用于处理多份细胞悬液的自动化方法与自动化设备的制造方法_3

文档序号:9756711阅读:来源:国知局
吸收片之间。将多个倾析阱36装载在夹具46中。如文件W02009/000999中所描述的,倾析夹具46被安装在板6的上方,以使得每个倾析阱36位于分析载玻片32的上方。
[0080]之后将板6装载到自动化设备2中。
[0081]与将板6装载到自动化设备2中的步骤并行或随后的是,技术人员或使用者将至少与所具有的瓶4一样多的中间容器20插入到每个插接座18中,所所述瓶4由每块接纳板6所承载。之后将插接座18装载到自动化设备2的离心分离机60中。
[0082]使吸取装置24在容纳有待处理的细胞溶液的瓶4上方移动。吸取装置24的针或吸液管26于是对瓶4内的细胞悬液的样本进行提取。
[0083]之后使吸取装置24在中间容器20上方移动,以将样本倾注/放置到中间容器20中,换言之,将样本倾注/放置到图2的示例性实施例中的微型阱22中。
[0084]之后通过细胞处理装置50对来自容纳在中间容器20中的细胞悬液的样本执行细胞处理操作。在图2的示例性实施例中,细胞处理操作是对容纳在中间容器20中的细胞悬液进行细胞染色。替代地,细胞处理操作是对容纳在中间容器20中的细胞悬液的细胞生物标志物进行标记。
[0085]优选地,这种对来自细胞悬液的样本的细胞处理步骤本身是以十一个子步骤来达成的,对于这十一个子步骤而言,其中的某些子步骤是可选的。
[0086]在第一子步骤期间,吸取装置24在清洗容器上方移动,以对容器中的清洗流体进行取样。之后使吸取装置24在容纳有细胞悬液样本的中间容器20上方移动。
[0087]在第二子步骤期间,吸取装置24将清洗流体倾注到中间容器20中,中间容器20位于图1与图2的示例性实施例中的离心分离机60内部。
[0088]在第三子步骤期间,离心分离装置54完成对容纳在中间容器20中的细胞悬液的离心分离,以将该细胞悬液分离为多个相。
[0089]在第四子步骤期间,使吸取装置24在中间容器20上方移动。之后吸取装置24取样出一定体积的细胞溶液(称为“上清液”体积)。之后将该“上清液”体积倾注到未示出的容器中。替代地,该“上清液”体积是通过将中间容器20倾斜来撷取的,该倾斜是例如按照大约90度的角度来倾斜,该倾斜使得“上清液”量能够被倾注到未示出的容器中。该步骤具有清洗与保存中间容器20中的所选定的细胞悬液的目的,以便为了对该细胞悬液进行处理。
[0090]根据第五子步骤,将处理流体施加到容纳在中间容器20中的细胞悬液样本。更具体地,根据本发明的第一实施例,使吸取分配装置24在处理容器上方移动,以采样出处理容器中的一些处理流体。之后使吸取分配装置24在中间容器20上方移动,并且将处理流体倾注到中间容器20中。在图2的示例性实施例中,吸取装置24的至少一根吸液管26对处理溶液进行取样并且将该处理溶液倾注到中间容器20中,该处理溶液包括至少一种染色剂或者细胞标记物。
[0091]在第六子步骤期间,离心分离装置54完成对容纳在中间容器20中的细胞悬液的离心分离,以将该细胞悬液分离为多个相。
[0092]在第七子步骤期间,使吸取装置24在中间容器20上方移动。之后吸取装置24对取样出细胞溶液的“上清液”体积。之后将该“上清液”体积倾注到未示出的容器中。替代地,该“上清液”体积是通过将中间容器20倾斜来撷取的,该倾斜是例如按照大约90度的角度来倾斜,该倾斜使得“上清液”体积能够倾注到未示出的容器中。
[0093]在第八子步骤期间,吸取装置24在清洗容器上方移动,以对该容器中的清洗流体进行取样。之后使吸取装置24在容纳有已染色的或已标记的细胞悬液样本的中间容器20上方移动。
