专利名称：一种高效生物杀菌剂及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种利用微生物制备生物农药制剂的技术方法，特别是一种利用微生物生产的高效生物杀菌剂(亦称夭禾2000制剂)及其制备方法。
传统的杀菌剂绝大部分都是使用化学农药，抗菌素是通过其化学物质作用来抑制杀灭病菌。这类技术产品在生产和使用中势必带来污染和农药残留等药害问题。如长期频繁使用化学农药可导致病(菌)虫害的抗药性出现，使化学农药本身的药效逐渐降低，这样一来须加大用药量，不仅会提高农业成本，还使农药残留量激增，对人体健康十分不利，又严重污染环境，由于化学农药的广谱灭杀作用，施用后还大量杀死害虫天敌，破坏生态平衡，为了克服上述缺点，人们研发了许多生物农药，其中不少生物农药具有较好的防治能力，还能保护害虫天敌，对人畜无害，不污染环境，但当前国内所研制生产的生物农药杀菌剂由于其防治机理是通过微生物活体细胞自身的代谢物来抑制有害微生物，这样势必带来防治稳定性差，作用效果慢等缺点，导致上述作用效果慢的原因还在于微生物杀菌剂施用后其活体细胞的存活、代谢强弱是和施用地的环境密切相关的，环境的差异就会带来作用效果上的差异。
本发明的目的是要在常规工业发酵的条件下，提供一种利用微生物及其代谢物为主要抗菌物质成份的高效生物杀菌剂(亦称夭禾2000杀菌剂)及其制备方法。使得具有受环境制约因素小、作用效果快、有效期长，使用范围广，还兼有生物农药和化学农药的使用优点。
本发明的目的是以如下技术方案实现的本发明将摒弃传统的芽孢杆菌生物制剂在制备过程中以提取活菌为目的，且是在活菌量最多时才进行提取的做法。本发明将采用新筛选的菌株和与传统不同的工艺配方，所追求的生物农药的质量标准不以单位拮抗菌含量多少为目标，而是以发酵液中微生物活菌代谢中能产生的对病原菌的抗菌物质成份的多少为取舍，即要在这种有效杀菌物质最大量时进行提取。鉴于以上思路，本发明研制出的高效生物杀菌剂的成份是由枯草芽孢杆菌(Bacillu subtilis)及其代谢物(中的抗菌物)为主要杀菌物质成份，并添加有适量有益于该菌株存活的营养基质为填充助剂所组成。
本发明仍利用常规工业发酵的设备条件进行生产，其具体的工艺流程主要包括新菌种的斜面菌活化培养——摇床培养——种子罐培养——发酵罐培养——放罐提取(可采用浓缩、去渣、去上清液)——添加填充助剂作吸附剂——烘干后粉碎——成品包装，其特征是a、在进行斜面菌种培养工序时，是采用新筛选出的枯草芽孢杆菌(Bacillu-subtilis)进行活化培养的新菌种(该新菌种已委托“中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心”进行保藏，菌株名称JK-1996，保藏编号CGMCC NO.0626，见保存(存活)证明)；b、在进行种子罐培养工序和发酵罐培养时，都是选择可促进抗菌物产生的培养基，其配方主要包括蛋白胨、酵母膏、淀粉、玉米浆及适量的磷酸钾(KH2PO4)、氯化钠(NaCl)、硫酸镁(MgSO4、硫酸铁(FeSO4)、碳酸钙(CaCO3)，其配方中蛋白胨、酵母膏、淀粉、玉米浆干物质的重量百分比是蛋白胨为1-3％.酵母膏为0.05～0.15％、淀粉为1.5～2.5％、玉米浆为1～3％，其余为洁净水。
本发明在具体实施时还具有以下几点技术特征一、在进行发酵罐培养工序时，发酵罐内的搅拌速度为接种后先静置4h(即在4小时内为0转)，4-12h为140转/min，12h后逐步提高至250转/min，转速增加的目的是要增强细菌后期的代谢作用。
二、在进行发酵罐培养工序时，罐内的温度控制为开机后0～20h为29～31℃，20h以后为32～34℃，过滤后保持为15～18℃。
三、在进行发酵罐培养工序时，罐内的PH值控制为0～24h的PH值为6.4～6.7，放罐提取前的PH值为7.5～7.8，停机过滤后调PH值为6.2～6.3(至等电点)，以便于有效抗菌物成份沉淀提取。
