专利名称：C、d型肉毒杀鼠素冻干剂及其加工方法
技术领域：
本发明涉及草原、森林、农田杀鼠剂及其加工方法，具体地说是涉及一种用《微生物透析培养装置》经透析培养出的C、D型肉毒毒素制备杀鼠素冻干剂及其加工方法。
背景技术：
历年来，草原、森林、农田鼠害的防治一直是我国科技工作者的重要任务。而传统的生物杀鼠剂产品为液体，包装为400ml/玻瓶，运输中包装容易破损，不仅造成了浪费，产品的泄漏还会造成毒素的扩散，而且需要低温保存。产品存放一年后毒价损失50％以上。而按常规疫苗的冻干工艺生产出的产品也会使毒价损失50％以上。
发明内容
本发明要解决的技术问题是克服现有技术中存在的不足，提供一种C、D型肉毒杀鼠素冻干剂及其加工方法，本发明加工方法可保持产品毒价少损失和不损失，并且方便产品的运输和保存，而且能降低产品的使用成本。
本发明的目的通过下述技术方案予以实现本发明C、D型肉毒杀鼠素冻干剂，由在《微生物透析培养装置》中经透析培养获得的高毒价C、D型肉毒梭菌毒素经冻干加工制成，所述的C、D型肉毒杀鼠素冻干剂由C、D型肉毒杀鼠素原苗与稳定剂按重量比为3.5～4.5∶1比例配苗；所述的稳定剂由重量含量为10～14％的明胶、35～45％的蔗糖、余量为水的原料组成；配苗后明胶在配比液中的重量含量为2～4％；蔗糖在配比液中的重量含量为5～15％。
本发明C、D型肉毒杀鼠素冻干剂及其加工方法与现有技术相比较有如下有益效果由于本发明采用了特有的冻干曲线，以及配比加入了具有延长产品保存期作用的稳定剂，经本发明方法加工的C、D型肉毒杀鼠素冻干剂可保持产品毒价少损失和不损失，并且方便产品运输和保存。本发明产品可广泛应用于草原、森林、农田鼠害的防治。
具体实施例方式
下面结合实施例对本发明作进一步描述。
本发明C型肉毒杀鼠素冻干剂，由在《微生物透析培养装置》中将C型肉毒梭菌经透析培养获得的高毒价C型肉毒梭菌毒素经冻干加工制成，所述的C型肉毒杀鼠素冻干剂由C型肉毒杀鼠素原苗与稳定剂按重量比为3.5～4.5∶1比例配苗；所述的稳定剂由重量含量为10～14％的明胶、35～45％的蔗糖、余量为水的原料组成；配苗后明胶在配比液中的重量含量为2～4％；蔗糖在配比液中的重量含量为5～15％。
所述的C型肉毒杀鼠素冻干剂工艺流程培养基→种子→透析器培养→除菌过滤→无菌检验→测毒配苗→玻瓶定量灌装→半压塞→冷冻干燥→抽空全压塞→包装→入库→检验→得产品；所述的除菌过滤是在无菌条件下除去C型肉毒梭菌外毒素中的本菌和其它有害细菌；所述的无菌检验是用培养基检验产品是否含有本菌和其它有害细菌；所述的配苗是将C型肉毒杀鼠素原苗与具有延长产品保存期作用的稳定剂以重量比为3.5～4.5∶1的比例配苗；所述的玻瓶定量灌装是将配比好的原料按每玻璃瓶5ml、25ml装入预先将玻瓶和瓶盖先粗洗、纯化水清洗、干热灭菌冷却后的瓶内；所述的半压塞是将瓶盖压入瓶口一半封口；所述的冷冻干燥是将灌装瓶放入真空冷冻机冷冻干燥；所述的抽空全压塞是将完成产品冻干后的玻瓶盖全压入瓶口，然后轧盖贴签装箱入库制得产品。
所述的冻干流程为冻干机空箱降温→产品入箱→产品预冻→加热升华→产品出箱；所述的冻干工艺条件为将C型肉毒杀鼠素原苗与稳定剂按上述比例混合振荡搅拌后，定量装瓶；空箱降温是在产品入箱前2小时先将冻干机空箱预冻，当箱内温度达-30℃以下，将分装好的产品入箱，产品装瓶为5毫升时，产品预冻箱内温度-32℃以下，需时间为1.5～2.5小时，根据机器性能可提高此阶段的速率；产品冻结温度-32℃～-40℃，需时间为4～5小时；产品第一次加热升华，板层温度为10℃～15℃，产品温度为-25℃～-28℃，需时间为10～12小时，此时箱内真空度为＜30pa，最后为10pa，根据产品及机器能量调整