片，包薄膜衣或糖衣，即得。
[0211] 实施例2
[0212] 本发明所述的祖师麻制剂的有效成分测定方法，包括以下步骤：
[0213] 1)对照品溶液的制备取祖师麻甲素、7-羟基香豆素对照品适量，精密称定，加85 % 甲醇制成每lml含祖师麻甲素0.1mg、7-羟基香豆素20yg的混合溶液，即得。2)供试品溶液的 制备取本品20片，除去包衣，精密称定，研细，取约0.6g，
[0214]精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入85 %甲醇50ml，密塞，称定重量，超声处理 (功率500W，频率40kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用85%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤 过，取续滤液，即得。
[0215] 3)测定法精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ1，注入液相色谱仪，测定，得到 色谱图，根据色谱图计算供试品中相应成分的含量。
[0216] 其中，色谱条件如下：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇为流动相Α，以 0.1 %冰醋酸溶液为流动相Β，按下表中的规定进行梯度洗脱;检测波长327nm。理论板数按 祖师麻甲素峰计算应不低于4000。
[0217] 梯度洗脱表
[0218]
[0220] 实施例3
[0221] 祖师麻制剂的鉴别方法，所述方法，包括以下步骤：
[0222] 1)取祖师麻片剂2片，除去包衣，研细，置具塞锥形瓶中，加甲醇25ml，超声处理20 分钟，滤过，滤液浓缩至约lml，作为供试品溶液。
[0223] 2)取祖师麻对照药材lg，同法制成对照药材溶液。
[0224] 3)再取祖师麻甲素对照品，加甲醇制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液。
[0225] 4)照薄层色谱法(《中国药典》2010年版一部附录VIB)试验，吸取上述三种溶液各2 ~5μ1，对照提取物溶液5μ1，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷-丙酮-冰醋酸 (7:1:0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光(254nm)下检视。供试品色谱中，在与对照 品色谱相应的位置上，显一个相同颜色的主斑点；在与对照药材色谱相应的位置上，显相同 颜色的主斑点
[0226] 实施例4、
[0227] 祖师麻药材的指纹图谱建立方法，所述方法，包括以下步骤：
[0228] 1)取祖师麻对照药材2g，加水煎煮1小时，滤过，滤液浓缩至约10ml，加甲醇使成为 70 %的甲醇溶液，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
[0229] 2)测定法精密吸取续滤液10μ1，注入液相色谱仪，测定，得到色谱图。
[0230] 其中，色谱条件如下：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇为流动相A，以 0.1 %冰醋酸溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱;检测波长327nm。理论板数按 祖师麻甲素峰计算应不低于4000。
[0231 ]梯度洗脱表
[0232]
[0233] 经过不同批次，10次以上的测定，经过处理得到一种呈现八个特征峰的标准指纹 图谱(图19)。
【主权项】
1. 一种祖师麻制剂的有效成分测定方法，包括以下步骤： 1) 对照品溶液的制备：取祖师麻甲素、7-羟基香豆素对照品，制成含祖师麻甲素、7-羟 基香豆素的混合溶液； 2) 供试品溶液的制备:取祖师麻片，研细，加入溶剂超声处理，滤过，得到续滤液； 3) 测定法:取对照品溶液与供试品溶液，注入液相色谱仪，得到色谱图，根据色谱图计 算供试品中相应成分的含量； 其中，色谱条件如下：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇为流动相A，以O . 1 % 冰醋酸溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱;检测波长327nm。理论板数按祖师麻 甲素峰计算应不低于4000; 梯度洗脱表2. 根据权利要求1所述的有效成分测定方法，包括以下步骤： 1) 对照品溶液的制备:取祖师麻甲素、7-羟基香豆素对照品适量，精密称定，加80-90% 甲醇制成每〇. 