图1为实验例1可溶性糖浓度与波长扫描图。
[0048]图2为实验例2不同显色剂（即蒽酮试剂)对吸光度的影响图。
[0049] 图3为实验例3不同煮沸时间对吸光度的影响图。
[0050] 图4实验例5制作的葡萄糖标准曲线。
[0051 ]图5为实验例6不同提取时间对糖提取量的影响图。
[0052]图6为实验例6不同料液比对糖提取量的影响图。
[0053]图7为实验例7不同提取方法对糖提取量的影响图。
【具体实施方式】
[0054]以下实验例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。
[0055]前期溶液的配制：
[0056] 1)葡萄糖标准溶液的配制（lmg · ml/1):在电子天平上准确称取100mg(精确到小数 点后第4位)分析纯无水葡萄糖，于1 OOmL容量瓶中加纯水溶解并定容。
[0057] 2)蒽酮试剂的配制：准确称取200mg(精确到小数点后3位）蒽酮放入烧杯中，向烧 杯中缓缓地加入l〇〇mL浓硫酸，边加边搅拌。溶解后呈黄色透明溶液，贮存于棕色瓶中。宜当 天使用当天配制，置4°C左右冰箱中保存，可使用14d。
[0058] 实施例1
[0059 ] -种成熟棉纤维中可溶性糖的测定方法，包括以下步骤：
[0060] (1)葡萄糖标准曲线的制作：
[0061 ] 配制每毫升含葡萄糖(^8、1(^8、2(^8、4(^8、6(^8、8(^8、10(^8的葡萄糖标准溶液； 将试管编号，依次将每个试管内加入lmL上述葡萄糖标准溶液，另取lmL水作为空白对照，每 一试管加入5mL蒽酮试剂，盖盖震荡，使之完全混合;在数显恒温水浴振荡器中沸水浴加热 10min，取出后在自来水中冷却；20min后，用紫外光谱仪在575nm波长处测定各溶液的吸光 度值(即0D值，光密度）；
[0062] 以吸光度值为横坐标，以葡萄糖浓度mg/mL为纵坐标，绘制葡萄糖标准曲线，其线 性回归方程为c = 0.1318x+0.0004,相关系数r = 0.9992,其中c代表葡萄糖的浓度（即可溶 性糖浓度），x代表吸光度值；
[0063] (2)样品待测液的制备：
[0064] 准确称取1.000±0.001 g已挑干净的棉样，放入50mL具塞试管中，加水50mL，反复 挤压至棉纤维完全浸湿，盖紧试管盖，在数显恒温水浴振荡器中沸水浴震荡加热60min，冷 却后加活性炭(〇.lg左右)摇匀，脱色30~40min，过滤，得样品待测液；
[0065] (3)样品待测液的测定：
[0066] 吸取步骤(2)所得样品待测液lmL，加入5mL蒽酮试剂，盖盖震荡，使之完全混合;在 沸水中加热l〇min，取出后在自来水中冷却；20min后，用紫外光谱仪在575nm波长处测定吸 光度值;同时做空白对照试验;按下式计算棉花样品含糖量： 50 mL X c
[0067] -X. = - X 100 m
[0068] 式中：
[0069] X为棉花样品含糖量，mg/g;
[0070] C为按葡萄糖标准曲线计算的可溶性糖浓度值，mg/mL;
[0071] m为棉花样品质量，g。
[0072] 所述空白对照试验是以水加蒽酮试剂作为对照样品，与样品待测液的处理方法相 同。
[0073] 实施例2
[0074] -种成熟棉纤维中可溶性糖的测定方法，与实施例1的区别仅在于样品待测液的 制备为酒精提取法。所述酒精提取法包括以下步骤:称（1.000±0.001)g已挑干净的棉样于 5〇mL具塞试管中，加入浓度为80 %的酒精30mL，置于80°C水浴中恒温振荡60min，过滤，收集 上清液，其残渣加10mL同样浓度的酒精重复提2次，合并上清液。在上清液中加入10mg活性 炭，80°C脱色30min，用80%的酒精定容至5〇11^过滤后取滤液备用。
[0075] 实施例3
[0076] -种成熟棉纤维中可溶性糖的测定方法，与实施例1的区别仅在于样品待测液的 制备为〇. 05 % Triton X-100溶液提取法。所述0.05 % Tri ton X-100溶液提取法包括以下步 骤:称（1.000±0.001)8已挑干净的棉样于具塞试管中，加入50!1^含有0.05%1^如1^-100 溶液，反复挤压至完全浸湿。浸泡30min，挤干棉样，过滤于50mL三角瓶中备用。