四、在进行添加填充助剂作吸附剂时，所选用的填充助剂可以是由农副产品有机物和高岭土构成，并经消毒粉碎过200目筛后所得的细粉。
本发明采用上述培养基配方与传统技术的配方有所不同，其活菌产生有用代谢物可比现有技术配方的更多。与现有技术相比较，本发明具有如下优点本制剂的生物农药中有效抗菌物质成份含量高，可以象一般农药一样方便使用。见效速度快，由于有效成份富含生化产物，可以直接作用于防治对象，所以一般情况下其作用效果快于活菌。防治效果稳定，使用时受环境影响较小，防治效果也就比普通生物农药稳定。使用范围广谱，不仅用于根部，叶面也一样使用，可杀灭多种病虫害，有利提高经济效益。
权利要求
1.一种高效生物杀菌剂，其特征是该杀菌剂的成份是由枯草芽孢杆菌(Bacillu subtilis)及其代谢物(中的抗菌物)为主要杀菌物质成份，并添加有适量有益于该菌株存活的营养基质为填充助剂所组成。
2.一种如权利要求1所述的高效生物杀菌剂的制备方法，及生产的工艺流程主要包括新菌种的斜面菌活化培养——摇床培养——种子罐培养——发酵罐培养——放罐提取——添加填充助剂作吸附剂——烘干后粉碎——成品包装，其特征是a、在进行斜面菌种培养工序时，是采用新筛选出的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)作为活化培养的新菌种。b、在进行种子罐培养工序和发酵罐培养时，都是选择可促进抗菌物产生的培养基，其配方主要包括蛋白胨、酵母膏、淀粉、玉米浆及适量的磷酸钾(KH2PO4)、氯化钠(NaCl)、硫酸镁(MgSO4)、硫酸铁(FeSO4)、碳酸钙(CaCO3)，其配方中蛋白胨、酵母膏、淀粉、玉米浆干物质的重量百分比是蛋白胨为1-3％、酵母膏为0.05-0.15％、淀粉为1.5-2.5％、玉米浆为1-3％。
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征是在进行发酵罐培养工序时，发酵罐内的搅拌速度为接种后先静置4h，4-12h为140转/min，12h后逐步提高至250转/min。
4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征是在进行发酵罐培养工序时，罐内的温度控制为开机后0～20h为29～31℃，20h以后为32～34℃，过滤后保持为15～18℃。
5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征是在进行发酵罐培养工序时，罐内的PH值控制为0～24h的PH值为6.4～6.7，放罐提取前的PH值为7.5～7.8，停机过滤后调PH值为6.2～6.3至等电点，以便于有效抗菌物成份沉淀提取。
6.根据权利要求2所述的制备方法，其特征是在进行添加填充助剂作吸附剂时，所选用的填充助剂可以是由农副产品有机物和高岭土构成，并经消毒粉碎过200目筛后所得的细粉。
全文摘要
一种高效生物杀菌剂及其制备方法，其特征是该杀菌剂的成分是由枯草芽孢杆菌(Bacillu subtilis)及其代谢物(中的抗菌物)为主要杀菌物质成分，并添加有适量有益于菌株存活的营养基质为填充助剂所组成。其制备的工艺特征是在进行斜面培养时，采用新筛选的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)作为活化培养的新菌种，在进行种子罐培养和发酵罐培养时，都是选择可促进抗菌物产生的培养基，其配方主要包括蛋白胨、酵母膏、淀粉、玉米浆、及适量的磷酸钾、氯化钠、硫酸镁、硫酸铁、碳酸钙等助剂。与现有技术比较，本发明有效抗菌物质成分含量高，由于有效成分是生化产物，可以直接作用于防治对象，作用效果快于活菌。防治效果稳定，使用时受环境影响较小，使用范围广谱，可用于根部和叶面杀灭多种病害，经济效益高。
文档编号A01N63/00GK1432284SQ0211060
公开日2003年7月30日 申请日期2002年1月18日 优先权日2002年1月18日
发明者林国宪 申请人:福建泰禾生化科技股份有限公司