升华速率，真空度不高于40pa；产品第二次加热升华，即产品二次干燥，箱内温度为28℃～30℃，需时间为5～6小时；当箱内温度达到28℃～30℃时，恒温时间为5～6小时；空箱降温是在产品入箱前2小时先将冻干机空箱预冻，当箱内温度达-30°C以下，将分装好的产品入箱，产品装瓶为25毫升时，产品预冻箱内温度为-32℃以下，需时间为4～5小时，根据机器性能可提高此阶段的速率；产品冻结温度-32℃～-40℃，需时间为10～12小时；产品第-次加热升华，板层温度为10℃～15℃，产品温度为-25℃～-28℃，需时间为15～16小时，此时箱内真空度为＜30pa，最后为10pa，根据产品及机器能量调整升华速率，真空度不高于40pa；产品第二次加热升华，即产品二次干燥，箱内温度为28℃～30℃，需时间为8～10小时；当箱内温度达到28℃～30℃时，恒温时间为8～10小时。
本发明D型肉毒杀鼠素冻干剂，由在《微生物透析培养装置》中将D型肉毒梭菌经透析培养获得的高毒价D型肉毒梭菌毒素经冻干加工制成，所述的D型肉毒杀鼠素冻干剂由D型肉毒杀鼠素原苗与稳定剂按重量比为3.5～4.5∶1比例配苗；所述的稳定剂由重量含量为10～14％的明胶、35～45％的蔗糖、余量为水的原料组成；配苗后明胶在配比液中的重量含量为2～4％；蔗糖在配比液中的重量含量为5～15％。
所述的D型肉毒杀鼠剂冻干工艺流程培养基→种子→透析器培养→除菌过滤→无菌检验→测毒配苗→玻瓶定量灌装→半压塞→冷冻干燥→抽空全压塞→包装→入库→检验→得产品；所述的除菌过滤是在无菌条件下除去D型肉毒梭菌外毒素中的本菌和其它有害细菌；所述的无菌检验是用培养基检验产品是否含有本菌和其它有害细菌；所述的配苗是将D型肉毒杀鼠素原苗与具有延长产品保存期作用的稳定剂以重量比为3.5～4.5∶1的比例配苗；所述的玻瓶定量灌装是将配比好的原料按每玻璃瓶5ml、25ml装入预先将玻瓶和瓶盖先粗洗、纯化水清洗、干热灭菌冷却后的瓶内；所述的半压塞是将瓶盖压入瓶口一半封口；所述的冷冻干燥是将灌装瓶放入真空冷冻机冷冻干燥；所述的抽空全压塞是将完成产品冻干后的玻瓶盖全压入瓶口，然后轧盖贴签装箱入库制得产品。
所述的冻干流程为冻干机空箱降温→产品入箱→产品预冻→加热升华→产品出箱；所述的冻干工艺条件为将D型肉毒杀鼠素原苗与稳定剂按上述比例混合振荡搅拌后，定量装瓶；空箱降温是在产品入箱前2小时先将冻干机空箱预冻，当箱内温度达-30℃以下，将分装好的产品入箱，产品装瓶为5毫升时，产品预冻箱内温度-32℃以下，需时间为1.5～2.5小时；产品冻结温度-32℃～-40℃，需时间为4～5小时；产品第一次加热升华，板层温度为10℃～15℃，产品温度为-25℃～-28℃，需时间为10～12小时，此时箱内真空度为＜30pa，最后为10pa，根据产品及机器能量调整升华速率，真空度不高于40pa；产品第二次加热升华，即产品二次干燥，箱内温度为28℃～30℃，需时间为5～6小时；当箱内温度达到28℃～30℃时，恒温时间为5～6小时；空箱降温是在产品入箱前2小时先将冻干机空箱预冻，当箱内温度达-30C以下，将分装好的产品入箱，产品装瓶为25毫升时，产品预冻箱内温度为-32℃以下，需时间为4～5小时，根据机器性能可提高此阶段的速率；产品冻结温度-32℃～-40℃，需时间为10～12小时；产品第一次加热升华，板层温度为10℃～15℃，产品温度为-25℃～-28℃，需时间为15～16小时，此时箱内真空度为＜30pa，最后为10pa，根据产品及机器能量调整升华速率，真空度不高于40pa；产品第二次加热升华，即产品二次干燥，箱内温度为28℃～30℃，需时间为8～10小时；当箱内温度达到28℃～30℃时，恒温时间为8～10小时。
