。配置B液海1000血的B液中分别加入1. 2g的3, 3'，5, 5' -四甲基联苯 胺、80g的无水己醇、2. 6g的8-轻基唾晰和4g的聚己帰化咯焼丽，用氯仿定容；
[0051] 步骤3)将滤纸片浸入A液中，充分浸泡后取出，置于温度为6(TC的真空干燥箱中 干燥，干燥时间为5分钟；
[0052] 步骤4)将滤纸片浸入B液中，充分浸泡后取出，置于温度为4(TC的真空干燥箱中 干燥，干燥时间为3分钟；
[0053] 步骤5)将干燥后的滤纸片与基板固定，裁成矩形纸条，制成检测尿液中肌酢含量 的试剂条。
[0054] 对比例2
[0055] -检测尿液中肌酢含量的试剂条，包括基板和滤纸片，通过如下步骤制备得到：
[0056] 步骤1)配置A液：每1000血的A液中分别加入250g的Tris缓冲液、3. 5g的巧 樣酸轴、2. Og的硫酸铜和0. 5g的聚己二醇，用去离子水定容，在定容时，可通过滴加盐酸来 控制A液的抑=6?7 ;
[0057] 步骤。配置B液海1000血的B液中分别加入1. 8g的3, 3'，5, 5' -四甲基联苯 胺、120g的无水己醇、3. 2g的8-轻基唾晰、3g的过氧化氨异丙苯和8g的聚己二醇，用氯仿 定容；
[0058] 步骤3)将滤纸片浸入A液中，充分浸泡后取出，置于温度为8(TC的真空干燥箱中 干燥，干燥时间为20分钟；
[0059] 步骤4)将滤纸片浸入B液中，充分浸泡后取出，置于温度为6(TC的真空干燥箱中 干燥，干燥时间为10分钟；
[0060] 步骤5)将干燥后的滤纸片与基板固定，裁成矩形纸条，制成检测尿液中肌酢含量 的试剂条。
[00川对比例3
[0062] 一检测尿液中肌酢含量的试剂条，包括基板和滤纸片，通过如下步骤制备得到：
[0063] 步骤1)配置A液：每1000血的A液中分别加入250g的Tris缓冲液、3. 5g的巧 樣酸轴、2. Og的硫酸铜和0. 5g的聚己二醇，用去离子水定容，在定容时，可通过滴加盐酸来 控制A液的抑=6?7 ;
[0064] 步骤。配置B液海1000血的B液中分别加入1. 8g的3, 3'，5, 5' -四甲基联苯 胺、120g的无水己醇、3. 2g的8-轻基唾晰和8g的聚己二醇，用氯仿定容；
[0065] 步骤3)将滤纸片浸入A液中，充分浸泡后取出，置于温度为8(TC的真空干燥箱中 干燥，干燥时间为20分钟；
[0066] 步骤4)将滤纸片浸入B液中，充分浸泡后取出，置于温度为6(TC的真空干燥箱中 干燥，干燥时间为10分钟；
[0067] 步骤5)将干燥后的滤纸片与基板固定，裁成矩形纸条，制成检测尿液中肌酢含量 的试剂条。
[006引 实施例4
[0069] 标准比色卡的制备方法：
[0070] (1)配置 0mmol/L、4. 4mmol/L、8. 8mmol/L、17. 6mmol/L、26. 4mmol/L 的肌酢标准溶 液；
[0071] (2)将上述实施例1?3制备好的检测试剂条分别浸于上述的五种肌酢标准溶液 中，2砂钟后取出，赔干，1分钟后显色完全；
[0072] (3)根据各试纸的显色情况制备比色卡，比色卡的色阶为无色到深蓝色的5个色 阶。
[007引 实施例5
[0074] 试剂条的使用方法：
[00巧]将实施例1?3制备好的试剂条浸入待测液中，2砂钟后取出，瞭干，1分钟后显色 完全，随后与标准比色卡进行比较，与试剂条上颜色最接近的标准比色卡上的颜色所对应 的浓度即为待测液的浓度，如果在两个色阶之间，则可估读肌酢浓度。
[0076] 实施例6
[0077] 尿液肌酢检测试剂条在仪器上的使用方法：
[0078] (1)配置 0mmol/L、4. 4mmol/L、8. 8mmol/L、17. 6mmol/L、26. 4mmol/L 的肌酢标准溶 液；
[0079] (2)将实施例1?3制备好的试剂条分别浸于上述的五种肌酢标准溶液中；
[0080] (3)使用尿液分析仪测定1分钟的反射率，根据5个点绘制标准曲线；
[0081] (4)使用时，将按照实施例制备好的试剂条浸入待测液中取出，1分钟后使用尿液 分析仪测定反射率，测得的反射率与标准曲线上对应的浓度即为待测液肌酢浓度。
[0082] W下是实施例1?3与对比例1?3在不同浓度的肌酢标准液中的显色变化程度、 显色完全所用去的显色时间及常温胆存下的最久保质期：
[0083]