[0094]在第九子步骤期间,吸取装置24将清洗流体倾注到中间容器20中。
[0095]在第十子步骤期间,离心分离装置54完成对容纳在中间容器20中的细胞悬液的离心分离,以将该细胞悬液分离为多个相。
[0096]在第十一子步骤期间,使吸取装置24在中间容器20上方移动。之后吸取装置24取样出细胞溶液的“上清液”体积,并且之后将该“上清液”体积倾注到未示出的容器中。
[0097]替代地,对来自细胞悬液的样本的细胞处理步骤不包括第二、第四、第十和/或第十一子步骤。
[0098]之后,对在中间容器20中经过处理的细胞悬液的样本的提取由吸取分配装置24完成。更为具体地,使吸取分配装置24在容纳有待分析的细胞溶液的中间容器20上方移动。吸取装置24的针或吸液管26之后完成对中间容器20内的细胞悬液的样本的提取。在未示出的替代方案中,在完成对中间容器20中的细胞悬液的样本的提取之前,吸取分配装置24首先取样出一定体积的容纳在容器中的细胞粘附剂,该容器为此目的而被放置在自动化设备2中。
[0099]之后使吸取装置24在倾析阱36上方移动,以将样本倾注/沉积在倾析室中,并且产生包括待分析的扩散细胞的分析载玻片32。该细胞扩散由如文件W02009/000999中所描述的倾析阱中的样本的沉积导致,并且本领域技术人员可参考该文件。
[0100]于一段时间内在载玻片32上进行倾析以制备分析载玻片,所述一段时间例如大致介于5分钟到60分钟之间,并且优选地等于15分钟。
[0101]针对每个待分析的瓶4,重复用于提取和处理样本的步骤以及用于制成载玻片的步骤。
[0102]通过细胞处理装置50,根据本发明的第一实施例的自动化设备尤其能够执行单色或多色的细胞染色处理操作。
[0103]根据本发明的自动化设备使得进一步能够对涂片化验和其它细胞薄层取样进行自动化制备与处理。
[0104]由自动化设备2应用的用于处理细胞悬液的方法能够以统一的方法在密封的容器中对每个细胞悬液样本进行处理,因此确保了样本相对于外界环境的隔离。通过避免交叉污染,尤其是避免分析载玻片之间的交叉污染的风险,该处理能够保持所有溶液和细胞样本的完整性。
[0105]此外,与文件EP 0590506中所描述的处理方法的不同之处在于,一旦细胞悬液样本被沉积在载玻片上,就没有抽吸和/或染色操作在分析载玻片上被执行。这能够得到在两个维度上清晰的细胞扩散,由此确保了选定的要素的留存,以及对细胞扩散达成了完全的和令人满意的数字化。
[0106]因此可想到的是,根据本发明的细胞处理方法使得能够对细胞处理操作(被确保在悬液中并且不再通过扩散)进行最优化,但同样减少了分析载玻片之间的交叉污染风险,同时能够在每个分析载玻片上得到在两个维度上完全清晰的细胞沉积物,从而使用于将经处理的扩散载玻片数字化的步骤最优化。
[0107]此外,使得能够在单一的自动化设备中实现对用于制备样本、对这些样本进行细胞处理和用于准备分析载玻片的各个步骤的标准化。相比于传统的处理技术,这能够获得空间以及由此降低成本。
[0108]图1与图3示出了本发明的第二实施例,对于该第二实施例,与之前描述的第一实施例的元件相似的元件以相同的附图标记进行标识,并且因此将不再描述。
[0109]与第一实施例的不同之处在于,细胞处理装置50不再包括容纳有处理流体的容器。此外,中间容器20不再包括任何微型阱22,但是包括单元70。如图3所示,每个单元70预充注有处理流体72。在图3的示例性实施例中,处理流体72是包括至少一种着色剂或细胞标记物的溶液。<
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