经冻干后的C、D型肉毒杀鼠素毒价不降低。
实施例1。
取C型肉毒杀鼠素4份，稳定剂1份，将稳定剂加入C型肉毒杀鼠素中，经振荡搅拌后按5毫升装入已预先清洗灭菌的玻瓶中；空箱预冻前先将冻干机箱体消毒，用0.1％新洁尔灭喷雾消毒，10分钟后擦干，擦布用后浸泡在消毒液中；如此消毒3次，产品入箱前2小时开冻干机空箱预冻，每半小时记录温度、压力一次，当箱内温度达到-30℃以下时，关闭冷凝器化霜的出水阀；将分装好的产品瓶盖半压塞开箱门，将产品迅速放入真空冷冻箱中，放好板温计、产品温度探头，迅速关箱门；产品预冻箱内温度达到-32℃，需时间为1.5小时；产品冻结温度达到-32℃，需时间为4小时，C型肉毒毒素转化为固态；产品第一次加热升华，板层温度为10℃，产品温度为-25℃，需时间为10小时，此时箱内真空度为＜30pa，最后为10pa，根据产品及机器能量调整升华速率，真空度不高于40pa；产品第二次加热升华，即产品二次干燥，箱内温度上升至28℃，需时间为5小时，当箱内温度达到28℃时，恒温时间为5小时，除去部分因吸附机理存在于生物材料上的结构水；对冻干好的产品抽真空全压塞后出冷冻箱，装箱入库得产品。
本实施例得到的产品毒价为200万MLD/ml，而冻干前的毒价亦是210万MLD/ml，冻干产品水分含量不超过4％。
实施例2。
取C型肉毒杀鼠素4份，稳定剂1份，将稳定剂加入C型肉毒杀鼠素中，经振荡搅拌后按5毫升装入已预先清洗灭菌的玻瓶中；空箱预冻前先将冻干机箱体消毒，用0.1％新洁尔灭喷雾消毒，10分钟后擦干，擦布用后浸泡在消毒液中；如此消毒3次，产品入箱前2小时开冻干机空箱预冻，每半小时记录温度、压力一次，当箱内温度达到-30℃以下时，关闭冷凝器化霜的出水阀；将分装好的产品瓶盖半压塞开箱门，将产品迅速放入真空冷冻箱中，放好板温计、产品温度探头，迅速关箱门；产品预冻箱内温度达到-32℃，需时间为2小时；产品冻结温度达到-35℃，需时间为4.5小时，C型肉毒毒素转化为固态；产品第一次加热升华，板层温度为12℃，产品温度为-26℃，需时间为11小时，此时箱内真空度为＜30pa，最后为10pa，根据产品及机器能量调整升华速率，真空度不高于40pa；产品第二次加热升华，即产品二次干燥，箱内温度上升至29℃，需时间为5.5小时，当箱内温度达到29℃时，恒温时间为5.5小时，除去部分因吸附机理存在于生物材料上的结构水；对冻干好的产品抽真空全压塞后出冷冻箱，装箱入库得产品。
本实施例得到的产品毒价为200万MLD/ml，而冻干前的毒价亦是200万MLD/ml，冻干产品水分含量不超过4％。
实施例3。
取C型肉毒杀鼠素4份，稳定剂1份，将稳定剂加入C型肉毒杀鼠素中，经振荡搅拌后按5毫升装入已预先清洗灭菌的玻瓶中；空箱预冻前先将冻干机箱体消毒，用0.1％新洁尔灭喷雾消毒，10分钟后擦干，擦布用后浸泡在消毒液中；如此消毒3次，产品入箱前2小时开冻干机空箱预冻，每半小时记录温度、压力一次，当箱内温度达到-30℃以下时，关闭冷凝器化霜的出水阀；将分装好的产品瓶盖半压塞开箱门，将产品迅速放入真空冷冻箱中，放好板温计、产品温度探头，迅速关箱门；产品预冻箱内温度达到-32℃，需时间为2.5小时；产品冻结温度达到-40℃，需时间为5小时，C型肉毒毒素转化为固态；产品第一次加热升华，板层温度为15℃，产品温度为-28℃，需时间为12小时，此时箱内真空度为＜30pa，最后为10pa，根据产品及机器能量调整升华速率，真空度不高于40pa；产品第二次加热升华，即产品二次干燥，箱内温度上升至30℃，需时间为6小时，当箱内温度达到30℃时，恒温时间为6小时，除去部分因吸附机理存在于生物材料上的结构水；对冻干好的产品抽真空全压塞后出冷冻箱，装箱入库得产品。