[0077] 实施例4
[0078] -种成熟棉纤维中可溶性糖的测定方法，与实施例1的区别仅在于样品待测液的 制备为水解提取法。所述水解提取法包括以下步骤:称（l.〇〇〇±〇.〇〇l)g已挑干净的棉样于 5〇mL具塞试管中，加50mL蒸馏水，在沸水浴中加热60min，滤出提取液20mL于50mL具塞试管 中，加5mol · L-1盐酸5mL继续在沸水浴中加热30min，冷却后，滴加一滴酚酞，用5mol · Γ1的 氢氧化钠中和至中性。
[0079] 本发明主要技术内容确定的依据
[0080] (一)方法选择
[0081 ] 1、比色方法的选择
[0082]关于棉花成熟纤维中可溶性糖含量的比色测定方法，目前应用广泛的主要有3， 5 -二硝基水杨酸比色法、苯酚硫酸法、斐林试剂比色法和蒽酮硫酸法等。
[0083] 3，5 -二硝基水杨酸比色法：3，5-二硝基水杨酸与还原糖共热后，被还原成棕红 色的氨基化合物，在一定范围内，还原糖的量和反应液的颜色强度成正比例关系，主要用于 还原糖的测定，该方法受提取背景颜色、样品中分解的氧、颜色稳定性变化的干扰，方法的 灵敏度有限。3,5 -二硝基水杨酸试剂配制好后，要在室温下放置7-10d以后才能使用，耗 时长。苯酚硫酸法:苯酚硫酸法测定糖的原理是，糖类物质与硫酸作用脱水，生成糠醛或糠 醛的衍生物，此衍生物遇苯酚能缩合成有色物质，其缺点是采用苯酚硫酸法测定时试剂反 应剧烈，液体容易溅出，苯酚易被氧化。
[0084]斐林试剂比色法：斐林试剂比色法会使次甲基蓝与空气接触被氧化，对显色有干 扰。
[0085] 蒽酮硫酸比色法：蒽酮与碳水化合物在浓硫酸作用下发生反应，产生蓝绿色的糠 醛化合物，其颜色的深浅与棉纤维中的糖分浓度存在线性关系，通过分光法或者紫外分光 法可以对其进行定量测定。该方法显色稳定、重现性好、操作简便、结果准确可靠，是目前国 内测试棉纤维含糖量的主流方法。
[0086] 因此，本发明比色方法选定蒽酮比色法。
[0087](二)试验条件的选定
[0088]实验例1最大吸收波长的选择
[0089]分别吸取葡萄糖标准溶液（lmg · mL-1)〇1111^、0.51111^、11111^、21111^、31111^、41111^、51111^，置于 50mL容量瓶中定容，配制每毫升含葡萄糖Oyg、10yg、20yg、40yg、60yg、80yg、100yg的葡萄糖 标准溶液。将试管编号，依次将每个试管内加入lmL上述标准液，另取lmL水作为空白，每一 试管加入5mL蒽酮试剂，盖盖震荡，使之完全混合。在数显恒温水浴振荡器中沸水震荡加热 lOmin，取出后在自来水中冷却。20min后，用紫外光谱仪在520~630nm波长范围进行扫描， 测出最大吸收波长为575nm，结果见图1 〇 [0090] 实验例2显色剂(即蒽酮试剂)添加量的确定
[0091 ] 向试管中各加入O.Olmg · mL-1葡萄糖标准液lmL，分别加入2mL、3mL、4mL、5mL、6mL、 7mL和9mL共7不同量的显色剂（即蒽酮试剂），每浓度做3个重复，盖盖震荡，使之完全混合。 在沸水中加热lOmin，取出后在自来水中冷却。20min后，在分光光度计上，测定各溶液的光 密度；以lmL蒸馏水为空白对照。结果见图2。由图2可以看出，随着显色剂添加量的增加，吸 光度逐渐增大，当显色剂添加量达5mL时，吸光度值最大，之后，随着添加量的增加吸光度值 反而变小并趋于稳定，因此，显色剂的最佳添加量为5mL。
[0092]实验例3沸水浴显色时间的确定
[0093]取试管18支，向试管中加入O.Olmg · ml/1葡萄糖标准液lmL及5mL蒽酮指示剂，盖盖 震荡，使之完全混合。在沸水中分别加热4111；[11、6111；[11、8111；[11、10111；[11、12111；[11、14111；[11，每个加热时 间做3个重复，取出后在自来水中冷却。20min后，在分光光度计上，测定各溶液的光密度。以 lmL蒸馏水为空白对照。结果见图3。由图3可以看出，随着煮沸时间的延长，吸光度逐渐增 大，当煮沸lOmin时，吸光度值最大，之后，随着煮沸时间的延长，吸光度值开始下降。因此， 沸水显色最佳时间为lOmin。
[009