Vi一未加标试样体积，mL;
[OHO] Co-加标用标准浓度，mg · mL-1;
[0141] Vo 一加标液体积，mL。
[0142] 表9回收率实验结果
[0143]
[0144] 实验例10与国家标准方法的比较
[0145] 对同一样品分别按实施例1方法和国家标准的方法GB/T 16258-2008《棉纤维含糖 试验方法定量法》进行棉纤维可溶性糖的提取和测定，二者结果比较相近，本方法结果略低 于国标法(表10,表11)，但差异不显著。但国标法存在如下缺点：
[0146] 1、国标使用的显色剂3,5_二羟基甲苯-硫酸溶液见光变色，容易氧化，影响测定的 准确性，还可能对环境造成危害；
[0147] 2、国标采用0.005%的脂肪酸烷醇酰胺作为糖的提取溶液，又使用0.04%脂肪酸 烷醇酰胺作为测定溶液，试剂配制繁琐，同时存放时间对脂肪酸烷醇酰胺的灵敏度有影响；
[0148] 3、样品的称取需在附有天平，能进行箱内称重，自动控温的通风式烘箱中进行，需 要进行原棉回潮率的测定，试验步骤比较繁琐，试验条件要求严格，实验的时间长，棉纺织 厂难以做到，不适用于大批量样品的测定。
[0149] 本发明采用蒽酮比色法测定可溶性糖含量，蒽酮显色稳定、重现性好、操作简便、 结果准确可靠，本测定方法采用水煮法提取可溶性糖，简化操作程序，降低测试成本，提高 了测试效率。
[0150] 表10方差分析表 [01511
[0152] 表11方差分析表
[0153]
[0154] 实验例11样品测定验证
[0155] 按照实施例1所述的提取和含量测定方法，测定了不同产地的棉花成熟纤维中可 溶性糖含量，由表12数据可以看出，不同产地的棉花中可溶性糖含量差别比较大，其中产地 为库尔勒的棉花中可溶性糖含量最高，产地为河北的含糖量最低;不同的棉区来说，新疆棉 区的含糖量最高，长江流域棉区次之，黄河流域棉区的含糖量最低。说明本方法可较好的测 定出棉纤维含糖量的差别。
[0156]表12不同产地棉花样品的含糖量 [01571
[0.
[0159]虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在 本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因 此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。
【主权项】
1. 一种棉纤维中可溶性糖的测定方法，该方法是W蔥酬试剂作为显色剂的紫外可见分 光光度测定方法，包括:葡萄糖标准曲线的制作;样品待测液的制备;样品待测液的测定。2. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述葡萄糖标准曲线的制作包括W下步 骤： 配制每毫升含葡萄糖化旨、1〇4旨、2化旨、4〇4旨、6化旨、8〇4旨、10〇4旨的葡萄糖标准溶液;将试 管编号，依次将每个试管内加入ImL上述葡萄糖标准溶液，另取ImL水作为空白对照，每一试 管加入2-lOmL蔥酬试剂，盖盖震荡，使之完全混合;沸水浴加热4-14min，取出后在自来水中 冷却;静置20min后，用紫外光谱仪在575nm波长处测定各溶液的吸光度值；W吸光度值为横 坐标，W葡萄糖浓度mg/mL为纵坐标，绘制葡萄糖标准曲线，其线性回归方程为C = ax+b，其 中C代表葡萄糖的浓度，X代表吸光度值。3. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述葡萄糖标准曲线的制作过程中：所述 蔥酬试剂的加入量为5mL，所述沸水浴加热时间为1 Omin，所述静置时间为20-60min。4. 根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述葡萄糖标准曲线其线性回归方程为C = ax+b = 0.1318x+0.0004,相关系数 r = 0.9992。5. 根据权利要求1-4任一项所述的方法，其特征在于，所述样品待测液的制备为水煮 法、酒精提取法、0.05 % Triton X-100溶液提取法或水解提取法； 所述水煮法包括W下步骤:准确称取1.000±0.001g已挑干净的棉样，放入50mL具塞试 管中，加水30-90mL，反复挤压至棉纤维完全浸湿，盖紧试管盖，95-100°C水浴震荡加热20- lOOmin，冷却后加活性炭脱色，过滤，得样品待测液； 所述酒精提取法包括W下步骤:称l.〇〇〇±〇.