本实施例得到的产品毒价为200万MLD/ml，而冻干前的毒价亦是210万MLD/ml，冻干产品水分含量不超过4％。
实施例4。
取C型肉毒杀鼠素4.5份，稳定剂1份，将稳定剂加入C型肉毒杀鼠素中，经振荡搅拌后按25毫升装入已预先清洗灭菌的玻瓶中；空箱预冻前先将冻干机箱体消毒，用0.1％新洁尔灭喷雾消毒，10分钟后擦干，擦布用后浸泡在消毒液中；如此消毒3次，产品入箱前2小时开冻干机空箱预冻，每半小时记录温度、压力一次，当箱内温度达到-30℃以下时，关闭冷凝器化霜的出水阀；将分装好的产品瓶盖半压塞，打开箱门，产品迅速放入真空冷冻箱中，放好板温计、产品温度探头，迅速关箱门，产品预冻箱内温度达到-32℃以下，需时间为4小时；产品冻结温度达到-32℃，需时间为10小时，C型肉毒毒素转化为固态；产品第一次加热升华，板层温度为10℃，产品温度为-25℃，需时间为15小时，此时箱内真空度为＜30pa，最后为10pa，根据产品及机器能量调整升华速率，真空度不高于40pa；产品第二次加热升华，即产品二次干燥，温度上升至28℃，需时间为8小时，当箱内温度达到28℃时，恒温时间为8小时，除去部分因吸附机理存在于生物材料上的结构水；对冻干好的产品抽真空全压塞后出冷冻箱，装箱入库得产品。
本实施例得到的产品毒价为200万MLD/ml，而冻干前的毒价亦是210万MLD/ml，冻干产品水分含量不超过4％。
实施例5。
取C型肉毒杀鼠素4.5份，稳定剂1份，将稳定剂加入C型肉毒杀鼠素中，经振荡搅拌后按25毫升装入已预先清洗灭菌的玻瓶中；空箱预冻前先将冻干机箱体消毒，用0.1％新洁尔灭喷雾消毒，10分钟后擦干，擦布用后浸泡在消毒液中；如此消毒3次，产品入箱前2小时开冻干机空箱预冻，每半小时记录温度、压力一次，当箱内温度达到-30℃以下时，关闭冷凝器化霜的出水阀；将分装好的产品瓶盖半压塞，打开箱门，产品迅速放入真空冷冻箱中，放好板温计、产品温度探头，迅速关箱门，产品预冻箱内温度达到-32℃以下，需时间为4.5小时；产品冻结温度达到-38℃，需时间为11小时，C型肉毒毒素转化为固态；产品第一次加热升华，板层温度为12℃，产品温度为-26℃，需时间为15.5小时，此时箱内真空度为＜30pa，最后为10pa，根据产品及机器能量调整升华速率，真空度不高于40pa；产品第二次加热升华，即产品二次干燥，温度上升至29℃，需时间为9小时，当箱内温度达到29℃时，恒温时间为9小时，除去部分因吸附机理存在于生物材料上的结构水；对冻干好的产品抽真空全压塞后出冷冻箱，装箱入库得产品。
本实施例得到的产品毒价为200万MLD/ml，而冻干前的毒价亦是200万MLD/ml，冻干产品水分含量不超过4％。
实施例6。
取C型肉毒杀鼠素4.5份，稳定剂1份，将稳定剂加入C型肉毒杀鼠素中，经振荡搅拌后按25毫升装入已预先清洗灭菌的玻瓶中；空箱预冻前先将冻干机箱体消毒，用0.1％新洁尔灭喷雾消毒，10分钟后擦干，擦布用后浸泡在消毒液中；如此消毒3次，产品入箱前2小时开冻干机空箱预冻，每半小时记录温度、压力一次，当箱内温度达到-30℃以下时，关闭冷凝器化霜的出水阀；将分装好的产品瓶盖半压塞，打开箱门，产品迅速放入真空冷冻箱中，放好板温计、产品温度探头，迅速关箱门，产品预冻箱内温度达到-32℃以下，需时间为5小时；产品冻结温度达到-40℃，需时间为12小时，C型肉毒毒素转化为固态；产品第一次加热升华，板层温度为15℃，产品温度为-28℃，需时间为16小时，此时箱内真空度为＜30pa，最后为10pa，根据产品及机器能量调整升华速率，真空度不高于40pa；产品第二次加热升华，即产品二次干燥，温度上升至30℃，需时间为10小时，当箱内温度达到30℃时，恒温时间为10小时，除去部分因吸附机理存在于生物材料上的结构水；对冻干好的产品抽真空全压塞后出冷冻箱，装箱入库得产品。