5-2ml含祖师麻甲素0.08-0.12mg、7-羟基香豆素18-22yg的混合溶液，即得； 2) 供试品溶液的制备:取祖师麻片18-22片，除去包衣，研细，取0.55-0.65g，精密称定， 置具塞锥形瓶中，精密加入80-90 %甲醇45-55ml，密塞，称定重量，超声处理25-35分钟，放 冷，再称定重量，用80-90%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得； 3) 测定法精密吸取对照品溶液与供试品溶液各8-12μ1，注入液相色谱仪，得到色谱图， 根据色谱图计算供试品中相应成分的含量。3. 根据权利要求1所述的有效成分测定方法，包括以下步骤： 1) 对照品溶液的制备：取祖师麻甲素、7-羟基香豆素对照品适量，精密称定，加85%甲 醇制成每1ml含祖师麻甲素0.1mg、7-羟基香豆素20yg的混合溶液，即得； 2) 供试品溶液的制备:取本品20片，除去包衣，精密称定，研细，取约0.6g，精密称定，置 具塞锥形瓶中，精密加入85 %甲醇50ml，密塞，称定重量，超声处理30分钟，其功率500W，频 率40kHz，放冷，再称定重量，用85%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得； 3) 测定法精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ1，注入液相色谱仪，测定，得到色谱 图，根据色谱图计算供试品中相应成分的含量。4. 一种祖师麻制剂的鉴别方法，所述方法，包括以下步骤： 1) 取祖师麻片剂2片，除去包衣，研细，置具塞锥形瓶中，加甲醇25ml，超声处理20分钟， 滤过，滤液浓缩至约Iml，作为供试品溶液； 2) 取祖师麻对照药材lg，研细，置具塞锥形瓶中，加甲醇25ml，超声处理20分钟，滤过， 滤液浓缩至约Iml，制成对照药材溶液； 3) 再取祖师麻甲素对照品，加甲醇制成每1ml含Img的溶液，作为对照品溶液； 4) 照薄层色谱法(《中国药典》2010年版一部附录VIB)试验，吸取上述三种溶液各2~5μ 1，对照提取物溶液5μ1，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷-丙酮-冰醋酸(7:1: 0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光(254nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱 相应的位置上，显一个相同颜色的主斑点；在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的 主斑点。5. -种祖师麻药材的指纹图谱建立方法，所述方法，包括以下步骤： 1) 取祖师麻对照药材，加水煎煮，滤过，滤液浓缩，加甲醇使成为甲醇溶液，摇匀，滤过， 取续滤液，即得； 2) 测定取取续滤液，注入液相色谱仪，得到色谱图。 其中，色谱条件如下：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇为流动相A，以0.1 % 冰醋酸溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱;检测波长327nm。理论板数按祖师麻 甲素峰计算应不低于4000， 梯度洗脱表6. 根据权利要求5所述的指纹图谱建立方法，所述方法，包括以下步骤： 1) 取祖师麻对照药材1.8-2.2g，加水煎煮0.5-2小时，滤过，滤液浓缩至约8-12ml，加甲 醇使成为65-75 %的甲醇溶液，摇匀，滤过，取续滤液，即得； 2) 测定法吸取续滤液8-12μ1，注入液相色谱仪，得到色谱图。7. 根据权利要求5所述的指纹图谱建立方法，所述方法，包括以下步骤： 1) 取祖师麻对照药材2g，加水煎煮1小时，滤过，滤液浓缩至约IOml，加甲醇使成为70 % 的甲醇溶液，摇匀，滤过，取续滤液，即得； 2) 测定法精密吸取续滤液10μ1，注入液相色谱仪，测定，得到色谱图。8. 根据权利要求5所述的指纹图谱建立方法，所述的指纹图谱，可以用于评价药材的质 量。9. 根据权利要求1所述的有效成分测定方法，经过检测，每片含祖师麻以祖师麻甲素 (CgH6〇4)计，不得少于2. Omg;含7-羟基香豆素(CgH6〇3)计，不得少于0.30mg。
【专利摘要】本发明公开了一种祖师麻制剂的有效成分测定方法，包括以下步骤：1)对照品溶液的制备：取祖师麻甲素、7-羟基香豆素对照品，制成含祖师麻甲素、7-羟基香豆素的混合溶液；2)供试品溶液的制备：取祖师麻片，研细，加入溶剂超声处理，滤过，得到续滤液；3)测定法：取对照品溶液与供试品溶液，注入液相色谱仪，得到色谱图，根据色谱图计算供试品中相应成分的含量。
【IPC分类】G01N30/34, G01N30/90, G01N30/02
【公开号】CN105424830
【申请号】CN201510765998
【发明人】张旭, 张仲毅, 赵相友, 韩龙, 唐飞, 方向伟
【申请人】秦皇岛市山海关药业有限责任公司
【公开日】2016年3月23日
【申请日】2015年11月11日