〇〇lg已挑干净的棉样于50mL具塞试管中， 加入浓度为80 %的酒精30mL，置于80°C水浴中恒溫振荡60min，过滤，收集上清液，其残渣加 lOmL同样浓度的酒精重复提2次，合并上清液；在上清液中加入lOmg活性炭，80°C脱色 3〇111；[]1，用80%的酒精定容至5〇1]^过滤后取滤液备用； 所述0.05 % Tri ton X-100溶液提取法包括W下步骤:称1.000 ± 0.001 g已挑干净的棉 样于具塞试管中，加入50mL含有0.05 % Tr i tonX-100溶液，反复挤压至完全浸湿；浸泡 30min，挤干棉样，过滤于50mLS角瓶中备用； 所述水解提取法包括W下步骤:称l.〇〇〇±〇.〇〇lg已挑干净的棉样于50mL具塞试管中， 加50mL蒸馈水，在沸水浴中加热60min，滤出提取液20mL于50mL具塞试管中，加5mol · 盐 酸5mL继续在沸水浴中加热30min，冷却后，滴加一滴酪献，用5mol · 1/1的氨氧化钢中和至中 性。6. 根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述水煮法样品待测液的制备过程中：加 水量为50-70mL，所述水为纯水;所述水浴震荡为沸水浴，水浴时间为60min;所述脱色为加 活性炭0.1 g左右摇匀，脱色30~40min。7. 根据权利要求1-6任一项所述的方法，其特征在于，所述样品待测液的测定包括W下 步骤:吸取样品待测液ImL，加入2-lOmL蔥酬试剂，盖盖震荡，使之完全混合;在沸水浴中加 热4-14min，取出后在自来水中冷却;静置20min后，用紫外光谱仪在575nm波长处测定吸光 度值;同时做空白对照试验;按下式计算棉花样品含糖量：式中： X为棉花样品含糖量，mg/g; C为按葡萄糖标准曲线计算的可溶性糖浓度值，mg/mL; m为棉花样品质量，g。8. 根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述样品待测液的测定过程中：所述蔥酬 试剂的加入量为5mL，所述沸水浴加热时间为lOmin，所述静置时间20-60min。9. 根据权利要求1-8任一项所述的方法，其特征在于，所述棉纤维为成熟棉纤维。10. 根据权利要求1-9任一项所述的方法，其特征在于，包括W下步骤： (1) 葡萄糖标准曲线的制作： 配制每毫升含葡萄糖Oyg、lOyg、20yg、40yg、60yg、80yg、lOOyg的葡萄糖标准溶液;将试 管编号，依次将每个试管内加入ImL上述葡萄糖标准溶液，另取ImL水作为空白对照，每一试 管加入5mL蔥酬试剂，盖盖震荡，使之完全混合;沸水浴加热lOmin，取出后在自来水中冷却； 静置20min后，用紫外光谱仪在575nm波长处测定各溶液的吸光度值；W吸光度值为横坐标， W葡萄糖浓度mg/mL为纵坐标，绘制葡萄糖标准曲线，其线性回归方程为c = 0.1318x+ 0.0004，相关系数r = 0.9992，其中C代表葡萄糖的浓度，X代表吸光度值； (2) 样品待测液的制备： 准确称取l.〇〇〇±〇.〇〇lg已挑干净的棉样，放入50mL具塞试管中，加水50mL，反复挤压 至棉纤维完全浸湿，盖紧试管盖，沸水浴震荡加热60min，冷却后加活性炭O.lg，摇匀，脱色 30~40min，过滤，得样品待测液； (3) 样品溶液的测定： 吸取步骤(2)所得样品待测液ImL，加入5mL蔥酬试剂，盖盖震荡，使之完全混合;在沸水 浴中加热lOmin，取出后在自来水中冷却；20min后，用紫外光谱仪在575nm波长处测定吸光 度值;同时做空白对照试验;按下式计算棉花样品含糖率：式中： X为棉花样品含糖量，mg/g; C为按葡萄糖标准曲线计算的可溶性糖浓度值，mg/mL; m为棉花样品质量，g。
【专利摘要】本发明涉及一种棉纤维中可溶性糖的测定方法，该方法是以蒽酮试剂作为显色剂的紫外可见分光光度测定方法，包括：葡萄糖标准曲线的制作；样品待测液的制备；样品待测液的测定。本发明方法测定结果与国标法测得的结果极其相近；本发明方法操作简便、重现性好、结果准确可靠，测试成本低、效率高，且不污染环境。
【IPC分类】G01N21/78, G01N21/33
【公开号】CN105548055
【申请号】CN201510928870
【发明人】王延琴, 魏守军, 周大云, 匡猛, 马磊, 唐淑荣, 方丹, 孟俊婷, 韦京艳, 徐双娇, 杨伟华
【申请人】中国农业科学院棉花研究所
【公开日】2016年5月4日
【申请日】2015年12月11日