本实施例得到的产品毒价为200万MLD/ml，而冻干前的毒价亦是210万MLD/ml，冻干产品水分含量不超过4％。
实施例7。
取D型肉毒杀鼠素4份，稳定剂1份，将稳定剂加入D型肉毒杀鼠素中，经振荡搅拌后按5毫升装入已预先清洗灭菌的玻瓶中；先将冻干机空箱预冻，空箱预冻前先将冻干机箱体消毒，用0.1％新洁尔灭喷雾消毒，10分钟后擦干，擦布用后浸泡在消毒液中；如此消毒3次，产品入箱前2小时开冻干机空箱预冻，每半小时记录温度、压力一次，当箱内温度达到-30℃以下时，关闭冷凝器化霜的出水阀；将分装好的产品瓶盖半压塞，打开箱门，将产品迅速放入真空冷冻箱中，放好板温计、产品温度探头，迅速关箱门；产品预冻箱内温度达到-32℃以下，需时间为1.5小时；产品冻结温度达到-32℃，需时间为4小时，D型肉毒毒素转化为固态；产品第一次加热升华，板层温度为10℃，产品温度为-25℃，需时间为10小时，此时箱内真空度为＜30pa，最后为10pa，根据产品及机器能量调整升华速率，真空度不高于40pa；产品第二次加热升华，即产品二次干燥，温度上升至28℃，需时间为5小时，当箱内温度达到28℃时，恒温时间为5小时，除去部分因吸附机理存在于生物材料上的结构水；对冻干好的产品抽真空全压塞后出冷冻箱，装箱入库得产品。
本实施例得到的产品毒价为2000万MLD/ml，而冻干前的毒价亦是2100万MLD/ml，冻干产品水分含量不超过4％。
实施例8。
取D型肉毒杀鼠素4份，稳定剂1份，将稳定剂加入D型肉毒杀鼠素中，经振荡搅拌后按5毫升装入已预先清洗灭菌的玻瓶中；先将冻干机空箱预冻，空箱预冻前先将冻干机箱体消毒，用0.1％新洁尔灭喷雾消毒，10分钟后擦干，擦布用后浸泡在消毒液中；如此消毒3次，产品入箱前2小时开冻干机空箱预冻，每半小时记录温度、压力一次，当箱内温度达到-30℃以下时，关闭冷凝器化霜的出水阀；将分装好的产品瓶盖半压塞，打开箱门，将产品迅速放入真空冷冻箱中，放好板温计、产品温度探头，迅速关箱门；产品预冻箱内温度达到-32℃以下，需时间为2小时；产品冻结温度达到-35℃，需时间为4.5小时，D型肉毒毒素转化为固态；产品第一次加热升华，板层温度为12℃，产品温度为-26℃，需时间为11小时，此时箱内真空度为＜30pa，最后为10pa，根据产品及机器能量调整升华速率，真空度不高于40pa；产品第二次加热升华，即产品二次干燥，温度上升至29℃，需时间为5.5小时，当箱内温度达到29℃时，恒温时间为5.5小时，除去部分因吸附机理存在于生物材料上的结构水；对冻干好的产品抽真空全压塞后出冷冻箱，装箱入库得产品。
本实施例得到的产品毒价为2000万MLD/ml，而冻干前的毒价亦是2000万MLD/ml，冻干产品水分含量不超过4％。
实施例9。
取D型肉毒杀鼠素4份，稳定剂1份，将稳定剂加入D型肉毒杀鼠素中，经振荡搅拌后按5毫升装入已预先清洗灭菌的玻瓶中；先将冻干机空箱预冻，空箱预冻前先将冻干机箱体消毒，用0.1％新洁尔灭喷雾消毒，10分钟后擦干，擦布用后浸泡在消毒液中；如此消毒3次，产品入箱前2小时开冻干机空箱预冻，每半小时记录温度、压力一次，当箱内温度达到-30℃以下时，关闭冷凝器化霜的出水阀；将分装好的产品瓶盖半压塞，打开箱门，将产品迅速放入真空冷冻箱中，放好板温计、产品温度探头，迅速关箱门；产品预冻箱内温度达到-32℃以下，需时间为2.5小时；产品冻结温度达到-40℃，需时间为5小时，D型肉毒毒素转化为固态；产品第一次加热升华，板层温度为15℃，产品温度为-28℃，需时间为12小时，此时箱内真空度为＜30pa，最后为10pa，根据产品及机器能量调整升华速率，真空度不高于40pa；产品第二次加热升华，即产品二次干燥，温度上升至30℃，需时间为6小时，当箱内温度达到30℃时，恒温时间为6小时，除去部分因吸附机理存在于生物材料上的结构水；对冻干好的产品抽真空全压塞后出冷冻箱，装箱入库得产品。