【主权项】
1. 一种检测尿液中肌酐含量的试剂条，包括基板和滤纸片，所述滤纸片附着在所述基 板上,所述滤纸片中依次浸入有A液和B液，其中： 每IOOOmL所述A液包含：200?250g的β -甘油磷酸二钠、2. 5?3. 5g的柠檬酸钠、 1. 2?2. Og的硫酸铜和0. 1?0. 5g的表面活性剂，并用去离子水定容； 每IOOOmL所述B液包含：1. 2?I. 8g还原性色原、80?120g的无水乙醇、2. 6?3. 2g 的抗氧化剂、2?3g的过氧化物和4?8g的表面活性剂，并用氯仿定容。
2. 根据权利要求1所述的检测尿液中肌酐含量的试剂条，其特征在于，所述抗氧化剂 选自8-羟基喹啉、2-羟基喹啉、8-甲基喹啉或其组合，所述还原性色原是3, 3'，5, 5'-四甲 基联苯胺。
3. 根据权利要求1所述的检测尿液中肌酐含量的试剂条，其特征在于，向所述A液中滴 加盐酸，并使得所述A液的pH = 6?7。
4. 根据权利要求1所述的检测尿液中肌酐含量的试剂条，其特征在于，所述基板材质 是聚氯乙烯树脂，或是聚丙烯，或是聚甲基丙烯酸甲酯。
5. 根据权利要求1所述的检测尿液中肌酐含量的试剂条，其特征在于，所述表面活性 剂选自聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇或其组合。
6. 根据权利要求1所述的检测尿液中肌酐含量的试剂条，其特征在于，所述过氧化物 选自过氧化氢异丙苯、过氧化氢二异丙苯、叔丁基过氧化氢或其组合。
7. -种如权利要求1?6中任一检测尿液中肌酐含量的试剂条的制备方法，其特征在 于，包括如下步骤： 步骤1)配置A液：每IOOOmL的A液中分别加入200?250g的β -甘油磷酸二钠、 2. 5?3. 5g的柠檬酸钠、1. 2?2. Og的硫酸铜和0. 1?0. 5g的表面活性剂，用去离子水定 容； 步骤2)配置B液：每IOOOmL的B液中分别加入1. 2?I. 8g还原性色原、80?120g的 无水乙醇、2. 6?3. 2g的抗氧化剂、2?3g的过氧化物和4?8g的表面活性剂，用氯仿定 容； 步骤3)将滤纸片浸入A液中，充分浸泡后取出，置于温度为60?80°C的真空干燥箱中 干燥，干燥时间为5?20分钟； 步骤4)将滤纸片浸入B液中，充分浸泡后取出，置于温度为40?60°C的真空干燥箱中 干燥，干燥时间为3?10分钟； 步骤5)将干燥后的滤纸片与基板固定，裁成矩形纸条，制成检测尿液中肌酐含量的试 剂条。
8. 根据权利要求7所述的检测尿液中肌酐含量的试剂条的制备方法，其特征在于，还 包括在步骤1)中通过滴加盐酸使得所述A液的pH = 6?7。
9. 根据权利要求7所述的检测尿液中肌酐含量的试剂条的制备方法，其特征在于，所 述抗氧化剂选自8-羟基喹啉、2-羟基喹啉、8-甲基喹啉或其组合，所述还原性色原是3, 3'， 5,5' -四甲基联苯胺，所述过氧化物选自过氧化氢异丙苯、过氧化氢二异丙苯、叔丁基过氧 化氢或其组合。
10. 根据权利要求7所述的检测尿液中肌酐含量的试剂条的制备方法，其特征在于，所 述表面活性剂选自聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇或其组合。
【专利摘要】本发明公开了一种检测尿液中肌酐含量的试剂条及其制备方法，该试剂条包括基板和滤纸片，滤纸片中依次浸入有A液和B液，其中：A液包含：β-甘油磷酸二钠、柠檬酸钠、硫酸铜和表面活性剂，去离子水定容；B液包含：还原性色原、无水乙醇、抗氧化剂、过氧化物和表面活性剂，氯仿定容。本案通过在体系中增加了抗氧化剂，降低了试剂条的假阳性率，同时使得试剂条能够长期保存不失效；改用β-甘油磷酸二钠替代Tris缓冲液体系，并将体系pH值控制在6～7之间，同时引入了过氧化物，使得该试剂条对肌酐的显色反应变得十分灵敏，显色迅速分明，且在不同浓度的肌酐中试剂条颜色的渐变差异明显，有利于对操作者的目视判断和机读判断。
【IPC分类】G01N21-78
【公开号】CN104568931
【申请号】CN201410810764
【发明人】白鹏利, 尹焕才
【申请人】中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
【公开日】2015年4月29日
【申请日】2014年12月24日