本实施例得到的产品毒价为2000万MLD/ml，而冻干前的毒价亦是2100万MLD/ml，冻干产品水分含量不超过4％。
实施例10。
取D型肉毒杀鼠素4.5份，稳定剂1份，将稳定剂加入D型肉毒杀鼠素中，经振荡搅拌后按25毫升装入已预先清洗灭菌的玻瓶中；先将冻干机空箱预冻，空箱预冻前先将冻干机箱体消毒，用0.1％新洁尔灭喷雾消毒，10分钟后擦干，擦布用后浸泡在消毒液中；如此消毒3次，产品入箱前2小时开冻干机空箱预冻，每半小时记录温度、压力一次，当箱内温度达到-30℃以下时，关闭冷凝器化霜的出水阀；将分装好的产品瓶盖半压塞，打开箱门，将产品迅速放入真空冷冻箱中，放好板温计、产品温度探头，迅速关箱门；产品预冻箱内温度达到-32℃以下，需时间为4小时；产品冻结温度达到-32℃，需时间为10小时，D型肉毒毒素转化为固态；产品第一次加热升华，板层温度为10℃，产品温度为-25℃，需时间为15小时，此时箱内真空度为＜30pa，最后为10pa，根据产品及机器能量调整升华速率，真空度不高于40pa；产品第二次加热升华，即产品二次干燥，温度上升至28℃，需时间为8小时，当箱内温度达到28℃时，恒温时间为8小时，除去部分因吸附机理存在于生物材料上的结构水；对冻干好的产品抽真空全压塞后出冷冻箱，装箱入库得产品。
本实施例得到的产品毒价为2000万MLD/ml，而冻干前的毒价亦是2100万MLD/ml，冻干产品水分含量不超过4％。
实施例11。
取D型肉毒杀鼠素4.5份，稳定剂1份，将稳定剂加入D型肉毒杀鼠素中，经振荡搅拌后按25毫升装入已预先清洗灭菌的玻瓶中；先将冻干机空箱预冻，空箱预冻前先将冻干机箱体消毒，用0.1％新洁尔灭喷雾消毒，10分钟后擦干，擦布用后浸泡在消毒液中；如此消毒3次，产品入箱前2小时开冻干机空箱预冻，每半小时记录温度、压力一次，当箱内温度达到-30℃以下时，关闭冷凝器化霜的出水阀；将分装好的产品瓶盖半压塞，打开箱门，将产品迅速放入真空冷冻箱中，放好板温计、产品温度探头，迅速关箱门；产品预冻箱内温度达到-32℃以下，需时间为4.5小时；产品冻结温度达到-38℃，需时间为11小时，D型肉毒毒素转化为固态；产品第一次加热升华，板层温度为12℃，产品温度为-26℃，需时间为15.5小时，此时箱内真空度为＜30pa，最后为10pa，根据产品及机器能量调整升华速率，真空度不高于40pa；产品第二次加热升华，即产品二次干燥，温度上升至29℃，需时间为9小时，当箱内温度达到29℃时，恒温时间为9小时，除去部分因吸附机理存在于生物材料上的结构水；对冻干好的产品抽真空全压塞后出冷冻箱，装箱入库得产品。
本实施例得到的产品毒价为2000万MLD/ml，而冻干前的毒价亦是2000万MLD/ml，冻干产品水分含量不超过4％。
实施例12。
取D型肉毒杀鼠素4.5份，稳定剂1份，将稳定剂加入D型肉毒杀鼠素中，经振荡搅拌后按25毫升装入已预先清洗灭菌的玻瓶中；先将冻干机空箱预冻，空箱预冻前先将冻干机箱体消毒，用0.1％新洁尔灭喷雾消毒，10分钟后擦干，擦布用后浸泡在消毒液中；如此消毒3次，产品入箱前2小时开冻干机空箱预冻，每半小时记录温度、压力一次，当箱内温度达到-30℃以下时，关闭冷凝器化霜的出水阀；将分装好的产品瓶盖半压塞，打开箱门，将产品迅速放入真空冷冻箱中，放好板温计、产品温度探头，迅速关箱门；产品预冻箱内温度达到-32℃以下，需时间为5小时；产品冻结温度达到-40℃，需时间为12小时，D型肉毒毒素转化为固态；产品第一次加热升华，板层温度为15℃，产品温度为-28℃，需时间为16小时，此时箱内真空度为＜30pa，最后为10pa，根据产品及机器能量调整升华速率，真空度不高于40pa；产品第二次加热升华，即产品二次干燥，温度上升至30℃，需时间为10小时，当箱内温度达到30℃时，恒温时间为10小时，除去部分因吸附机理存在于生物材料上的结构水；对冻干好的产品抽真空全压塞后出冷冻箱，装箱入库得产品。
本实施例得到的产品毒价为2000万MLD/ml，而冻干前的毒价亦是2100万MLD/ml，冻干产品水分含量不超过4％。
权利要求
1.一种C型肉毒杀鼠素冻干剂，由在《微生物透析培养装置》中将C型肉毒梭菌经透析培养获得的高毒价C型肉毒梭菌毒素经冻干加工制成，其特征在于所述的C型肉毒杀鼠素冻干剂由C型肉毒杀鼠素原苗与稳定剂按重量比为3.5～4.5∶1比例配苗；所述的稳定剂由重量含量为10～14％的明胶、35～45％的蔗糖、余量为水的原料组成；配苗后明胶在配比液中的重量含量为2～4％；蔗糖在配比液中的重量含量为5～15％。
2.一种C型肉毒杀鼠素冻干剂的加工方法，其工艺流程为培养基→种子→透析器培养→除菌过滤→无菌检验→测毒配苗→玻瓶定量灌装→半压塞→冷冻干燥→抽空全压塞→包装→入库→检验→得产品，其特征在于所述的除菌过滤是在无菌条件下除去C型肉毒梭菌外毒素中的本菌和其它有害细菌；所述的无菌检验是用培养基检验产品是否含有本菌和其它有害细菌；所述的配苗是将C型肉毒杀鼠素原苗与具有延长产品保存期作用的稳定剂以重量比为3.5～4.5∶1的比例混合；所述的玻瓶定量灌装是将配比好的原料按每玻璃瓶5ml、25ml装入预先将玻瓶和瓶盖先粗洗、纯化水清洗、干热灭菌冷却后的瓶内；所述的半压塞是将瓶盖压入瓶口一半封口；所述的冷冻干燥是将灌装瓶放入真空冷冻机冷冻干燥；所述的抽空全压塞是将完成产品冻干后的玻瓶盖全压入瓶口，然后轧盖贴签装箱入库制得产品。
3.根据权利要求2所述的C型肉毒杀鼠素冻干剂的加工方法，其特征在于所述的冻干流程为冻干机空箱降温→产品入箱→产品预冻→加热升华→产品出箱；所述的冻干工艺条件为将C型肉毒梭菌原苗与稳定剂按上述比例混合振荡搅拌后，定量装瓶；空箱降温是在产品入箱前2小时先将冻干机空箱预冻，当箱内温度达-30℃以下，将分装好的产品入箱，产品装瓶为5毫升时，产品预冻箱内温度-32℃以下，此阶段预冻时间为1.5～2.5小时；产品冻结温度-32℃～-40℃，需时间为4～5小时；产品第一次加热升华，板层温度为10℃～15℃，产品温度为-25℃～-28℃，需时间为10～12小时，此时箱内真空度为＜30pa，最后为10pa，根据产品及机器能量调整升华速率，真空度不高于40pa；产品第二次加热升华，即为二次干燥，箱内温度为28℃～30℃，需时间为5～6小时；当箱内温度达到28℃～30℃时，恒温时间为5～6小时；空箱降温是在产品入箱前2小时先将冻干机空箱预冻，当箱内温度达-30℃以下，将分装好的产品入箱，产品装瓶为25毫升时，产品预冻箱内温度为-32℃以下，此阶段需时间为4～5小时，根据机器性能可提高此阶段的速率；产品冻结温度-32℃～-40℃，需时间为10～12小时；产品第一次加热升华，板层温度为10℃～15℃，产品温度为-25℃～-28℃，时间为15～16小时；产品第二次加热升华，即为二次干燥，箱内温度为28℃～30℃，时间为8～10小时；当箱内温度达到28℃～30℃时，恒温时间为8～10小时。
4.一种D型肉毒杀鼠素冻干剂，由在《微生物透析培养装置》中将D型肉毒梭菌经透析培养获得的高毒价D型肉毒梭菌毒素经冻干加工制成，其特征在于所述的D型肉毒杀鼠素冻干剂由D型肉毒杀鼠素原苗与稳定剂按重量比为3.5～4.5∶1比例配苗；所述的稳定剂由重量含量为10～14％的明胶、35～45％的蔗糖、余量为水的原料组成；配苗后明胶在配比液中的重量含量为2～4％；蔗糖在配比液中的重量含量为5～15％。
5.一种D型肉毒杀鼠素冻干剂的加工方法，其工艺流程培养基→种子→透析器培养→除菌过滤→无菌检验→测毒配苗→玻瓶定量灌装→半压塞→冷冻干燥→抽空全压塞→包装→入库→检验→得产品；其特征在于所述的除菌过滤是在无菌条件下除去D型肉毒梭菌外毒素中的本菌和其它有害细菌；所述的无菌检验是用培养基检验产品是否含有本菌和其它有害细菌；所述的配苗是将D型肉毒杀鼠素原苗与具有延长产品保存期作用的稳定剂以重量比为3.5～4.5∶1的比例混合；所述的玻瓶定量灌装是将配比好的原料按每玻璃瓶5ml、25ml装入预先将玻瓶和瓶盖先粗洗、纯化水清洗、干热灭菌冷却后的瓶内；所述的半压塞是将瓶盖压入瓶口一半封口；所述的冷冻干燥是将灌装瓶放入真空冷冻机冷冻干燥；所述的抽空全压塞是将完成产品冻干后的玻瓶盖全压入瓶口，然后轧盖贴签装箱入库制得产品。
6.根据权利要求5所述的D型肉毒杀鼠素冻干剂的加工方法，其特征在于所述的冻干流程为冻干机空箱降温→产品入箱→产品预冻→加热升华→产品出箱；所述的冻干工艺条件为将D型肉毒梭菌原苗与稳定剂按上述比例混合振荡搅拌后，定量装瓶；空箱降温是在产品入箱前2小时先将冻干机空箱预冻，当箱内温度达-30℃以下，将分装好的产品入箱，产品装瓶为5毫升时，产品预冻箱内温度-32℃以下，此阶段预冻时间为1.5～2.5小时；产品冻结温度-32℃～-40℃，需时间为4～5小时；产品第一次加热升华，板层温度为10℃～15℃，产品温度为-25℃～-28℃，需时间为10～12小时，此时箱内真空度为＜30pa，最后为10pa，根据产品及机器能量调整升华速率，真空度不高于40pa；产品第二次加热升华，即产品二次干燥，箱内温度升为28℃～30℃，需时间为5～6小时；当箱内温度达到28℃～30℃时，恒温时间为5～6小时；空箱降温是在产品入箱前2小时先将冻干机空箱预冻，当箱内温度达-30℃以下，将分装好的产品入箱，产品装瓶为25毫升时，产品预冻箱内温度为-32℃以下，预冻时间为4～5小时，根据机器性能，可提高此阶段的速率；产品冻结温度-32℃～-40℃，需时间为10～12小时；产品第一次加热升华，板层温度为10℃～15℃，产品温度为-25℃～-28℃，需时间为15～16小时；产品第二次加热升华，即产品二次干燥，箱内温度为28℃～30℃，需时间为8～10小时；当箱内温度达到28℃～30℃时，恒温时间为8～10小时。
7.根据权利要求1和4所述的C、D型肉毒杀鼠素冻干剂，其特征在于经冻干后的C、D型肉毒杀鼠素毒价不降低。
全文摘要
本发明涉及草原、森林、农田杀鼠剂及其加工，具体地说是涉及一种用《微生物透析培养装置》中经透析培养出的C、D型肉毒毒素制备杀鼠素冻干剂及其加工方法。本发明的目的通过下述技术方案予以实现所述的C、D型肉毒杀鼠素冻干剂由C、D型肉毒杀鼠素原苗与稳定剂按重量比为3.5～4.5∶1比例配苗，经本发明加工方法加工制成。本发明有如下有益效果由于本发明采取了特有的冻干曲线，以及采用了具有延长产品保存期作用的稳定剂，经本发明方法加工的C、D型肉毒杀鼠素冻干剂可保持产品毒价少损失和不损失，并且方便产品运输和保存，能降低产品的使用成本。本发明产品可广泛应用于草原、森林、农田鼠害的防治。
文档编号A01N63/00GK1723779SQ20051002111
公开日2006年1月25日 申请日期2005年6月17日 优先权日2005年6月17日
发明者陈友信, 王如兴, 房西坤, 鲜文勋, 王玮, 王青明, 马勇, 白喜伊 申请人:青海生物药品厂